急性白血病患者mdr—1基因与P—gp糖蛋白表达

目的：评价ｍｄｒ－１基因与Ｐ－ｇｐ糖蛋白在急性血病（ＡＬ）细胞中表达的相关性及其临床意义。方法：分别应用ＲＴ－ＰＣＲ及流式细胞术（ＦＣＭ）３２例ＡＬ患者白血病细胞中的ｍｄｒ－１ ｍＲＮＡ及Ｐ－ｇｐ糖蛋白表达率及表达水平，同时检测１４例正常人作为对照。结果：临床非耐药组ｍｄｒ－１阳性率为２２．２％，Ｐ－ｇｐ阳性率为３３．３％，而临床耐药组两者分别为７８．６％，８５．７％，均与临床治疗结果有极显著的一     

乳腺癌多药抗药相关药物的体外敏感性与mdr—1基因表达

探讨乳腺癌多药抗药（ＭＤＲ）相关药物的体外敏感性与ｍｄｒ－１基因表达的关系，为乳腺癌的合理化疗提供理论依据。方法采用体外ＭＴＴ药敏试验及多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，检测了５６例乳腺癌病人的原代乳腺癌细胞对ＭＤＲ相关药物的敏感性，及乳腺癌组织的ｍｄｒ－１基因表达水平。结果体外抗药乳腺癌的ｍｄｒ－１基因阳性表达率均明显升高；Ｉｍａｘ％与ｍｄｒ－１基因表达水平无关；而ＩＣ５０与ｍｄｒ－１基因性的相关性具有统计学意义。结论乳腺癌抗ＭＤＲ相关药物的主要原因是ｍｄｒ－１基因表达     

逆转录－聚合酶链反应测定多药耐药基因

目的建立一个用于测定多药耐药基因（ｍｄｒ１）表达水平、反映临床耐药情况的逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量技术。方法根据处于指数增长期的ＰＣＲ产物量可反映最初模板量多少的原理，以白血病为疾病模型，通过对最佳模板量及最佳循坏数的分析、参比对照的设定等，建立了３５Ｓ－ｄＡＴＰ（３５硫－脱氧三磷酸腺苷）掺入的ＲＴ－ＰＣＲ法，并以此法对１９例临床白血病标本ｍｄｒ１ｍＲ－ＮＡ（信使核糖核酸）表达水平进行了检测。结果１９例临床标本检测发现，６例化疗耐药或复发病例中，５例有高水平的ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达（ｍｄｒ１／β－ａｃｔｉｎ：０．６８～０．７６）（β－ａｃｔｉｎ：β肌动蛋白）。１１例化疗完全缓解或部分缓解病例中，除２例有低水平ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达（ｍｄｒ１／β－ａｃｔｉｎ：０．３３、０．４０）外，其余９例均为阴性。ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达水平和临床化疗结果明显相关（Ｐ＝０．０１７）。结论所建立的方法基本上可反映白血病患者化疗耐药情况，指导临床化疗。     

反义核酸逆转人白血病多药耐药细胞株的耐药性

目的采用一段人工合成的互补于人ｍｄｒ１基因的反义硫代硫酸脱氧寡核苷酸（简称反义核酸）转染白血病多药耐药细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ，来逆转白血病细胞的多药耐药。方法ＭＴＴ法检测Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０，流式细胞仪分析细胞内的柔红霉素含量，免疫细胞化学染色方法确定Ｐ１７０的表达水平，ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ的相对水平（ｍｄｒ１／β２－ＭＧ）。结果浓度为２μｍｏｌ的反义核酸使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０从处理前的２５．７２μｇ／ｍｌ降至处理后的６．９７μｇ／ｍｌ，相对逆转效率为７３．０１％。反义核酸亦使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内的柔红霉素含量增加，Ｐ１７０表达阳性率从处理前的９８．６％±１．０％降至处理后的１８．３％±０．７％，ｍｄｒ１／β２－ＭＧ下降了０．５，ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ相对水平有所下降。结论反义核酸通过下调ｍｄｒ１基因，阻断Ｐ１７０的表达，从而降低Ｋ５６２／ＡＤＭ的耐药性。     

Ribozyme基因对人肿瘤细胞株MCF—7／Adr多药抗药性的靶向逆转

设计合成能切割人ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因并构建成真核细胞表达克隆（ｐＨβＡｐｒ－１ｎｅｗ／５ｍＲ３），以靶向切割耐药癌细胞株（ＭＣＦ－７／Ａｄｒ）的ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ，抑制Ｐ－糖蛋白的表达，逆转多药抗药性。方法将含Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因的真核细胞表达克隆转染ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞，采用斑点杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术测得Ｒｉｂｏｚｙｍｅ能在细胞中稳定表达，并使细胞中ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ降解８３．５％，Ｐ－糖蛋白表达明显下降（ＡＢＣ法）。结果Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因转染的ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞耐药性下降至敏感细胞的６倍，而无Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因转染的ＭＣＦ－７／Ａｄｒ耐药性是敏感细胞的１０００倍。结论这种基因调控技术介入可能将为肿瘤耐药的治疗开辟一个新领域。     

