筑巢式聚合酶链反应检测急性早幼粒细胞白血病PML／RARαmRNA

目的：观察急性早幼粒细胞白血病（APL）患者PML／RARαmRNA的表达情况。方法：应用逆转录筑巢式聚合酶链反应（Nested PCR)检测了30例APL患者的PML／RARαmRNA。结果：3例APL患者中22例检测到PML／RARαmRNA,其中16例为L型,6例为S型。结论：Nested PCR是检测APL患者PML／RARαmRNA有效而敏感的方法。     

急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因的检测

目的 探讨荧光原位杂交技术(FISH)在检测急性早幼粒细胞白血病(APL)患者PML/RARα融合基因中的价值.方法 对初诊的30例及20例疑似APL的患者进行FISH技术检测PML/RARα融合基因,对治疗过程中PML/RARα融合基因阳性细胞比例进行动态观察,进而协助诊断和指导治疗.结果 30例APL中PML/RARα融合基因阳性率90%(27/30),1例AML1/ETO融合基因阳性,确诊为AML-M2;20例未确诊者中AML1/ETO融合基因阳性率15%(3/20),PML/RARα融合基因阳性率50%(10/20),其余7例未检测到以上两种融合基因.达到完全缓解(CR)后有7例融合基因阴性,随访至CR后2年,发现7例PML/RARα融合基因阳性比例较高患者分别于1~3个月后复发.结论 FISH技术对APL的诊断具有高灵敏度和高准确度,并精确定位复杂核型中融合信号的位置,可用以确定白血病类型,指导临床治疗和进行治疗后的疗效监测.     

NB4细胞PML—RARα融合基因表达对维甲酸诱导分化作用的影响

目的研究急性早幼粒白血病（ＡＰＬ）细胞株ＮＢ４细胞ＰＭＬ－ＲＡＲα（早幼粒细胞白血病基因－维甲酸受体基因α）融合基因的表达对维甲酸诱导分化作用的影响，探讨ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因与维甲酸治疗作用间的关系。方法用反义核酸来阻断ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的表达并用逆转录－聚合酶链式反应检测。ＮＢ４细胞的生长、分化及功能。通过细胞生长曲线、形态学、细胞表面标志及ＮＢＴ（硝基四氮唑蓝）还原试验进行判定，细胞周期应用流式细胞仪进行分析。结果反义核酸阻断ＰＭＬ－ＲＡＲα表达后使维甲酸对ＮＢ４细胞的生长抑制作用增强，Ｓ期细胞由５２％降至２９％，同时ＮＢＴ还原能力提高，细胞表面标志变化明显，提示对维甲酸敏感性增加。结论ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的表达不仅与ＡＰＬ的发病有关，而且钝化了维甲酸对ＡＰＬ细胞的诱导分化作用。     

筑巢式聚合酶链反应检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARαmRNA

目的观察急性早幼粒细胞白血病(APL)患者PML/RARαmRNA的表达情况.方法应用逆转录筑巢式聚合酶链反应(Nested PCR)检测了30例APL患者的PML/RARαmRNA.结果30例APL患者中22例检测到PML/RARαmRNA,其中16例为L型,6例为S型.结论Nested PCR是检测APL患者PML/RARαmRNA有效而敏感的方法.     

急性早幼粒细胞白血病PML—RARαmRNA的检测和临床意义

应用热启动ＲＴ－ＰＣＲ方法检测急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）ＰＭＬ－ＲＡＲαｍＲＮＡ,与传统“巢式”ＰＣＲ比较,仅需１对引物而获１０＾－４的敏感性。对７例ＡＰＬ患者,分别在诊断时及缓解后进行ＰＭＬ－ＲＡＲαｍＲＮＡ的动态监测。     

