DA-6对冬季迟缓期的艾纳香生长和有效成分含量的影响

目的:研究DA-6对冬季迟缓期艾纳香生长和有效成分含量的影响。方法:以一年生艾纳香种子苗为实验材料,在冬季艾纳香生长迟缓期进行3次喷施DA-6。测定艾纳香的株高、地径、叶长和叶宽等生长指标以及叶干重。分别采用紫外可见分光光度法和GC法测定艾纳香叶片总黄酮和l-龙脑的相对含量,并计算绝对含量。结果:DA-6显著促进艾纳香生长,增加叶干重,其中10 mg·L-1DA-6作用的效果最显著。DA-6抑制了艾纳香叶片中总黄酮和l-龙脑相对含量的积累。CK处理组总黄酮和l-龙脑相对含量最高,显著高于100 mg·L-1DA-6处理组77.78%和96.49%。DA-6显著提高了总黄酮和l-龙脑的绝对含量。10 mg·L-1DA-6处理组艾纳香叶片中总黄酮和l-龙脑含量最高,显著高于其他处理组,是CK处理组的2.33倍和3.33倍。结论:因此,在冬季艾纳香生长迟缓期施加DA-6可以促进艾纳香生长和叶干重的增加,提高总黄酮和l-龙脑的绝对含量。     

艾纳香提取前不同处理方法对左旋龙脑含量的影响

目的:研究艾纳香提取前不同处理方法对艾纳香中左旋龙脑含量的影响,确定合理有效的提取前处理方法。方法:以左旋龙脑为对照品,以水杨酸甲酯为内标物,采用气相色谱法检测不同荫干时间、不同烘干温度及优化润湿处理方法的艾纳香中左旋龙脑含量的变化。结果:常温情况下左旋龙脑含量随着干燥时间的增加而减少,新鲜样品左旋龙脑含量以干重计为9.151 9 mg·g-1,常温情况下左旋龙脑含量随着干燥时间的增加而减少,24 h内减少最快;烘培温度越高左旋龙脑损失越多,烘焙温度超过50℃后损失加快,当烘焙温度为30℃时含量以干重计为6.097 8 mg·g-1;料液比为1∶2、润湿时间为20 min时样品左旋龙脑含量最高,以干重计为4.798 3 mg·g-1。结论:艾纳香鲜品左旋龙脑含量高;干燥温度越低时间越短左旋龙脑损失越少;料液比为1∶2、润湿时间为20 min时左旋龙脑含量最高。     

栽培艾纳香单株左旋龙脑和总黄酮含量变异分析

目的：探讨艾纳香栽培群体内主要化学成分个体变异规律,为艾纳香优良品种的定向选育奠定基础。方法：选取同一栽培环境下相同株龄100个艾纳香单株,采用GC测定左旋龙脑含量,紫外可见分光光度法测定总黄酮含量。通过相关分析、标准差法分组比较等方法分析化学成分单株变异规律。结果：100个单株艾纳香左旋龙脑变异系数为37.39%,总黄酮变异系数为20.13%;分组后左旋龙脑和总黄酮含量分别在3个组别间差异达到极显著（P＜0.001）水平;相关分析表明,两类成分间存在正相关关系（r=0.084,n=100）,但不具有统计学意义（P＞0.05）。结论：艾纳香栽培群体内单株化学成分含量变异较大,可为高含量育种提供材料。此外,艾纳香叶片中左旋龙脑和总黄酮积累不具有协同性,应分别对其进行选择。     

