锂恢复脆性X综合征小鼠模型的跳台行为及糖原合成酶激酶3β的活性

目的 探讨氯化锂治疗是否能改善Fmr1 基因敲除小鼠（ko鼠）学习跳台行为及糖原合成酶激酶3β（GSK3β）的活性。方法 采用30日龄的Fmr1 基因敲除小鼠（ko鼠）及同日龄的野生型小鼠（wt鼠）,分别用生理盐水（用药0）组;用药组：30mg/kg、60 mg/kg、90 mg/kg、120 mg/kg、200 mg/kg。观察用药后ko鼠及wt鼠分别在行为学跳台实验中的潜伏期和错误次数。 同时用免疫印迹观察ko及wt鼠的海马和皮层的GSK3β和磷酸化GSK3β（P-GSK3β）的表达。结果 与未治疗的wt鼠比较,未治疗的ko鼠跳台实验中的潜伏期时间短,错误次数增加,存在学习跳台障碍;免疫印迹实验结果：ko鼠P-GSK3β表达比wt鼠少。锂治疗能够恢复ko鼠的学习跳台行为及增加P-GSK3β的表达量。氯化锂最佳使用剂量30mg/kg和60 mg/kg。结论 锂能改善ko鼠的学习跳台能力,可能与锂改善的P-GSK3β的表达增加有关,对FMR1基因敲除小鼠有治疗作用。     

新生期小鼠七氟醚暴露对其青春期学习记忆及海马组织髓鞘损伤的影响

目的 探究新生期小鼠七氟醚暴露对其青春期学习记忆的影响及其相关机制.方法 6日龄C57BL/6小鼠随机分为对照组(CON组)、七氟醚组(SEVO组)、对照+氯化锂组(LiCl组)、七氟醚+氯化锂组(SEVO+ LiCl组).SEVO组为3％七氟醚连续暴露3d(第6～8天),每天1次,每次2 h,CON组为60％氧气对照,LiCl组为60％氧气暴露前30 min腹腔注射GSK3β抑制剂氯化锂(100 mg/kg),SEVO+LiCl组为七氟醚暴露前30 min腹腔注射氯化锂(100 mg/kg).新物体识别实验和Y迷宫实验检测小鼠第30～32天学习记忆功能;Western blot检测小鼠海马组织髓鞘碱性蛋白(MBP)、β-catenin蛋白表达及pGSK3β/GSK3β比值变化.结果 行为学实验结果显示,SEVO组小鼠识别指数和新臂探索次数百分比均低于CON组(P＜0.05).氯化锂预处理后,SEVO+ LiCl组小鼠识别指数和新臂探索次数百分比较SEVO组升高(P＜0.05),学习记忆功能改善.Western blot结果显示,SEVO组小鼠海马组织MBP蛋白、β-catenin蛋白表达及pGSK3β/GSK3β比值均低于CON组(P＜0.05),氯化锂预处理后,与SEVO组比较,SEVO+ LiCl组小鼠海马组织MBP蛋白、β-catenin蛋白表达增加,pGSK3β/GSK3β比值升高(P＜0.05).结论 新生期小鼠七氟醚暴露致青春期学习记忆功能受损,可能与抑制GSK3β/β-catenin信号通路中GSK3β(Ser9)磷酸化导致的海马组织髓鞘损伤有关.     

Fmr1基因敲除小鼠耳蜗的GABAα1受体的表达

目的 对4周龄Fmr1基因敲除小鼠耳蜗的GABAα1受体表达进行观察,探讨耳蜗GABAα1受体的表达是否受FMRP的影响.方法 使用PCR技术对Fmr1基因敲除小鼠鉴定后,对4周龄的Fmr1基因敲除小鼠和野生型小鼠进行耳蜗的GABAα1受体免疫组织化学的表达观察,数据采用多因素方差分析处理.结果 耳蜗HE染色结果:4周龄组KO鼠较WT鼠形态学观察无差异.4周龄KO小鼠的耳蜗中GABAα1受体表达的平均阳性细胞数均低于WT小鼠,P＜0.01,差异具有统计学意义.结论 GABAα1受体表达的降低可能与FMR1基因KO小鼠听源性惊厥发病有关.     

