非小细胞肺癌中TGF-β1与肿瘤相关纤维母细胞α-SMA、CD34表达的相关性和意义

目的 探讨非小细胞肺癌中肿瘤相关纤维母细胞蛋白的表达与癌侵袭的关系及TGF-β1是否与其蛋白表达改变有关。方法 采用免疫组织化学Elivision TM plus法检测60例非小细胞肺癌及相应癌旁非肿瘤组织中纤维母细胞α-SMA、CD34和肿瘤细胞TGF-β1的表达,并结合临床病理进行分析。结果 TGF-β1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于癌旁非肿瘤组织(P＜0.05),与TNM分期、肿瘤分化、肿块大小有关,(P＜0.05);α-SMA在非小细胞肺癌间质中的表达高于癌旁非肿瘤组织(P＜0.05); 与TNM分期、淋巴结有转移、肿块大小有关,(P＜0.05);CD34在非小细胞肺癌间质中的表达明显低于癌旁非肿瘤组织(P＜0.05);非小细胞肺癌组织中,TGF-β1与α-SMA表达呈正相关(r= 0.435,P = 0.001),与CD34表达呈负相关(r= -0.475,P<0.001),α-SMA与CD34表达呈负相关(r= -0.438,P = 0.001)。结论 与癌旁非肿瘤组织中纤维母细胞相比,非小细胞肺癌间质中纤维母细胞CD34表达缺失,而转变表现为α-SMA (+)的肌纤维母细胞的特征,联合检测两者将可能作为肿瘤相关纤维母细胞较特异的标记;肿瘤相关纤维母细胞与非小细胞肺癌的侵袭转移密切相关;非小细胞肺癌中肿瘤细胞可能通过分泌TGF-β1作用于肿瘤间质,促进CD34(+)纤维母细胞转变为α-SMA (+)肌纤维母细胞。     

食管癌组织中α-SMA,CD34及VEGF的表达与其临床意义

目的 探讨食管癌组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CD34、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的改变及与食管癌侵袭转移的关系,探讨三者在食管癌血管生成中的临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测40例食管癌组织及29例癌旁组织中纤维母细胞α-SMA,CD34和VEGF的表达,分析三者之间及与食管癌临床病理特征的关系.结果 40例食管癌组织α-SMA,CD34和VEGF的阳性表达与29例癌旁组织纤维母细胞中的阳性表达(82.50%vs 37.93%,χ2=14.454;32.50%vs 72.41%,χ2= 10.715;72.50%vs 20.69%,χ2=18.055;均P<0.05);α-SMA和VEGF均与肿瘤浸润深度、临床分期和淋巴结转移有关(均P<0.05),且两者的表达密切相关(r=0.453,P<0.01).结论 食管癌组织中分布有大量的α-SMA表达阳性的肌纤维母细胞,α-SMA,CD34和VEGF的表达有一定的内在联系,三者联合可作为判断食管癌侵袭转移及评估预后的重要指标.     

血小板源性生长因子受体-β、Podoplanin在非小细胞肺癌间质中的表达与癌相关成纤维细胞及淋巴管生成的关系

目的探讨血小板源性生长因子受体-β(PDGFR-β)、Podoplanin在非小细胞肺癌(NSCLC)间质中的表达与癌相关成纤维细胞(CAFs)和淋巴管生成的关系。方法采用免疫组织化学Elivision二步法,检测80例NSCLC患者间质及20例癌旁正常肺组织间质中PDGFR-β、Podoplanin的表达,用肌动蛋白α(α-SMA)标记CAFs,D2-40标记微淋巴管,计数微淋巴管密度(LMVD),分析PDGFR-β、Podoplanin表达情况及与CAFs、LMVD和临床病理参数之间的关系。结果 NSCLC中PDGFR-β、Podoplanin在间质中的表达均高于癌旁正常肺组织(P均<0.05)。NSCLC间质中PDGFR-β与Podoplanin的表达呈正相关(r=0.380,P<0.05),且其表达与CAFs密切相关。癌组织中LMVD明显高于癌旁正常肺组织(P<0.05);且淋巴结转移组LMVD更高(P<0.05);PDGFR-β或Podoplanin阳性表达组LMVD明显高于阴性表达组(P均<0.05)。间质中PDGFR-β的阳性表达与患者组织分化程度相关(P<0.05)。Podoplanin的阳性表达与组织分化程度和淋巴结的转移相关(P均<0.05)。结论 PDGFR-β、Podoplanin在NSCLC间质中的表达与CAFs有关,且与肿瘤淋巴管的形成密切相关。     

