DNA倍体检测与妇科肿瘤的关系

细胞异常增殖是肿瘤细胞的特性,细胞DNA含量不仅能敏感地反映细胞代谢异常,而且通过DNA倍体分析,细胞周期各时期比率的分析可以全面了解细胞生物学行为,从而有助于肿瘤的诊断,治疗和预后判断。     

免疫磁珠与荧光定量逆转录聚合酶链反应在胃癌患者外周血癌细胞检测中的应用价值

目的研究免疫磁珠和荧光定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测胃癌患者外周血癌细胞的应用价值。方法将不同浓度的人胃腺癌细胞系MGC803细胞加入到健康人血中,经淋巴细胞分离液收集单核细胞后,等分4份。其中1份直接用于提取RNA(方法Ⅰ)、其他分别用阴性磁珠(方法Ⅱ)、阳性磁珠(方法Ⅲ)及联用阴性和阳性磁珠(方法Ⅳ)富集癌细胞。然后,以癌胚抗原(CEA)mRNA作为分子标志物进行荧光定量RTPCR检测其相对拷贝数;并检测45例胃癌、30例胃溃疡患者和30名健康人外周血CEAmRNA。结果方法Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ测得的CEAmRNA相对拷贝数与癌细胞数间有良好的相关性(方法Ⅱ和ⅢP<005;方法ⅣP<001),尤以Ⅳ方法为佳,可检测出每毫升血中含有的1个胃癌细胞。Ⅰ～Ⅳ方法检测胃癌患者阳性率分别为4222%、5333%、5111%和6444%;方法Ⅳ与方法Ⅰ比较,差异有显著意义(P<005)。用方法Ⅳ检测30例胃溃疡患者均为阴性,而其他3种方法检出2例阳性;30名健康人中4种方法均未检出扩增产物。结论免疫磁珠与荧光定量RTPCR法可提高胃癌患者外周血CEAmRNA的检出率。     

免疫磁珠富集母体外周血胎儿DNA方法的研究

很多先天遗传性疾病目前尚无理想的早期诊断办法.传统的产前诊断方法如羊膜腔穿刺、绒毛膜取样、抽取脐血等取样技术,虽然有很高的准确性,但均具有创伤性,因此,探求无创性产前诊断方法具有重要临床意义.     

流式细胞术检测免疫表型和分析DNA倍体对非霍奇金淋巴瘤患者的临床价值

目的:探讨流式细胞术免疫表型检测及DNA倍体分析对于非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者的临床价值。方法:收集2007年8月至2015年3月我院收治的NHL患者80例为研究对象,作为观察组。选取同时期收治的20例反应性淋巴结增生患者为对照组。应用流式细胞术检测免疫表型和分析DNA倍体。结果:观察组患者DNA异倍体检出率、DAN指数(DI)值和SPF均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。NHL-Ⅰ、NHL-Ⅱ患者SPF、DI值与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);NHL-Ⅲ和NHL-Ⅳ患者的SPF、DI值与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。低度恶性组、中高恶性组患者SPF和DI值与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);中高恶性组患者SPF和DI值与低度恶性组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:流式细胞术免疫表型检测并进行DNA倍体分析,通过DI和SPF水平,能够反映肿瘤增殖情况和患者病情的恶化程度、指导预后。     

DNA倍体分析联合血清肿瘤标志物检测在宫颈癌筛查中的应用

目的探讨DNA倍体分析联合血清肿瘤标志物在宫颈癌筛查中的应用价值。方法选择2017年9月至2018年9月于该院进行宫颈癌筛查的350例患者为研究对象,采用DNA倍体分析技术对患者进行诊断,同时检测患者糖类抗原125(CA-125)、癌胚抗原(CEA),并进行病理组织检查。比较DNA倍体分析、CA-125、CEA水平对宫颈癌的诊断价值。结果 DNA倍体分析诊断宫颈癌的阳性率与病理组织检出的阳性率差异有统计学意义(χ~2=15.810,P0.001);宫颈癌患者血清CA-125、CEA水平显著高于病理检查阴性或宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CIN)患者(P0.05);受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析结果显示,DNA倍体分析联合血清CA-125、CEA水平诊断宫颈癌的曲线下面积(AUC)为0.906,明显高于DNA倍体分析、CA-125、CEA单独检测(P0.05)。结论 DNA倍体分析联合血清CA-125、CEA进行检测可以提高宫颈癌的阳性检出率,值得临床推广。     