外源镁对冬季迟缓期的艾纳香生物量和有效成分含量的影响

目的:考察外源镁对冬季生长迟缓期的艾纳香生物量和有效成分含量的影响。方法:选择一年生艾纳香种子苗为试验材料,以七水合硫酸镁提供镁元素,在冬季艾纳香生长迟缓期进行3次施肥,测定艾纳香的株高、地径、叶长和叶宽等生长指标以及生物量。采用UV测定艾纳香不同部位总黄酮含量,检测波长500 nm。采用GC测定艾纳香叶片中l-龙脑含量,程序升温(起始温度80℃,保持2 min;以5℃·min-1升温至100℃,继以20℃·min-1升温至200℃),进样口温度220℃,FID检测器温度240℃,进样量0.6μL,分流比9∶1。结果:外源镁提高了冬季生长迟缓期的艾纳香的生长指标,极显著提高了地径、叶长和叶宽,显著增加了艾纳香叶、茎和根的生物量。10 g·L-1镁处理的艾纳香叶片和茎生物量分别为226.47,140.40 g,依次为空白组(CK)叶片(22.45 g)和茎(26.57 g)生物量的10.09,5.28倍;15 g·L-1镁处理下的艾纳香叶片和茎生物量分别为244.88,146.02 g。外源镁对艾纳香不同部位中总黄酮和l-龙脑质量分数提高无促进作用或影响不显著,但增加了二者质量的积累,10,15 g·L-1镁处理下的l-龙脑质量分别是CK的8.5,10.0倍。结论:在冬季生长迟缓期施加镁,可促进艾纳香的生长和生物量积累,显著提高其总黄酮和l-龙脑的质量。     

艾纳香挥发油栓质量标准研究

目的：建立艾纳香挥发油栓的质量控制标准.方法：采用薄层色谱法对艾纳香进行定性鉴别,气相色谱法测定龙脑含量.结果：薄层鉴别可以检测出艾纳香对应的斑点,斑点清晰,阴性对照无干扰;龙脑对照品在0.025～1.60mg·mL-1之间线性关系良好（r2=0.9997）,平均回收率为98.34％（RSD为0.42％,n=6）.结论：该方法操作简单,准确性高,重复性好,可用于该制剂的质量控制.     

艾纳香挥发油和左旋龙脑在不同叶型及不同部位的分布

目的寻找艾纳香叶型和叶的茎生长部位中挥发油和左旋龙脑分布规律。方法挥发油采用药典方法蒸馏提取;左旋龙脑采用乙酸乙酯超声提取,气相色谱法测定。结果按叶型区分,艾纳香的挥发油的含有量由高到低依次为马耳艾、小叶艾和大叶艾,左旋龙脑依次为马耳艾、大叶艾和小叶艾,但统计学上无显著性差异。按部位区分,挥发油和左旋龙脑的量由高到低依次均为茎中上部叶和下部叶,统计学上有显著性差异。结论应首选马耳艾叶型和它的中上部位叶作为筛选优良种源。     

种植密度及采收期对苗药艾纳香产量和品质的影响

目的:研究不同种植密度和采收期对苗药艾纳香产量和品质的影响,为艾纳香的规范化栽培提供理论依据。方法:采用二因素试验进行种植密度和采收期对苗药艾纳香品质和产量的影响,设种植密度(株距×行距)50 cm×90 cm、50 cm×60 cm、50 cm×30 cm和30 cm×30 cm,采收期设10月中旬、11月中旬、12月中旬,随机区组设计。结果:种植密度及采收期对艾纳香的产量和品质均有影响。单位面积产量和单位面积挥发油产量都随着密度的增加,逐渐增大,密度为111 112株/hm~2时,12月中旬采收的艾纳香单位面积产量和单位面积挥发油产量最高,均可获得高产,分别为1 546.68 kg/hm~2和96.6 L/hm~2。在密度22 223株/hm~2和111 112株/hm~2时艾纳香叶片的总黄酮含量最高,分别为2.50 mg/g和2.53 mg/g,采收期对总黄酮含量无显著影响。结论:艾纳香根蘖苗当年移栽定植的适合种植密度为111 112株/hm~2,适宜的采收期为12月。     

