δ-氨基酮戊酸光动力学疗法治疗皮肤病的研究进展

δ-氨基酮戊酸光动力学疗法是一种非创伤性局部治疗技术,可特异性杀死病变细胞.近年研究表明,该疗法对靶细胞某些生物学特征的影响是重要作用机制之一.除非色素细胞性皮肤恶性肿瘤外,δ-氨基酮戊酸光动力学疗法的适应症逐渐扩展至癌前病变、病毒疣、痤疮、结缔组织病、光化性疾病等范围.升高温度、促溶剂、金属离子螫合物、电离子导入、脂质体载体等因素可促进其疗效.     

氨基酮戊酸光动力治疗尖锐湿疣局部免疫反应的研究

目的 探讨氨基酮戊酸光动力(ALA-PDT)治疗尖锐湿疣的局部免疫反应.方法 分别采用体外细胞共培养体系和在体免疫组化方法进行研究.将前期建立的稳定表达人乳头瘤病毒16E7蛋白HaCaT细胞株即HPV 16E7/HaCaT细胞作为HPV感染角质形成细胞模型,将ALA-PDT处理后的HPV 16E7/HaCaT细胞与外周血单一核细胞(PBMC)经Transwell小室共培养,3h后观察PBMC的趋化情况;同时采用免疫组化方法研究10例尖锐湿疣患者光动力前及光动力后1、2、3、48 h时,皮损中CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD68+巨噬细胞的数量及CD4+/CD8+T细胞数比值变化情况.结果 与ALA-PDT处理后的HPV 16E7/HaCaT细胞共培养3h后,PBMC有明显趋化现象.临床标本免疫组化结果显示,48 h时CD4+T细胞、CD8+T细胞数量及其比值明显升高(P＜0.05),而CD68+巨噬细胞在3h及48 h均升高(P＜0.05).结论 ALA-PDT治疗尖锐湿疣的过程中,可诱导机体产生局部抗病毒免疫反应.     

应用动物模型研究氨基酮戊酸光动力治疗皮肤病的研究进展

氨基酮戊酸光动力疗法是一种无创、有效且不良反应和毒副作用少的治疗技术,已广泛地应用于皮肤科领域多种疾病的治疗.动物模型是研究氨基酮戊酸光动力疗法治疗疗效及机制的重要方法.近年来,通过应用皮肤肿瘤、光老化、痤疮、瘢痕以及银屑病的动物模型,优化了氨基酮戊酸光动力疗法治疗参数,进一步阐明了氨基酮戊酸光动力疗法的治疗机制,为氨基酮戊酸光动力疗法增敏剂的开发和应用提供了理论基础.     

氨基酮戊酸光动力疗法对浮游表皮葡萄球菌抑制作用的体外研究

目的 观察氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)对浮游表皮葡萄球菌的影响,探讨ALA最适浓度和最佳孵育时间.方法 实验分3组,第1组,50 mmol/L ALA与细菌37℃避光孵育3、5、8、12、16、18、20、24h;第2组,不同浓度ALA(10、20、30、40、50 mmol/L)与细菌37℃避光孵育16h;第3组,单纯胰蛋白陈大豆肉汤培养基(TSB)(不加ALA)与细菌37℃避光孵育24h.3个组均通过激光共聚焦显微镜( CLSM)检测不同时间点原卟啉Ⅸ(PpⅨ)的荧光强度并做定量分析.同时对第1组进行不同剂量(30、50、70、90、100 J/cm2)红光照射,第2组用100 J/cm2红光照射,第3组不照光,同时设不同剂量红光照射对照组.采用菌落计数法分析ALA-PDT对浮游表皮葡萄球菌的影响.结果 第1组,CLSM下均观察到砖红色荧光,荧光强度随着孵育时间的延长而逐渐增强,孵育16、18、20、24h的荧光强度明显高于3、5、8、12 h(P＜ 0.05);第2组,荧光强度随着ALA浓度的增加而增强,50 mmol/L ALA组荧光强度明显高于10、20、30、40 mmol/L ALA组(P＜0.05);第3组,未见砖红色荧光.前两组经红光照射后发现,随着ALA浓度和光剂量的增加,存活的细菌数逐渐减少,当ALA为50 mmol/L、光剂量为100 J/cm2时,细菌生长受到抑制.结论 ALA-PDT对浮游表皮葡萄球菌有明显抑制作用,最适治疗参数为50 mmol/L ALA、孵育16 h,光照剂量100 J/cm2.     