Fmr1基因敲除小鼠耳蜗的GABAa1受体的表达

目的 对4周龄Fmr1基因敲除小鼠耳蜗的GABAa1受体表达进行观察,探讨耳蜗GABAa1受体的表达是否受FMRP的影响。方法使用PCR技术对Fmr1基因敲除小鼠鉴定后,对4周龄的Fmr1基因敲除小鼠和野生型小鼠进行耳蜗的GABa1受体免疫组织化学的表达观察,数据采用多因素方差分析处理。结果耳蜗HE染色结果：4周龄组KO鼠较WT鼠形态学观察无差异。4周龄KO小鼠的耳蜗中GABAa1受体表达的平均阳性细胞数均低于WT小鼠,P〈0.01,差异具有统计学意义。结论GABAa1受体表达的降低可能与FMR1基因KO小鼠听源性惊厥发病有关。     

βB2晶体蛋白基因敲除小鼠模型的建立

目的:建立βB2晶体蛋白基因敲除小鼠模型.方法:采用美国iGTL实验室的技术构建打靶载体,建立基因敲除小鼠模型.采用PCR对小鼠基因型进行鉴定,Western印迹法对晶体蛋白的表达进行鉴定.结果:PCR成功检测出3种基因型;纯合子基因敲除的小鼠未检测到βB2晶体蛋白的表达.结论:成功构建了βB2晶体蛋白基因敲除的小鼠模型.     

β-连环素及相关蛋白在脂多糖致急性肺损伤小鼠气道上皮的表达

目的研究脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）致小鼠急性肺损伤（acute lung injury，ALI）时β-连环素（-βcatenin，-βcat）在气道上皮细胞的表达变化及其意义。方法在建立LPS气管注射致小鼠急性肺损伤模型基础上，应用免疫组织化学染色检测-βcat、糖原合成酶激酶3-β（GSK3-β）在气道上皮的表达；应用Western blot检测肺组织内蛋白激酶C（PKC）、GSK3-β、磷酸化GSK3-β（P-GSK3-β）以及-βcat蛋白的表达。结果免疫检测显示，与正常组小鼠相比，LPS致急性肺损伤的小鼠气道上皮中，胞膜上-βcat及胞质内GSK3-β蛋白含量均明显降低（均P〈0.05）；Western blot检测显示，肺组织内PKC、P-GSK3-β及-βcat蛋白含量均较正常组小鼠明显升高（均P〈0.05），而GSK3-β蛋白含量显著下降（P〈0.05）。结论由LPS所致的小鼠ALI，一方面引起胞膜上行使连接功能的-βcat含量显著下降；另一方面可能通过PKC激活、GSK3-β磷酸化失活，导致胞质内-βcat含量的增加，使-βcat转入核内并与转录因子结合，启动Wnt途径靶基因转录，从而在气道上皮的损伤修复中发挥重要作用。     

跳台实验训练后 FMR1基因敲除小鼠学习记忆与细胞外信号调节激酶1／2的关系

目的：探讨跳台实验训练后FMR1基因敲除（ KO）小鼠学习记忆与海马CA1、CA3区细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）信号通路的关系。方法将20只4周龄FVB近交系KO及20只野生型（WT）小鼠分为KO组和WT组。利用跳台实验观察各组小鼠被动学习记忆能力,并通过Western blot检测海马CA1、CA3区ERK1／2及p－ERK1／2的表达。结果跳台实验第1天KO组的潜伏期较WT组短,错误次数较WT组多。跳台实验第2天KO组的潜伏期较WT组短,错误次数较WT组多。 Western blot结果显示跳台后KO组海马组织CA1区p－ERK1／2表达增加,与WT组比较差异有统计学意义（ P＜0.05）;跳台后KO组海马CA3区p－ERK1／2表达虽有增加,但与WT组比较,差异无统计学意义;跳台后KO组海马组织CA1及CA3区ERK1／2的表达与WT组比较差异无统计学意义。跳台后KO组和WT组ERK1／2及p－ERK1／2的表达与跳台前比较差异无统计学意义。结论 FMR1基因敲除小鼠学习记忆障碍与海马p －ERK1／2的异常表达有关。     

Fmr1基因敲除小鼠脏器重量和脏器系数的比较分析

目的 通过对Fmr1基因敲除小鼠雌雄两性和FVB小鼠的脏器重量和脏器系数进行比较分析,了解其脏器重量的差异,探讨Fmr1基因对动物生长发育等方面的影响.方法 分别测定Fmr1基因敲除小鼠雌雄两性和FVB小鼠内脏器官的绝对重量和脏器系数,并进行统计学处理和分析.结果 相同年龄的Fmr1基因敲除小鼠雄性的体重、心、肺、肝和肾的绝对重量均极显著的大于雌性(P＜0.01).雌雄间脏器系数除肾脏(P＜0.05)和脑(P＜0.01)外,其余无显著差异.与FVB小鼠比较,Fmr1基因敲除小鼠心脏较轻(P＜0.01),肾脏(P＜0.01)、体重和脑较重(P＜0.05).脏器系数肾脏较大(P＜0.01),心脏(P＜0.01)、脑和脾(P＜0.05)较小.结论 Fmr1基因可影响动物的某些脏器重量和脏器系数.     