测定旋光性区别梅片、艾片和冰片

梅片,即龙脑冰片,为龙脑香科植物龙脑香树脂和挥发油中取得的结晶;艾片,又名艾脑香,为菊科植物艾纳香的叶提取的结晶;冰片,亦称合成龙脑,为樟脑和松节油等用化学方法合成的加工制成品。由于三者外观性状较为相似,我国药典、部颁标准和省标又均未收载梅片和艾片的质量检验方法,为此本文试通过测定其各自     

气相色谱法测定艾纳香中左旋龙脑的研究

目的 建立气相色谱法测定艾纳香药材中左旋龙脑.方法 以水杨酸甲酯为内标物,采用PEG20M( 10％)填充柱(2m×3mm ×2μm),FID检测器;气化温度180℃;柱温150℃;检测器温度200℃;进样量为1μL.结果 左旋龙脑在0.312 ～ 10.000 mg/mL范围内与峰面积比值的线性关系良好,平均回收率为100.9％,RSD为2.2％.结论 本方法简便、准确、可用于艾纳香药材的质量评价.     

茉莉酸甲酯对艾纳香活性成分、抗氧化酶活力以及内源激素含量的影响

目的研究艾纳香植株不同叶位叶片中4种内源激素含量和3种抗氧化酶活性以及L-龙脑的含量与诱导剂的浓度、采样时间之间的规律。方法以0.01、0.10、1.00、10.00mmol/L的茉莉酸甲酯(MeJA)作为外源诱导剂,艾纳香不同叶位的叶片(嫩叶、成熟叶、老叶)为实验对象,以生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)4种内源激素含量和过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)3种抗氧化酶的活力以及活性成分L-龙脑的含量作为检测指标。结果 1.00 mmol/L的MeJA对L-龙脑的积累效果较好;不同浓度的MeJA诱导下,抗氧化酶的变化比较复杂。对于POD来说,除了10.00 mmol/L MeJA浓度处理下的艾纳香3个叶位的叶片中其含量低于对照外,其他浓度处理下,POD在72 h均显著高于对照(P0.05)。对于CAT来说,10.00 mmol/L MeJA诱导下,艾纳香3个叶位叶片其含量在24 h时达到最高,之后随着时间的推移,CAT活力极速下降。在其他浓度处理下,嫩叶和老叶中的CAT酶活力在72 h,显著低于对照,而在成熟叶中除了0.10 mmol/L MeJA处理,均在72 h时高于对照。对于SOD来说,除了1.00 mmol/L MeJA处理的3个叶位的叶片在48 h之后,SOD含量均高于对照,且与对照组有显著差异(P0.05)外,其余浓度处理下的SOD均低于对照。低浓度的MeJA(≤0.10 mmol/L)可以促进艾纳香叶片中的IAA、GA3和ZT的积累,而高浓度的MeJA(≥10.00 mmol/L)促进ABA的积累。结论艾纳香植株在外源MeJA(1.00 mmol/L)诱导下可以促进活性成分积累,为其栽培生产提供理论依据。     

外源水杨酸对艾纳香活性成分、抗氧化酶活力及内源激素含量的影响

目的:探索艾纳香植株不同部位叶片中活性成分L-龙脑含量、四种内源激素含量以及三种抗氧化酶活力对诱导剂浓度、采样时间的响应规律。方法:以浓度为0.01、0.1、1、10 mmol/L的水杨酸(SA)作为外源诱导剂,进行全株叶面均匀喷施处理,诱导后在24、48、72 h分别采集艾纳香植株不同叶位的叶片(嫩叶、成熟叶、老叶)样品,采用气相色谱法测定叶片中L-龙脑含量,通过分光光度法测定叶片中过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用酶联免疫法测定叶片中的生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)四种内源激素含量。结果:0.01 mmol/L SA诱导对艾纳香三个叶位叶片中L-龙脑积累效果较好;低浓度SA(0.01 mmol/L)能增强艾纳香三个叶位叶片中三种抗氧化酶的活力,其中POD和SOD随着时间的推移酶活力逐渐增强,在72 h时达到最高,而CAT在三个叶位中的活力变化复杂,无此规律;高浓度SA(≥0.1 mmol/L)减弱了三个叶位叶片中三种抗氧化物酶活力,浓度越高,减弱的现象越明显;低浓度SA(0.01 mmol/L)可促进艾纳香叶片中IAA、GA3和ZT的积累,这种现象在嫩叶和成熟叶中比较明显,而高浓度SA(≥1 mmol/L)对艾纳香三个叶位叶片中ABA的积累有明显的促进作用。结论:0.01 mmol/L水杨酸诱导既能够促进艾纳香叶片中L-龙脑的积累,又可以确保艾纳香植株正常生长。     

