Vk3对宫颈癌Hela细胞mTOR信号转导蛋白基因表达的影响

目的：观察维生素K3（Vk3）对Hela细胞雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其底物p70S6激酶(p70S6K)α1、α2、β1、β2和细胞周期素D1（cyclin D1）mRNA表达的变化及N-乙酰半胱氨酸 (NAC)对mTOR及其底物的影响,探讨mTOR信号转导蛋白在人宫颈癌的发生、发展过程中的作用。方法：实验分为对照组(Con)、Vk3处理组（Vk3）、Vk3与NAC联合作用（Vk3+NAC）组及NAC单独应用组(NAC),MTT法检测各组Hela细胞存活率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组Hela细胞中mTOR、p70S6K-α1、p70S6K-α2、p70S6K-β1、 p70S6K-β2及cyclin D1 mRNA表达。结果：与Con组比较,Vk3组Hela细胞存活率显著降低（P<0.01）,mTOR、p70S6K-α1、p70S6K-α2、p70S6K-β1、p70S6K-β2及cyclin D1 mRNA表达量均明显下降（P<0.05）;而与Vk3组比较,Vk3+NAC组Hela细胞存活率显著增加（P<0.01）,上述指标mRNA表达量均明显增加（P<0.05）。结论：Vk3通过其氧化应激作用抑制Hela细胞的增殖,其机制与降低mTOR信号转导蛋白及cyclin D1的基因表达有关。     

PI3K/AKT/mTOR途径在慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌萎缩中的作用

目的研究PI3K/AKT/mTOR信号通路在慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法采用单纯熏香烟法复制慢阻肺大鼠动物模型。采用Western blot技术检测慢阻肺大鼠趾长伸肌中PI3K/AKT/mTOR信号通路中PI3K、总的及磷酸化的mTOR（t-mTOR,p-mTOR）、总的及磷酸化的GSK-3β（t-GSK-3β,p-GSK-3β）、总的及磷酸化的4E-BP1（t-4E-BP1,p-4E-BP1）、总的及磷酸化的p70S6K1（t-p70S6K1,p-p70S6K1）蛋白表达变化。结果 Western blot分析结果显示,大鼠趾长伸肌组织中PI3K的蛋白表达在两组间差异不显著（P〉0.05）;t-mTOR、p-mTOR、t-GSK-3β和p-GSK-3β的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组（P〈0.05,其中p-GSK-3β两组对照P〈0.01）;t-4E-BP1和t-p70S6K1的蛋白表达在两组间差异不显著（P〉0.05）,p-4E-BP1和p-p70S6K1的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组（P〈0.05）。结论慢阻肺大鼠趾长伸肌组织内PI3K/AKT/mTOR信号通路被激活,可能是骨骼肌萎缩的代偿机制之一。     

TGF-β1体外诱导肝星形细胞活化中自噬和mTOR通路的变化

［摘要］目的: 观察体外转化生长因子 β1(transforming growth factor-beta1,TGF β1)诱导的肝星形细胞活化中自噬水平和哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路相关分子表达的变化。方法: 体外TGF β1诱导人肝星形细胞株LX 2,分为对照组、诱导48 h和72 h组,分别常规培养,加入2 ng/mL TGF β1培养48 h和72 h。观察细胞形态改变,应用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测TGF β1、α 平滑肌肌动蛋白(α smooth muscle actin,α-SMA)和LC3BⅡ以及mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)和核糖体蛋白S6激酶(p70 ribosomal protein S6 kinase,p70S6K)的表达。结果： TGF β1诱导48 h后,部分LX-2细胞变长呈纺锤形或梭形,诱导72 h后,90%以上LX 2细胞呈多突纺锤形,形态向成纤维细胞样细胞转变明显。与对照组相比,诱导48 h组细胞中α-SMA、TGF-β1和LC3BⅡ mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),诱导72 h组升高更明显(P<0.01);诱导48 h组细胞中p mTOR/mTOR比值和p70S6K蛋白表达降低,诱导72 h组降低更明显(P<0.05) 。结论： TGF-β1体外诱导肝星形细胞活化中自噬蛋白表达增加,而mTOR表达受到抑制。     