急性髓系白血病H-ras、凋亡及多药耐药的研究

目的研究急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｈｒａｓ／Ｐ２１、抗凋亡基因（ｂｃｌ２）、细胞凋亡与多药耐药基因（ｍｄｒ１／Ｐｇｐ）对疗效的影响,并证实流式细胞术（ＦＣＭ）检测Ｐｇｐ和逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ间的相关。方法用ＦＣＭ检测８５例初治ＡＭＬ患者的Ｈｒａｓ／Ｐ２１、ｂｃｌ２、细胞凋亡和ｍｄｒ１产物Ｐｇｐ的表达;用ＲＴＰＣＲ检测其中４７例的ｍｄｒ１／ｍＲＮＡ。结果Ｐ２１＋／Ｐｇｐ＋者完全缓解（ＣＲ）率明显低于Ｐ２１－／Ｐｇｐ－者（分别为５８．１％和１００％,Ｐ＜０．０２５）,高ｂｃｌ２／Ｐｇｐ＋的ＣＲ率明显低于低ｂｃｌ２／Ｐｇｐ－者（分别为６０％和９６．３％,Ｐ＜０．００５）。Ｐｇｐ＋３１例中２９例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性,Ｐｇｐ－１６例中仅２例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性。结论Ｐｇｐ＋同时Ｐ２１＋、高ｂｃｌ２者ＣＲ低,ＦＣＭ检测Ｐｇｐ和ＲＴＰＣＲ检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ相关性良好     

RT－PCR法检测胃癌组织mdr－1基因的表达及临床意义

应用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了３０例胃腺癌的ｍｄｒ－１基因的表达，结果发现：术前化疗的胃腺癌ｍｄｒ－１表达阳性率为９１％，明显高于术前非化疗组的阳性率（４７％）（Ｐ＜０．０１）。在术前非化疗组中，中分化胃癌的阳性率高于低分化胃癌的阳性率（Ｐ＜０．０５），ｍｄｒ－１基因的表达与胃癌转移的发生率没有明显的关系。临床上检测胃癌的ｍｄｒ－１基因的表达，可以帮助选择术后的化疗方案。     

nm_(23)-H_1 mRNA在胰腺癌中的表达及其与预后的关系

目的：探讨肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１表达产物ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ在胰腺癌组织中的表达及其与预后的关系。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，检测２７例胰腺癌及７例正常胰腺组织中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达。结果：７例正常胰腺组织仅１例表达ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ，占１４．２８％，２７例胰腺癌标本中有１９例表达ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ，占７０．２５％。经卡方检验发现：ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达与胰腺癌病理分级、临床分期及伴随局部淋巴结转移呈显著相关（Ｐ＜０．０５）。结论：检测ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达对判断胰腺癌恶性程度及预测预后有重要参考价值。     

胃,肠癌及癌旁组织MDR1基因表达的研究

目的;探讨胃,肠癌的原发耐药性及多药耐药基因（ｍｄｒ１）的肿瘤特异性,方法：以未接受肿瘤化疗的３１例胃癌和２４例结,直肠癌患者的癌及癌旁组织为研究对象,以逆转录ＰＣＲ技术和Ｄｏｔｂｌｏｔ技术进行ｍｄｒ１基因ｍＲＮＡ表达的研究。结果：（１）未接受化学治疗的胃癌患者的癌组织ｍｄｒ１ｍＲＮＡ呈阳性表达者占４８．３９％（１５／３１）肠癌为５４．１７％（１３／２４）（２）癌组织ｍｄｒ１基因ｍＲ－ＮＡ高表达,     