吡格列酮对肾小管上皮细胞转分化及CTGF表达的影响

目的 探讨吡格列酮能否负性调节转化生长因子β(TGF-β)诱导的肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞(TEMT),以及抑制TGF-β下游介质结缔组织生长因子(CTGF)表达,以阐明吡格列酮抗肾纤维化的作用及机制.方法 将体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分为空白对照组、TGF-β3 ng/mL诱导组、TGF-β3 ng/mL+DMSO组、不同剂量吡格列酮阻断组.应用倒置相差显微镜观察细胞形态,免疫组织化学、RT-PCR方法 定性及定量检测肌成纤维细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA);RT-PCR方法 定量检测CTGFmRNA的表达;ELISA法测定培养细胞上清液中Ⅲ型胶原的含量.结果 ①TGF-β诱导组细胞从原来典型的上皮细胞形态转变为长梭形肌成纤维细胞形态;免疫组织化学染色见大量α-SMA阳性细胞,与对照组相比,α-SMAmRNA表达量增加(P＜0.05);CTGF mRNA表达量增加(P＜0.05);细胞培养上清液中Ⅲ型胶原的含量增加(P＜0.05).②吡格列酮阻断组明显抑制TGF-β诱导的NRK52E细胞形态学改变;各剂量组均能抑制TGF-β诱导的α-SMA mRNA、CTGF mRNA表达及Ⅲ型胶原分泌(P＜0.05),且呈剂量依赖(P＜0.05);③相关分析显示,CTGF mRNA与α-SMA mRNA、Ⅲ型胶原的分泌呈正相关(r=0.975,0.988,P均＜0.01).α-SMA mRNA与Ⅲ型胶原的分泌呈正相关(r=0.952,P＜0.01).结论 吡格列酮能够抑制TGF-β诱导的TEMT及Ⅲ型胶原的分泌,对肾间质纤维化具有负性调节作用;吡格列酮抑制TGF-β诱导的CTGF表达可能是其负性调节TEMT的机制之一.     

阿魏酸钠减轻大鼠肾间质纤维化机制的研究

目的探讨阿魏酸钠对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠。肾间质纤维化的保护作用及机制。方法将45只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阿魏酸钠治疗组。分别于UUO术后3、7、14 d处死动物并取梗阻肾组织,比较病理改变;用SP法检测TGF-β1、p-p38MAPK、α-SMA的表达,并比较分析。结果与假手术组相比,模型组TGF-β1、p-p38MAPK、α-SMA的表达显著升高(P<0.05)且随时间延长,升高更显著;与模型组相比,治疗组TGF-β1、P-p38MAPK、α-SMA的表达显著降低(P<0.05);且TGF-β1、p-p38MAPK、α-SMA的表达呈现正相关性:TGF-β1与P-p38MAPK(r=0.745,P<0.05);p-p38MAPK与d-SMA(r:0.659,P<0.05);TGF-β1与α-SMA(r=0.770,P<0.05)。结论阿魏酸钠可能通过TGF-β1/p-p38 MAPK通路,下调α-SMA的表达,从而减轻大鼠肾间质纤维化。     

肝细胞生长因子对转化生长因子诱导肾小管上皮细胞转分化的影响

目的应用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞肌纤维母细胞转分化,研究肝细胞生长因子(HGF)对肾小管上皮细胞的表型重塑的作用和机制。方法在正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E细胞株)培养液中分别加入TGF-β1及HGF,应用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞形态变化;免疫组织化学方法检测肌纤维母细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;ELISA法分析测定培养细胞上清液中纤维连结蛋白(FN)的含量;RT-PCR检测结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达。结果1TGF-β1诱导肾小管上皮细胞从原有典型的上皮细胞形态转变为长梭形肌成纤维细胞样形态;α-SMA的表达、上清液FN含量、细胞CTGFmRNA表达明显增加(P<0.05)。2单纯HGF对细胞形态学、α-SMA的表达及FN含量与空白对照组无明显影响;不同浓度HGF组的CTGFmRNA表达较空白对照组均增加(P<0.05)。3HGF能抑制TGF-β1诱导的NRK52E细胞形态学改变;α-SMA的表达、FN水平均比诱导组TGF-β1明显下降(P<0.05);HGF抑制了TGF-β1诱导的CT-GFmRNA表达(P<0.05)。结论HGF能够负性调控TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞肌纤维母细胞转分化作用,减少FN分泌;HGF对TEMT的负性调节作用可能是通过减少CTGF表达来实现的。     

