甲状腺相关眼病眼眶结缔组织中共刺激分子CD40/CD40L的表达

目的观察甲状腺相关眼病(thyroid-associated ophthal mopathy,TAO)患者眼眶结缔组织中共刺激分子CD40/CD40L的表达,并探讨其可能的作用机制。方法采用免疫组化检测CD40/CD40L、细胞间黏附分子1(intercellular adhesionmolecule1,ICAM-1)/白细胞功能抗原(1eukocyte function antigen1,LFA-1)在甲状腺相关眼病患者(n=12)及正常对照(n=8)眼眶组织中的表达情况;原代培养TAO患者及正常对照眼眶成纤维细胞,应用RT-PCR方法检测CD40L刺激后眼眶成纤维细胞合成ICAM-1mRNA水平的变化。结果 TAO患者眼眶结缔组织中可见高表达CD40、ICAM-1的成纤维细胞,大量淋巴细胞浸润并高表达LFA-1;双酶标组化显示CD40阳性表达的成纤维周围浸润CD40L阳性表达的淋巴细胞;ICAM-1阳性眼眶成纤维细胞与LFA-1阳性淋巴细胞以直接接触的形式存在。RT-PCR结果显示,未激活状态TAO组眼眶成纤维细胞ICAM-1mRNA水平高于正常组(P<0.05);两组眼眶成纤维细胞经CD40L诱导后IC...     

重组人干扰素γ对球后成纤维细胞CD40 mRNA表达的影响

目的 探讨在重组人干扰素γ（rhIFN-γ）作用下，正常人和甲状腺相关眼病（TAO）患者球后成纤维细胞（RF）CD40 mRNA的表达情况。方法 用RT—PCR法，对不同浓度rhIFN-γ及400U／mL rhIFN-γ作用不同时间诱导体外培养的正常人和TAO患者RFCD40 mRNA进行半定量分析。结果经100，200。400，1000U／mL rhIFN-γ作用48h后，正常人和TAO患者RFCD40的光密度比值与各自对照组比较，差别有统计学意义（P〈0．01）；两者同一浓度比较差别无统计学意义（P〉0．05）。经400U／mL rhIFN-γ作用12，24，48，72h后，正常人和TAO患者RFCD40的光密度比值与各自对照组比较差别有统计学意义（P〈0．05），两者同一时间比较差别无统计学意义（P〉0．05）。结论 正常人和TAO患者RF均表达CD40 mRNA。rhIFN-γ可上调正常人和TAO患者RFCD40 mRNA的水平，呈浓度和时间依赖。     

生长抑素对人球后成纤维细胞增殖的影响

OBJECTIVE: To elucidate the possible mechanism of Somatostatin 14 in the treatment of Graves' ophthalmopathy, thus providing laboratory data with the intent to underpin therapeutic developments. METHODS: The human retro-ocular fibroblasts (HROFb) was cultured and MTT colorimetry assay was used to determine the proliferation of HROFb. RESULTS: MTT colorimetry assay could precisely reflect the proliferation of HROFb. The absorbance was directly proportional to the numbers of the cells (r = 0.996, P < 0.001). Somatostatin 14 could enhance the cell proliferation percentage at lower levels (< 25 nmol/L) and inhibit that at higher levels (> 25 nmol/L). The cell proliferation correlated positively to Somatostatin 14 levels significantly (r = -0.9054, P < 0.001). CONCLUSION: Somatostatin 14 has a dual effect on HROFb.     

