用聚合酶链反应检测宫颈癌组织中人巨细胞病毒DNA相关序列

为建立检测人巨细胞病毒感染的ＰＣＲ方法并探讨ＨＣＭＶ与宫颈癌的关系，从石蜡包埋和活检宫颈癌组织中提取ＤＮＡ，用聚合酶链反应体外扩增ＨＣＭＶＥｃｏＲＩＤ片段上一段长１５２ｂｐ的核酸序列，再用地高辛末端转移标记法标记和扩增片段互补的ＨＣＭＶ寡核苷酸探讨，用该探针证实扩增片段的特异性。     

聚合酶链反应检测新生儿巨细胞病毒

聚合酶链反应检测新生儿巨细胞病毒肇庆市第一医院（５２６０２０）蔡定邦，郭亮，李誉成，张传顺，陈享，陈伟红巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染后引起巨细胞包涵体病（ＣＩＤ），致全身多个器官损害并出现临床症状，使受损器官组织内出现巨细胞包涵体改变，多见于小婴儿。人巨...     

聚合酶链反应检测患儿尿标本中的巨细胞病毒DNA

本文建立了聚合酶链反应(PCR)检测人巨细胞病毒(HCMV)方法,探讨了该方法的某些实验条件。用PCR检测24例临床患儿尿标本。证明PCR方法特异、敏感、简便而快速。同科不同属病毒如HSV、EBV等以及人源正常细胞均无假阳性结果:最小检出量可达0.1fg DNA,相当于6个基因拷贝;用水浴箱手控时间即可进行PCR循环,30次循环仅需97min30s;PCR和DNA杂交检测尿标本中HCMV阳性例数分别为20和14例。该结果证明HCMV感染儿童的广泛性和严重性,初步表明儿童肾病综合症与HCMV有关。     

用聚合酶链反应检测宫颈癌组织中人巨细胞病毒DNA相关序列

为建立检测人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染的ＰＣＲ方法并探讨ＨＣＭＶ与宫颈癌的关系，从石蜡包埋和活检宫颈癌组织中提取ＤＮＡ，用聚合酶链反应体外扩增ＨＣＭＶＥｃｏＲＩＤ片段上一段长１５２ｂｐ的核酸序列，再用地高辛末端转移酶标记法标记和扩增片段互补的ＨＣＭＶ寡核苷酸探针，用该探针证实扩增片段的特异性。检测宫颈癌标本４３例，阳性率为２５．６％（１１／４３），正常宫颈组织８例，阳性率为０。宫颈癌标本阳性率高于正常宫颈标本，提示ＨＣＭＶ与宫颈癌的发生有关。     

多重半巢式聚合酶链反应检测巨细胞病毒DNA多聚酶基因

目的：探讨多重半巢式聚合酶链反应（msnPCR)在研究巨细胞病毒（CMV）DNA多聚酶基因（UL-54）中的应用价值。方法：从8例心肺移植患者血标本中提取DNA,以CMV-UL54为模板,自行设计6条特异性引物,建立msnPCR扩增系统。扩增产物在DNA测序仪上自动测序。结果：msnPCR能扩增出427bp和1052bp两条目的片段,扩增产物测序表面存在导致氨基酸改变的碱基有义突变。结论：msnPCR扩增结合测序,可检测CMV-UL54的7个功能区目片段中的碱基突变,msnPCR比普通PCR更加省时和经济。     

聚合酶链反应在临床巨细胞病毒感染检测中的应用和研究

本文用聚合酶链反应(PCR)技术检测76份患儿尿标本中巨细胞病毒(CMV)DNA,其中32份尿标本做了病毒分离,另44例同时做血清CMV IgM抗体检测。结果PCR和病毒分离阳性符合率为100％,与CMV IgM抗体检出率无显著差异(P>0.05)。证明PCR方法具有特异性高、敏感性好、操作简便、检测周期短等优点,适用于临床进行CMV感染的快速诊断。     

