氧化修饰的低密度和极低密度脂蛋白对巨噬细胞单核趋化蛋白表达的影响

探讨氧化修饰的低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）和氧化修饰的极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）是否能诱导巨噬细胞表达单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）ｍＲＮＡ和蛋白，以阐明二者在动脉粥样硬化发生中的作用。方法在巨噬细胞的培养基中分别加入２５μｇ／ｍｌ的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）、极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）、ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ，３７℃下温育２４小时，收集巨噬细胞的条件培养基，同时用异硫氰酸胍法提取巨噬细胞总ＲＮＡ。用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析的方法检测巨噬细胞ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ的表达，用夹心ＥＬＩＳＡ检测其条件培养基中ＭＣＰ－１蛋白的含量。用微孔滤膜法进行单核细胞的趋化试验。结果当巨噬细胞分别暴露于ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ２４小时后，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白的表达明显增加，同时单核细胞迁移距离的明显增加。而当巨噬细胞分别暴露于ＬＤＬ和ＶＬＤＬ２４小时，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白的表达只有轻微的增加，单核细胞迁移距离亦无明显的增加。结论巨噬细胞能表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白，ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ能诱导该细胞更强地表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白     

氧化修饰LDL及VLDL对兔主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA表达的作用

单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）是一种强的单核细胞趋化因子，在体外可由多种细胞分泌，包括血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）。本研究采用斑点杂交方法检测了氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）、极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）及氧化修饰极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）对培养的兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达的作用。结果表明，培养的ＳＭＣ可表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ，而且ＳＭＣ暴露于ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＯＸ－ＶＬＤＬ后，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达水平明显增高，分别增高约１１倍、６倍和２０倍。因此我们认为ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＯＸ－ＶＬＤＬ可以刺激培养的兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ｍＲＮＡ的表达。     

天然和氧化修饰型脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞形态的影响

在建立人主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）体外培养方法的基础上，观察了各种天然和氧化修饰型脂蛋白对培养人ＳＭＣ形态以及表型的影响。在氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ），氧化修饰高密度脂蛋白（Ｏｘ－ＨＤＬ）和氧化修饰极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）的作用下，ＳＭＣ形态发生以下变化：胞体变大，由梭形变为不规则多边形，突起细而长，而且“谷”、“峰”样生长方式也发生改变；ＬＤＬ和ｖＬＤＬ对ＳＭＣ的形态亦有影响，但不如氧化修饰脂蛋白明显；ＨＤＬ则无影响。电镜下观察，在ＯＸ－ＬＤＬ的诱导下，ＳＭＣ胞浆中的肌丝较对照组明显减少，而高氏器，内质网和线粒体则明显增多。上述结果说明，ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、ＯＸ－ＬＤＬ、ＯＸ－ＶＬＤＬ和ＯＸ－ＨＤＬ的致动脉粥样硬化作用可能与刺激ＳＭＣ表型由“收缩”型向“合成”型转化有关。     

氧化修饰低密度脂蛋白对巨噬细胞线粒体膜的损伤及云芝多糖…

采用ＡＣＡＳ５７０测定小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位及细胞内酯质过氧化物（ＬＰＯ），观察了氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）对巨噬细胞线粒体膜的损伤及云芝多糖（ＰＳＫ）的保护作用。结果发现ＯＸ－ＬＤＬ可使巨噬细胞线粒体膜电位消失，细胞内ＬＰＯ含量升高。而正常ＬＤＬ和乙酰化ＬＤＬ对线粒体膜电位的影响较小。非特异性免疫增强剂ＰＳＫ能降低巨噬细胞内ＬＰＯ含量，对ＯＸ－ＬＤＬ引起的巨噬细胞线粒体膜损伤有保     

氧化修饰低密度脂蛋白对巨噬细胞线粒体膜的损伤及云芝多糖的保护作用

采用ＡＣＡＳ５７０测定小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位及细胞内脂质过氧化物（ＬＰＯ），观察了氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＣ－ＬＤＬ）对巨噬细胞线粒体膜的损伤及云芝多糖（ＰＳＫ）的保护作用。结果发现ＯＸ－ＬＤＬ可使巨噬细胞线粒体膜电位消失，细胞内ＬＰＯ含量升高。而正常ＬＤＬ和乙酰化ＬＤＬ对线粒体膜电位的影响较小。非特异性免疫增强剂ＰＳＫ能降低巨噬细胞内ＬＰＯ含量，对ＯＸ－ＬＤＬ引起的巨噬细胞线粒体膜损伤有保护作用。     