磁珠富集法提高外周血HIV DNA检测灵敏度的研究

目的 建立外周血人免疫缺陷病毒脱氧核糖核酸(HIV DNA)磁珠富集检测方法,并评估该方法在提高HIV感染患者早期抗病毒治疗(early antiretrovital treatment, ART)后外周血中HIV DNA检测灵敏度中的应用价值。方法 采集1位HIV感染窗口期(window period, WP)即开展ART患者4个不同时间点的外周全血,Ficoll法分离外周全血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC),阴性分选富集PBMC中CD4⁺ T淋巴细胞,应用HIV DNA检测试剂盒检测磁珠富集组和全血组HIV DNA浓度。结果 采用免疫磁珠富集法从PBMC中分离纯化CD4⁺ T细胞,经流式细胞仪测定纯度达到(96.4±2.6)%,0.4%台盼兰染色细胞活力为(95.9±2.9)%。治疗后,在追踪的不同时间点,发现患者血浆中HIV RNA载量逐渐下降,至第4个追踪时间点,血浆中不再检出HIV RNA。全血组4个时间点,HIV DNA定量结果均未检出;磁珠富集组CD4⁺     

老年肿瘤患者外周血淋巴细胞免疫表型检测的临床意义

目的：探讨老年肿瘤患者的细胞免疫功能,为临床免疫增强治疗提供理论依据。方法：采用流式细胞仪分别检测80例老年肿瘤患者和60例正常老年人外周血淋巴细胞免疫表型,并对两组进行比较。结果：与对照组比较,肿瘤患者CD3＋、CD4＋、NK、CD4＋/CD8＋比值、CD19＋细胞比例降低具有统计学意义（P〈0.05）。CD8＋比例增高具有统计学意义（P〈0.05）。结论：肿瘤患者免疫功能较正常对照组比较明显降低,外周血淋巴细胞免疫表型分析可作为临床肿瘤患者常规免疫功能检测的一种方法,为临床应用免疫增强治疗提供理论依据。     

流式细胞术分析舌体鳞癌细胞DNA倍体和细胞周期的意义

目的探讨舌体鳞癌细胞的DNA倍体、细胞周期特征,并分析其临床意义.方法采用流式细胞术测定40例舌体鳞癌标本及10例正常舌体组织中的异倍体、DNA指数、增殖指数和S期细胞比例,并研究这些参数与肿瘤组织分期之间的关系.结果 40例舌体鳞癌中,异倍体检出率为70%(28/40);舌体鳞癌与正常舌组织相比,DI、SPF有显著性差异,相对于低分化组而言,高、中分化组的DI、SPF及PI有显著性差异.结论流式细胞仪可用来分析舌休鳞癌的DNA;DI可以鉴别细胞的良恶性;DI、SPF、PI可以作为恶性程度及预后的指标.     

流式细胞术分析舌体鳞癌细胞DNA倍体和细胞周期的意义

目的 探讨舌体鳞癌细胞的DNA倍休、细胞周期特征，并分析其临床意义。方法 采用流式细胞术测定40例舌体鳞癌标本及10例正常舌体组织中的异倍体、DNA指数、增殖指数和S期细胞比例，并研究这些参数与肿瘤组织分期之间的关系。结果 40例舌体鳞癌中，异倍体检出率为70％(28／40)；舌体鳞癌与正常舌组织相比，DI、SPF有显著性差异，相对于低分化组而言，高、中分化组的DI、SPF及PI有显著性差异。结论 流式细胞仪可用来分析舌体鳞癌的DNA；DI可以鉴别细胞的良恶性；DI、SPF、PI可以作为恶性程度及预后的指标。     

免疫磁珠法检测外周血微转移前列腺癌细胞的方法学探讨

目的:探讨前列腺癌外周血微转移免疫磁珠检测方法学的建立及其意义。方法:体外培养前列腺癌LNCaP细胞,将其分别与外周血单个核细胞(PBMC)及全血细胞混合,混合细胞悬液和事先已与单克隆抗体(鼠抗人PSMA单抗)预孵育的包被人抗鼠IgG抗体的磁珠作用,在磁架上分离,显微镜观察,计算玫瑰花环形成率,并进行灵敏度的检测。台盼蓝染色检测分选前后癌细胞存活率。结果:免疫磁珠检测法敏感性高,当PBMC与LNCaP细胞比例为106:1时可以检测到癌细胞,检测灵敏度为20个肿瘤细胞/mL外周血。分选后癌细胞活率较之分选前未明显改变。结论:免疫磁珠法是一种简便、快速、灵敏并且临床实用价值高的检测技术,可为临床早期发现前列腺癌微小残留提供新的思路,有助于前列腺癌的治疗和预后判断。     

