半夏泻心汤对溃疡性结肠炎小鼠肠道黏膜屏障功能保护作用及ZO-1和Occludin表达的影响

目的:观察半夏泻心汤对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道黏膜屏障功能的保护作用并探讨其可能的作用机制。方法:建立三硝基苯磺酸(TNBS)诱导小鼠实验性溃疡性结肠炎模型,实验按随机数字表法分为正常对照组、模型组、半夏泻心汤4. 5 g/kg组、半夏泻心汤9. 0 g/kg组和阳性对照组,连续给药21 d后考察小鼠DAI变化,测量结肠长度并进行CMDI及HS评分,测定MPO活性、DAO及D-LA水平、L/M值,检测ZO-1和Occludin的表达。结果:与正常对照组比较,模型组DAI、CMDI、HS、MPO活性、D-LA和DAO水平、L/M值明显升高,结肠长度ZO-1和Occludin表达明显降低;与模型组比较,半夏泻心汤4. 5 g/kg组、半夏泻心汤9. 0 g/kg组及阳性对照组DAI、CMDI、HS、MPO活性、D-LA和DAO水平、L/M值明显降低,结肠长度ZO-1和Occludin表达明显升高。结论:半夏泻心汤可能通过升高ZO-1和Occludin表达,从而保护溃疡性结肠炎小鼠肠道黏膜的屏障功能。     

党参多糖对溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮NF-κB信号通路的影响

目的观察党参多糖对大鼠溃疡性结肠炎的保护作用,并探讨其对结肠上皮NF-κB信号通路的影响。方法 50只雄性Wistar大鼠随机分为5组(每组10只),分别为正常组、模型组、柳氮磺胺嘧啶(SASP)阳性对照组(0.3 g/kg)、党参多糖高剂量组(9 g/kg)、党参多糖低剂量组(3 g/kg),采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇联合灌肠制作大鼠实验性溃疡性结肠炎(UC)模型。给药21 d后,观察大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(CMDI)及结肠组织形态,生化法及ELISA法分别检测结肠组织中SOD(超氧化物歧化酶)活性、MDA(丙二醛)、白介素IL-6、IL-10和TNF-α(肿瘤坏死因子-α)水平,RT-PCR检测结肠组织中IL-6、IL-10、TNF-α mRNA表达,免疫组化法及Western blot法测定结肠组织中NF-κB蛋白表达。结果党参多糖高低剂量组均能降低UC大鼠DAI评分、CMDI评分,改善结肠黏膜形态,降低结肠组织中MDA、IL-6、TNF-α水平,提高结肠组织中SOD活性和IL-10水平(P0.01),抑制IL-6、TNF-α mRNA表达,促进IL-10 mRNA表达(P0.01),抑制NF-κB蛋白表达(P0.01)。结论党参多糖具有保护大鼠溃疡性结肠炎的作用,其机制可能与抗脂质过氧化、抑制NF-κB信号通路减少炎症因子释放有关。     

重芪结肠靶向微丸的质量控制及对DSS诱导的小鼠UC模型的干预作用研究

目的:建立重芪结肠靶向微丸(PA-CTPC)中黄芪总多糖和重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ、H的含量测定方法;评价PA-CTPC对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的干预作用。方法:采用苯酚-浓硫酸法测定PA-CTPC中黄芪总多糖含量;采用高效液相色谱法(HPLC)测定重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ、H的含量;KM雄性小鼠随机分为正常组、模型组和PA-CTPC高、中、低剂量组(0.4、0.2、0.1 mg/g),采用4.0%DSS溶液自由饮用诱导建立小鼠UC模型,通过疾病活动指数(DAI)评分、结肠组织形态、病理损伤评分及血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-4(IL-4)、D-乳酸(D-LA)、二胺氧化酶(DAO)水平评价PA-CTPC对DSS诱导的小鼠UC模型的干预作用。结果:苯酚-浓硫酸法测定3批PA-CTPC中黄芪总多糖平均含量分别为158.33、151.20、156.70 mg/g;HPLC法测定3批PA-CTPC中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ、H的平均总含量分别为49.56、50.00、50.13 mg/g;PA-CTPC中、高剂量组可明显改善UC模型小鼠一般状况,降低DAI评分、结肠大体形态和组织病理学评分,明显降低血液中IL-6、TNF-α、D-LA、DAO水平,升高IL-10、IL-4水平。结论:建立的PA-CTPC中黄芪总多糖和重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ、H的含量测定方法准确、稳定、可行,可用于PA-CTPC的质量控制。PA-CTPC对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有治疗作用,与调控炎性因子表达,改善肠道黏膜屏障功能有关。     