土壤因子对艾纳香有效成分的影响研究

目的:研究艾纳香有效成分与土壤因子的相关性,筛选影响其含量的主导因子。方法:GC测定艾纳香中l-龙脑的含量,紫外-可见分光光度计测定总黄酮的含量,理化分析法测定土壤因子,应用相关分析、逐步回归分析及灰色关联度分析对土壤因子与有效成分的关系进行综合分析。结果:艾纳香中l-龙脑含量与有效硫呈显著负相关(P<0.05),总黄酮含量与p H、碱解氮、交换性钙、交换性镁呈显著负相关(P<0.05);经逐步回归分析发现,影响l-龙脑含量的主导因子为有效硫,影响总黄酮含量的主导因子为p H;经灰色关联度分析发现,p H为影响艾纳香有效成分的重要因子,其次为碱解氮和有效硫。结论:无论是选择适宜产地还是施肥,都应重视和考虑氮、硫及土壤p H对艾纳香质量的影响。     

植物生长调节剂对黄独试管苗微型块茎诱导形成的影响

目的 探讨植物生长调节剂（NAA、2,4-D、6-BA、KT、PP₃₃₃）对黄独微型块茎诱导形成的影响,以期找到适宜的微型块茎诱导形成的植物生长调节剂浓度和组合。方法 采用植物组织培养技术、单因素试验和正交试验的方法,以黄独试管苗的带芽茎段为外植体,开展植物生长调节剂对黄独微型块茎诱导形成的影响等方面的研究。结果 生长素单独使用有利于黄独微型块茎的诱导形成,NAA和2,4-D诱导微型块茎形成的适宜浓度均为0.5 mg/L,两者的诱导效果无显著性差异。细胞分裂素单独使用不利于黄独微型块茎的形成,KT和6-BA诱导微型块茎形成的适宜浓度均为2 mg/L,但KT的诱导效果好于6-BA。生长素、细胞分裂素和PP₃₃₃组合可以显著促进黄独微型块茎的诱导形成,其中较佳的组合为MS＋NAA 0.5 mg/L＋6-BA 2.0 mg/L＋PP₃₃₃ 0.5 mg/L。结论 筛选出了诱导黄独微型块茎形成的植物生长调节剂单独使用和组合使用的适宜浓度,为黄独微型块茎的离体诱导形成及工业化生产奠定了技术基础。     

馥芳艾纳香快繁体系的建立

目的建立馥芳艾纳香Blumea aromatica的快繁技术体系,为大量生产种苗提供基础。方法利用不同激素配比的培养基,筛选出馥芳艾纳香快速繁殖的最适培养基。结果带腋芽茎段是丛生芽诱导的最佳材料;丛生芽诱导的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,诱导率为100%;最佳继代增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.2mg/L NAA,增殖倍数为6.83;最适的生根培养基为1/2 MS+0.3 mg/L NAA,生根率100%,移栽成活率84.07%。最适培养条件为温度26℃、光照强度为2 000 lx、光照时间10 h。结论快繁技术体系可在短时间内提供大量种苗,并为馥芳艾纳香规模化生产种苗提供技术指导。     