头皮银屑病外用药物的新选择——卡泊三醇倍他米松凝胶

头皮是银屑病最常见的好发部位之一.外用药物是治疗头皮银屑病的主要方法,维生素D3衍生物和糖皮质激素是目前最主要的外用药物.卡泊三醇倍他米松凝胶(赛美尔)(Xamiol)是一种含有卡泊三醇(50 μg/g)和二丙酸倍他米松(0.5 mg/g)的新型混合凝胶制剂.该文收集了国外赛美尔凝胶的临床试验及综述等文献资料,综述了赛美尔凝胶的作用机制、疗效和安全性,及其对患者依从性及生活质量的提高.赛美尔凝胶为头皮银屑病的外用药物治疗提供了新的选择.     

【开放获取】丙酸氟替卡松乳膏单独或联合卡泊三醇软膏治疗轻中度斑块状银屑病的随机自身对照研究

【摘要】 目的 评价0.05%丙酸氟替卡松乳膏单独应用及与0.005%卡泊三醇软膏联合应用治疗轻中度斑块状银屑病的短期疗效和安全性。方法 2020年10月至2021年1月,于北京友谊医院对30例轻中度斑块状银屑病患者采用随机、开放、自身对照临床研究,一侧肢体皮损处早上外用0.005%卡泊三醇软膏、晚上外用0.05%丙酸氟替卡松乳膏（联合用药组）,对侧肢体皮损处每日外用2次0.05%丙酸氟替卡松乳膏（丙酸氟替卡松组）,疗程4周。分别于治疗前、治疗1、2、4周随访,采集静态临床医生整体评估（sPGA）、银屑病面积和严重程度指数（PASI）等临床指标,并记录不良事件。采用重复测量的方差分析、多变量方差分析、Mann-Whitney U秩和检验和独立样本t检验进行疗效和安全性评价。结果 治疗前,两组sPGA评分、PASI评分差异均无统计学意义（均P > 0.05）。治疗1周,丙酸氟替卡松组sPGA（1.10 ± 0.31）分、PASI评分（1.05 ± 0.51）分显著低于联合用药组［sPGA（1.73 ± 0.45）分,PASI评分（1.38 ± 0.69）分,F = 40.74、4.38,均P < 0.05］;治疗2、4周,联合用药组sPGA为（0.83 ± 0.46）、（0.23 ± 0.43）分,PASI评分为（0.53 ± 0.47）、（0.23 ± 0.50）分,均显著低于丙酸氟替卡松组（F = 4.88、56.14、15.21、26.36,均P < 0.05）。治疗1周,丙酸氟替卡松组浸润/肥厚严重程度评分显著低于联合用药组（U = 165.00,P < 0.05）;治疗2、4周,联合用药组红斑、鳞屑严重程度评分均显著低于丙酸氟替卡松组（U = 540.00、765.00、825.00、795.00,均P < 0.05）。结论 单用0.05%丙酸氟替卡松乳膏治疗银屑病起效快,0.05%丙酸氟替卡松乳膏与0.005%卡泊三醇软膏联合用药治疗2、4周效果更好,两种方法安全性均可。     

