塞来昔布对鼻咽癌CNE-2Z细胞生物学行为的影响

目的 探讨塞来昔布对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖、黏附、运动能力等生物学行为的影响.方法 不同浓度塞来昔布作用鼻咽癌细胞24 h后,运用平板克隆形成实验检测塞来昔布对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响;应用细胞-细胞黏附实验、细胞-基质黏附实验和细胞运动实验检测塞来昔布对肿瘤细胞黏附和运动能力的影响;Western blot和免疫细胞化学检测鼻咽癌细胞COX-2蛋白表达变化.结果 塞来昔布可以明显抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖,0、25、50、75、100 μmol/L组肿瘤细胞克隆形成数率分别为(85.68±1.83)%、(69.00±4.08)%、(59.03±2.43)%、(37.28±3.25)%和(12.58±3.69)%,各组间比较差异均有显著性(F=321.187,P＜0.01).细胞-细胞黏附实验结果显示,同一个时间点各组间细胞黏附率差异有显著性(F值分别为21.605、181.301,P均＜0.001),其中15 min时间点0、25、50 μmol/L组细胞间黏附率分别为(12.38±1.54)%、(19.30±1.49)%和(20.18±1.80)%,45 min时间点细胞间黏附率分别为(46.34±1.37)%、(58.72±1.68)%和(67.15±0.86)%;细胞-基质黏附实验结果表明,25、50 μmol/L组细胞异质黏附力明显低于无药组(t值分别为24.840和38.565,P均＜0.01);运动实验显示穿膜肿瘤细胞数分别为(124.3±8.02)个、(84.3±12.22)个和(55.3±9.29)个,组间差异有统计学意义,用药组穿膜细胞数明显减少(F＝36.010,P＜0.01);Western blot结果发现,25、50 μmol/L组COX-2蛋白的表达水平与对照组相比明显下降(t值分别为25.356和73.656,P均＜0.01);免疫细胞组织化学结果发现,0、25、50 μmol/L组COX-2阳性表达数分别为(380±11)个、(313±12)个、(213±8)个,各浓度组间差异有统计学意义(F＝298.578,P＜0.01).结论 塞来昔布可以抑制鼻咽癌细胞的增殖,增强鼻咽癌细胞间的黏附力,降低细胞与细胞外基质的黏附力及运动能力,机制可能与下调COX-2蛋白的表达水平有关.     

环氧合酶-2抑制剂对非小细胞肺癌A549细胞VEGF表达的影响

目的探讨环氧合酶-2抑制剂对非小细胞肺癌A549细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法加不同浓度塞来昔布与A549肺癌细胞共培养,MTT法检测细胞增殖,50μmol/L塞来昔布作用于A549细胞48 h,RT-PCR方法检测各组细胞的VEGF基因表达水平,Western blot方法检测各组细胞的VEGF蛋白表达。结果塞来昔布在体外对细胞株A549的生长抑制作用呈剂量、时间依赖性;各组细胞培养48 h后,相比于对照组,RT-PCR方法检测发现塞来昔布组细胞VEGF m RNA表达显著降低(P0.01),Western blot方法检测发现塞来昔布组细胞VEGF蛋白表达显著降低(P0.01)。结论塞来昔布可能通过调节VEGF的表达抑制A549细胞增殖。     

环氧合酶-2抑制剂对非小细胞肺癌A549细胞Fas表达的影响

目的探讨环氧合酶-2抑制剂对非小细胞肺癌A549细胞Fas表达的影响。方法加不同浓度塞来昔布与A549肺癌细胞共培养,MTT法检测细胞增殖,50μmol·L~(-1)塞来昔布作用于A549细胞48 h,RT-PCR方法检测各组细胞的Fas基因表达水平,Western blot方法检测各组细胞的Fas蛋白表达。结果塞来昔布在体外对细胞株A549的生长抑制作用呈剂量、时间依赖性;各组细胞培养48h后,相比于对照组,塞来昔布组Fas mR NA和蛋白在A549细胞的表达水平显著升高(P0.01)。结论 T塞来昔布抑制A549细胞增殖可能与上调Fas的表达相关。     

