瘦素对雄激素性脱发小鼠模型毛囊的影响

目的：确定瘦素对雄激素性脱发小鼠毛囊的影响。方法：40只雄性C57小鼠随机分组,空白组10只不予处理,余30只背部皮下注射丙酸睾酮5 mg/kg·d进行造模。造模成功后分为3组,继续给药4周：模型组（皮下注射丙酸睾酮）、米诺地尔组（注射丙酸睾酮+外用5%米诺地尔酊）、瘦素组（注射丙酸睾酮+重组小鼠瘦素）,比较生长期与休止期毛囊数量比值（A/T）,毛囊细胞增殖与凋亡情况及雄激素受体(AR)蛋白含量。结果：(1)米诺地尔组及瘦素组较模型组脱发面积缩小;(2)米诺地尔组与瘦素组较模型组的生长期/休止期毛囊数比值、Ki67表达均明显增加（均P＜0.05）,两者在米诺地尔组与瘦素组之间比较均无明显统计学差异（均P＞0.05）;(3)毛囊凋亡数量及AR水平在米诺地尔组与瘦素组间比较均无明显统计学差异（均P＞0.05）。结论：皮下注射瘦素对雄激素性脱发模型小鼠有明确治疗作用,且效果与外用5%米诺地尔溶液作用相当。     

柴胡皂苷A通过调节ERK/NF-κB信号通路减轻小鼠玫瑰痤疮样炎症反应

目的 探讨柴胡皂苷A(SSA)调节细胞外信号调节激酶(ERK)/核因子κB(NF-κB)信号通路对小鼠玫瑰痤疮样炎症反应的影响。方法 按照随机数字表法将小鼠随机分为Ct组、Model组、低剂量SSA组(SSA-L组，37.5 mg/kg)、高剂量SSA组(SSA-H组，75 mg/kg)、盐酸多西环素(DH)组(30 mg/kg)、重组小鼠表皮生长因子(rmEGF)组(ERK激动剂，15μg/kg)、SSA-H+rmEGF组(75 mg/kg+15μg/kg),每组12只。除Ct组外，其他组小鼠均需构建玫瑰痤疮模型，Ct组小鼠背部注射4次等量的PBS。造模24 h后，进行给药处理，1次/d,持续8周。观察各组小鼠皮损变化，并进行红斑程度评分及红斑面积测定；HE染色检测小鼠背部注射部位皮肤病理损伤程度；甲苯胺蓝染色检测小鼠背部注射部位皮肤肥大细胞浸润情况；免疫荧光染色检测小鼠背部注射部位皮肤中血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)的表达；ELISA实验检测小鼠背部注射部位皮肤中白细胞介素-6(IL-6)、S100钙结合蛋白A9(S100A9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达；Weste...     

度普利尤单抗对特应性皮炎模型小鼠TLR3表达的影响

目的 探讨皮下注射度普利尤单抗对特应性皮炎(AD)模型小鼠Toll样受体3(Toll-like recepter 3,TLR3)表达的影响。方法 将32只BALB/c小鼠(6周龄,24 g左右)随机分为对照(NC)组、AD组、度普利尤单抗10mg/kg组、25mg/kg组,每组8只。NC组小鼠两侧耳部应用无水乙醇涂抹,其余各组小鼠两侧耳部涂抹2 nmol/L卡泊三醇(MC903)擦剂,1次/d,重复14 d。2周造模结束后,度普利尤单抗组分别给予10 mg/kg和25mg/kg的度普利尤单抗皮下注射,2次/周。AD组、NC组则给以等体积生理盐水腹腔注射,4组小鼠均干预1周,再过1周后处死小鼠并采集组织。采用HE染色观察皮损病理学形态特征,甲苯胺蓝染色观察皮损肥大细胞数量,免疫组织化学及Western blot实验检测皮损中IL-4、IL-13Rα1、TLR3的蛋白表达情况。结果 AD组小鼠出现典型的特应性皮炎样皮损及相应的组织病理学改变,度普利尤单抗组观察到小鼠皮损较AD组红斑明显减轻,表皮增生程度减轻,炎症细胞浸润减轻等。与NC组相比,AD组的小鼠皮损组织中的IL-4、IL-13Rα...     