δ-氨基酮戊酸浓度对皮肤成纤维细胞生物学功能的影响

目的 探讨δ-氨基酮戊酸(ALA)诱导的光动力学反应强度对皮肤成纤维细胞主要生物学特征的影响.方法 体外分离并培养人皮肤成纤维细胞,加入终浓度为0.5～5.0 mmol/L的ALA,37 ℃避光孵育3 h后,632.8 nm波长激光照射.通过MTT比色法、流式细胞仪检测细胞的增殖水平(A值)、死亡率,并用ELISA和碱性水解法测定细胞合成基质金属蛋白酶(MMP-1、2、3)、胶原蛋白(羟脯氨酸含量)的水平.结果 随着ALA浓度上升,皮肤成纤维细胞的A值由0.45±0.05逐渐下降至0.32±0.04,而死亡率由6.4%±2.0%逐渐上升至29.6%±2.2%.同时,细胞合成MMP的水平先期呈逐渐增强,最后则逐渐减退;而胶原蛋白含量在初期旱下降趋势,在后期出现反弹.结论 适当强度的光动力学反应可以促进皮肤成纤维细胞分泌MMP并抑制胶原蛋白合成,更强的光动力学反应则具有相反作用.     

卡泊三醇对银屑病皮损中角质形成细胞凋亡的影响

从细胞凋亡角度探讨卡泊三醇(CPT)治疗银屑病(PS)的药理机制。采用末端标记(TUNEL)技术 ,分别检测了30例CPT治疗前后的PS患者和10名正常人皮肤标本的角质形成细胞凋亡。经CPT治疗后的PS皮损中的角质形成细胞凋亡数较治疗前明显增加(P<0.05)。CPT治疗PS的疗效可能与其增加角质形成细胞的凋亡有关。     

卡泊三醇对黑素细胞黑素合成的影响

目的 探讨卡泊三醇对黑素细胞黑素合成的影响及其作用的可能机制.方法 用噻唑蓝比色法(MTT法)、酶学方法及NaOH法,观察卡泊三醇对黑素细胞增殖及色素合成的作用;RT-PCR和蛋白印迹分别检测卡泊三醇对黑素细胞酪氨酸酶基因转录和蛋白表达水平的影响.结果 10~(-9)～10~(-5) mol/L浓度范围的卡泊三醇对体外培养的黑素细胞增殖的影响与空白对照组比较差异无统计意义(P＞0.05).同样浓度范围下,10~(-9)、10~(-8)mol/L浓度的卡泊三醇能明显增强黑素细胞的酪氨酸酶活性和促进黑素细胞的黑素含量,与空白对照组比较,酪氨酸酶活性可分别升高137%、123%(P＜0.05),黑素含量分别增加40.63%、18.75%(P＜0.05).其中10~(-9) mol/L浓度的卡泊三醇增强黑素细胞的酪氨酸酶活性及促进黑素细胞的黑素含量最明显.与高浓度组、空白对照组比较,10~(-9) mol/L浓度的卡泊三醇使酪氨酸酶蛋白表达增高也最明显.较空白对照组增高270.4%(P＜0.05).结论 卡泊三醇对黑素细胞增殖无影响,可增加黑素细胞酪氨酸酶蛋白表达水平,提高酪氨酸酶活性,从而促进黑素细胞的黑素合成.     

氧对5-氨基酮戊酸光动力疗法诱导HaCaT细胞凋亡和死亡的影响

目的 探讨基态氧和单线态氧对5-氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）诱导HaCaT细胞凋亡和死亡的影响。方法 取对数生长期的HaCaT细胞，分别与不同浓度的ALA避光孵育4 h，随后给予相应剂量的He-Ne激光照射，照射后12 h以MTT法检测细胞存活率；PI单染法检测细胞凋亡率；二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）标记法测定细胞内活性氧基（ROS）水平。为了造成光动力反应前后细胞的化学缺氧以及淬灭产生的单线态氧基（1O2），将不同浓度的氯化钴（CoCl2）和叠氮钠（NaN3）分别加入培养基，比较ALA-PDT处理组与未处理组HaCaT细胞凋亡和死亡率以及细胞内ROS水平的变化。结果 MTT结果表明，ALA-PDT诱导HaCaT细胞的凋亡与死亡率与ALA浓度和He-Ne激光照射剂量呈正相关。经400 μmol/L CoCl2处理的细胞，胞内ROS水平显著降低，细胞死亡率未处理组为57.65% ± 2.88%，处理组降至16.68% ± 1.86%，细胞凋亡率则分别为43.80%和15.40%。10 mmol/L NaN3几乎能完全清除ALA-PDT诱导产生的ROS，增强HaCaT细胞对ALA-PDT诱导的细胞死亡或凋亡的抵抗。结论 改变光动力反应前后细胞内的基态氧与单线态氧含量，能调控ALA-PDT诱导的HaCaT细胞凋亡和死亡。     