Fmr1基因敲除雄性小鼠生长指标的变化

目的对出生后0~56d的清洁级FVB小鼠和Fmr1基因敲除雄性小鼠的体重和体长指标进行分析比较,同时比较出生后28d的睾丸大小变化。方法挑选10周龄FVB小鼠和Fmr1基因敲除小鼠各20只(雌、雄各半),采取1∶1同居,全同胞兄妹近交繁殖,测定雄性子代生长发育指标,进行统计分析。结果出生后0~56d清洁级Fmr1基因敲除雄性小鼠体重与体长的增长与FVB小鼠差异无统计学意义(t=0.93,t=1.24,P>0.05),但出生后28d的FVB小鼠和Fmr1基因敲除雄性小鼠睾丸大小差别有统计学意义(t=4.12,P<0.05)。结论 Fmr1基因敲除不影响雄性小鼠正常的体重和体长的发育,但出生后28d的Fmr1基因敲除小鼠有巨睾征。     

Fmr1基因敲除小鼠血清雌性激素含量的比较研究

目的 测定不同周龄和超排前后雌性Fmr1基因敲除FVB小鼠和背景FVB小鼠血清生殖激素雌二醇(E2)、孕酮(P)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)含量,比较不同周龄和不同状态下敲除基因动物的血清性激素水平,研究敲除基因对动物的发育和生殖生理等方面的影响.方法 用放射免疫分析法测定上述动物不同周龄和超排前后血清E2、P、LH和FSH的含量,测定Fmr1基因敲除小鼠不同周龄时的超排卵数,进行统计学分析.结果 6周龄的雌性Fmr1基因敲除小鼠与FVB小鼠比较,LH、FSH值差异无显著性(P＞0.05),E2的P值差异有显著性(P＜0.05).10周龄的两组动物间血清生殖激素水平和超排卵数均差异无显著性(P＞0.05).10周龄Fmr1基因敲除小鼠的超排卵数与6周龄动物比较差异有显著性(P＜0.05).结论 敲除Fmr1基因对动物雌性激素的分泌有影响,该基因与动物的生殖生理有一定的关联.     

脑灵汤及其萃取物对脆性X综合征的作用及机制的研究

目的:研究脑灵汤及其萃取物对脆性X综合征的作用。方法:选择Fmr1基因敲除小鼠50只,其中空白组、溶媒组、挥发油组(A组)、皂甙组(B组)、水溶物质组(C)组各10例,空白组使用健康的Fmr1基因敲除小鼠,其他四组选用抑制GSK-3建模,A、B、C组分别使用脑灵汤萃取的挥发油、皂甙和水溶物进行颈后肌肉注射治疗。比较五组小鼠的行为学结果。结果:水迷宫、AGS test及旷场实验中观察组3组小鼠表现虽然比对空白组有一定的差距,但较溶媒组出现了较明显的改善。结论:脑灵汤及其萃取物对小鼠抑制GSK-3模型的脑功能恢复有一定的疗效。     