二次PCR检测HL60细胞系PML—RARα融合mRNA

急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）具有染色体易位ｔ（１５；１７）而产生的特异的融合基因ＰＭＬ－ＲＡＲα。本研究应用二次聚合酶链反应（ｂｏｓｔｅｒ－ＰＣＲ）技术检测了ＡＰＬ细胞系ＨＬ６０细胞中ＰＭＬ－ＲＡＲα融合ｍＲＮＡ。结果表明，ＨＬ６０细胞系中同时具有二种ＰＭＬ－ＲＡＲα融合ｍＲＮＡ异构体（Ｌ型和Ｓ型）。本实验的敏感度可达１０＾－６个细胞水平，同时检测了结果具有高度的特异性。提示本方法可作为今后检测     

荧光原位杂交技术检测急性早幼粒细胞白血病的PML/RARα融合基因重排

目的：探讨双色双融合荧光原位杂交技术（dual-color and dual-fusion fluorescence in-situ hybridization,D-FISH）在急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia,APL）诊断中的应用价值。方法：同时应用常规细胞遗传学R显带（RHG）核型分析和双色双融合荧光原位杂交2种方法,对21例APL患者进行检测。结果：21例APL患者中,常规细胞遗传学检出t（15;17）染色体易位18例,D-FISH检测均为PML/RARα融合基因（＋）;2例阴性和1例因无分裂相而无法分析结果者经D-FISH检测均为（＋）。D-FISH检测总阳性率100%（21/21）,高于常规细胞遗传学检查阳性率85.71%（18/21）。结论：与常规细胞遗传学方法相比,D-FISH检测APL的PML/RARα融合基因具有简便、快速、灵敏、特异性强等优点,可以作为APL临床诊断的一种重要检测方法。     

急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因异构体的临床意义

目的：探讨急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因异构体及其临床关系。方法：用逆转录／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）检测２１例初诊ＡＰＬ患者细胞中ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因转录本，并分析其对临床特征的可能不同影响。结果：在ＡＴＲＡ诱导治疗过程中，短型ＰＭＬ－ＲＡＲα异构体ＡＰＬ组的早期死亡和复发率（４／８）（５０％）高于长型ＰＭＬ－ＲＡＲα异构体组（２／１３）（１５．４％）；与长型异构体相反，存活期２月至２年患者含短型异构体的比例（７５％）大于存活期２年以上组（３３．３％）；未观察到患者血液学参数改变与不同ＰＭＬ－ＲＡＲα异构体有关。结论：与长型ＰＭＬ－ＲＡＲα异构体组ＡＰＬ患者相比，短型ＰＭＬ－ＲＡＲα异构体组的预后可能更差。     

PML/RARα融合基因及染色体检测在急性早幼粒细胞白血病诊断中的应用

目的:探讨PML/RARα融合基因检测及染色体分析对急性早幼粒细胞白血病(APL)诊断的价值。方法:骨髓细胞24h培养后,采用FISH法检测PML/RARα融合基因,同时染色体R显带法分析是否存在t(15;17)。结果:41例确诊的APL患者中FISH检测发现所有病例均存在PML/RARα融合基因,检出率为100%,染色体核型分析发现典型t(15;17)38例,复杂核型1例,正常核型2例,检出率为92.7%。结论:PML/RARα融合基因检测和染色体分析是诊断APL的可靠方法,而PML/RARα融合基因检测灵敏度更高,可作为细胞遗传学的重要补充。     

急性早幼粒细胞自血病PML／RARα融合基因的检测

目的探讨荧光原位杂交技术（FISH）在检测急性早幼粒细胞白血病（APL）患者PML／RARα融合基闪中的价值。方法对初诊的30例及20例疑似APL的患者进行FISH技术检测PML／RARα融合基因,对治疗过程中PML／RARα融合基因阳性细胞比例进行动态观察,进而协助诊断和指导治疗。结果30例APL中PML／RARα融合基因阳性率90％（27／30）,1例AML1／ETO融合基因阳性,确诊为AML-M2;20例未确诊者中AML1／ETO融合基因阳性率15％（3／20）,PML／RARα融合基因阳性率50％（10／20）,其余7例未检测到以上两种融合基因。达到完全缓解（CR）后有7例融合基因阴性,随访至CR后2年,发现7例PML／RARα融合基因阳性比例较高患者分别于1-3个月后复发。结论FISH技术对APL的诊断具有高灵敏度和高准确度,并精确定位复杂核型中融合信号的位置,可用以确定白血病类型,指导临床治疗和进行治疗后的疗效监测。     