黄芪多糖对溃疡性结肠炎大鼠的作用及其机制研究

目的:探讨黄芪多糖对溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)大鼠的作用及其机制。方法:选取雄性Wistar大鼠72只,采用随机数字表法分为空白组、模型组、黄芪多糖组、阳性对照组,每组18只,模型组、阳性对照组和黄芪多糖组采用三硝基苯磺酸灌肠建立大鼠UC模型,建模成功后,黄芪多糖组用黄芪多糖按200 mg/kg剂量灌肠,阳性对照组用硫唑嘌呤按60 mg/kg的剂量灌肠,模型组和空白组予以等量生理盐水,连续灌肠10天。对比各组大鼠结肠炎症评分,结肠上皮细胞中B淋巴细胞瘤-2 (B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bax蛋白的表达,结肠上皮凋亡细胞计数,血清D-乳酸、二胺氧化酶(Diamine oxidase,DAO)的水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠的DAI评分、大体形态损伤评分、结肠损伤评分、Bax蛋白表达水平、血清D-乳酸、DAO水平、结肠上皮凋亡细胞计数均显著升高(P 0.05),结肠上皮细胞中Bcl-2表达显著降低(P 0.05);与模型组比较,黄芪多糖组和阳性对照组的DAI评分、大体形态损伤评分、结肠损伤评分、Bax蛋白表达水平、血清D-乳酸、DAO水平、结肠上皮凋亡细胞计数均显著降低(P 0.05),结肠上皮细胞中Bcl-2显著升高(P 0.05);与阳性对照组比较,黄芪多糖组DAI评分、大体形态损伤评分、结肠损伤评分、Bax蛋白表达水平、结肠上皮凋亡细胞计数均较高(P 0.05),结肠上皮细胞中Bcl-2、血清D-乳酸、DAO水平较低(P 0.05)。结论:黄芪多糖能显著减轻UC大鼠的炎性反应,且可能是通过上调Bcl-2,下调Bax蛋白表达,改善肠道屏障功能,达到治疗效果。     

固肠止泻丸治疗溃疡性结肠炎的作用机理研究

目的:探讨固肠止泻丸治疗溃疡性结肠炎的作用机理。方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)复制溃疡性结肠炎大鼠模型。将模型大鼠随机分为模型组及固肠止泻丸水溶液高[9.6μg/(kg·d)]、中[4.8μg/(kg·d)]、低[2.4μg/(kg·d)]剂量组,并设空白组,每组10只。高、中、低剂量组灌胃相应剂量固肠止泻丸水溶液,空白组及模型组灌胃等体积生理盐水,持续干预2周。通过HE染色观察大鼠结肠变化情况,通过疾病活动指数(disease activity Index,DAI)、宏观评分(macroscopic score,MS)以及结肠厚度和结肠水肿情况评估大鼠肠道病理症状改善情况,同时观察髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)、5-羟色胺(5-HT)含量变化情况。结果:固肠止泻丸可有效改善溃疡性结肠炎模型大鼠体质量减轻及大便异常、直肠出血、粘连、内黏膜出血、结肠厚度异常、结肠水肿等病理症状;降低MPO活性及TNF-α、5-HT含量,增加IL-10含量。结论:固肠止泻丸治疗溃疡性结肠炎作用机理可能与改变结肠中TNF-α及IL-10的含量从而调节th1/th2平衡、降低MPO活性及5-HT含量有关。     