体外培养人毛乳头细胞中咖啡因抗雄激素作用的机制研究

目的:探讨咖啡因在体外培养人毛乳头细胞中抗雄激素作用的机制.方法:体外培养人毛乳头细胞经0.000 5%咖啡因及10 nmol/L睾酮单独及联合处理48 h后,通过碱性磷酸酶(AKP)染色、四甲基偶氮唑蓝(MTT)、流式细胞仪检测,并筛选10个基因通过RealtimePCR检测mRNA水平表达量.结果:0.000 5%咖啡因能对抗睾酮对毛乳头细胞的凋亡,促进增殖;顶部毛乳头细胞经睾酮处理后雄激素受体(AR)、Ⅱ型5α-还原酶(SRD5A2)、p53基因、凋亡信号受体FasR、糖原合成酶激酶(GSK)-3β、转化生长因子(TGF)-β2表达上调,加入咖啡因后可部分逆转睾酮的生理作用.阴部毛乳头细胞睾酮处理后p53、FasR等凋亡因子的表达下降,加入咖啡因可以进一步抑制细胞凋亡.结论:咖啡因在体外培养人毛乳头细胞中可能通过多条信号转导通路发挥抗雄激素作用.     

多西紫杉醇诱导鼠血管肉瘤细胞ISOS-1凋亡和抑制增殖的研究

目的探讨多西紫杉醇对鼠血管肉瘤细胞ISOS-1凋亡和增殖的影响。方法建立ISOS-1鼠血管肉瘤动物模型,20只移植瘤模型小鼠分为4组,每组5只,即①5mg/kg多西紫杉醇组;②10mg/kg多西紫杉醇组;③20mg/kg多西紫杉醇组;④对照组。静脉给予多西紫杉醇,每周1次。测定肿瘤体积,观察超微结构改变,并采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测组织细胞凋亡情况。结果多西紫杉醇剂量为5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg时,其瘤体积抑制率分别为71%、77%、79%,与对照组比较,可见到有意义的肿瘤增殖抑制效果(P<0.01);多西紫杉醇各剂量组超微结构观察,可见早期凋亡改变,ISOS-1细胞凋亡率均显著高于对照组(P<0.01)。结论多西紫杉醇具有诱导鼠血管肉瘤细胞ISOS-1凋亡和抑制其在小鼠体内增殖的作用。     

广嗣育麟汤对雷公藤多苷诱导的生精障碍大鼠模型生精功能改善的研究

目的观察广嗣育麟汤对生精障碍大鼠模型生精功能的影响,阐述其作用机制。方法选择雷公藤多苷(GTW)灌胃4周建立生精障碍模型,造模成功后将大鼠随机分为空白对照组、模型对照组和中药干预组,中药干预组采用广嗣育麟汤颗粒悬浆灌胃,空白对照组和模型对照组均采用去离子水灌胃,干预4周后观察各组大鼠一般状况、脏器系数、精液质量、血清性激素水平、睾丸组织病理改变、睾丸组织和生精细胞超微结构。结果中药干预组与模型对照组相比,大鼠的一般状态、附睾脏器系数、精液质量各项指标、卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌二醇(E_2)均有显著的改善,其差异均具有统计学意义(均P0.05或P0.01);形态学和超微结构方面,生精小管结构、排列比较正常,内含的生精细胞明显增多;变性、凋亡的生精细胞减少,内含的线粒体等细胞器明显增多。结论广嗣育麟汤可以有效提高生精障碍大鼠模型生精功能,其作用机制可能是通过改善血清内分泌环境、修复睾丸异常病理形态和超微结构来实现。     

氧化苦参碱对银屑病模型雌激素周期小鼠阴道上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨氧化苦参碱对银屑病模型雌激素周期小鼠阴道上皮细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用注射雌激素刺激小鼠阴道上皮组织增生的方法复制银屑病小鼠动物模型,同时给予不同剂量的氧化苦参碱干预,实验10 d 后,应用免疫组化法和末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术分别检测各组小鼠阴道上皮细胞细胞增殖性核抗原(PCNA)表达水平和凋亡情况.结果:与正常组相比,模型组PCNA 表达显著增加(P < 0.01),细胞凋亡指数明显增加(P < 0.01),氧化苦参碱80、40 和20mg/kg 组PCNA表达显著减少(P < 0.01),凋亡指数显著增加(P < 0.01).结论:氧化苦参碱对实验性银屑病具有保护作用,该作用可能与其降低表皮细胞PCNA 表达水平,促进表皮细胞凋亡有关.     