mTOR信号通路的激活在左旋多巴诱发异动症中的作用及机制研究

目的:探讨mTOR信号通路的激活在左旋多巴诱发异动症(L-dopa induced dyskinesia,LID)中的作用及可能机制。方法:60只普通雄性大鼠,其中选取10只作为健康对照组,皮下注射安慰剂葵花油2 mg/kg;其余50只采用鱼藤酮2 mg/kg,颈背部注射,以大鼠行为变化2~6分选为PD组;PD组大鼠L-dopa 10 mg+Benserazide诱导,制备LID模型,最终大鼠模型对照组(n=10),PD组(n=10),LID组(n=14)。Western Blot技术检测大鼠纹状体S6K的Thr389、S6Ser240/244表达及mTOR的蛋白活性(p70S6K)及免疫组织化学检测AMPA受体亚基Glu R1、Glu R2水平。结果:LID组大鼠Thr389、S6Ser240/244、代表mTOR蛋白活性p70S6K表达及Glu R1、Glu R2阳性细胞数均明显高于PD组及对照组,差异均有统计学意义(P0.05);PD组大鼠Thr389、S6Ser240/244、代表mTOR蛋白活性p70S6K表达及Glu R1、Glu R2阳性细胞数均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:mTOR信号通路激活参与了PD及LID的发病,mTOR信号通路激活Thr389位点,进而激活S6K,引发S6Ser240/244激活,导致PD、LID的发生及进展。而且mTOR激活后,AMPA受体亚基Glu R1、Glu R2功能增强,对LID的发生也具有促进作用。     

雷帕霉素对大鼠主动脉瓣膜间质细胞增殖的影响

目的利用雷帕霉素靶向抑制mTOR并探讨其对大鼠心瓣膜间质细胞增殖的影响。方法体外分离大鼠瓣膜间质细胞后 培养并鉴定;细胞随机分为两组：雷帕霉素组与对照组;MTT法检测并绘制大鼠瓣膜间质细胞用药前后的生长曲线;流式细胞 仪检测雷帕霉素对细胞周期的影响;RT-PCR 检测细胞中S6、P70S6K的mRNA表达水平;Western blotting 检测细胞中S6、 P70S6K、P-S6、P-P70S6K蛋白的表达水平。结果体外分离获得的大鼠瓣膜间质细胞分离培养成功;对照组细胞活性显著高于 加药组细胞（P<0.05）,加药组细胞生长变缓。流式细胞术检测发现加药组和对照组细胞的各周期占比均没有明显差别;加药组 细胞的S6蛋白与P70S6K蛋白的磷酸化水平降低（P<0.05）。结论雷帕霉素能抑制瓣膜间质细胞的增殖其原因,可能不是通过 改变细胞周期而是通过抑制mTOR后下调其靶蛋白S6和P70S6K的磷酸化水平引起的。     

柯萨奇病毒B3感染HeLa细胞后mTOR通路部分信号蛋白表达的变化

目的研究柯萨奇病毒B3(CVB3)感染宫颈癌细胞株(HeLa)后mTOR通路中信号分子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)、p70S6激酶(p70S6K)、磷酸化真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)、磷酸化p70S6激酶(p-p70S6K)等蛋白表达的变化。方法 CVB3感染Hela细胞后3、6、9、12和24 h作为病毒组,未被CVB3感染的同时间点细胞作为对照组;运用Western blotting检测mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、4EBP1、p-4EBP1表达的变化。结果①CVB3感染Hela细胞后,不同时间点感染后的mTOR、p-mTOR、4EBP1、p70S6K、p-4EBP1、p-p70S6K表达含量变化及与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。②通过直线相关性分析发现,病毒组mTOR与p70S6K蛋白表达之间具有正相关关系,对照组间无相关关系;病毒组mTOR与4EBP1蛋白表达之间具有负相关关系,而对照组具有正相关关系;两组间的mTOR与p-mTOR均具有正相关关系,病毒组p70S6K与p-p70S6K蛋白表达具有正相关关系,对照组无相关关系。病毒组4EBP1与p-4EBP1蛋白表达无明显相关,对照组具有正相关关系。结论 CVB3感染HeLa细胞后可抑制mTOR/p70S6K通路,激活mTOR/4EBP1通路调控细胞的生长。     

