基于谱效相关法探究酒炙丹参增强抗凝血活性的物质基础

目的通过谱效相关法探究酒炙丹参增强抗凝血活性的物质基础。方法采用HPLC法建立丹参生品与酒炙品指纹图谱,并进行相似度评价。测定不同批丹参生品与酒炙品的体外抗凝血效价,包括活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(FIB)含量。以丹参生品与酒炙品的HPLC图谱的峰面积及其抗凝血效价为基础,采用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)法对HPLC图谱和抗凝血效价进行相关性分析。结果10批生丹参饮片HPLC指纹图谱相似度为0.991~0.999,10批酒丹参饮片与对照图谱的相似度为0.982~0.999。丹参酒炙后抗凝血活性显著增强。PLS-DA法分析得出,指纹图谱中7(丹酚酸B)、6(紫草酸)、5(迷迭香酸)、15(VIP均大于1)号峰是导致丹参酒炙后抗凝血活性增强的主要成分。结论该方法能较精准地找到丹参酒炙增强抗凝血活性的主要贡献成分。     

黄柏及其不同炮制品的指纹图谱研究

目的:建立不同市售区黄柏生品及其蜜炙品、盐炙品、酒炙品的HPLC指纹图谱研究,比较不同市售区黄柏及其炮制品的指纹特征的差异。方法:采用HPLC法得出10批黄柏生品及其蜜炙品、盐炙品、酒炙品的指纹图谱并进行比较,流动相为乙腈(A)-水(含0.3%磷酸和0.3%二乙胺,B),梯度洗脱(0~10min,10%~14%A;10~20min,14%~25%A;20~45min,25%A),流速0.8mL/min,检测波长284nm,柱温40℃,分析时间45min。结果:蜜炙品、盐炙品、酒炙品与黄柏生品的指纹图谱基本一致,但各成分间的相对含量有所不同,对其中的绿原酸、黄柏碱、木兰花碱、盐酸药根碱、小檗红碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱等成分进行了归属。10批黄柏生品及其蜜黄柏、盐黄柏、酒黄柏的共有模式色谱峰相似度都0.9。结论:建立的指纹图谱有良好的精密度、稳定性和重复性,对黄柏生品及其不同炮制品的质量评价具有重要意义。     

远志蜜炙前后HPLC指纹图谱对比研究

目的研究远志蜜炙前后HPLC指纹图谱的差异。方法采用梯度洗脱法,分别对生远志及相应的10批蜜远志进行HPLC测定,流动相为乙腈-0.05%磷酸线性梯度洗脱,检测波长为210nm;记录时间为100min。采用中南大学出版的指纹图谱相似度比较软件进行比较。结果10批蜜远志的指纹图谱相似度均大于0.95;生远志与蜜远志建立的共有模式的相似度均小于0.9。结论蜜炙对远志化学成分种类影响不大,但改变了成分间的比例关系;蜜炙方法具有较好的重现性和稳定性。     

黄柏及其不同炮制品的HPLC指纹图谱分析

目的:建立黄柏生品、酒炙品和盐炙品的HPLC指纹图谱,比较不同产地黄柏及其炮制品指纹特征的差异。方法:采用HPLC比较10批黄柏生品、酒炙品和盐炙品的指纹图谱,流动相乙腈(A)-水(含0.3%磷酸和0.3%二乙胺,B)梯度洗脱(0~10 min,10%~14%A;10~20 min,14%~25%A;20~45 min,25%A;45~50 min,25%~65%A;50~55 min,65%~70%A;55~60 min,70%~75%A;60~70 min,75%~100%A),流速0.8 m L·min-1,柱温40℃,检测波长284 nm,分析时间70 min。结果:酒黄柏、盐黄柏与生黄柏的指纹图谱基本一致,但各成分间的相对含量存在差异,对其中的绿原酸、黄柏碱、木兰花碱、药根碱、小檗红碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、黄柏内酯进行了归属。10批黄柏生品、酒炙品和盐炙品共有模式色谱峰相似度均0.9。结论:建立的指纹图谱具有很好的精密度、重复性和稳定性,可作为黄柏及其炮制品质量评价的依据。     

炮制-配伍对理中丸方水煎液指纹图谱影响研究

目的:比较炮制-配伍前后理中丸方水煎液指纹图谱的差异。方法:用生制饮片和炮制品饮片分别制备各10批理中丸,以水煎煮法制备其水煎液。采用超高效液相色谱法(UPLC),对炮制-配伍前后理中丸方水煎液指纹图谱差异进行研究。色谱条件:色谱柱Acquity BEH C18(100 mm×2. 1 mm,1. 7μm);流动相:乙腈-0. 1%磷酸水;梯度洗脱;流速:0. 2 m L·min-1;柱温:30℃;检测波长:237 nm。利用指纹图谱相似度软件分别对10批生品和10批炮制品指纹图谱进行比较,又利用SIMCA 13. 0. 3软件对生品、炮制品各10批理中丸方水煎液进行聚类分析和主成分分析。结果:分别建立了10批生品和10批炮制品理中丸方水煎液指纹图谱,并计算其相似度,10批生品的相似度大于0. 98,10批炮制品的相似度大于0. 99。指纹图谱各色谱峰的保留时间基本一致,差异较小,但炮制前后相对峰面积变化较大。聚类和主成分可以清楚地将生品与炮制品聚为两大类。结论:实验所建立的指纹图谱方法稳定、准确,可用于比较生品与炮制品理中丸方的质量差异,为其质量控制提供依据。     