免疫磁珠负性富集结合免疫荧光抗体技术检测卵巢癌患者外周血CTCs的方法建立和应用

目的建立基于细胞学水平的循环肿瘤细胞负性富集技术来检测卵巢上皮性癌(卵巢癌)患者外周血循环肿瘤细胞。方法体外培养卵巢癌SKOV-3细胞,按一定比例掺入到2 ml健康人外周静脉血中,应用免疫磁珠为基础的负性富集结合免疫荧光抗体技术对循环肿瘤细胞进行定量检测。评价该方法富集靶细胞的回收率,并用上述方法检测32例卵巢癌患者和10例对照者外周血中的循环肿瘤细胞。结果①在健康志愿者2 ml外周血掺入不同数目SKOV-3细胞的条件下,肿瘤细胞的回收率在64%~80%之间,掺入细胞间回归方程为Y=0.782X-1.408,相关系数为0.998。②10例对照者外周血中未检测到CK8/18+,18例卵巢癌患者的外周血中检测到CK8/18+,阳性率为56.3%(18/32,X~2=7.681,P0.01)。③CTCs阳性与远处转移密切相关(X~2=5.776,P0.05)。结论免疫磁珠负性富集结合免疫荧光抗体技术检测卵巢癌患者外周血循环肿瘤细胞的方法可能具有一定的临床应用价值。     

DNA异倍体联合肿瘤标志物检测在胸腔积液良恶性诊断中的应用

目的探讨DNA异倍体联合肿瘤标志物检测在胸腔积液良恶性诊断中的价值。方法将53例胸腔积液分为恶性组(23例)和良性组(30例)。除常规细胞学检查外,以DNA细胞自动检测分析仪检测患者胸腔积液中的DNA异倍体,采用电化学发光法测定胸腔积液中癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA125)肿瘤标志物含量。比较DNA异倍体联合肿瘤标志物诊断与细胞学诊断的优劣。结果 CA125(AUC=0.747)、CEA(AUC=0.882)、DNA(AUC=0.776)均有显著的诊断价值(P0.001)。CA125取值为563 U/ml时,最佳诊断灵敏度、特异度分别为72.73%、76.67%;CEA取值为2.93μg/ml时,最佳诊断灵敏度、特异度分别为86.96%、86.67%;DNA取值为0时,最佳诊断灵敏度、特异度分别为78.26%、73.33%;3个指标具有同样的诊断价值。将DNA异倍体、CEA、CA125检测结果进行联合诊断的灵敏度与单独诊断时的最佳灵敏度(指标CEA,86.96%)相近,同时其特异度优于3个指标独立诊断时特异度。结论DNA异倍体联合CEA、CA125检测诊断恶性胸腔积液灵敏度与单独诊断时的最佳灵敏度相近,但其特异度优于3个指标独立诊断时特异度。具有定量、快速、价廉、易标准化的特点,且操作简单。     

肺癌患者荷瘤DNA倍体含量及外周血FOXP3与化疗效果的相关性研究

目的探讨肺癌患者荷瘤DNA倍体含量及外周血FOXP3与化疗效果的相关性。方法采用流式细胞术检测89例肺癌患者的DNA倍体含量,并对67例手术和化疗患者检测体内CD4+CD25+FOXP3+调节性T淋巴细胞(Treg细胞),并以63例健康体检者作正常对照。结果随着TNM分期的发展,异倍体肿瘤的发生率逐渐上升(P0.01),有淋巴结转移或癌栓者其癌旁肺组织异倍体比率高于无癌栓或淋巴结转移者,肺癌患者CD4+CD25+T细胞、CD4+FOXP3+T细胞占CD4+T细胞的比例与对照组相比明显升高,CD4+FOXP3+T细胞占CD4+CD25+T细胞的比例与对照组相比无差异,化疗后较化疗前显著降低。结论化疗可使患者CD4+FOXP3+T细胞占CD4+及CD4+CD25+T细胞的比例明显下调,同时测定癌及癌旁细胞核DNA倍体模式,在评估肺癌恶性程度及预后上有一定意义。     

肺结核患者外周血白细胞中结核分枝杆菌DNA的检测

明确外周血白细胞中结核分枝杆菌ＤＮＡ检测在肺结核诊断中的意义。应用聚合酶反应技术，对９５例肺结核患者外周血标本、８４例肺结核患者痰标本进行了结核分枝杆菌ＤＮＡ检测。     

RT-PCR检测外周血中肝癌细胞的研究进展

应用RT－PCR技术检测外用血中肝癌细胞是近年发展起来的新方法,白蛋白mRNA和AFPmRNA为肝组织特异表达,通过检测这二个转录子作为肝癌细胞存在于外周血的标记,有助于判断肝癌的转移、复发。本文综述了近年有关这方面的研究进展。     