辛伐他汀与罗格列酮对动脉粥样硬化大鼠CD40和CD40L表达的影响

目的　观察辛伐他汀与罗格列酮对动脉粥样硬化大鼠CD40 和CD40L表达的影响。方法　通过高脂饮食和采用维生素D负荷法复制早期动脉粥样硬化大鼠模型,分别予辛伐他汀、罗格列酮(剂量分别为10 mg·kg-1·d-1、2.5 mg·kg-1·d-1,n=10)干预;采用酶法测定大鼠血脂、苏木精伊红(HE)染色观察大鼠胸主动脉病理变化、半定量逆转录聚合酶链反应检测大鼠腹腔巨噬细胞CD40 和CD40L mRNA的表达。结果　动脉粥样硬化组大鼠主动脉出现形成纤维增生性动脉硬化斑块,经辛伐他汀和罗格列酮干预后病变程度减轻;与动脉粥样硬化组相比,辛伐他汀或罗格列酮干预后的大鼠血总胆固醇均显著下降(P<0.01),低密度脂蛋白胆固醇逆转录聚合酶链反应及三酰甘油亦明显降低(P<0.05);CD40 和CD40L mRNA表达分别由0.96±0.24降至0.76±0.15和0.89±0.22、由0.73±0.18降至0.62±0.17和0.54±0.12(P<0.05)。结论　辛伐他汀与罗格列酮均能降低血脂,并通过降低巨噬细胞CD40和CD40L表达发挥抗动脉粥样硬化作用。     

甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞CD90表达的研究

目的检测培养的不同来源眼眶成纤维细胞(OF)是否存在表达CD90抗原的差异,为研究眼眶成纤维细胞潜在的功能异质性奠定基础。方法培养甲状腺相关眼病(TAO)患者和正常对照眼眶成纤维细胞,流式细胞术检测CD90的表达。结果正常人、TAO患者的眼外肌、眼眶脂肪/结缔组织来源的成纤维细胞均有部分细胞表达CD90。正常人/眼外肌来源OF、TAO患者/眼外肌来源OF、正常人/眼眶脂肪来源OF、TAO患者/眼眶脂肪来源OF的CD90 细胞的比例分别为82.95%±6.49%,80.83%±7.14%,64.55%±4.45%,59.20%±11.19%。眼外肌来源的成纤维细胞中CD90 的细胞比例高于眼眶脂肪/结缔组织来源的成纤维细胞(P<0.05),而正常人与患者之间差异没有统计学意义(P>0.05)。结论正常人和TAO患者OF表达CD90抗原不一致,且与解剖部位有关。     

硝苯地平对人牙龈成纤维细胞MMP-1和 MMP-2 mRNA表达的影响

目的探讨硝苯地平(Nifedipine)对人牙龈成纤维细胞(gingival fibroblasts, GFs)基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1, MMP-1)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA表达的影响。方法 取牙周手术切除的健康牙龈组织,组织块法分离及培养获得GFs,免疫细胞化学法对GFs进行鉴定。对GFs进行药物刺激,分为硝苯地平组(1μg/ml)、LPS组(1μg/ml)、硝苯地平+LPS组(分别为1μg/ml),同时设空白对照组。实时定量PCR检测各组24、48h时MMP-1和MMP-2 mRNA的表达水平。结果 组织块法获得的GFs生长状态良好;免疫细胞化学显示,GFs抗波形丝蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性。与空白对照组相比,硝苯地平组刺激48h后MMP-1、MMP-2 mRNA表达减少(P＜0.05);硝苯地平+LPS组MMP-1 mRNA表达明显增加(P＜0.05),MMP-2 mRNA表达无明显变化。结论 硝苯地平可能通过影响GFs MMP-1和MMP-2基因的表达而影响牙龈增生。     

可溶性CD40L促进甲状腺相关性眼病患者眼眶成纤维细胞增殖和透明质酸合成酶表达

目的 探讨可溶性CD40L(sCD40L)对甲状腺相关眼病(TAO)患者眼眶成纤维细胞(OFs)增殖和3种透明质酸合成酶(HAS)mRNA表达水平的影响,初步探讨sCD40L在TAO发病中的作用。方法 取5例TAO患者的眼眶成纤维细胞和2例正常人眼眶成纤维细胞进行原代培养,采用MTS比色法检测不同浓度及作用时间下的sCD40L对不同来源的眼眶成纤维细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR技术检测不同浓度的sCD40L对两种不同来源的眼眶成纤维细胞的3种HAS基因表达水平的影响。结果 12.5ng/ml以上浓度的sCD40L作用后对TAO患者眼眶成纤维细胞有促增殖作用,而25ng/ml以上浓度的sCD40L作用后才能对正常人眼眶成纤维细胞有促增殖作用。TAO患者眼眶成纤维细胞HAS3 mRNA的合成受sCD40L的影响而增加,并且呈现出浓度和时间依赖的趋势。结论 sCD40L对TAO患者眼眶成纤维细胞的生长以及HAS3基因的表达均有明显刺激作用,提示sCD40L在TAO的病理过程中起一定作用。     