白藜芦醇对冠心病患者T细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白活化及CD71表达率的影响

目的：观察白藜芦醇对冠心病（CHD）患者 T 细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）活化水平及细胞表面活化标记物转铁蛋白受体（CD71）表达率的影响,探讨白藜芦醇参与动脉粥样硬化细胞免疫调控的作用机制。方法将30例 CHD 患者随机分为 CHD 未处理组、白藜芦醇低剂量及高剂量组,另选10例胸痛综合征（CPS）患者作为对照组。抽取各组患者外周血后提取 T 细胞并进行体外细胞培养。CHD 未处理组及 CPS 对照组只加 CHD 或 CPS 患者 T 细胞培养液,低剂量组、高剂量组为 CHD 患者 T 细胞培养液中加终浓度为12.5μmol/ L、150μmol/ L 的白藜芦醇。各组细胞培养24 h 后,采用 Western blot 检测 p70S6K 磷酸化水平（p - p70S6K）,并用流式细胞仪检测 CD4﹢ CD71﹢细胞比例。结果与对照组比较,未处理组 p - p70S6K 及 CD4﹢ CD71﹢细胞比例均显著升高（P ＜0.05）,而予低剂量组、高剂量组上述指标较未处理组均明显降低（P ＜0.05）,高剂量组与对照组比较无明显差异（P ＞0.05）。结论白藜芦醇对 CHD 的有益作用可能与其抑制 T 细胞中 mTOR 活化及下调细胞活化表面标记物 CD71表达率有关。     

舒芬太尼后处理通过ERK1/2介导的p70S6K信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨舒芬太尼后处理通过细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）介导的p70核糖体蛋白S6激酶（p70S6K）信号传导通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的影响,阐明舒芬太尼后处理对大鼠MIRI的保护作用。方法：72只SD雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注（I/R）组、二甲基亚砜（DMSO）组、PD组（缺血末到再灌注开始后15min给予20 μmol·L^-1ERK的抑制剂PD98059）、舒芬太尼后处理组（Sufen组）和Sufen+PD组。除假手术组外,其余各组大鼠均缺血30min后再灌注2 h。于缺血前即刻（T0）和再灌注30min（T1）、60min（T2）、90 min（T3）、2h（T4）时记录心率（HR）、平均动脉压（MAP）,再灌注末测定大鼠心肌梗死面积,采用Western blotting法检测大鼠心肌组织中p-ERK1/2和p-p70S6K蛋白表达水平。结果：与T0时比较,T1~T4时I/R组、Sufen组、DMSO组、PD组和PD+Sufen组大鼠MAP和HR降低（P<0.05）;与假手术组比较,其余各组大鼠HR降低（P<0.05）,MAP升高（P<0.05）;与I/R组比较,T3时Sufen组大鼠HR降低（P<0.05）,MAP升高（P<0.05）。与I/R组比较,Sufen组大鼠心肌梗死面积明显减少（P<0.05）;与Sufen组比较,PD+Sufen组大鼠心肌梗死面积明显增加（P<0.05）。与假手术组比较,I/R组、Sufen组和DMSO组大鼠心肌组织中p-ERK1/2和p-p70S6K蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）;与I/R组比较,Sufen组大鼠心肌组织中p-ERK1/2和p-p70S6K蛋白表达水平均进一步升高（P<0.05）;与Sufen组比较,PD+Sufen组大鼠心肌组织中的p-ERK1/2和p-p70S6K蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。结论：舒芬太尼后处理通过ERK1/2介导的p70S6K信号通路对大鼠MIRI起保护作用,可改善MIRI大鼠的心功能指标,减少心肌梗死面积。     

辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏TGF-β系统的影响

目的：探讨辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1（TGF-β1）和转化生长因子βⅡ型受体（TβⅡR）表达的影响及其肾脏的保护机制。方法：SD大鼠单次腹腔注射55mg/kg链脲佐菌素(STZ )制备糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠随机分成糖尿病组、辛伐他汀治疗组［4mg/(kg·d)］和正常对照组。用免疫组织化学，RT-PCR和Western印迹法检测16周大鼠肾脏TGF-β1和TβⅡR表达的变化。结果：与正常对照组比较，糖尿病组和辛伐他汀治疗组TGF-β1和TβⅡR表达均增加（P<0.05）。治疗组TGF-β1和TβⅡR表达显著低于糖尿病组（P<0.05）。结论：辛伐他汀可以通过下调TGF-β1和TβⅡR的表达，抑制TGF-β系统信号通路的过度激活，减少糖尿病大鼠尿蛋白，延缓肾脏病变的进展。     

链脲佐菌素致阿尔茨海默病模型大鼠脑内mTOR/P70S6K/IRS-1信号通路的变化

目的：观察侧脑室（intracerebroventricular,ICV）注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）对大鼠脑内mTOR/P70S6K/IRS-1信号通路的影响。方法：将30只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,每组各15只,对照组于第1天和第3天ＩＣＶ注射生理盐水,模型组于第 1天和第3天侧脑室注射STZ（ICV-STZ,3 mg/kg） 建立AD模型。第 1 次注射后 36 d 采用 Morris 水迷宫检测2组大鼠空间学习和记忆能力的变化;Western blot检测2组大鼠大脑皮质和海马组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTORSer2448）、核糖体40S小亚基S6蛋白激酶（P70 ribosomal S6 protein kinase,P70S6K）、磷酸化核糖体40S小亚基S6蛋白激酶（phosphorylated P70 ribosomal S6 protein kinase,p-P70S6KThr389）、胰岛素受体底物-1（insulin receptor substract-1,IRS-1）和磷酸化胰岛素受体底物-1（phosphorylated insulin receptor substract-1,p-IRS-1Ser636）蛋白的表达;HE染色观察2组大鼠大脑皮质和海马组织形态学的改变;甲硫素S染色观察2组大鼠脑内Aβ的沉积。结果：Morris 水迷宫结果显示 ICV-STZ 能明显降低大鼠目标象限停留时间[对照组：（55.945±9.447） s,模型组：（31.961±5.346） s,t=8.558,P=0.000]和穿越平台次数[对照组：（7.533±2.560）次,模型组：（2.867±1.506）次,t=6.086,P=0.000];HE染色可见：ICV-STZ大鼠大脑皮质和海马的部分细胞出现了明显的固缩和肿胀;甲硫素S染色发现：在ICV-STZ 处理后,大鼠脑内出现Aβ的大量沉积。Western blot结果表明：ICV-STZ能同时增加大鼠大脑皮质p-P70S6KThr389[对照组：（0.268±0.066）,模型组：（0.654±0.079）,t=-8.409,P=0.000]、p-IRS-1Ser636[对照组：（0.710±0.092）,模型组：（1.033±0.135）,t=-4.417,P=0.002]和海马p-P70S6KThr389[对照组：（0.405±0.064）,模型组：（0.732±0.077）,t=-7.339,P=0.000]、p-IRS-1Ser636[对照组：（0.498±0.093）,模型组：（0.836±0.102）,t=-5.496,P=0.001]蛋白的表达,但不影响大鼠大脑皮质和海马P70S6K、mTOR、p-mTORSer2448、IRS-1蛋白的表达。结论：ICV-STZ 能增加大鼠脑内mTOR/P70S6K/IRS-1信号通路的激活,提示异常活化的mTOR/P70S6K/IRS-1信号通路可能参与了 AD 的发生发展。     

葡萄子原花青素对糖尿病大鼠心肌超微结构的影响

目的：观察葡萄子原花青素（grape seed proanthocyanidin extracts,GSPE）对链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）糖尿病大鼠血浆糖基化终末产物（advanced glycation end products,AGEs）、心肌超微结构的影响;探讨GSPE对STZ糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法：雄性Wistar大鼠尾静脉注射0.1%STZ以建立糖尿病模型,成模后随机分为2组,糖尿病对照组（DM1组,n=8）和糖尿病GSPE治疗组（GSPE250?mg/(kg·d),DM2组,n=12）,另设2组,正常对照组（C1组,n=10）和正常GSPE治疗组（C2组,n=10）。24周后采血测血糖、糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin, HbA1c）、AGEs,电镜观察心肌超微结构变化。结果：DM2组AGEs较DM1组明显降低(t=2.792, P=0.02);DM1组肌原纤维和线粒体排列紊乱,经GSPE治疗后DM2组明显减轻。结论：GSPE能够抑制STZ糖尿病大鼠非酶糖基化反应,对其心脏超微结构有一定保护作用。     