口服异维A酸治疗痤疮的临床疗效及实验室研究

目的 :　研究口服异维A酸对痤疮患者体内雄激素受体的影响及临床疗效观察 ,进一步为维A酸类药物治疗痤疮提供理论依据。方法 :　采用放射配体方法测定实验组 (A组 )与对照组 (B组 )外周血雄激素受体 (AR)水平及痤疮患者服药后AR水平。临床疗效与传统常规治疗疗效对比。结果 :　服药后雄激素受体水平 6 0 8± 4 6位点 /细胞 ,较服药前的 72 9± 5 3位点 /细胞明显降低 (P <0 .0 5 ) ,但受体与雄激素的亲和力无改变 ,血清睾酮水平也无明显差异。治疗组与对照组临床疗效观察有显著差异(P <0 .0 1)。结论 :　口服异维A酸能降低AR水平 ,从而影响痤疮发病的各个环节     

毛发疾病

952258 斑秃皮损性激素受体的检测/兰长贵//中华皮肤科杂志。-1995,28(2).-91～93 采用荧光素类固醇激素结合法对21例斑秃患者和16例正常人头皮组织雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和雄激素受体(AR)进行对照研究。结果病例组表皮基层PR阳性细胞率高于正常组(P<0.05),汗腺分泌部AR阳性细胞率显著低于正常组(P<0.01)。皮损毛囊外根鞘ER、PR显著增多(P<0.01),AR无变化,毛母质细胞ER、PR、AR阳性表达,而正常为阴性。毛乳头细胞ER、PR、AR均明显减少(P<     

雄激素受体RNA干扰质粒的构建及其对毛乳头细胞雄激素受体表达的抑制作用研究

目的:构建雄激素受体(androgen receptor,AR)RNA干扰的真核表达质粒,并将其转染人毛乳头细胞(dermal papilla cell,DPC)后观测其对AR表达的影响.方法:应用基因重组技术构建AR的RNA干扰质粒,经测序鉴定后以脂质体转染方法将质粒转染DPC,Western blot检测被转染细胞AR蛋白的表达.结果:成功构建了雄激素受体RNA干扰的真核表达质粒.将其转染了人DPC后,经Western blot证实AR RNA干扰质粒能使DPC细胞AR蛋白含量显著下降(P<0.05).结论:AR的RNA干扰质粒能抑制DPC内AR的表达,该实验为雄激素性脱发基因治疗的实验研究提供了必要的基础.     

The progress in molecular mechanism of androgenic alopecia

雄激素性秃发(AGA)的发病涉及多数雄激素信号转导通路.AGA 患者秃发区和胡须的毛乳头细胞Ⅱ型5α-还原酶的表达高于其他部位.雄激素受体(AR) 在AGA 患者毛乳头细胞的表达高于非脱发的患者.此外,AR 共激活因子Hic-5/ARA55 在雄激素敏感部位如AGA 的秃发区和胡须的毛乳头细胞高表达.Ⅱ型5α-还原酶、AR 和Hic-5/ARA55 的表达增强可上调AGA 秃发区毛乳头细胞对雄激素的敏感性.雄激素诱导毛乳头细胞分泌转化生长因子(TGF)-β1抑制角质形成细胞生长,提示TGF-β1作为生长抑制因子是AGA 发病的决定因素之一.TGF-β2 和DKK-1 亦是雄激素诱导的毛囊上皮细胞生长抑制剂.预计更多的发病递质将被发现,进一步揭示AGA 的发病机制并寻找更好的治疗靶点.     