宁夏枸杞粗提物抗大鼠溃疡性结肠炎的作用

目的探讨宁夏枸杞粗提物对大鼠溃疡性结肠炎的作用。方法采用三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇溶液(含TNBS20~25mg,乙醇浓度30~50%,大鼠TNBS给药剂量80~90mg/kg)建立溃疡性结肠炎大鼠模型,分别给予柳氮磺胺吡啶(SASP)、宁夏枸杞粗提物以及SASP和枸杞粗提物联合用药后,观察各组大鼠一般情况、结肠病变大体形态及病理变化,并检测大鼠血清SOD和结肠组织中MPO活性。结果宁夏枸杞粗提物能明显降低结肠炎大鼠的死亡率,改善一般情况,缩小溃疡面积。枸杞粗提物组、SASP组DAI评分和CMDI评分明显降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组大鼠血清SOD和结肠MPO活性与正常组比较,均有统计学差异(P0.05);宁夏枸杞粗提物组大鼠血清SOD和结肠MPO活性与模型组相比,均有统计学差异(P0.05);与SASP组相比,无统计学差异(P0.05);联合用药组大鼠血清SOD和结肠MPO活性与粗提物组及SASP组相比,均有统计学差异(P0.05)。结论宁夏枸杞粗提物具有抗大鼠溃疡性结肠炎的作用,可升高大鼠血清中SOD,降低结肠组织中MPO活性;联合用药抗溃疡性结肠炎作用优于单用宁夏枸杞粗提物和SASP,实验结果为进一步研究宁夏枸杞抗溃疡性结肠炎的作用机制提供了实验依据。     

黄芪多糖对急性溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜PI3K/Akt信号的调控作用

目的探讨黄芪多糖对急性溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜PI3K/Akt信号的调控作用。方法建立以TNBS/乙醇法复制的大鼠急性溃疡性结肠炎模型,8 d后观察各组大鼠肉眼下结肠形态变化及光镜下病理损伤并进行评分。采用Western blot分别检测各组大鼠结肠黏膜中Akt、ρ-Akt及PI3K蛋白的表达。结果与模型组相比,黄芪多糖组可明显降低大鼠病理损伤评分(P0.05)。Western blot显示,与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜ρ-Akt、PI3K表达升高,且均有显著性差异(P0.05);与模型组比较,黄芪多糖组结肠黏膜中ρ-Akt、PI3K表达显著下降(P0.05)。结论黄芪多糖治疗急性溃疡性结肠炎可能是通过PI3K/Akt信号的调控起作用。     

肠愈宁颗粒对溃疡性结肠炎大鼠部分免疫机制的影响

目的:研究不同剂量的肠愈宁颗粒对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-4(IL-4)表达的影响,阐述其抗UC的免疫机制。方法:48只雄性Wistar大鼠平均随机分成6组:空白对照组、模型组、肠愈宁高剂量组、肠愈宁中剂量组、肠愈宁低剂量组、美沙拉嗪对照组。应用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇复合灌肠法诱导UC大鼠模型,评估疾病活动指数(DAI),结肠黏膜损伤指数(CMDI)并进行组织损伤指数(TDI)评分,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠IL-1β、TNF-α、IL-4的变化。结果:注入5% TNBS 50 mg/kg＋50%乙醇0.25 mL连续1周可成功导致大鼠患上溃疡性结肠炎(UC),肠愈宁颗粒可对抗5% TNBS 50 mg/kg＋50%乙醇所致的大鼠UC,与模型组比较,加入肠愈宁高剂量组、肠愈宁中剂量组的DAI、CMDI和TDI评分均降低,IL-1β、TNF-α表达下调,IL-4表达上调。结论:肠愈宁颗粒抵抗溃疡性结肠炎(UC)的作用显著,其机制可能与下调促炎因子TNF-α以及白细胞介素IL-1β的表达,上调促炎因子IL-4的表达有关。     