光动力疗法治疗尿道尖锐湿疣的临床研究

目的探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）治疗尿道尖锐湿疣的最适ALA浓度和最佳敷药时间。方法将60例尿道尖锐湿疣患者分为0．5％、1％、3％、5％和10％ALA五组，分别在敷药1、3、5、7h时取材，进行原位定量原卟啉Ⅸ检测、常规组织病理检查和杂交捕获试验检测高危型、低危型HPVDNA。结果经不同浓度和时间的ALA湿敷后，皮损局部的表皮内均有不同程度的原卟啉Ⅸ砖红色荧光。荧光基本上分布于表皮全层，而真皮几乎见不到原卟啉Ⅸ荧光。原位定量原卟啉Ⅸ荧光强度在敷药3h时已经明显升高．在5h时到达最高峰，7h时再次下降为3h时的水平。随着ALA浓度的增高，其组织中原卟啉Ⅸ的荧光强度逐渐增高。经统计学分析，5％和10％ALA组原卟啉Ⅸ荧光强度显著高于其他组（P〈0．05）。HPV DNA杂交捕获试验结果显示。尿道尖锐湿疣患者的临床标本中低危型HPV DNA100％（60／60）阳性，18．3％（11／60）病例同时检测出高危型HPV DNA。结论ALA-PDT治疗尿道尖锐湿疣的最佳ALA浓度为5％或10％．最佳敷药时间为3-5h。     

卵清蛋白联合卡泊三醇诱导构建特应性皮炎小鼠模型

【摘要】 目的 探讨快速建立特应性皮炎（AD）小鼠模型的方法。方法 以C57BL/6小鼠为模式动物,利用简单随机化方法分为3组,卡泊三醇 + 卵清蛋白（OVA）组（6只）两侧耳部外涂卡泊三醇和OVA,卡泊三醇组（6只）耳部外涂卡泊三醇,对照组（3只）耳部外涂75%乙醇,连续12 d。分别在造模前和第14天时拍摄小鼠耳部照片并测量小鼠耳厚度,取小鼠尾静脉血,检测血清总IgE和OVA特异性IgE水平,并在第14天取小鼠耳廓皮肤进行组织病理检查。结果 第14天时卡泊三醇 + OVA组和 卡泊三醇组小鼠耳部皮肤出现红肿、干燥、脱屑,耳厚度较造模前均明显增加（均P < 0.001）,但两组间耳厚度［分别为（0.355 ± 0.03）和（0.370 ± 0.05） mm］差异无统计学意义（q = 0.674,P = 0.231）。耳部皮肤病理检查显示,与卡泊三醇组和对照组相比,卡泊三醇 + OVA组小鼠表皮增生和炎症细胞（包括嗜酸性粒细胞和肥大细胞）浸润更加明显。皮肤免疫组化检查显示,3组间表皮炎症因子胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）和干扰素γ表达差异无统计学意义（均P > 0.05）,但IL-13差异有统计学意义（F = 5.159,P = 0.032）,卡泊三醇 + OVA组IL-13表达水平（77.12 ± 5.46）高于对照组（55.49 ± 9.92,q = 3.170,P = 0.021）。第14天时卡泊三醇 + OVA组和卡泊三醇组小鼠血清总IgE与造模前比较均明显升高,其中卡泊三醇 + OVA组总IgE升高更明显［（8 278.56 ± 3 297.68）比（892.64 ± 82.83） μg/L,t = 4.132,P = 0.026］,且卡泊三醇 + OVA组血清OVA特异性IgE水平（192.846 ± 15.391） μg/L显著高于卡泊三醇组［（8.492 ± 3.879） μg/L,q = 22.476,P < 0.001］。 结论 连续12 d外涂卡泊三醇和OVA可快速建立过敏原诱发的AD小鼠模型,为进行过敏原相关的AD发病机制研究奠定了一定基础。     