三里屯社区9年强化管理对2型糖尿病患者糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病的影响研究

目的　研究北京市朝阳区三里屯社区卫生服务中心9年强化管理对2型糖尿病（T2DM）患者糖尿病微血管并发症的影响,探索血糖、血压、血脂水平及联合达标≥3次与微血管并发症预后的关系。方法　将三里屯社区2008年入选的224例T2DM患者随机分为强化组（113例）和标准组（111例）,对其连续管理并随访9年,以收缩压、舒张压、糖化血红蛋白（HbA1c）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）为主要管理指标,比较管理前后两组上述指标的差异;收集终点事件（糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病）,比较管理后两组终点事件的发生情况;探索分组管理方式和主要指标达标次数是否≥3次与微血管并发症的关系。结果　入组时两组患者性别、年龄、病程、吸烟情况、BMI、收缩压、舒张压、空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2 h PG）、LDL-C、HbA1c及尿微量清蛋白排泄率（UAER）比较,差异无统计学意义（P>0.05）;管理后强化组FPG、2 h PG、LDL-C、HbA1c、UAER水平低于标准组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组BMI、收缩压、舒张压比较,差异无统计学意义（P>0.05）。标准组发生或加重的糖尿病视网膜病变6例（5.4%）,糖尿病肾病13例（11.7%）;强化组发生或加重的糖尿病视网膜病变1例（0.9%）,糖尿病肾病5例（4.4%）。两组视网膜病变发生率、糖尿病肾病发生率比较,差异有统计学意义（P<0.05）。HbA1c和联合达标≥3次的患者微血管病变发生率低于HbA1c和联合达标<3次的患者,差异有统计学意义（P<0.05）。结论　社区T2DM强化管理可有效减少糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病的发生;HbA1c达标、联合达标次数≥3次,更可明显减少上述并发症的发生,提高患者生存质量。     

西格列汀对老年2型糖尿病轻度认知障碍患者血糖漂移和认知功能的影响研究

目的　研究西格列汀对老年2型糖尿病（T2DM）轻度认知障碍（MCI）患者血糖漂移及认知功能的影响。方法　选择老年T2DM轻度认知障碍患者78例,随机分为研究组39例（西格列汀+二甲双胍组）和对照组39例（格列齐特+二甲双胍组）。两组患者联合用药前及用药24周后测量体质指数（BMI）、空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2 hPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）。所有患者治疗前后均接受72 h动态血糖监测（CGMS）,根据监测结果计算日内平均血糖漂移幅度（MAGE）、日间血糖漂移幅度（MODD）、血糖水平标准差（SDBG）、平均餐后血糖漂移幅度（MPPGE）,治疗前后用蒙特利尔认知评估量表（MoCA）评估认知功能。观察治疗前及药物治疗6个月后血糖、血糖漂移、认知功能的变化。结果　治疗前,两组BMI、FBG、2 hPG、HbA1c、MAGE、MODD、SDBG、MPPGE、MoCA评分差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后,研究组MAGE、MODD、SDBG、MPPGE低于对照组,MoCA评分高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组BMI、FBG、2 hPG、HbA1c差异无统计学意义（P>0.05）。结论　西格列汀可能通过降低老年T2DM轻度认知障碍患者的血糖漂移进而改善其认知功能。     