环氧合酶-2抑制剂对非小细胞肺癌A549细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨环氧合酶-2抑制剂对非小细胞肺癌A549细胞Bcl-2和Bax表达的影响。方法加不同浓-1度塞来昔布与A549肺癌细胞共培养,MTT法检测细胞增殖,50μmol·L塞来昔布作用于A549细胞48 h,实时定量PCR方法检测各组细胞的Bcl-2和Bax基因表达水平,Western blot方法检测各组细胞的Bcl-2和Bax蛋白表达。结果塞来昔布在体外对细胞株A549的生长抑制作用呈剂量、时间依赖性;各组细胞培养48h后,相比于对照组,塞来昔布组细胞Bcl-2 m RNA和蛋白表达显著下调,Bax m RNA和蛋白表达显著上调,Bcl-2/Bax比值显著降低(<0.01)。结论塞来昔布可能通过调节Bcl-2和Bax的表达抑制A549细胞增殖。     

塞来昔布抑制人胰腺癌细胞系PANC-1的增殖、侵袭、迁移能力

目的探讨COX-2抑制剂塞来昔布对人胰腺癌细胞系PANC-1增殖、侵袭、迁移能力的影响,确定塞来昔布作用的最佳浓度和最适宜的应用时间。方法不同浓度的塞来昔布(20、60和100μmol/L)处理胰腺癌细胞不同时间(24、48和72 h)后,用MTT比色法检测细胞的增殖能力;用Transwell实验检测细胞的侵袭能力;采用细胞划痕实验检测细胞的迁移能力。结果 MTT结果显示塞来昔布作用后胰腺癌细胞的增殖能力下降,呈时间和浓度依赖性(P0.05);Transwell侵袭实验结果显示塞来昔布作用后胰腺癌细胞的侵袭能力下降,呈浓度依赖性(P0.01);划痕实验结果显示塞来昔布作用后胰腺癌细胞的迁移能力下降,呈浓度依赖性(P0.01)。结论塞来昔布以浓度梯度、时间梯度的形式减弱人胰腺癌细胞系PANC-1的增殖能力,以浓度梯度的形式减弱人胰腺癌细胞系PANC-1的侵袭及迁移能力。     

COX-2抑制剂(NS-398)对结肠癌HT-29细胞体外侵袭力的作用及CD44v6、nm23-H1基因的调节

目的：研究NS-398对结肠癌HT-29细胞体外侵袭力的作用及CD44v6、nm23-H1基因的调节。 方法： 通过流式细胞仪检测COX-2和CD44v6的表达，MTT检测细胞活性，改良的Boyden小室法观察HT-29细胞侵袭重组基底膜的能力，RT-PCR观察nm23-H1 mRNA的表达。 结果： HT-29细胞COX-2表达阳性，0.1、1.0、10 μmol/L NS-398可显著抑制HT-29细胞侵袭重组基底膜的能力，且上述作用与NS-398的毒性作用无关。NS-398可下调CD44v6的表达，上调nm23-H1 mRNA的表达。 结论： NS-398具有抑制结肠癌细胞HT-29体外侵袭力的作用，下调CD44v6的表达和上调nm23-H1 mRNA的表达可能是其作用机制。     

miR-342靶向LGR5对鼻咽癌CNE-1细胞增殖与侵袭的影响

目的探讨miR-342对鼻咽癌CNE-1细胞增殖与侵袭的影响及可能机制。方法利用脂质体介导的miR-342模拟物或阴性对照转染鼻咽癌CNE-1细胞,并通过实时定量PCR进行验证。通过MTT实验检测CNE-1细胞增殖能力的变化,Transwell实验检测CNE-1侵袭能力变化,采用生物信息学软件预测LGR5是否为miR-342潜在的靶基因,并以双荧光素酶报告基因实验验证。Western blot检测miR-342过表达后CNE-1细胞LGR5蛋白的表达变化以及下游β-catenin、Ascl2和C-myc的表达。结果 MiR-342过表达能抑制鼻咽癌CNE-1细胞的体外增殖与侵袭能力;生物信息学软件分析结果显示LGR5是miR-342的靶基因之一,双荧光素酶报告基因证实LGR5为miR-342的下游靶基因。miR-342过表达后,CNE-1细胞中LGR5以及下游β-catenin、Ascl2和Cmyc蛋白表达下调。结论 miR-342通过靶向调控LGR5抑制鼻咽癌CNE-1细胞增殖与侵袭。     