不同浓度氨基酮戊酸光动力治疗中重度痤疮疗效观察

目的 探讨不同浓度氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）治疗中重度痤疮的有效性及安全性。方法 采用随机、自身对照的方法将180例患者分为5％、10%、15%、20% ALA 4个治疗组,患者一侧面部外敷ALA,另一侧面部外敷安慰剂。均采用相同剂量的红光进行照射,每周1次,共4次。在治疗结束后第2周、1个月、3个月、6个月分别进行随访,记录皮损消退情况及不良反应。结果 治疗结束后随访,各治疗组皮损改善情况与对照组相比,差异均有统计学意义（P < 0.05）。至第6个月随访,试验侧有效率5% ALA组为79.55％,10% ALA组为88.37％,15% ALA组为95.24％,20% ALA组为97.73％,疗效均明显优于对照侧,差异有统计学意义（P < 0.05）。试验侧各浓度组间比较,随浓度增加,有效率明显增加,差异有统计学意义（P < 0.05）。从不良反应看,ALA浓度越高,红肿及色素沉着等不良反应的发生率越高,但无瘢痕形成。结论 ALA-PDT治疗中重度痤疮疗效明显优于单用红光治疗,结合临床有效率和安全性,10%和15% ALA-PDT治疗能达到较满意的疗效。     

Lack of selectivity of protoporphyrin IX fluorescence for basal cell carcinoma after topical application of 5-aminolevulinic acid: implications for photodynamic treatment

Clinical trials of topical ALA in photodynamic therapy (PDT) of basal cell carcinoma (BCC) show significant recurrence rates. Exogenous 5-aminolevulinic acid (ALA) is converted by intracellular enzymes to photoactive protoporphyrin IX (PpIX) in human tissues. PpIX generates cytotoxic singlet oxygen when irradiated with visible light in the 400–640 nm range. To evaluate variability and heterogeneity in PpIX production by tumors in such trials, and to assess the usefulness of PpIX for marking skin tumors, we measured PpIX fluorescence distribution in BCC after topical application of 20% ALA cream. ALA cream was applied under occlusion for periods ranging from 3 to 18 h (average 6.9 h, SD 4 h) to 16 BCCs. ALA conversion to PpIX in the BCCs was assessed by in vivo photography, ex vivo video fluorescence imaging, and fluorescence microscopy. External macroscopic PpIX fluorescence, as assessed by in vivo and ex vivo imaging, correlated with the clinical presence of BCC. Examination by a digital imaging fluorescence microscope revealed inter- and intratumor fluorescence variability and heterogeneity. PpIX fluorescence corresponding to full tomor thickness was found in six superficial and four nodular tumors, and partial-thickness fluorescence was observed in five nodular tumors, but no PpIX fluorescence was observed in some areas of superficial, nodular and infiltrating tumors. In a significant number of nodular and infiltrating BCCs, topical ALA appeared to provide little or no PpIX in deep tumor lobules. In addition, no selectivity for tumor tissue versus normal epidermis was seen. The grossly brighter external PpIX fluorescence over tumors may be due, therefore, to enhanced penetration through tumor-reactive stratum corneum and to the tumor thickness. The absence of reproducible fluorescence marking of nodular and infiltrating BCC suggests that topical ALA, at least under the present delivery protocols, may not be a reliable regimen for photodynamic treatment of these BCCs.     