雷公藤多苷对TNBS/乙醇溃疡性结肠炎大鼠脂质过氧化损伤的保护作用

目的:研究雷公藤多苷对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溃疡性结肠炎大鼠脂质过氧化损伤的保护作用。方法:通过TNBS联合乙醇灌肠的方法,建立TNBS/乙醇溃疡性结肠炎大鼠模型。造模成功后,90只雄性Wistar大鼠随机分为6组,每组15只,分别为正常对照组、模型对照组、雷公藤多苷3mg/kg、6mg/kg、12mg/kg、硫唑嘌呤6mg/kg,每组各自给予相应药物灌胃治疗,连续14天。每3天进行一次大鼠疾病活动指数(DAI)评分,所有大鼠在14天后均被解剖,相应结肠组织被留取,对各组大鼠结肠组织进行大体及镜下病理评分;同时,进行心脏取血,离心后取上清液,用ELISA法检测血清中MDA、SOD、GSH-Px、IL-1β和TNF-α含量。结果:DAI评分,大体及镜下表现和评分均提示TNBS/乙醇大鼠模型是研究溃疡性结肠炎的极佳模型,雷公藤多苷可显著改善溃疡性结肠炎大鼠临床症状及促进高质量的黏膜愈合,即镜下黏膜愈合,该作用与硫唑嘌呤6mg/kg相当或强于硫唑嘌呤6mg/kg。脂质过氧化反应相关因子ELISA结果提示:与正常对照组相比,模型对照组大鼠体内MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px水平显著降低。与模型组相比,雷公藤多苷呈现剂量依赖性地抑制大鼠血清中MDA水平,增加大鼠血清中SOD、GSH-Px水平,其中雷公藤多苷12mg/kg组能显著抑制MDA、促进SOD、GSH-Px释放。同时,硫唑嘌呤6mg/kg的作用略好于雷公藤多苷12mg/kg,但无统计学差异。炎症因子ELISA结果提示雷公藤多苷呈剂量依赖性地抑制血清中IL-1β及TNF-α的表达,其中雷公藤多苷6mg/kg、12mg/kg、硫唑嘌呤6mg/kg与模型对照组相较抑制炎症因子释放更显著;雷公藤多苷12mg/kg与硫唑嘌呤6mg/kg对炎症因子IL-1β及TNF-α的抑制作用相当,但差异无统计学意义。结论:雷公藤多苷可显著减少TNBS/乙醇溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜镜下炎性细胞浸润,最终达到镜下黏膜愈合的目的,其机制之一是通过减少自由基生成、抑制脂质过氧化反应和增强抗氧化能力,抑制炎症因子释放,重新建立氧化还原平衡,抑制结肠炎症。     

美洲大蠊提取物对2,4,6-三硝基苯磺酸诱导大鼠溃疡性结肠炎的影响

目的探究美洲大蠊提取物对2,4,6-三硝基苯磺酸诱导大鼠溃疡性结肠炎的影响。方法建立2,4,6-三硝基苯磺酸诱导UC大鼠模型,大鼠随机分为正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(300 mg/kg)、肠炎宁组(600 mg/kg)及美洲大蠊提取物低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg),于UC模型建立第8天进行相应药物灌胃治疗,1次/d,连续14 d。实验期间对大鼠进行DAI、CMDI、HS评分,检测血清IL-4、IL-17、TNF-α、IFN-γ水平和结肠组织TGF-β1、EGF、MPO水平。结果以DAI评分为依据,将轻中度炎症大鼠纳入实验,占造模大鼠比率为93.75%。与模型组比较,美洲大蠊提取物可降低DAI评分、HS评分(P0.01),下调血清IL-17、TNF-α、IFN-γ及结肠组织MPO水平(P0.01),降低结肠指数和CMDI评分(P0.05,P0.01),增加血清IL-4及结肠组织TGF-β1、EGF水平(P0.01)。结论美洲大蠊提取物对UC大鼠有一定的治疗效果,其作用机制可能与上调IL-4、EGF、TGF-β1水平,下调TNF-α、IL-17、MPO、IFN-γ水平有关。     

蒲公英水提物对大鼠溃疡性结肠炎的作用

目的 通过建立乙醇-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导溃疡性结肠炎模型,研究蒲公英水提物对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用,并初步探索其作用机制.方法 采用三硝基苯磺酸诱导溃疡性结肠炎大鼠模型,灌肠给予奥沙拉嗪(200 mg/kg)和蒲公英水提物(100、200 mg/kg),通过检测大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(...     

平溃灌肠剂对溃疡性结肠炎模型大鼠疗效及作用机制研究

目的:研究平溃灌肠剂对溃疡性结肠炎大鼠模型的治疗作用,并对其作用机制进行探讨。方法:选取SPF级SD大鼠60只,随机抽取8只作为正常组,剩余52只采用三硝基苯磺酸+乙醇制备溃疡性结肠炎大鼠模型。造模成功后剩余50只大鼠随机分为模型组、柳氮磺吡啶组(0.32g/kg)及平溃灌肠剂高(17.25g/kg)、中(8.64g/kg)、低(4.32 g/kg)剂量组,每组10只。给予相应药物进行治疗,连续给药10 d。观察大鼠病变活动指数(DAI)变化,进行损伤程度评分、病理组织学评分,检测血清D-乳酸(D-LA)、二胺氧化酶(DAO)水平及脱氧胆酸(UDCA)、牛磺熊脱氧胆酸(TUDCA)、甘氨熊脱氧胆酸(GUDCA)水平。结果:各给药组大鼠体质量均显著高于模型组(P0.05);各给药组DAI、结肠黏膜组织损伤程度评分、病理组织学评分均显著低于模型组(P0.05);各给药组与模型组比较,表现为D-LA、DAO和DCA降低,UDCA、TUDCA和GUDCA升高,其中柳氮磺吡啶组、平溃灌肠剂高剂量组各指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:平溃灌肠剂可能通过促进溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜损伤修复,降低D-LA、DAO和DCA,升高UDCA、TUDCA和GUDCA水平发挥其治疗作用。     