非小细胞肺癌患者血清肝细胞生长因子及转化生长因子-β的检测及临床意义

目的 探讨血清肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子-β(TGF-β)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,阐明HGF、TGF-β在NSCLC疾病的侵袭和进展中的作用.方法 采用ELISA法检测72例术前NSCLC患者(NSCLC组)和70例健康体检者(对照组)血清HGF、TGF-β水平.结果 NSCLC组血清HGF、TGF-β均显著高于对照组,相比较差异有显著性(t =4.046,3.994,P ＜0.05).临床分期Ⅳ期的血清HGF、TGF-β水平显著高于Ⅲ期,相比较差异有显著性(t=3.941,3.898;P ＜0.05);肿瘤低分化组血清HGF、TGF-β水平明显高于高中分化组,相比较差异有显著性(t =3.471,3.656;P ＜0.05);发生肿瘤转移组血清HGF、TGF-β水平显著高于肿瘤未转移组,相比较差异有显著性(t=3.357,3.615;P ＜0.05).血清HGF、TGF-β水平在性别、年龄和肿瘤病理类型之间比较差异无显著性(P＞0.05).结论 HGF、TGF-β在NSCLC血清中呈高表达,NSCLC患者术前血清HGF、TGF-β水平与肿瘤临床分期、肿瘤分化程度和肿瘤转移有关,高水平的HGF、TGF-β表明NSCLC疾病的侵袭和进展.     

Expression of relevance and significance of MCT1,CD147 in non-small cell lung cancer

目的 探讨单羧酸转运泵家族1(MCT1)、CD147(EMMPRIN)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达规律及其在NSCLC发生、发展、预后中的意义.方法 取经病理确诊的56例NSCLC患者癌组织、癌旁组织(距肿瘤边缘＞5 cm)和20例肺良性病变组织,并将癌旁组和肺良性病变组划为对照组与肺癌组比较,采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测MCT1、CD147蛋白及mRNA表达,进行定性和定量分析.结果 ①在NSCLC组织中MCT1、CD147表达均明显高于癌旁组织及肺良性肿瘤差异具有统计学意义(P＜0.05);② MCT1在肺癌细胞膜中表达、CD147表达呈正相关(P＜0.05);③ MCT1、CD147表达与NSCLC患者的肿瘤组织类型、淋巴转移均有关(P＜0.05),另外MCT1(细胞膜)蛋白表达还与肿瘤分化程度及吸烟史有关(P＜0.05),MCT1 mRNA表达还与肿瘤分化程度有关(P＜0.05).结论 在NSCLC患者组织中MCT1、CD147的表达具有显著相关性.     

益气活血法对肾间质纤维化影响的实验研究

目的 观察益气活血中药拮抗肾间质纤维化的作用及对转化生长因子β1mRNA表达的影响.方法 将30只大鼠随机分假手术组(对照组)、模型组和治疗组(中药组),采用单侧输尿管梗阻(UUO)模型,术后第14天观察梗阻肾组织病理改变,应用免疫组织化学方法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原的表达.结果 模型组TGF-β1、α-SMA、Ⅰ型胶原的表达增加,肾间质病变加重,与对照组相比有显著差异(P＜0.05);治疗组与模型组相比,TGF-β1、α-SMA、Ⅰ型胶原的表达下调,肾间质病变面积明显缩小,差异有显著性(P＜0.05).结论 益气活血中药可能通过下调TGF-β1、α-SMA、Ⅰ型胶原的表达,从而阻抑肾间质纤维化的进展.     