炮制龙胆的HPLC指纹图谱及其共有模式的建立

目的:建立不同产地炮制龙胆药材的HPLC指纹图谱,为整体控制和评价龙胆药材的质量提供依据.方法:采用HPLC测定10批不同产地的炮制龙胆药材,使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"进行相似度评价,制定指纹图谱的共有模式.色谱条件:Agilent Eclipse XDB-C18柱,甲醇-水为流动相梯度洗脱,检测波长:254 nm,体积流量:1.0 mL/min,柱温:20℃.结果:建立了炮制龙胆药材HPLC指纹图谱的共有模式,并对不同产地的炮制药材图谱进行了相似度评价.结论:经统计学分析,本实验稳定性,重现性好,简便可行,适用于龙胆药材的标准化种植及质量控制.     

丹皮炭HPLC指纹图谱研究

目的:建立丹皮炭的HPLC指纹图谱分析方法,为整体控制和评价丹皮炭的质量提供依据.方法:采用HederaODS-3柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相甲醇-乙腈(1:1)-0.5‰三氟乙酸水,梯度洗脱,检测波长258.nm.以丹皮酚为参照物,对10批丹皮炭进行指纹图谱的分析.结果:建立了丹皮炭饮片的HPLC指纹图谱共有模式,标定了11个共有峰,10批炭品的相似度在0.830～0.991.结论:该指纹图谱方法简便、准确、重复性好,可专属性地研究丹皮炭的指纹图谱,为有效地控制该饮片的内在质量提供了科学依据.     

决明子炒制前后指纹图谱比较研究

目的:研究建立决明子不同饮片的HPLC指纹图谱鉴别方法,比较生、炒决明子化学成分的差别.方法:采用RP-HPLC,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,研究生、炒决明子饮片指纹图谱的区别,作相似度分析,并对其主要色谱峰进行指认.结果:生、炒决明子饮片的HPLC指纹图谱有明显差异,并指认了12个主要色谱峰.结论:采用HPLC图谱比较法可作为生、炒决明子饮片的一项质控鉴别指标.     

女贞子酒蒸前后分别配方的二至丸HPLC指纹图谱差异分析

目的 比较女贞子酒蒸前后分别配方的二至丸HPLC指纹图谱差异，研究女贞子酒蒸对二至丸化学成分的影响。方法 采用HPLC法测定不同批次的女贞子生品与酒蒸品分别配方的二至丸指纹图谱，并进行相似度评价；采用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法研究女贞子生品与酒蒸品分别配方的二至丸HPLC指纹图谱差异，筛选出其差异成分。结果 女贞子酒蒸前后分别配方的二至丸HPLC指纹图谱具有35个共有峰，10批生女贞子配方的二至丸HPLC指纹图谱相似度为0.936～0.994,10批酒蒸女贞子配方的二至丸HPLC指纹图谱相似度为0.937～0.995;女贞子酒蒸前后配方的二至丸HPLC指纹图谱具有显著差异，共筛选出羟基酪醇、特女贞苷、女贞苷G13、女贞酸、红景天苷、毛蕊花糖苷、酪醇、油女贞苷、松果菊苷等14种差异成分。结论 女贞子酒蒸对二至丸的化学成分影响显著，建立的指纹图谱结合PCA、OPLS-DA可有效区分女贞子生品与酒蒸品配方的二至丸，辨识出的差异成分为二至丸质量标志物的选择提供了科学依据。     

大黄5种饮片指纹图谱色谱峰的归属与比较

目的:对大黄不同饮片指纹图谱中色谱峰进行归属,比较各饮片化学成分的变化规律.方法:采用HPLC,甲醇-1%冰醋酸梯度洗脱,比较各饮片以及饮片与药材在280,430 nm下,指纹图谱的变化情况.结果:大黄生、酒、醋片HPLC指纹图谱较相似,均可归属24个色谱峰,熟大黄饮片归属19个色谱峰,大黄炭饮片可归属22个色谱峰.430 nm下,除熟大黄饮片归属7个色谱峰外,其他饮片均可归属出8个色谱峰.结论:大黄生、酒、醋片指纹图谱较相似.熟大黄及大黄炭饮片与生片相比,化学成分的组成及含量变化显著.