AT2受体基因敲除后对小鼠肾脏中TGFβ表达的作用

目的:探讨血管紧张素Ⅱ2型(AT2)受体基因敲除后对肾组织中转化生长因子β(TGFβ)的作用,揭示AT2受体基因缺失后导致肾脏损伤的机制。方法:检测了3～24月龄野生型(AT2 / )和AT2受体基因敲除(AT2-/-)两种小鼠血浆中血管紧张素Ⅱ活性,以及肾组织中血管紧张素Ⅱ1型(AT1)受体、TGFβ和纤维连接蛋白(FN)的基因表达,并观察了12～21月龄的AT2-/-小鼠经过AT1受体拮抗剂缬沙坦治疗(30mg/kg/日)3个月后肾组织中TGFβ和FN的mRNA表达改变。结果:(1)随着小鼠月龄的增长,在21和24月龄时,AT2-/-小鼠血浆中血管紧张素Ⅱ的活性显著高于同龄AT2 / 小鼠。(2)在15～24月龄时,AT2-/-小鼠肾组织中AT1受体、TGFβ和FN的mRNA表达明显增强,显著高于同龄的AT2 / 小鼠和3月龄的AT2-/-小鼠,而在AT2 / 小鼠各月龄组中,肾组织中AT1受体、TGFβ和FN的mRNA表达水平则未见明显改变。(3)12～21月龄的AT2-/-小鼠经AT1受体拮抗剂缬沙坦治疗后,肾组织中TGFβ和FN的mRNA表达水平与同龄未治疗的AT2-/-小鼠比较有显著降低。结论:AT2受体基因敲除后导致的肾脏损伤可能与AT1受体的功能增强,以及引起的TGFβ表达增强、细胞外基质产生增多有关。     

TNFR2基因敲除小鼠H22移植瘤生长特点和Treg数量与功能检测

目的 观察tmTNF-α/TNFR2信号轴对荷瘤鼠肿瘤生长影响及其机制.方法 采用Western blot检查H22荷瘤鼠肿瘤微环境中Treg细胞TNFR1及TNFR2的表达.TNFR2敲除BALB/c小鼠和野生型鼠各10只,在TNFR2敲除的BALB/c小鼠皮下接种H22肝癌细胞株,观察肿瘤直径及肿瘤微环境中Treg的募集数量,同时以野生型小鼠做对照.用tmTNF-α刺激Treg细胞,ELISA检测上清IL-10和TGF-β的含量.结果 荷瘤鼠微环境中Treg细胞TNFR2表达明显高于野生型小鼠脾脏Treg细胞(P＜0.05),而TNFR1表达未见明显变化;TNFR2基因敲除鼠肿瘤直径明显低于野生型小鼠(P＜0.05),且肿瘤微环境中Treg细胞数量也明显少于野生型小鼠(P＜0.05).在体外tmTNF-α可以促进Treg细胞产生IL-10和TGF-β(P ＜0.05).结论 TNFR2基因敲除小鼠肿瘤生长减缓,肿瘤局部微环境中Treg细胞减少,同时tmTNF-e能够刺激Treg细胞释放抑炎因子IL-10和TGF-β,增强其免疫抑制功能.     

利脉胶囊对小鼠学习记忆的影响

目的观察利脉胶囊对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍及正常小鼠空间学习记忆的影响。方法采用跳台实验观察利脉胶囊(140mg/kg ig qd×14)对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的改善作用,以触电潜伏期及单位时间内错误次数作为学习记忆成绩;采用Morris水迷宫实验观察利脉胶囊(140mg/kg,ig qd×20)对正常小鼠空间学习记忆的影响,以定位航行实验小鼠逃避潜伏期及空间探索实验小鼠经过目标平台次数作为学习记忆成绩。结果①跳台试验。第1d跳台训练,利脉胶囊组3m in内跳台错误次数少于模型组(P<0.01),而和正常组无显著性差异(P>0.05)。第2d跳台检测,东莨菪碱模型组触电潜伏期较正常对照组明显缩短;利脉胶囊治疗组触电潜伏期显著长于模型组(P<0.01),而与正常对照组接近,5m in错误次数有减少趋势。②水迷宫试验。利脉胶囊治疗组逃避潜伏期小于正常组,经过目标平台次数有增加趋势。结论利脉胶囊对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍有一定的改善作用,并具有一定的促智作用。     

条件性胰岛β细胞CASK基因敲除小鼠的构建及鉴定

目的：构建条件性胰岛β细胞钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶（calcium/calmodulin?dependent serine protein kinase,CASK）基因敲除小鼠,为研究CASK基因在糖尿病发生中的机制提供动物模型。方法：将CASKloxp/- 雌鼠与CASKloxp/Y雄鼠杂交,获得基因型为CASKloxp/loxp雌鼠、CASKloxp/Y雄鼠;再让条件性胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶雄鼠与CASKloxp/loxp雌鼠杂交获得CASKloxP/YMIP?Cre雄鼠和CASKloxP/-MIP?Cre雌鼠。CASKloxP/YMIP?Cre基因型小鼠即为本实验所需要构建的模型小鼠。小鼠生后1~2周剪尾,通过PCR鉴定小鼠基因型,4~5周龄时腹腔注射他莫昔芬诱导Cre重组酶表达后,利用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹技术验证CASK基因敲除效果。结果：从引进这两种小鼠开始,繁殖10个月,共获得基因型为CASKloxP/YMIP?Cre的雄鼠28只,PCR 结果证实小鼠基因型符合CASKloxP/YMIP?Cre。实时荧光定量PCR、蛋白质印迹结果显示CASKloxP/YMIP?Cre小鼠胰岛CASK表达量明显下降。结论：利用 Cre/loxp系统,成功构建了条件性胰岛β细胞CASK基因敲除小鼠,为在动物水平研究CASK基因在糖尿病发病机制中的作用提供了研究平台。     