血小板反应蛋白1及血管内皮生长因子在肾间质纤维化中的表达及意义

目的 探讨肾脏组织中血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,TSP-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肾间质纤维化发生、发展中的表达及意义.方法 选择不同类型肾脏疾病患者53例,按肾间质病理损伤程度对肾组织标本进行分组:正常对照组5例、轻度损伤组18例、中度损伤组19例、重度损伤组11例.用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统半定量检测肾间质的TSP-1、VEGF、CD34、TGF-β1、α-SMA和Ⅳ型胶原表达情况.结果 在正常对照组,TSP-1无阳性表达;TGF-β1在肾小管上皮细胞浆偶见表达;α-SMA仅在血管壁表达;肾间质Ⅳ型胶原在肾小管基底膜、动脉管壁呈线状表达.而VEGF在肾小管上皮细胞及足突细胞浆均可见表达,CD34在肾小管周围毛细血管内皮细胞表达.随着病变程度加重, TSP-1、TGF-β1、α-SMA和Ⅳ型胶原其表达量及面积显著增加(P＜0.01),与肾间质病理损害程度呈显著正相关(r=0.86,0.674,0.779,0.784).而VEGF及CD34表达量及面积则显著递减(P＜0.01),与肾间质病理损害程度呈显著负相关(r=-0.715,-0.672).结论 随着肾间质病理损伤程度加重,TSP-1在肾小管上皮细胞、肾间质区表达增强,与肾间质损害程度呈显著正相关;VEGF在肾小管上皮细胞、足细胞表达减弱,与肾间质损害程度呈显著负相关.提示TSP-1与VEGF对肾小管周围毛细血管作用失衡,使肾小管周围毛细胞血管减少,加重肾组织缺氧,导致慢性肾间质纤维化发生、发展.     

肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及E-cadherin、Vimentin和TGF-β表达的影响

目的 研究肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及癌、癌旁组织中上皮-间质转化(EMT)相关因子E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响.方法 40只小鼠随机分为肺复康组(17.2 g生药/kg)、5-Fu组(25 mg/kg)、Lewis肺癌模型组、正常组.检测肿瘤体积、肿瘤质量以及癌、癌旁组织中E-cadherin、Vimentin和TGF-β的蛋白表达情况.结果 与模型组相比,肺复康组肿瘤体积减小(P＜0.01),肿瘤质量降低(P＜0.01);肺复康组抑瘤率为36％.与正常组比较,模型组癌及癌旁组织E-cadherin表达降低(P＜0.01),Vimentin、TGF-β表达升高(P＜0.01);与模型组癌及癌旁组织相比,肺复康组癌及癌旁组织E-cadherin表达升高(P＜0.01),而Vimentin、TGF-β无显著性差异(P＞0.05).结论 肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤的生长具有一定的抑制作用;并能上调E-cadherin的表达,从而促进肿瘤细胞间的同质粘附而抑制肿瘤的侵袭、转移.     

TGF-β1及PKCα在胰腺癌中的表达及其相关性

目的:研究TGF-β1及蛋白激酶Cα(PKCα)在胰腺癌中的表达及其相互关系.方法:选取42例胰腺癌及癌旁组织,构建组织芯片,应用免疫组织化学SP三步法检测TGF-β1和PKCα在胰腺癌及癌旁组织中的表达.结果:TGF-β1在胰腺癌及癌旁组织的表达分别为80.9%(34/42)、19.1%(8/42);PKCα在胰腺癌细胞胞膜和胞质表达分别为59.5%(25/42)、52.3%(22/42),而在癌旁组织细胞胞膜和胞质表达分别为4.76%(2/42)、83.3%(35/42);相对于癌旁组织,癌组织中的TGF-β1的表达明显增强(P＜0.01),PKCα的膜表达明显增强(P＜0.01),PKCα的膜表达与TGF-β1的表达正相关(P＜0.01).结论:胰腺癌中TGF-β1的过表达可能与PKCα的膜转运有关,而PKCα的膜表达在多药性耐药中发挥重要作用,检测胰腺癌组织中TGF-β1及PKCα的表达可能有助于对胰腺癌的化疗效果作出评价.     

肿瘤干细胞标志物CD133和内皮素转化酶对非小细胞肺癌预后的影响

目的 研究肿瘤干细胞标志物CD133和内皮素转化酶(ECE)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表达的临床意义.方法 用免疫组织化学方法检测77例NSCLC组织中CD133和ECE的表达,分析其与肿瘤大小、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系.结果 77例NSCLC组织中CD133与ECE的阳性表达率分别为51.9%(40/77)和45.5%(35/77).CD133和ECE的表达与淋巴结转移呈正相关(r=0.246,P＜0.05;r=0.339,P＜0.05);CD133和ECE的表达均与患者术后生存时间呈负相关(P＜0.05).CD133和ECE的表达与肿瘤大小、组织学类型和组织分化程度均无关(P＞0.05).CD133与ECE的表达之间呈正相关(r=0.249,P＜0.05).结论 肿瘤干细胞标志物CD133和ECE的表达与NSCLC的淋巴转移和预后密切相关,它们的高表达提示患者预后不良.     