苯丙氨酸对C2C12细胞葡萄糖摄取能力的影响及与mTOR-p70S6K通路的关系探讨

目的 观察苯丙氨酸对小鼠成肌细胞系C2C12葡萄糖摄取能力的影响,以及刺激后细胞内哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）-p70S6K信号通路分子的变化。方法 体外培养C2C12细胞,分化诱导为多核的肌管细胞后进行饥饿处理,然后分别用不同浓度苯丙氨酸（1.25、2.5、5、10、20 mmol/L）处理细胞,以KRB平衡液作为对照。通过检测2-NBDG评价细胞葡萄糖摄取能力。用Western blot方法检测细胞内mTOR、p70S6K、胰岛素受体底物（IRS）-1、蛋白激酶B(Akt)的表达情况。结果 与KRB平衡液对照相比,5 mmol/L亮氨酸使C2C12细胞的葡萄糖摄取能力下降了约30%（P=0.001）,5 mmol/L苯丙氨酸使C2C12细胞摄取葡萄糖的能力上升了约40%（P＜0.01）,且苯丙氨酸的这种促进作用随浓度增大有逐渐增强的趋势。苯丙氨酸对细胞内mTOR Ser2448磷酸化水平无明显影响。除1.25 mmol/L外,其它浓度苯丙氨酸均能抑制p70S6K Thr389的表达。亮氨酸使IRS-1 Ser636/639磷酸化水平表达增高（P＜0.01）,除1.25 mmol/L外,其它浓度的苯丙氨酸均有抑制IRS-1 Ser636/639表达的趋势,但与对照相比差异无统计学意义（P=0.381）。高浓度短时间的苯丙氨酸刺激对C2C12细胞内的Akt Ser473表达无明显影响。结论 苯丙氨酸可能通过减少p70S6K的磷酸化,继而减少p70S6K对IRS-1的刺激作用而使细胞葡萄糖摄取能力增强。但苯丙氨酸对mTOR-p70S6K通路的抑制作用不通过Akt的激活。     

2型糖尿病患者葡萄糖负荷后胰岛素分泌达峰时间的影响因素研究

背景　胰岛素分泌高峰延迟在2型糖尿病（T2DM）患者中普遍存在,其可能是T2DM患者餐后高血糖的重要原因。目前国内外对T2DM患者胰岛素分泌高峰延迟影响因素的研究较少。目的　探讨T2DM患者葡萄糖负荷后胰岛素分泌达峰时间（tmax）的影响因素。方法　选取2016年1月—2018年6月于武汉科技大学附属孝感医院内分泌科住院的T2DM患者490例,根据tmax将患者分为3组：短tmax组（tmax≤90 min,n=159）、中tmax组（90 min相似文献   

2型糖尿病患者空腹血糖与葡萄糖负荷后胰岛素峰值的相关性研究

目的　探讨2型糖尿病（T2DM）患者空腹血糖（FPG）对葡萄糖负荷后胰岛素峰值（INSmax）的影响。方法　选取2016年1月—2018年2月于武汉科技大学附属孝感医院内分泌科住院的T2DM患者548例,根据INSmax水平将其分为低INSmax组（INSmax≤30.0 mU/L,n=183）、中INSmax组（30.0 mU/L62.5 mU/L,n=183）。收集患者的一般资料,检测糖化血红蛋白（HbA1c）、血酮体及血常规,行75 g葡萄糖耐量试验和胰岛素释放试验测量FPG、空腹胰岛素（FIns）、试验后30、60、120、180 min血糖（GLU）及胰岛素（INS）,记录INS测量最大值（INSmeasuremax）、稳态模型胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）、稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。记录INSmax及达峰时间（tmax）、GLU峰值（GLUmax）及达峰时间（Tmax）、tmax与Tmax的差值（ΔT）。结果　中INSmax组、高INSmax组的男性比例、HbA1c、酮症发生率均低于低INSmax组,外源性胰岛素使用史、高血压病史、高尿酸血症/痛风病史、高血脂病史、非酒精性脂肪性肝病病史、体质指数（BMI）均高于低INSmax组（P<0.01）;高INSmax组的红细胞分布宽度均高于低INSmax组,HbA1c、血红蛋白（Hb）均低于中INSmax组（P<0.01）。低INSmax组FPG、30、60、120、180 min GLU、GLUmax、Tmax均高于中INSmax组和高INSmax组,FIns和30、60、120、180 min INS,INSmeasuremax、HOMA-β、HOMA-IR、ΔT均低于中INSmax组和高INSmax组（P<0.05）;中INSmax组FPG和30、60、120、180 min GLU、GLUmax均高于高INSmax组,FIns、30、60、120、180 min INS、INSmeasuremax、HOMA-β、HOMA-IR、ΔT均低于高INSmax组（P<0.05）。INSmax与BMI、嗜酸粒细胞计数、FIns、30、60、120、180 min INS、HOMA-β、HOMA-IR、INSmeasuremax、ΔT呈正相关（P<0.05）;INSmax与HbA1c、Hb、FPG、30、60、120、180 min GLU、GLUmax、Tmax呈负相关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示,高FPG、高180 min GLU是T2DM患者INSmax的危险因素,高HOMA-IR是T2DM患者INSmax的保护因素（P<0.001）。结论　T2DM患者FPG与INSmax水平呈负相关,控制FPG对于改善T2DM患者胰岛β细胞储备功能很有意义。     