人胃癌组织WAF1基因的缺失与不表达

探讨ＷＡＦ１与胃癌的关系，为胃癌基因治疗提供有价值的依据。方法３２例胃癌和３０例正常胃粘膜标本提取细胞ＤＮＡ、总ＲＮＡ，ＭＴＳ１ｃＤＮＡ探针采用随机引物法进行３２Ｐ－ｄＡＴＰ掺入标记，ＷＡＦ１与所提ＤＮＡ、ＲＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析，检测标本中有无ＷＡＦ１的缺失和ｍＲＮＡ的不表达。ｐ５３抗体与提取的蛋白质进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析，检测标本中有无ｐ５３的表达。结果ＷＡＦ１Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析结果显示，３２例胃癌标本ＷＡＦ１基因缺失率及ｍＲＮＡ不表达率分别为３４．４％和４０．６％，明显高于正常胃粘膜组。ＷＡＦ１基因缺失率及ｍＲＮＡ不表达与胃癌浸润的深度及分化程度有关，胃癌侵及肌层组ＷＡＦ１基因缺失及ｍＲＮＡ不表达率分别为５２．６％和５７．９％，胃癌未侵及肌层组分别为７．７％和１５．４％，高、中分化胃癌组ＷＡＦ１基因缺失及ｍＲＮＡ不表达率分别为７．１％和１４．３％，而低分化及印戒细胞胃癌组分别为５５．８％和６１．１％。结论胃癌的发生与ｐ５３失活及ＷＡＦ１ｍＲＮＡ不表达有关，胃癌组织中ｐ５３失活与ＷＡＦ１ｍＲＮＡ不表达关系密切。     

恶性淋巴瘤mdr1和MRP mRNA及 P-gp表达水平与化疗疗效的相关研究

目的探讨恶性淋巴瘤mdr1、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效的相关性.方法应用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术和流式细胞术(FCM)方法,以8例人正常淋巴结为正常对照,对46例淋巴瘤患者[23例初治(HD1例,NHL22例)及23例复发(HD5例,NHL18例)]的mdr1 mRNA、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效间的关系进行了前瞻性研究.结果复发患者mdr1基因和P-gp表达水平及阳性率均高于初治患者(P<0.001),而MRP基因表达水平及阳性率在复发与初治患者间差异无显著意义(P>0.05).mdr1基因及P-gp表达阳性患者的化疗有效(CR+PR)率(33.33%和26.67%)明显低于mdr1基因及P-gp表达阴性患者(85.71%和83.87%,P<0.001),而MRP基因表达阳性患者与阴性患者的化疗有效率差异无显著意义(P>0.05).相关分析显示,mdr1基因和P-gp表达水平之间有明显相关性(r=0.296 3,P<0.05),而mdr1和MRP之间、MRP与P-gp之间均无明显相关性(r=0.072 3,P>0.05;r=0.081 8,P>0.05).结论 mdr1基因及P-gp表达是恶性淋巴瘤患者多药耐药的主要机制,而MRP基因不是产生耐药的主要机制.mdr1基因及P-gp表达水平的高低与恶性淋巴瘤化疗疗效密切相关,而MRP基因的表达与化疗疗效未见相关.     

卵巢癌中多药耐药基因的表达及其意义

为探讨卵巢癌隐含的耐药机制及其对化疗的影响,用RT－PCR方法对7例正常卵巢组织及32例卵巢癌进行了多药耐药基因（mdr1)检测,结果表明：正常卵巢组织中,rdr1基因均无表达,32例卵巢癌中,mdr1表达阳性率为28．1％,mdr1基因表达与病理类型有关（P＜0．05）,而且mdr1表达阳性者耐药发生率（55．6％）显著高于阴性者（8．6％,P＜0．01）。结果提示：卵巢癌中隐含有由mdr1介导的多药耐药机制,mdr1的表达与卵巢癌的化疗耐药有一定的关系。     

多药耐药基因mdr_1在食管癌组织中的表达及其意义

目的 :检测食管癌基因mdr1mRNA表达 ,探讨其与食管癌临床病理间的关系。方法 :应用逆转录多聚酶链反应 (RT -PCR)对 5 1例术前未作治疗的食管癌 ,2 0例正常食管组织的mdr1mRNA进行检测并于食管癌患者的病理类型、部位、浸润转移作对比研究。结果 :5 1例食管癌癌组织中mdr1mRNA阳性表达率为 6 2 .7% (32 /5 1) ,正常食管组织表达率为 10 .0 % (2 /2 0 ) ,二者差异有显著性 (P <0 .0 1)。mdr1mRNA食管癌的分化程度、发生部位、病理类型、浸润转移无关 (P >0 .0 5 )。结论 :食管癌组织中mdr1mRNA的存在着高表达 ,可作为食管癌化疗耐药的指标     

THE EXPRESSION OF MDR1 GENE IN GASTRIC CARCINOMA AND ITS RELATIONSHIP TO CLINICOPATHOLOGICAL VARIABLES

ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ（ＭＤＲ）ｏｆｃａｎｃｅｒｃｅｌｓｔｏａｎｔｉｃａｎｃｅｒｄｒｕｇｓｉｓａｍａｊｏｒｐｒｏｂｌｅｍｉｎｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ,ａｎｄｔｈｅｃｈｉｅｆｍｅｃｈａｎｉｓｍｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅｆｏｒＭＤＲｉｓｔｈ...     