用聚合酶链反应技术检测流产和死胎组织的巨细胞病毒与弓…

作者通过人巨细胞病毒分离、套式聚合酶链反应限制酶切分析、弓形虫分离及一次性ＰＣＲ，对不明原因的流产，死胎组织进行ＨＣＭＶ与弓形虫检测。结果发现，２８份流产，死胎组织中，１例死胎肺组织ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，但病毒分离性；１例胎儿心、肺、脑、肝、肾、眼组织弓形虫ＤＮＡ阳性，其脑、肺眼、肝组织经动物接种后，在小白鼠腹水中找到弓形虫洋养体，但心、肾结果阴性。结果提示：临床上有些不明原因的流产，死胎可能是由于     

聚合酶链反应检测人巨细胞病毒感染的研究近况

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaclion,PCR)已广泛用于人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染的诊断、预测HCMV病的发生、HCMV的免疫学研究,监测抗病毒治疗     

聚合酶链反应和原位杂交检测成人肾炎肾组织HBV DNA

目的 探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染与成人肾小球肾炎（肾炎）之间的联系,及研究ＨＢＶ对肾脏的致病作用。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和原位杂交（ＩＳＨ）技术检测３９例血清ＨＢＶ标志物阳性的成人肾有活检组织ＨＢＶ ＤＮＡ的存在状态。结果 用ＰＣＲ法测定肾活检组织抽提物ＨＢＶ ＤＮＡ１７／３９例阳性（４３．６％）,其中５例ＰＣＲ阳性者再且地高辛素标记的ＨＢＶ ＤＮＡ探针原位杂交,测定肾活检石腊包埋切     

用聚合酶链反应技术检测泌尿系疾病患者尿中疱疹病毒DNA

为探讨泌尿系疾病与疱疹病毒感染的关系，我们用ＰＣＲ及限制性内切酶酶切技术检测了尿中疱疹病毒的ＤＮＡ。９９例泌尿系疾病患者中，５８例检出ＣＭＶ；对照组５２例中，８例检出ＣＭＶ，两组检出率间有显著性差异，但不同病种ＣＭＶ检出率之间差异无显著性。患者组和对照组尿中均未检出ＥＢ病毒（ＥＢＶ），Ⅰ型单纯疱疹病毒（ＨＳＶⅠ）和Ⅱ型单纯疱疹病毒（ＨＳＶⅡ）。３５例患者同时作了血清抗“Ｏ”检测，１６例急性肾炎，８例慢性肾炎和９例肾病综合征中，抗“Ｏ”阳性率分别为５００％、１２５０％和１１１１％，相应的ＣＭＶ阳性率则分别为６２５０％、６２５０％和５５５６％。     

聚合酶链反应监测人巨细胞病毒感染

应用ＰＣＲ技术对疑为先天性ＨＣＭＶ感染的患儿及其母亲血、尿标本分别进行了ＨＣＭＶ－ＤＮＡ检测。开展了稳定的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ检测方法。患儿及其母亲尿标本经基因扩增后均测到１５１ｂｐＨＣＭＶ－ＤＮＡ片段，考虑患儿为先天性ＨＣＭＶ感染。     

应用聚合酶链反应快速诊断巨细胞病毒感染

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测学龄前儿童尿标本中的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ），并和常规细胞培养（ＣＣＣ）、早期抗原检测（ＤＥＡ）两法进行了比较。结果表明，１０５份尿标本中有４１份ＣＣＣ出现ＨＣＭＶ特征性细胞病变（ＣＰＥ），其中３８份标本ＰＣＲ检测为阳性，敏感性为９２．７％，其余６４份ＣＣＣ阴性，有６份ＰＣＲ检测阳性，特异性为９０．６％，与ＤＥＡ相比，ＰＣＲ检测的特异性和敏感性分别为９３．６％，９５．     