以5-氨基酮戊酸诱导荧光定位诊断尖锐湿疣的临床研究

目的 探讨5-氨基酮戊酸(ALA)诱导的荧光诊断法在诊断尖锐湿疣(CA)亚临床感染中的价值.方法 临床随机选择25例CA患者,在其疣体及周围5 cm范围进行外用20%ALA乳膏并封包,在2 h和4 h时以410nm蓝光观察用药部位红斑面积.并对相同部位进行醋酸白试验,观察结果.结果 25例患者中,疣体ALA阳性率为100%,醋酸白试验阳性率为80%;疣体周围ALA阳性率为96%,醋酸白试验阳性率为8%.合适的检测时间为敷药后2 h.但黏膜及炎症部位仍存在一定的假阳性.结论 ALA在CA的疣体及其周围亚临床感染的诊断中优于传统的醋酸白试验,在CA的诊断和鉴别诊断中具有一定价值.     

氨基酮戊酸光动力疗法对小鼠RAW264.7巨噬细胞株Toll样受体2信号转导通路的影响

目的 探讨氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）对小鼠RAW264.7细胞Toll样受体（TLR）2表达、下游信号转导通路分子和细胞因子分泌的影响。方法 用灭活痤疮丙酸杆菌诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞株产生炎症模型,实验分为空白组和模型组,予不同浓度ALA孵育细胞,并予16 J/cm2红光照射。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）浓度。Western 印迹检测TLR2、髓样分化因子88（MyD88）、磷酸化p38、JNK、ERK、IκBα蛋白表达。采用SPSS18.0统计软件,各组间计量资料比较采用单因素方差分析或Tambane′s T2检验。结果 模型组TNF-α、IL-6的浓度分别为（0.34 ± 0.02） ng/L（P < 0.01）、（0.21 ± 0.03） ng/L（P < 0.05）,均高于空白组。与0.03 mmol/L ALA组比较,0.12 mmol/L ALA组TNF-α浓度为（0.03 ± 0.01） ng/L,差异无统计学意义（P > 0.05）,IL-6浓度为（0.07 ± 0.01） ng/L,差异有统计学意义（F = 114.813,P < 0.01）。模型组TLR2、MyD88、p-p38、p-IκBα、p-JNK、p-ERK蛋白表达水平（A值）分别为0.90 ± 0.14（P < 0.01）、1.11 ± 0.13（P < 0.01）、0.84 ± 0.04（P < 0.01）、1.45 ± 0.20（P < 0.01）、2.56 ± 0.06（P < 0.01）、3.70 ± 0.40（P < 0.01）,均高于空白组,差异有统计学意义,并随着ALA浓度升高而降低,呈剂量依赖性。结论 光动力治疗可减少小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞TLR2的表达,可能通过细胞信号转导通路,引起细胞因子分泌减少发挥作用。     

人瘢痕疙瘩成纤维细胞裸鼠荷瘤模型的建立

目的 建立一种简单、成功率高的人瘢痕疙瘩裸鼠荷瘤模型。 方法 27只雌性BALB/c裸鼠随机分为5组,A、B、C组每组5只,在每只裸鼠腋窝下接种人瘢痕疙瘩成纤维细胞和Matrigel胶混悬液0.1 ml,细胞浓度分别为1.0 × 104个/μl Matrigel胶（A组）、3.0 × 104个/μl Matrigel胶（B组）、5.0 × 104个/μl Matrigel胶（C组）。取C组成形瘤块修剪成若干个5 mm × 5 mm × 5 mm大小的组织块移植于D组裸鼠（8只）的腋窝皮下;E组裸鼠（4只）皮下注射100 μl Matrigel胶作为对照组。A、B、C组出瘤后30 d、D组瘤块移植后30 d肉眼观察瘤体的形成过程及变化,并在第31天处死裸鼠进行组织病理学检查,分析其移植后成形的瘤体组织学变化及裸鼠的心、肝、脾、肺、肾组织的变化。 结果 A、B、C组裸鼠成瘤率为100%,出瘤时间分别为（90.20 ± 3.96） d、（61.00 ± 2.92） d、（39.60 ± 3.20） d。出瘤30 d时3组瘤体体积分别为（288.34 ± 25.29） mm3、（1 370.63 ± 105.24） mm3、（1 940.98 ± 184.37） mm3,3组差异有统计学意义（F = 138.74,P < 0.05）。D组裸鼠成形瘤块移植后瘤块体积先略增大后逐渐减小,移植第14天始持续增大,8只中7只成瘤。E组裸鼠未见瘤体形成。组织病理学检查,各组瘤体的组织形态在镜下一致,与人瘢痕疙瘩组织相似,未见其他脏器组织学改变及转移瘤灶。结论 裸鼠皮下接种人瘢痕疙瘩成纤维细胞可建立瘢痕疙瘩裸鼠荷瘤模型,而且已成瘤组织修剪成一定体积再次移植于裸鼠皮下也可以建立瘢痕疙瘩裸鼠荷瘤模型。     