多耐药基因在乳腺癌组织中表达及临床意义

目的全面了解乳腺癌内源性耐药情况,实现肿瘤病人个体化化疗。方法应用荧光定量PCR方法检测51例术前未经化疗的乳腺癌和癌旁组织中mdr1、MRP、LRP、GST-π、TOPOⅡα、BCRP基因表达。结果这6个多药耐药基因在乳腺癌组织和癌旁组织中的阳性表达率均有显著统计学意义;mdr1、LRP、GST-π、TOPOⅡα在乳腺癌组织和癌旁组织之间的表达水平无显著统计学意义（P〉0.05）;MRP和BCRP在乳腺癌组织中的表达水平显著高于其在癌旁组织中的表达水平,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 MRP和BCRP可能与乳腺癌的内源性耐药有关,mdr1、LRP、GST-π、TOPOⅡα的表达可能与乳腺癌的内源性耐药无关,乳腺癌患者进行术前的新辅助化疗是可行的。     

多药耐药基因在膀胱移行细胞癌中的表达与P63、Survivin基因表达的相关性研究

目的研究膀胱移行细胞癌(TCC)组织中多药耐药基因MDR-1与P63蛋白及Survivin基因表达的关系,从分子水平探讨预测化疗效果的可行性。方法利用免疫组织化学方法检测10例正常膀胱粘膜标本(正常膀胱组),46例未经任何化疗的TCC标本(未化疗组),20例化疗后多次复发而行手术切除的TCC标本(获得性耐药组)组织中MDR-1、P63和Survivin的表达。结果(1)MDR-1的阳性表达在获得性耐药组与未化疗组之间有显著差异性;(2)P63的阳性表达在未化疗组各级(G)组间有显著差异;在获得性耐药组与未化疗组之间有显著差异;(3)Survivin的阳性表达在各级(G)组间有显著差异,各期(T)组间有显著差异,获得性耐药组与未化疗组间有显著差异。(4)Survivin的阳性表达率和肿瘤分级、临床分期呈正相关。结论通过检测MDR-1基因可以对TCC患者进行化学治疗敏感性预测;MDR-1表达与P63和Survivin的表达具有一致性,P63、Survivin与MDR-1三者基因可能共同表达协同作用,产生更强的耐药能力。     

实时荧光定量PCR检测乳腺癌5种多药耐药基因的表达强度

目的 :检测 5种多药耐药基因在乳腺癌细胞株 MCF- 7和 MCF- 7/ADR里的表达强度变化 ,为乳腺癌多药耐药逆转研究提供新的思路。方法 :通过实时荧光定量 PCR技术分别检测乳腺癌敏感细胞株 MCF- 7和耐药细胞株 MCF- 7/ADR里的 mdr1、MRP、L RP、GST- π、TOPO α基因表达强度。结果 :MCF- 7/ADR里的 mdr1、MRP、LRP、GST- π基因表达强度分别比它们在 MCF- 7里的表达强度相对增加了 1 2 5 .39、5 5 .5 3、1 .2 4、3.38倍 ,TOPO α则降低了 0 .43倍 ,其中 mdr1、MRP表达强度的相对增加倍数均显著高于 L RP、GST- π、TOPO α的增加 (或降低 )倍数 ( P<0 .0 0 1 )。结论 :除了 mdr1之外 ,MRP也可能在乳腺癌的多药耐药产生机制里起重要作用。因此 MRP基因可以成为乳腺癌耐药逆转研究的新作用靶点     

胃、肠癌及癌旁组织MDR1基因表达的研究

目的：探讨胃、肠癌的原发耐药性及多药耐药基因（ｍ ｄｒ１）的肿瘤特异性。方法：以未接受肿瘤化疗的 ３１ 例胃癌和 ２４ 例结、直肠癌患者的癌及癌旁组织为研究对象,以逆转录 Ｐ Ｃ Ｒ 技术和 Ｄｏｔ ｂｌｏｔ 技术进行 ｍ ｄｒ１ 基因 ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达的研究。结果：①未接受化学治疗的胃癌患者的癌组织ｍ ｄｒ１ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 呈阳性表达者占 ４８３９％ （１５／３１）,肠癌为 ５４１７％ （１３／２４）。②癌组织ｍ ｄｒｌ基因ｍ Ｒ Ｎ Ａ 高表达,癌旁组织的表达强度显著低于癌组织。结论：检测癌手术标本ｍ ｄｒ１ 基因可发现原发性耐药,对术后制定化疗方案有重要的参考价值。