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1.
针对C-mycmRNA第二外显子起始妈AUG及下游4个密码子设计合成了反义、正义及锚配寡核苷酸(ODNs)、并对合成的ODNs进行 硫代磷酸化修饰。在人肝癌细胞SMMC-7721培养体系中,对反义寡核苷酸(ASODN)抑制细胞增殖的作用进行了研究。发现(1)与正义和错配ODNs相比较,反义C-mycODN有明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长的作用;(2)该生长抑制作用随ASODN剂量增加而增 相似文献
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目的:探讨反义硫代寡核苷酸对HPV16阳性的人宫颈癌细胞增殖的影响,方法:人工合三段18-mer的反义硫代寡核苷酸S-ODN1-3,其中S-ODN1(AE6),S-ODN2(AE7)分别与HPV16E6E7基因的起始码及其下游序列互补S-ODN,为一随机序列,分别用三种反义寡核苷酸处理整合有HPV16基因组的人宫颈癌细胞SiHa。通过四唑盐比色法,^3H-TdR参入试验观察不同浓度反义寡核苷酸对S 相似文献
3.
c-myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管周细胞增殖的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
应用细胞培养、核酸斑点杂交、~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察c-myc反义寡核苷酸(ODNs)对低氧内皮细胞条件培养液(HECCM)诱导的大鼠肺血管周细胞c-myc mRNA表达、增殖细胞核抗原(PCNA)表达及~3H-TdR掺入量的影响。结果表明,HECCM显著促进周细胞 c-myc mRNA表达、PCNA表达(P<0.01)及~3H-TdR掺入量增加(P<0.01),反义ODNs显著阻抑 HECCM诱导的周细胞c-myc mRNA表达、PCNA表达(P<0.01)及~3H-TdR掺入量增加(P<0.05),而同义ODNs无上述作用(P>0.05)。结果提示,HECCM可通过上调c-myc基因表达促进肺血管周细胞增殖,反义ODNs通过下凋c-myc基因表达,抑制HECCM诱导的肺血管周细胞增殖。 相似文献
4.
氧化修饰LDL及VLDL对兔主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA表达的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)是一种强的单核细胞趋化因子,在体外可由多种细胞分泌,包括血管平滑肌细胞(SMC)。本研究采用斑点杂交方法检测了氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)及氧化修饰极低密度脂蛋白(OX-VLDL)对培养的兔主动脉SMCMCP-1mRNA表达的作用。结果表明,培养的SMC可表达MCP-1mRNA,而且SMC暴露于OX-LDL、VLDL及OX-VLDL后,其MCP-1mRNA表达水平明显增高,分别增高约11倍、6倍和20倍。因此我们认为OX-LDL、VLDL及OX-VLDL可以刺激培养的兔主动脉SMCMCP-1mRNA的表达。 相似文献
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反义寡脱氧核苷酸抑制丁型肝炎病毒基因链核酶活性的作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨反义寡脱氧核苷酸(asODN)抑制丁型肝炎病毒(HDV)核酶活性以阻断HDV复制的作用,方法在构建含HDV基因链和抗基因链核酶cDNA片段的重组质粒pHDVrz277的基础上,体外转录出112聚核苷酸(nt)的基因链核酶,观察5条asODN抑制核酶活性的作用,并对作用最好的一条进行序列优化。结果 互补于683-703nt的自裂位点和茎样结构(stem)1区的asODN可完全抑制该112nt核酶的活性,互补于756-770nt(SSrB区)和721-735nt(SSrA区)的asODN亦有较高活性,抑制率分别为69.36%和48.64%,而对应于736-750nt(stemw区)和704-720nt<SSrC区)者几乎无抑制作用。对互补于683-703nt的asODN进行序列优化发现,封闭自裂位点在内的13nt(683-695nt)的asODN仍保留很高抑制作用,抑制率大于90%。结论stexnl和SSrB在基因链核酶中起重要作用,asODN可有效抑制HDV基因链核酶活性。 相似文献
6.
应用细胞培养、核酸斑点杂交、H^3-胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察c-myc反义寡核苷酸(ODNs)对低氧内皮细胞条件培养液(HECCM)诱导的大鼠肺血管周细胞c-myc mRNA表达、增殖细胞核抗原(PCNA)表达及^3H-TdR掺入量的影响。结果表明,HECCM显著促进周细胞c-myc mRNA表达、PCNA表达(P〈0.01)及^3H-TdR掺入量增加( 相似文献
7.
目的:为研制抗丙型肝炎病毒(HCV)NS3抗原单克隆抗体,用于检测丙肝患者血清中的HCVNS3抗原。方法:用基因工程表达的HCV非结构区NS3蛋白与鼠血清白蛋白交联后,免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术获得能分泌单克隆抗体(McAb)的细胞株。结果:获得有实用价值的两株McAb。两株McAb与免疫抗原有较强的抗原-抗体反应,与HCVNS4、NS5及核心区C33肽、CP9、CP10抗原无反应性,在竞争ELISA中,对HCV-IgG阳性血清有较好的抑制作用。结论:用基因工程表达的HCV非结构区NS3蛋白,能够制备出有实用价值的单克隆抗体。 相似文献
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