冬虫夏草对人成纤维细胞ICAM—1及CD126表达的影响

目的：观察冬虫夏草（虫草）对人成纤维细胞ＩＣＡＭ－１及ＣＤ１２６表达的影响,探讨虫草抗肝纤维化的机制。方法：采用细胞培养法,于培养液中加入不同浓度的冬虫虫草。通过流式细胞仪观察经分子探针标记的ＩＣＡＭ－１及ＣＤ１２６阳性细胞数。结果：正常培养条件下,人成纤维细胞表达ＩＣＡＭ－１、ＣＤ１２６阳性率分别为（８６．６３±５．９４）％和（７７．９５±４．６８）％,虫草能明显抑制其表达。结论：冬虫虫草能抑制成纤维细胞表达某些细胞粘附分子,这可能是其抗肝纤维化机制之一。     

卡维地洛对大鼠颈动脉损伤后MMP－9 和TIMP－1 表达的影响

目的:观察卡维地洛( CAＲ) 对大鼠颈动脉损伤血管组织MMP－9、TIMP－1 表达的影响,探讨卡维地
洛防治再狭窄的机制。方法:雄性Wistar 大鼠90 只,随机分为假手术组、损伤组和CAＲ 组,后两组行颈动脉球
囊损伤术。三组均于术后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d 处死大鼠。光镜下观察血管损伤后内膜增生情况,用免疫组化
和ＲT－PCＲ 法检测MMP－9、TIMP－1 在各组术后不同时间点的表达情况。结果: 与损伤组比较,术后14 dCAＲ
组内膜面积、内膜与中膜面积比值显著减少,管腔面积显著扩大( P＜0． 05) ; 与损伤组比较,CAＲ 组术后3 ～ 14
dMMP－9 表达显著减少( P＜0． 05) ,而TIMP－1 表达无显著变化。结论: 卡维地洛有效抑制大鼠颈动脉损伤后
MMP－9 表达,抑制了VSMCs 迁移、增殖,改善了细胞外基质的合成与降解平衡,从而减轻再狭窄。     

颈动脉粥样硬化斑块CD40、MMP9的表达及意义

目的:观察CD40及基质金属蛋白酶-9(MMP9)在人颈动脉粥样硬化斑块中的表达,探讨CD40在斑块稳定性中的作用及可能机制.方法:将因颈动脉粥样硬化狭窄(>70%)行颈动脉内膜切除术的28例手术标本分为有临床卒中事件组(n=15)和无临床卒中事件组(n=13),另设尸检无动脉粥样硬化的正常颈动脉(n=8)作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测各组斑块中CD40和MMP9 mRNA水平,Western印迹检测各组CD40和MMP9蛋白表达水平,并对CD40与MMP9基因的表达作相关性分析.结果:无临床卒中事件组和有临床卒中事件组的CD40、MMP9基因的表达较正常对照组明显增高(P＜0.01),有临床卒中事件组明显高于无临床卒中事件组(P＜0.01),CD40与MMP9 mRNA表达有正的直线相关关系(r=0.964,P＜0.01).正常颈动脉中MMP9和CD40蛋白基本不表达;颈动脉粥样硬化斑块中MMP9和CD40蛋白表达较正常颈动脉明显增高;有卒中事件组颈动脉斑块MMP9和CD40蛋白表达高于无卒中事件组.结论:颈动脉粥样硬化斑块中CD40、MMP9表达增高,可能与斑块的稳定性密切相关.     