姜黄素在阿尔茨海默病中对炎症以及神经元的保护机制研究

目的:通过观察姜黄素治疗后阿尔茨海默病炎症及神经元的变化,初步探讨姜黄素在该疾病中对炎症以及神经元的保护机制。方法:将3月龄APP/V717转基因小鼠及C57BL/6小鼠随机分为C57BL/6野生鼠对照组、姜黄素治疗组(APP/V717转基因小鼠),转基因鼠对照组(APP/V717转基因小鼠)各10只。其中C57BL/6野生鼠对照组和转基因鼠对照组喂养正常的鼠粮,姜黄素治疗组连续喂养含姜黄素的鼠粮9个月(姜黄素按600ppm/d加入到鼠粮中)。喂养后通过水迷宫测试检测小鼠的学习记忆能力;Nissl染色观察小鼠神经细胞的变化;Western blot检测炎症因子IL-1β、TNF-α及凋亡相关的蛋白Bax/Bcl-2的表达;TUNEL法观察小鼠海马区的细胞凋亡情况。结果:1正常鼠粮和含姜黄素鼠粮喂养小鼠体重未发现明显差异;2C57BL/6野生鼠对照组的潜伏期为(21.71±8.69)s,姜黄素治疗组的潜伏期为(25.12±4.28)s,而转基因对照组小鼠的潜伏期为(44.28±8.74)s,姜黄素治疗组小鼠的潜伏期明显低于转基因小鼠,差异有统计学意义(P<0.05);3Nissl染色发现姜黄素治疗组小鼠的神经元细胞与野生型小鼠相似,而转基因小鼠神经元形态不完整,仅有散在的尼氏小体;4IL-1β、TNF-α在转基因小鼠组中表达最高,野生型小鼠中最低,而转基因小鼠在姜黄素治疗后IL-1β、TNF-α的含量明显降低,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);5转基因小鼠的海马区发现较多凋亡的神经元,而在野生型小鼠中几乎未见凋亡神经元,姜黄素治疗组小鼠中见到少量散在的凋亡神经元;6转基因小鼠中Bax的表达明显高于野生型小鼠和姜黄素治疗组小鼠,而Bcl-2的表达量显著低于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素治疗阿尔茨海默病小鼠可以改善小鼠的认知功能,并且有效的减少炎症因子的产生、减少神经元的凋亡。     

Fmr1基因敲除对小鼠生长发育的影响

目的：Fmr1基因敲除对小鼠生长发育的影响.方法：挑选10周龄FVB小鼠和Fmr1基因敲除小鼠各20只（雌、雄各半）,采取1∶1同居,全同胞兄妹近交繁殖,测定子代生长发育指标,进行统计分析.结果：Fmr1基因敲除小鼠体质量与体长分别为：0 d,（1.25.4±0.21）g,（38.99±1.74）mm;21 d,（8.17±2.26）g,（122.81±11.42）mm;60 d,（22.93±2.93）g,（180.19±7.46）mm;FVB小鼠体质量与体长分别为：0 d,（1.33±0.23）g,（40.53±3.05）mm;21 d,（7.75±1.56）g,（118.73±7.85）mm;60 d,（21.11±1.99）g,（176.43±5.73）mm.两个品系的小鼠体质量与体长的增长差异无统计学意义（P〉0.05）.结论：Fmr1基因敲除不影响小鼠正常的生长发育.     