EGCG对大鼠三硝酸苯磺酸结肠炎Caspase-1表达及其相关细胞因子分泌的影响

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对大鼠TNBS结肠炎的治疗作用,并探讨其可能的抗炎机制。方法:用TNBS/乙醇溶液灌肠建立大鼠TNBS结肠炎模型,造模成功后随机分模型组和EGCG组(浓度分别为25、50、75mg/kg),另设空白对照组。各组按相应剂量EGCG配成2ml灌胃,空白对照组和模型组给予生理盐水灌胃,连续7天。观察大鼠一般情况、进行疾病活动指数(DAI)、结肠大体形态损伤指数(CMDI)、结肠组织病理学(HI)评分;测定结肠组织匀浆丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性;免疫组织化学法检测结肠组织Caspase-1的表达;ELISA法检测血清中IL-1β和IL-18的水平。结果:与模型组大鼠相比,EGCG 75mg/kg浓度时,大鼠一般状况改善,DAI、CMDI和HI评分均有不同程度降低,结肠组织匀浆中MPO活性和MDA含量也有不同程度下降,免疫组化显示结肠组织中Caspase-1表达下降,血清中IL-1β和IL-18浓度也有所降低。结论:EGCG能减轻TNBS结肠炎大鼠结肠炎症,可能与EGCG抑制结肠组织中Caspase-1的表达,降低血清中IL-1β和IL-18的水平相关。     

溃结宁膏穴位敷贴对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织黏膜屏障的作用

目的观察溃结宁膏穴位敷贴对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜屏障的作用,探讨其治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法选用SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、敷贴组、SASP组,并建立溃疡性结肠炎大鼠模型造模后敷贴组给予溃结宁膏穴位敷贴,SASP组予SASP灌胃;观察结肠组织大体形态及结肠黏膜损伤程度,光学显微镜下观察结肠组织病理改变,并进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)、结肠组织学损伤指数(TDI)评分,同时分别运用ELISA方法测定血清中D-乳酸(D-LA)和二胺氧化酶(DAO)的含量、Western blotting方法检测各组大鼠结肠黏膜组织ZO-1、SOCS1的蛋白表达。结果形态组织学检测:在CMDI、TDI评分上,模型组较空白组升高(P 0.01);敷贴组和SASP组较模型组降低(P 0.05);敷贴组与SASP组比较差异无统计学意义(P 0.05)。ELISA检测:与空白组比较,其余3组的D-LA和DAO含量上升(P 0.05);与模型组比较,敷贴组和SASP组D-LA、DAO差异明显(P 0.05);与SASP组比较,敷贴组各项指标差异不明显(P 0.05)。Western blotting检测:与空白组比较,模型组ZO-1、SOCS1蛋白的表达下降(P 0.01);与模型组比较,敷贴组和SASP组ZO-1、SOCS1明显升高(P 0.05);与SASP组比较,敷贴组各项指标差异不明显(P 0.05)。结论溃结宁膏穴位敷贴可以一定程度上提高模型大鼠ZO-1、SOCS1等蛋白的水平,同时降低血清中D-LA和DAO的含量,从而达到减轻肠道炎症反应,促进结肠黏膜愈合,重建肠黏膜机械屏障的完整性的目的。     