大剂量VitE与氧化修饰低密度脂蛋白

大剂量ＶｉｔＥ与氧化修饰低密度脂蛋白上海市第六人民医院内科邵淮鲁，包玉倩，陈万春近来研究证明，氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸＬＤＬ）在动脉粥样硬化的发生发展过程中较低密度脂蛋白（ＬＤＬ）更重要。某些冠心病患者的ＬＤＬ可以正常，但ＯＸＬＤＬ的含量明显高于正...     

天然及氧化型低密度和检低密度脂蛋白诱导培养的内皮细胞 …

为探讨天然及氧化修饰脂蛋白对培养的内皮细胞ＭＩＰ－１α及ＶＤＭ－１ｍＲＮＡ表达的作用，取正常人新鲜血液，用超速梯度离心法分离出ＬＤＬ和ＶＬＤＬ后，加Ｃｕ＾２＋使之氧化，成为ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ。培养人脐静脉内皮细胞（ＥＣ），待其汇合后分别加放ＬＤＬ、ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、ＯＸ－ＶＬＤＬ，使其终浓度为２５ｕｇ／ｍｌ，对照组不加脂蛋白。培养２４ｈ后，收集ＥＣ，用异硫氰酸胍法提取其总ＲＮＡ，用     

氧化修饰低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡

通过观察凋亡细胞的核形态及特征ＤＮＡ梯形图谱（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ），研究了氧化修饰和低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）诱导的巨噬细胞凋亡。结果显示：Ｏｘ－ＬＤＬ可引起明显的巨噬细胞凋亡，表现在Ｏｘ－ＬＤＬ处理的细胞核发生固缩，染色体ＤＮＡ断裂的的凝胶电泳图谱呈典型的梯形，正常和乙酰化的ＬＤＬ（Ｎ－ＬＤＬ和ＡＣ－ＬＤＬ）未引起明显的巨噬细胞凋亡。Ｏｘ－ＬＤＬ引起的巨噬细胞雕凋亡具有浓度和时间效应且与其修饰     

内皮氧化低密度脂蛋白受体介导了氧化低密度脂蛋白对内皮 …

探讨氧化低密度脂蛋白（ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｌｏｗ ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ，ｏｘ－ＬＤＬ）血管内皮受体（ｌｅｃｔｉｎ－ｌｉｋｅ ｏｘ－ＬＤＬ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＬＯＸ１）在ｏｘ－ＬＤＬ致内皮细胞损伤中的作用及其机制。方法：放射配基结合及竞争抑制实验检测人脐静脉内皮细胞（ｈｕｍａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｖｅｉｎ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａ ｃｅｌｌｓ，ＨＵＶＥＣｓ）存在ＬＯＸ１的高亲和位点     

抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体的制备和生物学性质

用经Ｃｕ￣（２＋）氧化修饰４ｈ和２４ｈ的小鼠低密度脂蛋白（ｍｕｒｉｎｅＯ－ＬＤＬ）混合物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于融合前３天用经Ｃｕ￣（２＋）氧化修饰４ｈ和２４ｈ人低密度脂蛋白（ｈｕｍａｎＯ－ＬＤＬ）的混合物加强免疫，取免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤ＳＰ－（２／０）细胞融合，获得５株抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体，命名为ＨＯＬ－１、ＨＯＬ－２、ＨＯＬ－３、ＨＯＬ－４、ＨＯＬ－５。这些单抗均有较高的抗体效价，抗体类型为ＩｇＧ－（２ａ），单克隆抗体相加实验表明，ＨＯＬ－１、ＨＯＬ－３、ＨＯＬ－４识别Ｏ－ＬＤＬ的同一抗原位点，ＨＯＬ－２识别另一个，ＨＯＬ－５识别第３个。竞争性ＢＡ－ＥＬＩＳＡ实验显示：ＨＯＬ－１能够识别丙二醛修饰的ＬＤＬ（ＭＤＡ－ＬＤＬ）、乙酰化修饰的ＬＤＬ（Ａｃｅｔｙｌ－ＬＤＬ）和各种修饰度的Ｏ－ＬＤＬ，但与未修饰ＬＤＬ（ｎ－ＬＤＬ）无交叉反应。     