用双重PCR检测人巨细胞病毒DNA

选取HCMV IEV基因区为扩增的靶序列,合成两对引物,其中一对巢居于另一对之间。扩增片段分别为721 bP和167bp。单次PCR扩增灵敏度达0.5～1.0fg,双重扩增可提高灵敏度10～100倍。用HSV-1,HSV-2,CoxB组1～6型病毒培养物作模板,无非特异扩增。14例疑为CMV感染患儿尿标本经PCR测定,12例检出HCMV DNA,其中11例病毒分离阳性。PCR快速,可靠,比病毒分离简便易行,对临床HCMV感染的诊断有重要意义。     

聚合酶链反应检测EB病毒DNA在鼻咽癌诊断中的应用

流行病学、血清学和分子生物学的资源证实,爱泼斯坦－巴尔病毒（ＥＢＶ）感染与鼻咽癌（ＮＰＣ）有密切关系。血清ＥＢＶ－ＶＣＡ－ＩｇＡ,ＥＢＶ－ＥＡ－ＩｇＡ测定和聚合酶链（ＰＣＲ）检测组织中ＥＢＶ－ＤＮＡ已用于ＮＰＣ的临床诊断。本文评价上述方法在ＮＰＣ诊断中的实用价值。８５例病人双盲法测定血清ＥＢＶ－ＶＣＡ－ＩｇＡ（Ｉ）,ＥＢＶ－ＥＡ－ＩｇＡ（Ⅱ）;鼻咽活检组织用ＰＣＲ法检测ＥＢＶ－ＤＮＡ－（Ⅲ）和组织     

聚合酶链反应检测膀胱癌组织中人乳头状瘤病毒DNA

目的：为研究简便，快速，特异，灵敏的检测膀胱癌组织中人乳头状瘤病毒，借以探讨膀胱癌的病因。方法：采用聚合酶链反应技术行人乳头状瘤病毒ＤＮＡ检测。结果：正常膀胱粘膜组织中未检出ＨＰＶ：２０例新鲜膀胱移行细胞癌组织中有８例阳性表达，总阳性率为４０％，按ＷＨＯ分级标准，膀胱移行上皮细胞癌Ｉ级检出率５０％，Ⅱ级４３％，Ⅲ级２０％。结论：正常膀胱粘膜到病变组织ＨＰＶ ＤＮＡ从无到有，说明ＨＰＶ感染与癌的发生     

用聚合酶链反应法检测172例孕妇尿中巨细胞病毒－DNA

本文对１７２例孕妇的尿用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＰＣＲ）进行巨细胞病毒－ＤＮＡ检测（ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓＨＣＭＶ－ＤＮＡ），结果显示非正常孕妇（以前有自然流产、死胎、畸胎、不育症等）１２１人尿中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者４３例，阳性率为３５．５％，而５１例正常孕妇中阳性者仅２例，阳性率为３．９％，表明活动性人巨细胞病毒感染是非正常孕妇的重要原因之一。２０例孕妇尿中ＮＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者用干扰素、转移因子等治疗后，１４例转阴。用ＰＣＲ法检测活动性人巨细胞病毒感染是一个比较准确、敏感、快速的方法，并是保证优生优育的重要手段之一。     

用聚合酶链反应法检测172例孕妇尿中巨细胞病毒－DNA

本文对１７２例孕妇的尿用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＰＣＲ）进行巨细胞病毒－ＤＮＡ检测（ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓＨＣＭＶ－ＤＮＡ），结果显示非正常孕妇（以前有自然流产、死胎、畸胎、不育症等）１２１人尿中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者４３例，阳性率为３５．５％，而５１例正常孕妇中阳性者仅２例，阳性率为３．９％，表明活动性人巨细胞病毒感染是非正常孕妇的重要原因之一。２０例孕妇尿中ＮＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者用干扰素、转移因子等治疗后，１４例转阴。用ＰＣＲ法检测活动性人巨细胞病毒感染是一个比较准确、敏感、快速的方法，并是保证优生优育的重要手段之一。