复方溃结康灌肠液对葡聚糖硫酸钠诱导溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜的保护作用

目的研究复方溃结康灌肠液对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜的保护作用。方法将大鼠随机均等分为正常组、模型组、复方溃结康灌肠液低剂量组(787.5 mg/kg)、复方溃结康灌肠液中剂量组(1575 mg/kg)、复方溃结康灌肠液高剂量组(3150 mg/kg)、美沙拉嗪组(5 mL/kg),除正常组外,自由饮用4.5%DSS溶液7 d制备溃疡性结肠炎模型,各治疗组给予相应药物行灌肠干预,每日称取大鼠体质量,检测便潜血,评估疾病活动指数(DAI);干预结束后,处死大鼠,取结肠组织,观察大鼠病理损伤及进行结肠组织病理学(HS)评价,同时应用化学比色法来检测髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果与正常组相比,DSS诱导的UC大鼠毛色、活动度、潜血、大便性状等一般情况较差,体质量下降明显,DAI指数最大,病理损伤明显,HS评分最重,MPO活性较正常组更高(P0.01),经过7 d的干预后,各治疗组均有不同程度的好转,能够降低DAI指数和HS评分,下调MPO活性水平(P0.01)。结论复方溃结康灌肠液对DSS诱导溃疡性结肠炎大鼠有较好的治疗作用,能够明显改善腹痛腹泻、脓血等临床症状,还能降低结肠炎症细胞的浸润,保护结肠黏膜。     

白头翁汤加减联合双歧杆菌制剂对大鼠溃疡性结肠炎的影响

目的:探讨白头翁汤加减联合双歧杆菌制剂治疗溃疡性结肠炎的效果及其作用机制研究。方法:SPF级SD大鼠60只,随机抽取8只大鼠作为正常组,剩余52只造模。采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠法复制溃疡性结肠炎模型,第3天随机抽取2只解剖,观察造模是否成功。剩余的50只大鼠随机分为5组,每组10只,分别为模型组,丽珠肠乐(双歧杆菌制剂)组(丽珠肠乐组),丽珠肠乐+白头翁汤加减高、中、低浓度组(联合高、中、低剂量组),定时给药持续14 d,评估大鼠疾病活动指数(diseaseactivityindex,DAI)。取材后行苏木素-伊红(HE)染色;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清D-乳酸(D-lactic acidosis,D-LA),二胺氧化酶(double amine oxidase,DAO)水平及结肠细胞因子白细胞介素-8(IL-8),IL-13水平;实时荧光定量-聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测双歧杆菌及IL-1βmRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量明显降低,DAI和HE染色评分均明显升高,血清D-LA,DAO及结肠组织IL-8水平明显升高,IL-13水平明显降低,双歧杆菌mRNA明显降低及IL-1βmRNA明显升高(P0.05);联合组高剂量组死亡率低于丽珠肠乐组,各给药组大鼠体质量均高于模型组(P0.05);联合组高剂量组死亡率低丽珠肠乐组,且体质量高于丽珠肠乐组(P0.05);联合组高剂量组DAI低于丽珠肠乐组(P0.05);联合组高剂量组HE评分低于丽珠肠乐组(P0.05);与丽珠肠乐组比较,联合组高剂量组D-LA,DAO和IL-8降低,IL-13升高(P0.05);各用药组大鼠结肠组织中双歧杆菌mRNA相对含量均有增加(P0.05);联合组高剂量组双歧杆菌mRNA相对含量高于丽珠肠乐组(P0.05);联合组高剂量组IL-1β的相对表达量低于丽珠肠乐组(P0.05)。结论:高剂量白头翁汤加减联合双歧杆菌制剂可能通过促进溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜修复,加强肠道双歧杆菌定植,降低D-LA,DAO和IL-8,升高IL-13水平,下调IL-1βmRNA表达发挥协同治疗作用。     

康复新液对TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎治疗作用的研究

目的:观察康复新液对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗作用。方法:将60只SD大鼠随机分为空白对照组(等体积蒸馏水)、模型对照组(等体积蒸馏水)、柳氮磺吡啶组(SASP,0.6g/kg)、康复新液高、中、低剂量组(20、10、5m L/kg),每组10只,雌雄各半。采用TNBS灌肠造模,造模后第3天开始灌胃给药,连续12d,给药结束后各组取材进行HE染色,并用ELISA法测定结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-10(IL-10)的水平。结果:造模后大鼠结肠呈明显溃疡样损伤;与空白对照组相比较,模型对照组大鼠结肠组织中促炎相关因子MPO、TNF-α和IL-1β的含量升高(P0.05),抗炎因子IL-10含量降低(P0.05);与模型对照组比较,康复新液高剂量组大鼠结肠组织损伤减轻,高、中、低剂量组均能降低大鼠结肠组织中MPO、TNF-α含量(P0.05),也有降低IL-1β含量和升高IL-10含量的作用趋势。结论:康复新液对TNBS诱导的大鼠结肠炎具有良好的治疗效果,机制可能与调节抗炎因子和促炎因子之间的平衡作用有关。     