痤疮患者皮损处雄激素受体的表达

目的:研究雄激素受体(AR)在寻常性痤疮患者皮损处的表达.方法:用免疫组化法对15例男性寻常性痤疮患者的皮损及20例正常对照的皮肤组织进行了雄激素受体的检测.结果:寻常性痤疮患者皮损的表皮角质形成细胞、毛囊的外毛根鞘细胞、皮脂腺细胞、毛囊角栓部位的角质形成细胞及皮脂腺周围浸润的炎性细胞均有雄激素受体的表达,其表达水平明显高于正常对照组(P<0.05).结论:雄激素受体表达水平增高可能参与了痤疮的发病过程.     

青蒿琥酯对小鼠玫瑰痤疮样炎症的作用观察

目的 观察青蒿琥酯对小鼠玫瑰痤疮样炎症的影响.方法 在25只7周龄BALB/c雄鼠背部皮下注射40μl抗菌肽LL-37,每12小时1次,共4次,制备玫瑰痤疮样小鼠模型,并将其随机等分为5组,每次注射LL-37后模型组给予生理氯化钠溶液灌胃,治疗组分别给予25、50、100 mg/kg青蒿琥酯溶液灌胃,阳性对照组给予30 mg/kg盐酸多西环素溶液灌胃;另取5只小鼠作为空白对照组,仅背部皮下注射4次纯水.首次注射LL-37后48 h观察各组皮损和红斑评分,取背部注射部位皮肤行HE染色,观察组织结构并计数炎症细胞数量,ELISA法检测皮损髓过氧化物酶(MPO)活性.结果 模型组皮损炎症反应明显,红斑评分(3.20±0.84)、炎症细胞计数(517.27±99.43)和MPO活性(0.57±0.08)均显著高于空白对照组(均P＜0.01),阳性对照组红斑评分(1.60±0.89)、炎症细胞计数(270.93±124.63)和MPO活性(0.40±0.05)均显著低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05、0.01、0.01).50和100 mg/kg青蒿琥酯组红斑评分分别是1.80±0.84和1.40±0.55,显著低于模型组(P＜0.05、0.01),炎症细胞计数分别为286.00±33.72和258.00±36.44,显著低于模型组(均P＜0.01),MPO活性分别是0.43±0.05和0.40±0.06,亦明显低于模型组(P＜ 0.05、0.01).50 mg/kg和100 mg/kg青蒿琥酯组红斑评分、炎症细胞计数和MPO活性与阳性对照组差异均无统计学意义.结论 青蒿琥酯能抑制小鼠玫瑰痤疮样炎症反应,以中、高剂量最为明显.     

镇心安神方对特应性皮炎样动物模型维生素D及丝聚蛋白表达的影响

目的探讨镇心安神方(ZXASF)对特应性皮炎(AD)样小鼠模型血清及皮肤组织1,25(OH)2-D3、维生素D受体及Filaggrin表达的影响。方法采用1-氯-2,4-二硝基苯(DNCB)反复刺激BALB/c小鼠背部皮肤,建立AD样动物模型。54只小鼠随机分为6组(正常对照组、模型组、维生素D组、ZXASF低、中、高剂量组),每组9只。造模14 d后,ZXASF低、中、高剂量组分别按含ZXASF生药量9.9 g/(kg·d)、18.18 g/(kg·d)及36.36 g/(kg·d)的颗粒水溶液灌胃,维生素D组灌服维生素D滴剂2000 IU/(kg·d),模型组及正常对照组灌服生理盐水0.1 mL/(10g·d),共治疗14 d,观察各组模型小鼠皮损面积及皮炎评分,ELISA检测模型动物血清1,25(OH)2-D3、维生素D受体及皮肤组织Filaggrin含量,HE染色观察皮损组织病理学变化,免疫组织化学检测皮肤组织FLG的表达。结果末次给药后模型组皮炎评分、皮炎面积均高于正常对照组(P<0.01),模型组皮肤组织病理学表现为角化过度、棘层肥厚、海绵形成、真皮层炎性细胞浸润,ZXASF低、中、高剂量组及维生素D组小鼠背部皮损的红斑、糜烂、渗液及结痂减轻,皮炎评分及皮损面积均低于模型组(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组血清1,25(OH)2D3、维生素D受体及皮肤组织Filaggrin含量均降低(P<0.05)。与模型组比较,ZXASF中剂量组血清1,25(OH)2D3、维生素D受体及皮肤组织Filaggrin含量升高(P<0.05),ZXASF低、高剂量组血清1,25(OH)2D3含量低于维生素D组(P<0.05),ZXASF中剂量组血清VDR含量高于维生素D组(P<0.05)。结论ZXASF可以改善AD样动物模型皮损,上调动物模型血清1,25(OH)2-D3、维生素D受体及皮肤组织Filaggrin的表达,以中剂量组作用最为显著。     

