舒林酸抑制结肠癌细胞株增殖诱导凋亡

目的 研究非选择性环氧化酶(COX) 抑制剂舒林酸对结肠癌细胞株HT-29 生长的影响及其参与引起细胞死亡的可能机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT) 比色法检测舒林酸对结肠癌细胞增殖的抑制,激光共聚焦显微镜(LSM)及荧光显微镜观察细胞凋亡,流式细胞仪( FCM) 分析其对细胞凋亡及细胞周期的影响.结果 MTT 显示舒林酸能呈剂量和浓度依赖性抑制HT-29的增殖.TUNEL 染色荧光显微镜下观察凋亡细胞呈棕褐色,AnnexinV/PI染色后LSM观察凋亡细胞胞膜绿染,胞核红染或呈桔黄色, FCM显示此药促进细胞的凋亡,使处于G0 /G1期的细胞比例显著降低.结论 舒林酸可抑制结肠癌细胞株HT-29生长,促进其凋亡,其机制可能与其阻止细胞周期的进展有关.     

微小RNA-451对结肠癌细胞侵袭能力的影响

目的 研究微小RNA-451(miR-451)对结肠癌细胞系SW480侵袭能力的影响.方法 用荧光染料标记的siRNA片段转染,优化转染条件,观察转染效率;通过化学方法合成miR-451 mimics,以脂质体包裹转染SW480细胞,并设单独脂质体转染组、无关序列转染组、未处理组(对照组),采用细胞计数试剂盒-8检测miR-451对细胞增殖的影响,流式分析检测miR-451对细胞凋亡的影响,Transwell小室检测miR-451对细胞侵袭能力的影响.结果 化学合成的miR-451 mimics(100 nM)转染对结肠癌细胞系SW480的增殖和凋亡无明显影响,但对SW480的侵袭能力有抑制作用.结论 转染miR-451 mimics能抑制结肠癌细胞系SW480的侵袭能力.     

洛铂对结肠癌细胞的抗肿瘤活性及机制研究

目的 探索洛铂在结肠癌细胞中的抗肿瘤活性,阐明潜在分子机制,为临床应用提供理论证据.方法 体外培养结肠癌细胞SW480,用MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度的洛铂分别处理结肠癌SW480细胞株24、48 h和72 h后,对结肠癌细胞增殖活性的抑制作用;用流式细胞仪检测不同浓度梯度的洛铂对结肠癌SW480细胞株凋亡率...     

三氧化二砷在体外抑制结肠癌细胞的研究

目的 在体外观察三氧化二砷(As2O3)对结肠癌细胞系HT-29的抑制作用,并探讨其作用机制,为其是否能作为结肠肿瘤的化疗药物提供理论基础.方法 将不同浓度As2O3作用于HT-29细胞不同时间后,用MTT检测细胞抑制率,光镜及透射电镜观察细胞形态学和超微结构的变化,通过流式细胞仪及共聚焦显微镜分析凋亡及自噬.结果 4.0μmol/L As2O3作用72h可明显抑制HT-29细胞增殖及诱发其凋亡,且抑制率与药物作用时间及浓度成正比.在凋亡早期细胞形态学变化在光镜下可见细胞缩小变圆,在电镜上可见细胞质浓缩、核固缩及自噬溶酶体.4.0μmol/L As2O3作用72h后HT-29细胞凋亡率为25%.结论 As2O3能明显抑制结肠癌细胞系HT-29的增殖,其作用机制与引起凋亡及自噬密切相关.     

VEGFR-3siRNA对人结肠癌细胞生长和侵袭力的影响

目的 探讨不同浓度血管内皮生长因子受体-3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人结肠癌细胞生长和侵袭力的影响.方法 设计合成VEGFR-3siRNA,以不同剂量转染到人结肠癌细胞株(human colon adenocarcinoma cell line,LoVo)细胞中,采用四甲基偶氮唑蓝显色法[3-(4,5-dimethl-2 thiahiazoyi)-3,5-di-phenyl-tetrazolium bromide,MTT]观察细胞生长变化,应用半定量逆转录-聚合酶链反应、Western-blot检测转染前后VEGFR-3 mRNA和VEGFR-3蛋白表达的变化,基质-黏附实验检测细胞转染后黏附能力,体外侵袭试验检测转染后肿瘤细胞侵袭性的改变.结果 VEGFR-3 siRNA引起LoVo细胞生长抑制,在一定范围内呈浓度、时间依赖性;转染siRNA后VEGFR-3 mRNA和VEGFR-3蛋白表达下降;转染siRNA 72 h后LoVo细胞的黏附能力显著下降,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);VEGFR-3 siRNA使LoVo细胞侵袭能力明显下降,LoVo细胞穿膜细胞数明显低于空白对照组、非特异性对照组(P＜0.05).结论 VEGFR-3siRNA能够在LoVo细胞中引发RNA干扰效应,下调VEGFR-3基因的表达可以抑制细胞增殖,使LoVo细胞黏附力和侵袭能力明显下降.     