CD40-CD40L与OX40在急性髓性白血病中的表达意义

目的:检测在急性髓性白血病细胞中CD40、CD40L、OX40的表达并探讨其临床意义.方法:应用流式细胞仪检测46例未经治疗的初诊急性髓性白血病患者骨髓单个核细胞表面CD40、CD40L、OX40的表达,分为四组:仅表达CD40的患者组(①组)、表达CD40+CD40L+OX40-的患者组(②组)、三种抗原全部表达组(③组)和全部不表达组(④组).利用SPSS统计软件分析.结果:在有高白细胞表现的患者中,②组的发病率(100%)最高;在有血小板减少表现的患者中,①组的发病率(100%)最高;在有脾大表现的患者中,④组的发病率(6.7%)最低.结论:CD40的单独表达可能使白血病患者血小板的降低更加严重,而当合并CD40L表达时,会减少血小板低下的发生率.CD40的表达能增加患者伴有脾大表现的可能性.     

CD40L在特发性血小板减少性紫癜患者中的表达及其意义

目的研究特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者血浆中可溶性CD40配体（sCD40L）及T、B淋巴细胞和血小板上CD40L的变化,探讨CD40分子在ITP中的作用。方法应用酶联免疫吸附法检测患者血浆中sCD40L的变化;流式细胞术检测不同细胞上CD40L的表达水平。结果 ITP患者血浆中的sCD40L浓度明显高于正常对照组（P〈0.05）,且血小板计数对血浆中sCD40L浓度有一定程度的影响（r=0.58,P〈0.05）;ITP患者T淋巴细胞上CD40L的表达率较正常对照组明显升高（P〈0.05）。结论 ITP患者血浆及T细胞上CD40L升高,淋巴细胞表面的CD40-CD40L相互作用可能与ITP的发病有关。     

MMP_2、MMP_9、TIMP_1、TIMP_2和CD44V6在非小细胞肺癌中的表达及与转移、预后的关系

目的探讨CD44V6、基质金属蛋白酶MMP2、MMP9及抑制剂TIMP1、TIMP2在非小细胞性肺癌(NSCLC)中的表达及与转移、预后的关系。方法采用免疫组织化学S-P法,分别检测43例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中CD44V6、MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的蛋白表达。43例均随访或追观3年以上。结果43例NSCLC的CD44V6阳性表达率65.1%(28/43),15正常支气管上皮组织阳性表达13.3%(2/43),两者相比差异有显著性(P<0.05);肺鳞癌组织的CD44V6阳性率85.7%(18/21),肺腺癌组织阳性度45.5%(10/23),两者相比差异有显著性(P<0.01);Ⅲ期和Ⅰ期之间CD44V6表达有显著差异(P<0.05);肺癌伴淋巴结转移者的CD44V6表达高于未发生淋巴结转移者(P<0.05);CD44V6高表与患者3年生存期成负相关(P<0.05),但与肺癌细胞分化程度及临床参数等均无明显关系(P<0.05)。MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2在NSCLC中的阳性表达率(分别为79.1%、74.4%、55.8%及60.5%)明显高于正常支气管上皮组织(分别为27.7%、26.7%、20.0%、及26.7%)(P<0.01或P<0.05);腺癌中MMP9的阳性表达率(90.9%)显著高于鳞癌(57.1%,P<0.05);MMP2、MMP9的表达随着病理分级和临床分期增加而有增高趋势;而TIMPl、TIMP2的阳性表达则呈下降趋势。MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的阳性表达率与患者淋巴结转移和3年生存期密切相关(P<0.05),但与患者的临床参数均无明显关系(P>0.05)。结论CD44V6、MMP2、MMP9、TIMPl及TIMP2的过度表达与NSCLC的发展、淋巴结转移及预后有密切关系,可作为临床评估NSCLC的进展及预测其转移潜能和预后的重要指标之一。     

CD40、CD40L和sCD40在B细胞恶性血液肿瘤中的作用

CD40、CD40L和sCD40作为重要的信号分子,在诱导抗原呈递细胞、T细胞的活化与肿瘤免疫中发挥着重要作用。该文探讨这三种分子在急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤等疾病中的发病机制,以及多种CD40结合药物,如CD40L三聚体（CD40LT）、CD40单抗和CD40L阳性细胞目前作为免疫治疗药物在血液肿瘤治疗中的临床意义。     