翻白草对TNBS诱导的急性溃疡性结肠炎大鼠促炎因子及趋化因子的影响

目的:研究翻白草对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的实验性溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用,并阐明其对促炎因子IL-17、TNF-α、IFN-γ、MIP-1α以及趋化因子(RANTES)表达的影响。方法:采用TNBS-乙醇灌肠法复制溃疡性结肠炎大鼠模型,实验分为空白对照组、模型对照组、柳氮磺吡啶组(阳性药)、翻白草醇提物高、中、低剂量组6组,连续给药14 d后取结肠组织进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)和苏木素-伊红染色(HE)评价,通过蛋白芯片检测大鼠结肠组织中IL-17、TNF-α、IFN-γ、MIP-1α以及趋化因子(RANTES)含量。结果:翻白草各剂量组DAI水平较模型组均明显下降,其中翻白草高、中剂量组能够明显降低大鼠结肠组织炎细胞浸润的程度,经翻白草干预后大鼠结肠组织中促炎因子IL-17、TNF-α、IFN-γ、MIP-1α及RANTES表达减少。结论:翻白草醇提物通过调节炎症因子表达,抑制趋化因子募集粒细胞浸润,有效改善TNBS诱导的急性溃疡性结肠炎大鼠的肠黏膜损伤。     

苦参总碱对溃疡性结肠炎模型大鼠的影响

目的:研究苦参总碱对溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗作用及对核因子-κB、下游炎症细胞因子表达的影响。方法:采用TNBS(2,4,6-三硝基苯磺酸)+乙醇法制备大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis)模型,随机分为模型对照组、苦参总碱低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg)、阳性对照组(柳氮磺胺吡啶,Sulfasalazine)等5组,另设正常对照组大鼠10只。留取结肠组织标本,观察结肠大体形态变化,并做病理组织学检查。采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法观察溃疡性结肠炎模型大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-8(IL-8)和白介素-1(IL-1)的含量,采用Western blot法检测结肠组织NF-κB的表达水平。结果:与模型组相比,苦参总碱100 mg/kg组能改善溃疡性结肠炎模型大鼠结肠大体形态评分,减轻肠道炎性反应和粘膜损伤;苦参总碱(100、200、400 mg/kg)干预后能降低血清中炎症因子TNF-α、IL-1和IL-8的水平。苦参总碱治疗组均能下调结肠组织中NF-κB的蛋白表达,呈现的剂量依赖性。结论:苦参总碱能够抑制NF-κB的活化,减少炎性因子表达,对溃疡性结肠炎有明显的治疗作用。     

化浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠炎症免疫细胞因子的影响研究

目的研究化浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)及血浆P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)含量的影响,探讨该方治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法取60只雄性Wistar大鼠,随机选取15只大鼠作为正常组,其余45只大鼠采用TNBS/无水乙醇法诱导溃疡性结肠炎模型。然后将造模成功大鼠随机分为模型组、美沙拉嗪组及化浊解毒方组,每组14只。正常组常规饲养,模型组予0.9%NaCl溶液4 mL/(kg·d)灌胃,美沙拉嗪组予美沙拉嗪混悬液0.3 g/(kg·d)灌胃,化浊解毒方组予化浊解毒方混悬液20 g/(kg·d)灌胃,均1次/d,连续14 d。记录各组大鼠疾病活动指数(DAI)评分,观察结肠组织病理学变化,检测血清IL-1β及血浆VIP、SP含量。结果模型组大鼠DAI评分及血浆SP含量和血清IL-1β含量均明显高于正常组(P均0.05),血浆VIP含量明显低于正常组(P均0.05),结肠黏膜水肿、充血、溃疡明显。美沙拉嗪组、化浊解毒方组大鼠DAI评分及血浆SP含量和血清IL-1β含量均明显低于模型组(P均0.05),血浆VIP含量均明显高于模型组(P均0.05),结肠黏膜水肿、充血、溃疡明显减轻;且化浊解毒方组血浆VIP含量明显高于美沙拉嗪组(P0.05),DAI评分及血清IL-1β含量均明显低于美沙拉嗪组(P均0.05),结肠黏膜病理变化明显轻于美沙拉嗪组,但2组血浆SP含量比较差异无统计学意义(P0.05)。结论化浊解毒方能够有效改善溃疡性结肠炎大鼠结肠病理损伤,其作用机制可能与平衡细胞因子,进而抑制炎症免疫损伤有关。