HGF和TGF-β1在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的：探讨HGF和TGF-β1在非小细胞肺癌（ NSCLC）中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测73例非小细胞肺癌患者癌组织中及30例癌旁正常肺组织中HGF及TGF-β1的表达;分析HGF及TGF-β1表达情况及与临床病理参数之间的关系。结果73例肺癌组织中HGF的阳性表达率为67．1％,在30例癌旁正常组织的阳性表达率为16．7％,两者差异有显著性意义（ P＜0．05）;HGF的表达与肺癌淋巴结转移密切相关（P＜0．05）,而与病理组织类型及肿瘤的分化程度无显著相关（P均＞0．05）。73例肺癌组织中TGF-β1的阳性表达率为49．3％,在30例癌旁正常肺组织的阳性表达率为16．7％,两者比较差异也有显著性意义（ P＜0．05）;TGF-β1的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关（P均＜0．05）,而与病理组织类型无显著相关（P＞0．05）。经Spearman相关分析, HGF与TGF-β1在NSCLC组织中的表达呈显著正相关（r＝0．340,P＜0．05）。结论在NSCLC中存在HGF与TGF-β1的高表达,两者的高表达可能促进了肿瘤的恶性增殖及淋巴结转移;联合检测HGF及TGF-β1对判断NSCLC恶性程度、转移潜能及预后有重要临床意义。     

转化生长因子-β1体外诱导气道上皮细胞向肌纤维母细胞转分化

目的探讨TGF-β1体外诱导气道上皮细胞表型向肌纤维母细胞转分化的可能性。方法TGF-β1（10μg/L）处理气道上皮细胞株16HBE-14o，显微镜下实时观察形态学变化，免疫染色方法检测E-cadherin，α-SMA和F-actin的表达，RT-PCR方法检测E-cadherin，α-SMA mRNA的表达。结果TGF-β1 10μg／L作用3d，气道上皮细胞株16HBE-14o失去正常的立方形，变得肥大，胞体拉长；上皮细胞特征性标志E-cadherin表达减弱，胞浆中出现肌纤维母细胞表型标志物α-SMA，F-actin聚合形成张力纤维沿着细胞长轴分布。结论本研究提示，气道上皮细胞在TGF-β1的作用下经历了表型改变向肌纤维母细胞转分化，可能作为肺肌纤维母细胞的一个新的来源，从而参与哮喘气道重塑、气道高反应性的发生发展。     

非小细胞肺癌肿瘤细胞的E-cadherin和vimentin蛋白表达及病理意义

目的 了解非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤细胞上皮-间质转化(EMT)情况,并探讨其病理意义.方法 用免疫组织化学方法检测143例NSCLC患者肿瘤细胞和44例患者癌旁支气管黏膜上皮细胞的上皮标志蛋白E-cadherin和间叶标志蛋白vimentin的表达情况,用SPSS 17.0统计软件分析上述蛋白表达与患者部分临床病理参数关系.结果 E-cadherin阳性表达率在肺癌细胞为52.4％,显著低于癌旁支气管黏膜上皮细胞的70.5％(P＜0.05),且癌细胞E-cadherin表达丢失与癌旁支气管黏膜上皮细胞表达丢失显著正相关(r=0.539,P＜0.05);在低分化腺癌为34.4％,显著低于高、中分化腺癌的61.7％ (P ＜0.05),在男性肺癌患者为43.2％,显著低于女性患者的64.5％(P＜0.05),但其表达与患者的年龄、吸烟状况、淋巴结转移、组织学类型无显著相关关系(P＞0.05).Vimentin阳性表达率在肺癌细胞为36.4％,显著高于癌旁支气管上皮细胞的20.5％ (P ＜0.05),且癌细胞vimentin表达与癌旁支气管黏膜上皮细胞表达显著正相关(r =0.814,P＜0.05);在低分化腺癌为62.5％,显著高于高、中分化腺癌的30.0％ (P ＜0.05),但其表达与患者的性别、年龄、吸烟状况、淋巴结转移、组织学类型无显著相关关系(P＞0.05).E-cadherin与vimentin蛋白表达无显著相关关系(r=0.108,P＞0.05).结论 EMT现象存在于NSCLC,且在低分化腺癌表现尤为明显.     