注射氨基酮戊酸光动力疗法对大鼠痤疮样炎性结节模型的疗效及组织病理学影响

【摘要】 目的 探讨注射氨基酮戊酸（ALA）光动力疗法对大鼠痤疮样炎性结节模型的疗效及组织病理改变。方法 40只SPF级SD大鼠分为正常对照组、模型对照组、注射ALA组、外敷ALA组，每组10只。除正常对照组不处理外，其余3组大鼠右耳廓内侧接种痤疮丙酸杆菌，建立大鼠痤疮样炎性结节模型。造模成功后，模型对照组不处理，注射ALA组将5%ALA注射入结节内再予红光照射，外敷ALA组直接外敷5%ALA于鼠耳痤疮样结节处再予红光照射，均为每周1次，共2次。末次治疗24 h后观察各组大鼠耳部大体表现和组织病理学变化，测量耳廓厚度，并检测肝肾功能。采用单因素方差分析和LSD-t检验比较各组差异。结果 正常对照组、模型对照组、外敷ALA组、注射ALA组大鼠耳廓厚度分别为（0.435 ± 0.006）、（1.269 ± 0.071）、（1.088 ± 0.098）、（0.699 ± 0.095） mm，差异有统计学意义（F = 235.60，P < 0.001），模型对照组耳廓厚度高于正常对照组、外敷ALA组和注射ALA组（t 值分别为24.18、5.24、16.48，均P < 0.01）；注射ALA组低于外敷ALA组（t = 11.24，P < 0.01）。外敷ALA组和注射ALA组大鼠耳廓局部红肿程度、结节数均低于模型对照组，真皮及皮下组织浸润炎症细胞数量减少，注射ALA组结节消退更明显，亦未见团块状分布的炎症细胞或微脓肿形成。各组大鼠丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、肌酐、尿素氮水平差异均无统计学意义（均P > 0.05）。结论 注射ALA光动力疗法治疗大鼠痤疮样炎性结节模型较外敷ALA光动力疗法治疗更有效。     

Influence of light exposure on the kinetics of protoporphyrin IX formation in normal skin of hairless mice after application of 5-aminolevulinic acid methyl ester

The rates of protoporphyrin IX (PpIX) photodegradation and reappearance after light exposure at 420 and 632 nm were measured in mouse skin at different times after 1 h topical application of 5-aminolevulinic acid methyl ester (ALA-Me). After ALA-Me application (1 h) and removal, the fluorescence of PpIX increased for about 1 h, and then reached a maximum and started to decrease. Reappearance of PpIX fluorescence after exposures (degrading 60%-80% of the PpIX) was faster for exposures 0.5 h after ALA-Me application than for exposures 3 h. The bleaching rate was largest in the former case. This indicates that PpIX is located deeper in the skin after 3 h than after 0.5 h, whereas the pool of ALA-Me in the skin is largest at 0.5 h. In all cases, the reappearance was faster at a skin temperature of 35 degrees C than at 23 degrees C. Reappearance of PpIX fluorescence was faster after exposure to light at 420 nm than at 632 nm. The rate of elimination of PpIX from the volume of detection was faster after 420 nm light irradiation than that after 632 nm. These findings are discussed in view of penetration depths of light and ALA-Me, and diffusion of PpIX.