卡介菌多糖核酸调控miR-155/SOCS1轴治疗特应性皮炎小鼠的作用机制

目的探索卡介菌多糖核酸调控miR-155/SOCS1轴治疗特应性皮炎(AD)小鼠的作用机制。方法 BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、卡介菌多糖核酸低剂量(0.05 mL/kg)组、卡介菌多糖核酸中剂量(0.1 mL/kg)组、卡介菌多糖核酸高剂量(0.15 mL/kg)组、地塞米松(0.5 mg/kg)组。除对照组外,其余组小鼠制备AD小鼠模型,分组处理后,观察各组小鼠耳部皮炎症状,并进行评分;苏木精-伊红染色(HE)检测各组小鼠耳组织病理情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、免疫球蛋白E(IgE)水平;实时荧光定量(qRT-PCR)检测各组小鼠耳组织miR-155、SOCS1表达;免疫印迹法检测各组小鼠耳组织SOCS1表达。结果与对照组比较,模型组小鼠耳组织出现特应性皮炎症状,皮炎评分、IgE及TNF-α、IL-6、miR-155水平显著升高(P0.05),SOCS1表达降低(P0.05)。与模型组比较,卡介菌多糖核酸低、中、高剂量组及地塞米松组小鼠耳组织皮炎症状减轻,皮炎评分、IgE及TNF-α、IL-6、miR-155水平降低(P0.05),SOCS1表达升高且卡介菌多糖核酸各剂量之间有剂量依赖性(P0.05)。卡介菌多糖核酸高剂量组与地塞米松组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论卡介菌多糖核酸可下调miR-155表达、上调SOCS1表达,抑制炎症反应,改善AD小鼠的皮炎症状。     

太田痣患者真皮黑素细胞免疫组化研究

目的：探讨太田痣的发病机制。方法：对10例太田痣患者石腊标本，进行免疫组织化学和银染色。结果：10例患者中S100、银染色和MCIR均为阳性，其中：HMB45阳性6例，C—hit5例，雄激素受体(AR)4例，孕激素受体(PR)3例，雌激素受体(ER)2例。结论：太田痣的黑素细胞具有色素细胞及早期胚胎细胞的特性，黑素细胞存在性激素受体。     

雄激素受体基因腺病毒载体的构建及对人毛乳头细胞增生的影响

目的检测未转染的毛乳头细胞第3、6、9代雄激素受体(androgen receptor,AR)蛋白的表达;构建及鉴定AR基因过表达的腺病毒载体,将其转染进入人毛乳头细胞(dermal papilla cell,DPC),探讨AR基因对人DPC增生的影响。方法应用基因同源重组获得p Adeasy-Adtrack-AR重组腺病毒质粒,腺病毒感染人DPC,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测AR的表达,应用CCK-8法检测人DPC的增生。结果未转染前,DPC的AR表达量随着传代逐渐降低;成功构建了AR基因腺病毒载体,腺病毒转染人DPC 48 h后AR蛋白高表达,腺病毒转染24、48、72 h对人DPC的增生无影响。结论人DPC过表达AR基因模型为进一步研究雄激素性脱发提供了一定的实验基础。     