冠心病CD163和sCD40L检测的临床意义

目的探讨外周血单核细胞表面血红蛋白清道夫受体（CD163）的表达水平和血清可溶性白细胞分化抗原40配体（sCD40L）在冠心病（CHD）中的意义,并探讨CD163和sCIMOL与炎症反应的关系。方法按照WHO关于冠心病的诊断标准,并结合冠状动脉造影（CAG）结果,选择84例冠心病（CHD）患者和20例非冠心病（NCHD）作为研究对象。84例CHD分为三组：急性心肌梗死（AMI）30例,不稳定型心绞痛（UA）30例,稳定型心绞痛（sA）24例。四组患者均在入院当天采用流式细胞仪检测全血单核细胞表面CD163表达水平（mfi）。采用双抗体夹心酶标免疫吸附法（ELISA）测定血清标本中的sCD40L水平（ng／ml）。同时测定ESR、CRP。结果四组患者CD163和sCIMOL水平有明显差异（P〈0．01）。CD163的表达水平在AMI组[（85．38±6．89）mfi]明显高于UA组的（65．18±5．52）mfi（P〈0．001）、SA组的（45．26±4．73）mfi（P〈0．001）和NCHD组的（20．95±3．42）mfi（P〈0．001）,UA组明显高于SA组和NCHD组（P〈0．001）,SA组明显高于NCHD组（P〈0．001）。sCD40L水平在AMI组[（8．48±4．13）ng／Ml]和UA组[（8．72±4．26）ng／mL]明显高于SA组的（4．36±2．68）ng／mL（P〈0．01）和NCHD组的（4．12±1．96）ng／mL（P〈0．01）。CD163的表达水平与sCD40L、ESR和CRP显著正相关（r=0．837,P〈0．001、r=0．722,P=0．001和r=0．734,P=0．001）。结论不同类型冠心病患者的CD163和sCD40L的水平不同,随着冠心病病情加重,CD163和sCD40L的水平逐渐升高,可作为判断冠心病临床类型、评估冠心病危险性的指标。CD163与sCD40L、ESR和CRP具有显著正相关关系。     

CD40、CD40L和sCD40在B细胞恶性血液肿瘤中的作用

CD40、CD40L和sCD40作为重要的信号分子,在诱导抗原呈递细胞、T细胞的活化与肿瘤免疫中发挥着重要作用.该文探讨这三种分子在急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤等疾病中的发病机制,以及多种CD40结合药物,如CD40L三聚体（CD40LT）、CD40单抗和CD40L阳性细胞目前作为免疫治疗药物在血液肿瘤治疗中的临床意义.     

sCD40/sCD40L在早发型子痫前期的表达及意义

目的 探讨sCD40/sCD40L在早发型子痫前朝的表达及意义.方法 采用酶联免疫吸附法测定2008年10月至2009年10月在哈尔滨医科大学附属第一医院住院分娩的早发型子痫前期患者60例(轻度子痫前期和重度子痫前期患者各30例),及随机选取30例正常晚期妊娠孕妇静脉血及脐血中sCD40L的水平.结果 sCD40L在...     

急性髓性白血病中CD40-CD40L与OX40的表达与Bcl-2和Bcl-xL表达的相关性分析

目的:探讨在急性髓性白血病(AML)中,CD40、CD40L、OX40抗原的表达与白血病相关基因Bcl-2和Bcl-xL表达的相关性.方法:根据流式细胞仪检测结果将46例未经治疗的初诊急性髓性白血病患者分为四组:仅表达CD40的患者组(①组)、表达CD40+CD40L+OX40-的患者组(②组)、三种抗原全部表达组(③组)和全部不表达组(④组),利用RT-PCR方法检测46例患者骨髓单个核细胞Bcl-2、Bcl-xL mRNA的表达,利用SPSS统计软件分析.结果:①组、④组Bcl-2、Bcl-xL的表达水平低于②、③组的表达水平.结论:在CD40与CD40L同时表达时,可以提高白血病细胞Bcl-2和Bcl-xL的表达.