PML/RARa融合基因阴性急性早幼粒细胞白血病的治疗

目的探讨PML/RARa融合基因阴性急性早幼粒细胞白血病(APL)治疗.方法4例患者用亚砷酸诱导治疗,完全缓解后,3例用亚砷酸联合化疗巩固治疗,1例行自体造血干细胞移植治疗.1例用维甲酸诱导治疗,缓解后,用维甲酸联合亚砷酸和化疗交替巩固治疗.结果5例患者均于诱导治疗1疗程获得完全缓解.1例于完全缓解后半年接受自体造血干细胞移植过程中死于心力衰竭,其余4例处于完全缓解状态.结论PML/RARa融合基因阴性的APL对亚砷酸或维甲酸(少数患者)诱导治疗是敏感的,亚砷酸或(和)维甲酸联用化疗巩固治疗有较好疗效.     

51例APL患者PML/RARα mRNA转录本的检测及其意义

目的建立实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)方法并检测初诊急性早幼粒细胞白血病(APL)患者甲幼粒细胞白血病/维甲酸受体(PML/RARα)融合基因含量,评价检测结果的临床意义。方法采用"欧洲抗癌计划"推荐的引物和探针建立RQ-PCR方法,检测51例初诊APL患者的PML/RARα融合基因含量,并分析其临床意义。结果 APL初诊患者的年龄与外周血白细胞(WBC)数呈负相关(r=-0.376,P=0.014),相关性主要见于长型和变异型患者(r=-0.51,P=0.005)。51例APL初诊患者中,长型患者33例,变异型患者3例,长型和变异型36例。APL初诊患者PML/RARα转录本绝对含量为3.75×102～6.20×105拷贝/50ng(中位7.24×103拷贝/50ng);相对含量为0.51%～676.87%(中位9.31%)。15例短型患者PML/RARα转录本绝对含量为2.26×103～2.33×106拷贝/50ng(中位1.17×105拷贝/50ng);相对含量为12.04%～802.68%(中位95.26%)。短型患者外周血WBC数明显高于长型患者(P=0.041),其融合基因含量也明显高于长型患者(P<0.01),而在性别、年龄、外周血Hb、PLT,骨髓原粒及异常早幼粒细胞比例、血液学缓解时间和分子生物学缓解时间等方面比较差异无统计学意义。33例初诊患者血液学缓解时间、分子生物学缓解时间与患者的年龄、WBC数及融合基因含量无相关性。结论 RQ-PCR方法敏感、可靠,可以对APL初诊患者进行诊断和分型。     

一种灵敏检测慢性粒细胞性白血病融合基因的方法:RT-nested-PCR

应用RT-nsted-PCR方法检测15例慢性粒细胞性白血病患者的融合基因bcr/abl，检出率高达93％。此方法是当前检测慢性粒细胞性白血病残留细胞较灵敏、较可靠的方法。     

维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病副作用的护理

全反式维甲酸 (ＡＴＲＡ)的应用给急性早幼粒细胞白血病 (ＡＰＬ)的治疗带来了新希望 ,但其各种副反应也给患者带来很大的痛苦 ,严重时可危及患者的生命。因此 ,在护理上了解ＡＴＲＡ可能引起的副作用 ,早期采取相应的护理对策 ,对预防并发症的发生 ,减轻由并发症给患者带来的痛苦非常重要。1　临床资料1995年 12月至 2 0 0 0年 12月在本院住院诊治的ＡＰＬ患者 30例 ,男 18例 ,女 12例 ,平均年龄 (35± 7)岁。经血象、骨髓象、分子生物学技术、骨髓活检确诊为ＡＰＬ。治疗方法 :ＡＴＲＡ30ｍｇ(由中国重庆制药厂生产 ) ,每天分 3次口服 ,共…     