维生素E在冠心病患者中抗氧化作用的临床研究

近年来研究认为,氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）有致动脉粥样硬化作用。ＶｉｔＥ具有抗氧化作用。本研究以不同剂量ＶｉｔＥ对冠心病（ＣＨＤ）患者的氧化及抗氧化指标的影响进行观察,现将结果报告如下。１材料与方法１．１对象１．１．１正常对照组：选择我院保...     

氧化修饰低密度脂蛋白的蛋白组份可引起巨噬细胞线粒体膜的损伤

采用ＡＣＡＳ５７０测定小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位，观察了氧化修饰低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）对巨噬细胞线粒体膜的损伤及其不同组份（ｍｏｉｅｔｙ）在致损伤中的作用。结果显示Ｏｘ－ＬＤＬ可使巨噬细胞线位体膜产生损伤，用ＧＳＨＰｘ模拟物ｅｂｓｅｌｅｎ清除Ｏｘ－ＬＤＬ上的脂氢过氧化物（ＬＯＯＨ）可使损伤减轻２０％。单独的脂质组份虽然含有大量的ＬＯＯＨ，但对巨噬细胞线粒体膜电位无显著影响，而单独的蛋白组份则可引起线粒体膜电位下降，其降低程度与Ｏｘ－ＬＤＬ清除ＬＯＯＨ后的降低程度相当，说明Ｏｘ－ＬＤＬ清除ＬＯＯＨ后对线粒体膜的损伤可能是由修饰的载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）产生的。     

血液透析患者氧化修饰低密度脂蛋白水平检测与分析

近年来研究发现,氧化修饰低密度脂蛋白（ＯｘｉｄｉｚｅｄＬｏｗＤｅｎｓｉｔｙＬｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｏｘ－ＬＤＬ）是ＬＤＬ致动脉粥样硬化（ＡＳ）的重要机制［１］,故检测ＯＸ－ＬＤＬ将有助于对动脉粥样硬化性心血管疾病（ＡＳＣＶＤ）的预测［２］。慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）血液透析（ＨＤ）患者主要死于心脑血管疾病［３］。为探讨ＣＲＦ血透患者体内Ｏｘ－ＬＤＬ及其它脂蛋白成分的水平,我们检测了ＣＲＦ２１例ＨＤ患者血浆Ｏｘ－ＬＤＬ及血清总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、载脂蛋白Ａ１（ＡｐｏＡ１）、载脂蛋白Ｂ…     

氧化修饰低密度脂蛋白的蛋白组份可引起巨噬细胞线粒体膜…

采用ＡＣＡＳ５７０测定小鼠腹腔巨噬细胞线粒体膜电位，观察了氧化修饰低密度脂蛋白对巨噬细胞线粒体膜的损伤及春不同组份（ｍｉｏｅｔｙ）在致损伤中的作用，结果显示Ｏｓ－ＬＤＬ可使巨噬细胞线粒体膜产生抽伤，用ＧＳＨＰｘ模拟物ｅｂｓｅｌｅｎ清除Ｏｘ－ＬＤＬ上的脂氢过氧化（ＬＯＯＨ）可使损伤减轻２０％，单独的脂质份虽然含有大量的ＬＯＯＨ，但在噬细胞线粒体膜电位无显著影响，而单独的蛋白组份则可引起线粒体膜一下降     

人血浆中氧化修饰低密度脂蛋白在冠心病不稳定心绞痛 …

目的 探讨冠心病不稳定型心绞痛患者血浆中氧化修饰低蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）水平及其与心绞痛的关系。方法 采用双抗体心心法检测４８例冠心病不稳定型心绞痛患者血浆中ＯＸ－ＬＤＬ水平及血脂，丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。结果 不同类型不稳定型心绞痛患者血浆中ＯＸ－ＬＤＬ、ＭＤＡ水平及ＳＯＤ活必鸨显著差异。血清甘油三脂（ＴＧ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ）及血浆中ＭＤＡ均显著高于正常对照组，且与Ｏ     