敲除Sirt3后激活自噬对阿尔茨海默病有保护作用

目的: 探究Sirt3在阿尔茨海默病（AD）发生发展中的作用及可能机制。方法: 体内实验以C57BL/6野生型小鼠和Sirt3基因敲除小鼠为对象,采用腹腔注射D-半乳糖联合脑定位注射β-淀粉样蛋白（Aβ）_1-40建立AD小鼠模型。莫里斯（Morris）水迷宫实验、自发活动开场实验和悬尾实验观察造模前后小鼠学习记忆和焦虑抑郁状态的改变,免疫荧光染色观察脑内海马区域Aβ沉积情况,蛋白质印迹法检测小鼠脑组织中自噬和凋亡相关蛋白表达。体外实验选小鼠皮层原代细胞作为对象,给予Aβ_1-40建立AD体外模型,MTT法检测细胞活性。结果: 体内实验结果显示,野生型小鼠诱发AD后平台潜伏期延长（P < 0.05）,穿越平台次数减少、目标象限停留时间缩短（均P < 0.05）,提示造模后小鼠的学习记忆能力下降;而Sirt3敲除能够缓解AD所致的学习记忆障碍（均P < 0.05）。相较于野生型小鼠,Sirt3基因敲除小鼠脑内海马区域的Aβ沉积减少（P < 0.05）,凋亡蛋白cleaved caspase 3表达减少（P < 0.05）。另外,野生型小鼠诱发AD后LC3-Ⅱ和P62蛋白表达增加（均P < 0.05）,提示自噬流受阻;而Sirt3基因敲除小鼠诱发AD后LC3-Ⅱ蛋白表达增加,P62蛋白表达减少（均P < 0.05）,提示自噬被激活。小鼠皮层原代细胞AD模型中,Sirt3基因敲除的细胞较野生型细胞死亡减少（P < 0.05）;加用自噬抑制剂氯喹后,Sirt3基因敲除的保护作用消失（P < 0.05）。结论: Sirt3敲除对于D-半乳糖联合Aβ_1-40诱发的AD有保护作用,这种保护作用可能与自噬流活化有关。     

LSS基因敲除小鼠的饲养、繁殖及基因型鉴定

探讨羊毛固醇合成酶(LSS)基因敲除鼠的繁育和基因型分析.将引进杂合子小鼠进行饲养并繁育,提取其基因组DNA,利用PCR反应扩增目的 基因片段,鉴定出小鼠的基因型;Westem blot分析并比较LSS基因敲除杂合子小鼠和野生型小鼠的肝脏、皮肤组织中LSS蛋白的表达情况.成功的繁育出LSS基因敲除小鼠,使用PCR鉴定其子代小鼠包括野生型(LSS+/+,Wt)、杂合子(LSS+/-),未出现纯合敲除小鼠;Western blot结果表明:相较于野生型小鼠,LSS基因敲除杂合子小鼠在肝组织和皮肤组织中表达LSS蛋白量少;杂合子敲除鼠的生存能力比野生型小鼠弱.获得LSS基因敲除小鼠,PCR鉴定小鼠基因型具有简单、稳定的优点.     

高脂饮食诱导APOE和LDLR基因敲除鼠AS斑块形成的分子病理学特征

目的 观察在高脂饮食务件下,载脂蛋白E(ApoE)和低度密度脂蛋白受体(LDLR)基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块形成的病理学特征与基质金属蛋白酶(MMP-2,9)和Mac-3表达水平.方法 用C57BL/6J小鼠普通饮食作对照,用ApoE基因敲除和LDLR基因敲除两种小鼠,每种分为普通饮食和高脂饮食两组,8只/组.连续喂养120d后,分离获得各组小鼠主动脉,用Masson染色,油红O染色法观察小鼠动脉粥样斑块病理形态学变化,用免疫组织化学检测AS斑块内炎症以及基质金属蛋白酶(MMP-2,9)表达水平,用免疫双荧光抗体法分析AS斑块巨噬细胞和平滑肌细胞内MMP-9表达的差异.结果 与普通饮食的基因敲除鼠比,高脂饮食的ApoE和LDLR基因敲除鼠的动脉粥样硬化斑块显著增大,炎性细胞增多,纤维帽中基质纤维成分减少,纤维帽形状变薄和大量中性脂滴沉积.其中,以ApoE基因敲除鼠的最为严重.AS斑块形成大小与Mac-3表达水平和炎症细胞增加呈正相关.斑块内MMP-9表达在巨噬细胞内占50%～70%,在平滑肌细胞内占30%.结论 高脂饮食可加重ApoE和LDLR基因敲除小鼠AS斑块形成和Mac-3表达及炎症细胞增加,MMPs水平亦相应增加,其病变呈现出不稳定性斑块特征.