道地中药颖半夏组培快繁优化研究

目的:建立并优化道地中药颖半夏的组培快速繁殖体系。方法:将不同大小的茎尖接种于培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L,考察最适宜大小的外植体;以MS培养基为基本培养基,通过不同种类和浓度的植物生长调节剂配比试验,筛选颖半夏试管苗快速繁殖与生根的最佳培养基组成。结果:最适宜的外植体为直径0.4mm的茎尖,诱导丛生芽的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT 0.1 mg/L;诱导试管苗生根的最适培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+PP333 0.2 mg/L。结论:采用组织培养方法可进行颖半夏的快速繁殖,为后续的道地药材种质资源保护奠定了基础。     

芦笋茎尖诱导生根的初步研究

以IBA、PP333,KT植物生长调节剂为试验因子对芦笋A01（asparagua officinalis ）茎尖诱导生根进行了3因子3水平正交试验，结果分析表明其芽诱生根的最佳培养基为1／2MS＋0．5mg／L IBA＋0．05mg／L KT＋1mg/L PP333。     

沙漠嘎不同部位总黄酮和艾纳香素含量比较

目的:测定蒙药沙漠嘎不同部位总黄酮和艾纳香素的含量,为合理开发沙漠嘎资源提供依据。方法:采用紫外—可见分光光度法,以橙皮素为对照品,测定总黄酮含量;采用高效液相色谱法,测定艾纳香素含量。结果:沙漠嘎不同部位的总黄酮和艾纳香素含量不同,有较大差异:其中叶的总黄酮和艾纳香素含量较高,而以6月份采收的叶含量最高;茎的总黄酮和艾纳香素含量较低。结论:沙漠嘎不同部位总黄酮和艾纳香素含量存在差异,为传统用药习惯嫩枝叶入药提供实验依据。     

滇桂艾纳香组培快繁技术体系的研究

目的:探索滇桂艾纳香组培快繁技术体系的最佳培养条件。方法:以滇桂艾纳香的嫩茎段为外植体,采用正交试验设计方法优化增殖培养基,建立组培快繁体系。结果:0.1%Hg Cl2溶液灭菌10 min效果最佳;茎段丛生芽诱导培养基以MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L最佳,诱导率达90%;6-BA是影响增殖的主要因素,达显著水平,NAA与KT效应不显著;芽增殖的最适培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+KT 1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,增殖系数为7.12;生根培养基用1/2MS+NAA 0.5 mg/L最好,生根率100%,移栽成活率93.33%。结论:该试验得到的组培快繁技术体系可在短时间内提供大量种苗,并为规模化生产种苗提供技术指导。     

不同产地不同采集期滇桂艾纳香中总黄酮及原儿茶酸的含量测定

目的:建立滇桂艾纳香药材中总黄酮及原儿茶酸含量的测定方法,通过考察不同产地不同采集期滇桂艾纳香中总黄酮及原儿茶酸含量的变化,为滇桂艾纳香药材的质量控制提供科学依据.方法:采用紫外分光光度法测定滇桂艾纳香药材总黄酮的含量,测定波长为510 nm;采用高效液相色谱法测定原儿茶酸的含量,色谱柱为Agilent Hypersi...     

白芨愈伤组织诱导、增殖与分化研究

目的 建立白芨愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系.方法 以MS为基本培养基,应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比,研究不同外植体及植物生长调节剂对白芨愈伤组织形成、增殖和分化的影响.结果 白芨假鳞茎为诱导愈伤组织形成的最佳外植体;1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)与2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)组合不仅可诱导白芨愈伤组织形成,还有利于愈伤组织分化成芽.1.0 mg/L 6-BA与3.0 mg/L 2,4-D的组合促进愈伤组织增殖,增殖系数为7.8;在分化培养基中附加0.5 mg/L噻二唑苯基脲(TDZ),可提高愈伤组织分化率.结论 白芨愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 3.0 mg/L;分化最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L.