血浆氧化修饰低密度脂蛋白与心肌梗塞的关系

对２３例心肌梗塞患者及２５例正常对照组血浆氧化修饰低密度脂蛋白（ｏｘｉｄａｔｉｖｅｌｙＭｏｄｉｆｉｅｄＬｏｗＤｅｎｓｉｔｙＬｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｏｘ－ＬＤＬ）水平进行了测定。结果显示心肌梗塞患者血浆ＯＸ－ＬＤＬ高于正常对照组，认为ＯＸ－ＬＤＬ与心肌梗塞发生有关，故对心肌梗塞的诊断提供一定的参考价值。     

高密度脂蛋白的氧化修饰的特征及对低密度脂蛋白氧化的影响

研究高密度脂蛋白（ＨＤＬ）氧化修饰后对其结构及对低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化的影响。在体外用Ｃｕ＾２＋氧化人血浆ＨＤＬ，观察其蛋白和脂质部分的变化，并测定在ＨＤＬ条件下ＬＤＬ氧化的何苦充代巴比妥酸值（ＴＢＡＲＳ）。结果：氧化ＨＤＬ（ＯＸ－ＨＤＬＯ）的ＴＢＡＲＳ值升高，色氨酸残苦（Ｔｒｐ）的特征荧光吸收强度降低且λｍａｘ（发射）从３３５ｎｍ升至３４１ｎｍ，紫外吸收增高，琼脂糖凝胶是泳迁移增快，ＬＤＬ氧     

抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体的制备和生物学性质

用经Ｃｕ＾２＋氧化装饰４ｈ和２４ｈ的小鼠低密度脂蛋白（ｍｕｒｉｎｅＯ－ＬＤＬ）混合物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于融合前３天用经Ｃｕ＾２＋氧化修饰４ｈ和２４ｈ人低密度脂蛋白（ｈｕｍａｎ Ｏ－ＬＤＬ）的混合物加强免疫，取免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤ＳＰ２／０细胞融合，获得５株抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体，命名为ＨＯＬ１、ＨＯＬ２、ＨＯＬ３、ＨＯＬ４、ＨＯＬ５。这些单抗均有较高的抗体效价，抗体类型为Ｉｇ     

氧化修饰低密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞周期及增殖细胞核抗原的影响

应用流式细胞仪对氧化修饰低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）刺激动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖、细胞周期及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、Ｐ５３、Ｐ２７及ｃ－ｅｒｂＢ蛋白表达的影响进行了观察。结果发现：Ｏｘ－ＬＤＬ和天然低密度脂蛋白（Ｎ－ＬＤＬ）刺激培养人动脉ＳＭＣ细胞增殖时其Ｓ期细胞百分率增加，且Ｏｘ－ＬＤＬ的作用比Ｎ－ＬＤＬ强，表明Ｏｘ－ＬＤＬ和Ｎ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ细胞增殖时与Ｓ期细胞的增加有关；Ｏｘ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ增殖的同时ＰＣＮＡ蛋白阳性率增加，而与Ｐ５３、Ｐ２７和ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白的表达无关。提示ＰＣＮＡ可能参与了Ｏｘ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ的细胞增殖作用；特异性蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂ＧＦ１０９２０３Ｘ能降低Ｏｘ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ增殖过程中ＰＣＮＡ的阳性率，表明该细胞增殖过程中ＰＣＮＡ表达的抑制可能与ＰＫＣ信号传递通路有关。     

低密度脂蛋白与椎基底动脉系短暂脑缺血发作

目的：了解椎基底动脉系短暂性脑缺血发作（ＶＢＡ＿ＴＩＡ）患者血中氧化低密度脂蛋白级常见因素影响。方法：用ＥＬＩＳＡ法测定３２例ＶＢＡＴＩＡ患者的血浆ＯＸＬＤＬ浓度。结果：患者ＤＸＬＤＬ浓度超过正常上限值，ＯＸＬＤＬ浓度与年龄呈等级负相关，而与常用脂代谢指标关系不大。结论：ＯＸＬＤＬ可能是ＶＢＡ＿ＴＩＡＳ发病的危险因素，而脑动脉粥样硬化在ＶＢＡ－ＴＩＡ的发病中起重要作用。