APL用ATRA诱导缓解中白细胞增高及PML—RARα异构体检测的意义

用全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）治４０例急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）过程中动态观察ＷＢＣ及骨髓象变化，按血象及骨髓象变化的类型分为３组：第１组２３例（５７．２％），治疗后ＷＢＣ高峰时增益５～１０倍以上，高峰持续时间＜１０ｄ，骨髓中早幼粒细胞比治疗前降低２０％以上；第２组１０例（２５％），治疗后ＷＢＣ高峰时增益＞５～１０倍，高峰持续时间２周左右，骨髓中早幼粒细胞计数升高持续不降；第３组７例（１７．５％），高峰仅５倍以下，持续时间＜１０ｄ。ＰＭＬ－ＲＡＲα短型融合基因多见于第２组，患者容易发生呼吸窘迫综合征及肾衰。应采取措施，防止白细胞过多所引起的并发症。     

急性早幼粒细胞白血病的基因重排

1957年Hillstead首先将急性早幼粒细胞白血病(APL)从急性非淋巴细胞白血病中区分出来,予以命名,并描述其临床特征。1976年Golomb等发现APL有第17号染色体(chr.17)的长臂部分缺失,即del 17(q11～21),之后又证实这缺失部分移位至第15号染色体的长臂上,形成t(15;17)(q22;q21),当时     

实时定量PCR检测白血病融合基因的应用研究

目的探讨实时荧光定量RT-PCR(RQ-PCR)检测融合基因在慢性粒细胞性白血病(CML)及急性早幼粒细胞白血病(APL)诊疗中的应用价值。方法采用RQ-PCR方法,对15例拟诊CML和17例拟诊APL的患者,在诊断及治疗过程中分别进行融合基因BCR/ABL、PML/RARa的检测,并且观察CML经羟基脲+干扰素(Hu+IFNα)与伊马替尼(IM)不同药物治疗的疗效差别。结果 15例拟诊CML患者中12例经融合基因检测确定诊断;17例拟诊APL患者中15例经融合基因检测确定诊断。动态观察,两种疾病在治疗的6个月、12个月时融合基因表达量明显下降,与初诊比较差异有统计学意义(P<0.01),其中CML两种不同治疗方案间差别显著(P<0.05)。两种疾病在血液学进展或复发前可发现融合基因显著升高。结论融合基因检测对于CML、APL的诊断、疗效观察和微小残留病的监测有重要价值。     

维甲酸诱导分化治疗急性早幼粒细胞白血病完全缓解三例报告

随着对白血病细胞生物学特性研究的深入,现已知道急性白血病细胞并不像过去那样被认为是完全丧失了分化、成熟能力的恶性细胞。Breitman等报道应用维甲酸(Retinoic Acid,RA),诱导分化人类早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60),经含有1     

PML—RARa融合基因检测方法学的建立

应用筑巢式逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测２３例急性早幼粒白血病（ＡＰＬ）早幼粒白血病基因ＰＭＬ维甲酸受体α融合基因（ＰＭＬ－ＲＡＲａ）肯定了２例与急淋白血病Ｍ２不易鉴别的不典型ＡＰＬ，１５例缓在２年以内ＡＰＬ此融合基因均阳性，其中Ｌ型８例，Ｓ型７例，Ｌ型中尚发现一个变异型，８例缓解在３年以上ＡＰＬ，此融合基因４例阳性，其中Ｌ型３例，Ｓ型１例，Ｌ型１例已有复发倾向，而缓解超过４年ＡＰＬ此