口虾蛄提取物对人鼻咽癌细胞端粒酶活性的影响

目的:研究口虾蛄提取物(EOS)对人低分化鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)端粒酶活性的抑制作用及其可能机制。方法:MTT法检测不同浓度的EOS对CNE-2Z细胞增殖能力的影响;端粒酶重复序列扩增-酶联免疫吸附法(TRAP-ELISA)检测各组细胞端粒酶活性,RT-PCR法检测端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达,Western blotting检测c-Myc蛋白表达。结果:EOS对CNE-2Z细胞增殖具有抑制作用,且呈剂量依赖性(P0.01);EOS处理组CNE-2Z细胞端粒酶的活性、hTERT mRNA和c-Myc蛋白的表达水平均低于对照组(P0.01),也呈剂量依赖性,并且hTERT mRNA的下调与c-Myc的抑制存在相关性(P0.05)。结论:EOS可能通过下调细胞c-Myc表达而抑制了hTERT mRNA的转录,以致端粒酶的活性降低而抑制CNE-2Z细胞增殖。     

针对CD44的siRNA对脑胶质瘤细胞U87增殖与侵袭的抑制作用

目的:通过RNA干涉下调CD44在脑胶质瘤细胞U87中的表达,观察CD44的表达抑制对胶质瘤增殖、迁移和侵袭的影响。方法:根据CD44基因序列设计并合成的siRNA片段(CD44-siRNA)转染U87细胞,利用荧光实时定量qRT-PCR检测细胞中CD44基因mRNA水平的变化;Western blot检测CD44蛋白水平的变化;MTT法检测U87细胞增殖;单细胞划痕愈合实验、Transwell小室侵袭实验检测U87细胞的迁移与侵袭能力变化。结果:CD44-siRNA下调了U87细胞中CD44mRNA水平与蛋白水平的表达,转染细胞的增殖和迁移侵袭能力下降。结论:CD44-siRNA能够下调CD44的表达,并有效抑制U87脑胶质瘤细胞的增殖及其迁移侵袭力,为以CD44为靶点的脑胶质瘤基因治疗奠定基础。     

塞来昔布促进Jurkat细胞对表柔比星的化疗敏感性

目的研究塞来昔布对T细胞淋巴瘤Jurkat细胞株化疗敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法 MTT法检测表柔比星联合塞来昔布对Jurkat细胞增殖活性的影响,并计算IC_(50)值;流式细胞术检测表柔比星联合塞来昔布对Jurkat细胞凋亡水平的影响;Western blot检测塞来昔布对Jurkat细胞株表达P-gp、MRP1、LRP及TopoⅡ蛋白水平的影响;构建Jurkat细胞株裸鼠移植瘤模型,分为模型对照组、单独塞来昔布组、单独表柔比星组及塞来昔布表柔比星组,治疗后引颈处死裸鼠,剥离瘤组织,检测其质量、体积、瘤组织细胞凋亡率,同时检测瘤组织表达MDR1、MRP1、LRP及TopoⅡ的水平。结果表柔比星联合塞来昔布对T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat增殖活性具有明显抑制作用,同时表柔比星的IC_(50)值明显减低(P0.05),Jurkat细胞的凋亡水平也较对照组明显增加(P0.01);与塞来昔布共培养的Jurkat细胞表达TopoⅡ蛋白的水平明显增加,而表达MDR1、MRP1、LRP蛋白的水平均明显下降(P0.05);联合塞来昔布可明显增强表柔比星对Jurkat瘤组织的抑制作用,并可明显下调瘤组织MDR1、MRP1、LRP的表达水平,上调TopoⅡ的表达水平。结论塞来昔布可通过调控耐药相关基因的表达而增强Jurkat细胞化疗敏感性,因此提示该药在T细胞淋巴瘤的临床治疗中具有广泛前景。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.

     

Aspects of the problem of direct introduction of Standards of International Organizations

Editorial note. This article is published as part of a discussion. Particular issues of the article are disputable. First of all, this concerns the so-called “folder” method of introduction of international standards for medical devices to domestic medical practice (i.e., by direct translation of the standards and their publication as standardizing documents). Nevertheless, at least one of the problems, the problem of coordination between domestic state standards for medical devices and international recommendations of ISO and IEC, is undoubtedly of topical importance. Advancement of new health service legislation which is to be approved by law-makers will definitely introduce corrections into the present situation. The Editorial Board of Meditsinskaya Tekhnika believes this article will lessen these problems and to be welcomed by readers.