阿司匹林对糖尿病大鼠免疫系统影响的研究

目的探讨阿司匹林对糖尿病大鼠外周血T淋巴细胞及相关细胞因子和免疫器官系数的影响。方法链脲佐菌素腹腔内注射雄性SD大鼠诱导糖尿病,分为糖尿病组(DM组n=12)和糖尿病阿司匹林干预组(AD组n=12),另有鼠龄和体重相似的雄性SD大鼠作为对照组(NC组n=12)。AD组用阿司匹林30mg﹒kg-1﹒d-1灌胃,DM组和NC组用等量的蒸馏水灌胃;流式细胞术检测CD3+T细胞、CD4+T细胞以及CD8+T细胞比例,酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠血浆中TNF-α及IL-6,无菌取胸腺和脾脏计算免疫器官系数。结果实验12周时,DM组CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和胸腺指数,显著低于NC组(P0.01),血浆中IL-6和TNF-α显著高于NC组(P0.01)。与DM组相比,AD组CD8+T细胞无显著改变(P0.05),但AD组CD3+T细胞、CD4+T细胞和胸腺指数显著高于DM组(P0.01),血浆中TNF-α和和IL-6显著低于DM组(P0.01)。结论阿司匹林对糖尿病大鼠免疫系统有保护作用。     

mTOR和VEGF基因表达在糖尿病大鼠肾损伤中的相关性

［摘要］目的　观察糖尿病大鼠mTOR和VEGF基因表达与肾损伤间的相关性．方法　糖尿病（DM）大鼠成模后12、16、20、24周,选取DM组分别为7、6、6、9只和非糖尿病组（NDM）组各5只,测定肾小球及肾小管病理改变程度半定量评分（HS）及肾小球基底膜（GBM）厚度;免疫组化（IHC）测定mTOR、VEGF、VEGFR2抗体在肾脏中的表达;实时定量PCR（RT-Q-PCR）荧光染料法检测基因在肾脏的mRNA表达,基因的标化值（SCt）定量PCR产物．结果　光镜下HS在总的DM组及各病程DM组均高于同期NDM组,20、24周DM组明显升高,GBM厚度在总的DM组明显高于NDM组,P＜0.01,24周DM组增厚更明显;VEGF、VEGFR2基因IHC评分在总的DM组及各病程DM组均高于NDM组,两者在总的DM组中正相关,均与光镜下HS正相关,P＜0.05．VEGF、VEGFR2基因SCt值在总的DM组均明显高于NDM组,VEGF基因SCt值在DM组间12周表达最高,24周次之,较16、20周明显升高,P＜0.01;VEGFR2基因SCt值在DM组间随病程延长逐渐降低,24周最低．VEGF基因SCt值与VEGFR2基因SCt值在总的DM组明显正相关,P＜0.01,与GBM厚度在总的DM组正相关．mTOR基因与VEGF、VEGFR2基因三者的IHC评分在总的DM组中均互相正相关,均与光镜下HS正相关,P＜0.05．结论　光镜下HS及GBM厚度在DM大鼠中升高,反应肾损伤,VEGF、VEGFR2基因蛋白及mRNA在DM大鼠肾脏中表达,且随着DM病程增长表达协同增高;VEGF mRNA表达与GBM厚度正相关;mTOR基因可能与VEGF、VEGFR2基因蛋白表达在DM大鼠肾损伤有协同相关作用,但不排外不同病程、不同动物样本量表达结果及实验条件可能存在结果差异．