RT-PCR检测外周血中肺癌细胞的研究进展

外周血循环中癌细胞的检测是判断肺癌患者复发、转移和疗效的有价值指标 ,应用RT PCR技术检测外周血中肺癌细胞是近年发展起来的新方法 ,本文综述了近年来有关这方面的报道     

DNA倍体定量分析在宫颈癌筛查中的临床应用研究

目的对宫颈癌筛查情况进行分析,为探讨适宜宫颈癌的筛查模式提供参考。方法选取6830例已婚妇女开展宫颈癌筛查,采用专用Feulgen DNA染色做DNA定量测定,由全自动DNA倍体定量分析系统进行扫描,同时也进行液基薄层细胞学检测(TCT)。两种检测法为阳性者均进行组织病理学检测。结果6830例已婚妇女中检出异倍体细胞者占8.39%,其中检出1~2个占5.81%,≥3个占2.58%。阴道镜下活检,CINⅡ及以上病变51例(0.75%);原位癌患病率为0.04%,浸润癌患病率为0.03%。30~45岁CIN和宫颈癌高发,其中>30~35岁、>35~40岁、>40~45岁CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、原位癌、浸润癌患病率分别为1.84%、0.70%、0.61%、0.09%、0.09%,1.23%、0.65%、0.39%、0.06%、0,0.82%、0.16%、0.25%、0.08%、0。与TCT检测方法进行比较,DNA倍体定量法对宫颈癌及癌变前发现率(1.86%)高于TCT检测法(1.30%)(P>0.05)。结论全自动DNA倍体定量分析系统可以作为宫颈癌筛查的一种方法,提高筛查覆盖率、规范宫颈病变的早诊早治技术,可降低宫颈癌的患病率和病死率。     

机会性宫颈癌筛查中DNA倍体分析的临床价值

目的 探究机会性宫颈癌筛查中DNA倍体分析的临床价值分析.方法 选择我院收治的性生活史3年以上女性患者6260例纳入研究,依据不同筛查方式划分成观察组(DNA倍体分析方式)及对照组(液基细胞学(TCT)检测),各3130例.对比两组患者的筛查和病理结果、两种诊断方式评价结果、CIN1+诊断符合率情况.结果 对照组筛查获...     

循环肿瘤DNA检测及其临床应用研究进展

循环肿瘤DNA(ctDNA)主要来自于坏死、凋亡的肿瘤细胞,循环肿瘤细胞,肿瘤细胞分泌的外排体.ctDNA检测标本易获取、创伤小、方便动态监测,可反应肿瘤细胞基因改变的相关情况.ctDNA检测方法根据目标不同可分为两大类,一类是有针对性的检测特定的基因和突变,另一类是以非靶向方法检测所有的基因,通过与已知参考序列对照可...     

胃癌发生发展中DNA倍体分析与Fas表达的临床价值

目的 研究DNA倍体分析与Fas表达在胃癌发生、发展过程中的动态变化及二者关系。从定量病理学、临床免疫学角度探讨细胞增殖和细胞凋亡在胃癌发生发展中的临床意义。方法 采用FCM对四种病变组织经胃镜采取的活检胃粘膜组织（经病理诊断）进行DNA倍体和FAS表达检测。结果 （1）中-重度不典型增生病变和胃癌DNA异倍体率显著高于慢性萎缩性胃炎和轻度不典型增生（P〈0.01）;（2）胃癌DI值显著高于慢性炎症和不典型增生（P〈0.01）;四种病变DI值显著高于正常胃黏膜（P〈0.01）;轻度不典型增生显著高于慢性炎症（P〈0.05）。（3）在无异倍体标本中,胃癌、中、重度不典型增生的S期、G2＋S期比率与慢性炎症相有显著差异（P〈0.01）;各型病变与正常胃黏膜相比均有显著差异（P〈0.01）。（4）四种胃黏膜病变的Fas表达率由慢性炎症—轻度增生—中、重度增生—胃癌递减;胃癌组与其他四组相比有显著差异（P〈0.01及P〈0.05）。DI值高者其Fas表达率下降（r=-0.43）,二者具有负相关性。结论 从正常胃黏膜—慢性萎缩性胃炎—轻度不典型增生—中、重度不典型增生—胃癌过程中,异倍体出现率递增,Fas表达率递减,S期,G2＋S期比例递增,DI值增高。DNA倍体分析与Fas表达有相关性。在胃癌的早期诊断、恶性程度的判定、预后估计及治疗上有一定的临床应用价值。