“菟丝子-枸杞子”药对修复生精功能障碍大鼠血睾屏障的机制研究

目的观察"菟丝子-枸杞子"药对对雷公藤多苷(GTW)诱导的生精障碍大鼠模型血睾屏障的影响,初步探讨其改善模型大鼠生殖功能的机理。方法将56只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组和药对组。以GTW 40mg/(kg·d)灌胃4周构建SD大鼠生精障碍模型,成模后阳性对照组每日给予左卡尼汀悬液[0.2g/(kg·d)]灌胃,药对组每日给予菟丝子-枸杞子悬液[6g/(kg·d)]灌胃,治疗4周后检测各组大鼠的精子质量、生殖激素和抑制素B、附睾肉毒碱,观察支持细胞形态,并采用Western blot检测睾丸组织血睾屏障相关蛋白的表达,分析比较不同组间的差异。结果药对组大鼠精子浓度[(39.17±13.75)×10~6/mL]高于模型对照组[(28.23±8.05)×10~6/mL],其差异具有统计学意义(P<0.05)。药对组[(29.92±5.25)%]和左卡尼汀组精子活动率[(29.31±6.33)%]均显著高于模型对照组大鼠[(20.13±6.63)%],其差异具有统计学意义(P<0.01);药对组和左卡尼汀组大鼠卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)和泌乳素(PRL)与模型对照组相比均显著降低,附睾肉毒碱含量显著升高,其差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。药对组与模型对照组比较,支持细胞结构和形态改善,生精小管结构、排列较为正常,生精细胞明显增多,形态改善;药对组Occludin、ZO-1和connexin 43的蛋白表达比模型对照组显著增多,其差异具有统计学意义(P<0.05);β-catenin和N-cadherin的蛋白表达也有不同程度增高,虽然未见明显差异,但增高趋势明显。结论 "菟丝子-枸杞子"药对能够有效减轻GTW造成的生精功能障碍,其机制可能与修复血睾屏障损伤有关。     

内皮素3/内皮素受体B对A375细胞NF-KB/Bcl-2相关蛋白A1抗凋亡通路的调节北大核心CSCD

目的研究内皮素3(ET-3)对人恶性黑素瘤(MM)A375细胞核因子(NF)-κB/Bfl-1抗凋亡通路的调节。方法用ET-3(100 nmol/L)刺激A375细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率。RT-PCR及Western印迹测定不同浓度ET-3(0、1、10、100 nmol/L)及其与内皮素受体B(ETRB)阻断剂BQ788联合干预A375细胞后,Bfl-1在mRNA和蛋白质水平的表达。Western印迹检测相同条件干预下磷酸化NF-κB(pNF-κB)的蛋白表达。结果 ET-3可以降低A375细胞的凋亡率(F=10.68,P<0.05)。ET-3对A375细胞Bfl-1 mRNA和蛋白表达水平的影响呈浓度依赖性上调,BQ788明显阻断ET-3上调Bfl-1的效应(P<0.01)。Western印迹检测结果显示,ET-3显著上调pNF-κB的表达(P<0.05),BQ788干预下其表达水平降低,接近对照组,ET-3(100 nmol/L)+BQ788组与100 nmol/L ET-3组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ET-3/ETRB通过激活NF-κB/Bfl-1抗凋亡通路抑制A375细胞凋亡。     

中波紫外线诱导小鼠表皮细胞Bax和Bcl-2的表达

目的:探讨中波紫外线(UVB)对正常小鼠表皮细胞凋亡及凋亡相关基因Bax和Bcl-2的调控.方法:将正常ICR小鼠随机分为对照组(假照射组)、不同剂量紫外线照射后2 h组.1500 J/m2紫外线照射不同时间组.采用SP法染色检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的蛋白表达.结果:小鼠皮肤用不同剂量紫外线照射2 h后,Bax的表达随紫外线剂量增大而变大,Bcl-2表达减少,呈剂量依赖性.用1500 J/m2紫外线照射小鼠后,Bax和Bcl-2的表达与紫外线照射后时间有关.结论:中波紫外线照射小鼠皮肤后,Bax表达上调,Bcl-2表达下调,促进小鼠紫外线损伤的表皮细胞凋亡.