乳腺癌间质成纤维细胞α-SMA表达的意义

目的 探讨乳腺癌间质成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-CSMA)在乳腺癌浸润机制中的作用以及与乳腺癌预后的关系.方法 通过免疫组化的方法检测α-SMA在乳腺癌及正常乳腺组织间质中的表达,结合5年随访资料分析α-SMA表达与浸润性导管癌预后的关系.结果 α-SMA在原位癌间质成纤维细胞和早期浸润性导管癌表达阳性率分别为12.5%(2/16),42.9%(9/21),两者差异有统计学意义(P＜0.05);α-SMA在浸润性导管癌间质与原位癌及早期浸润癌表达差异均有统计学意义(P＜0.01).在浸润性导管癌中,α-SMA在Ⅲ期、Ⅳ期表达阳性率高于Ⅰ期、Ⅱ期,差异有统计学意义(P＜0.05).对68例浸润性导管癌进行生存分析,α-SMA表达阴性组5年生存率高于α-SMA表达阳性组,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 α-SMA与乳腺癌浸润机制有一定关系,可能是影响乳腺癌预后的因素之一.     

食管间质成纤维细胞与食管癌细胞相互作用的体外研究

目的 体外研究不同类型食管间质成纤维细胞与癌细胞株间接接触后其基因及生物学特性的改变.方法 检测人食管正常间质成纤维细胞(NFs)、不典型增生间质成纤维细胞(AFs)及癌相关纤维母细胞(CAFs)与癌细胞株间接相互接触前后的波形蛋白(Vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β(TGF-β1)、人肝细胞生长因子(HGF)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9 mRNA及食管癌细胞株的增殖细胞核抗原(PCNA) mRNA,并与食管癌细胞株进行侵袭实验.结果 从NFs到AFs再到CAFs,Vimentin mRNA的表达无差别,α-SMA、TGF-β1、HGF、MMP2及MMP9 mRNA的表达逐渐增强.在与食管癌细胞株间接接触后,NFs及AFs的α-SMA、TGF-β1、HGF、MMP2及MMP9 mRNA表达均上调,且差异有统计学意义(P＜0.05),而CAFs的相应mRNA表达无明显变化.食管癌细胞株的PCNA mRNA在与NFs接触后,无变化;而与AFs和CAFs接触后,PCNA mRNA表达明显上调.结论 食管癌细胞与食管间质成纤维细胞可影响对方的增殖活性及侵袭特性.     

UUO模型大鼠肾间质纤维化动态进展及α-SMA、TGF-β1和VDR表达变化

目的 观察单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾小管间质纤维化动态进展,研究该病理过程中肾脏纤维化相关蛋白表达的变化.方法 32只清洁级SD大鼠随机分为假手术组(n=16)和UUO模型组(模型组,n=16).两组大鼠分别于术后(模型组建模后)第2、5、9、14天分批(n=4)处死,留取手术侧(模型组梗阻侧)肾脏组织.分别采用HE和Masson染色、免疫组织化学染色及Western blotting等方法,评价肾小管间质纤维化损伤程度并检测肾脏组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、维生素D受体(VDR)及转化生长因子β1(TGF-β1)等相关蛋白的表达.结果 肾脏组织形态学观察显示,随着输尿管梗阻时间的延长,肾小管间质纤维化程度逐步加重.免疫组织化学染色显示,模型组大鼠建模后各时间点肾间质α-SMA和FN阳性面积百分比均显著高于假手术组(P＜0.05),且随着梗阻时间的延长逐渐升高,至建模后第14天时达到高峰.Western blotting分析表明,模型组大鼠建模后各时间点α-SMA和TGF-β1相对表达量均显著高于假手术组(P＜0.05),而VDR相对表达量显著低于假手术组(P＜0.05);建模后第2天,模型组大鼠肾脏组织α-SMA相对表达量已显著增加;建模后第14天,模型组α-SMA和TGF-β1相对表达量分别增高至假手术组的12.7倍和8.8倍,而VDR相对表达量下降至假手术组的3%.结论 UUO模型大鼠建模后第14天可出现显著的肾间质纤维化;建模早期肾间质中α-SMA表达增加提示肾间质成纤维细胞的活化;VDR表达的进行性减少提示其与肾间质纤维化有关.