蓝莓提取物对人结肠癌细胞的体外抑制作用及机制研究

目的研究蓝莓提取物对人结肠癌细胞株HCT116增殖的体外抑制作用及其机制。方法应用不同浓度梯度蓝莓提取物处理人结肠癌HCT116细胞,噻唑蓝（M1T11）比色法检测肿瘤细胞增殖情况,应用流式细胞术检测蓝莓提取物对HCT116细胞体外凋亡情况影响,并进一步研究了Caspase-3活性以及NF-KB表达变化情况以探讨相关机制。结果蓝莓提取物对HCT116细胞的增殖抑制作用呈现明显的剂量及时间效应关系;流式细胞仪检测显示各浓度（0．25、0．50、1．00、2．00mg／L）蓝莓提取物处理组HCT116细胞平均凋亡率分别为（8．86±1．03）％、（16．33±1．99）％、（49．29±6．73）％、（63．68±8．26）％,除0．25mg／L组外,均显著高于对照组的（6．62±0．97）％：1．00mg／L蓝莓提取物还可显著升高肿瘤细胞巾Casepase-3活性,抑制NF-κB表达。结论蓝莓提取物可能通过激活Casepase-3级联反应通路和抑制NF-κB表达,诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡从而抑制其体外的生长与增殖。     

黄连素对结肠癌细胞生长的影响及其机制的研究

目的 观察黄连素对结肠癌细胞株生长的影响,探讨其作用机制.方法 应用不同浓度的黄连素作用于结肠癌细胞后,通过细胞免疫组化SP法检测细胞膜表面的cox-2蛋白的表达,用流式细胞仪观察癌细胞凋亡的情况,并应用RT-PCR法检测cox-2 mRNA的含量.结果 黄连素对结肠癌的生长有明显抑制作用,并有浓度依赖性.在相同时间内,药物处理组的cox-2蛋白和mRNA的表达与空白对照组相比较均有显著性差异(P<0.01);流式细胞仪分析存在G2/M阻滞,在G1峰前有明显的凋亡峰.结论 黄连素能够有效地抑制结肠癌细胞的生长,其机制可能是通过cox-2诱导细胞凋亡.     

选择性环氧合酶-2抑制剂对胃癌细胞生长的影响

目的　观察选择性环氧合酶 - 2 ( COX- 2 )抑制剂 (美洛昔康、塞来昔布、罗非昔布 )对人胃癌细胞株SGC790 1生长的影响以及罗非昔布对人胃癌裸鼠移植瘤生长的抑制效应。方法　采用 3H-胸腺嘧啶核苷 ( 3H- Td R)掺入法了解细胞的增殖 ;用免疫组化检测细胞增殖核抗原 ( PCNA)及细胞 COX- 2的表达 ;用 TUNEL 染色法检测细胞凋亡。建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型 ,给予罗非昔布 8周 ,观察肿瘤大小、COX- 2及 PCNA表达情况。结果三种选择性 COX- 2抑制剂均较阿司匹林更有效抑制体外培养的胃癌细胞 3H- Td R掺入 ,3H-胸腺嘧啶掺入值与药物浓度呈负相关。美洛昔康、塞来昔布、罗非昔布对胃癌细胞 3H-胸腺嘧啶掺入的 IC50 分别为 1.18× 10 - 7mol/ L、1.68× 10 - 8mol/ L、4.3 9× 10 - 9mol/ L。经 1× 10 - 5m ol/ L 的上述三种药物作用 2 4h,SGC790 1细胞凋亡指数分别为 19.8%± 1.8%、2 4.6%± 1.2 % 3 1.2 %± 2 .2 %。 COX- 2抑制剂的选择性越高 ,凋亡指数也显著升高 ( P<0 .0 1)。罗非昔布对裸鼠胃癌原位移植瘤的抑瘤率为 93 .9% ;肿瘤组织的 COX- 2、PCNA表达均较对照组明显下降。结论　COX- 2抑制剂的选择性越高 ,对胃癌生长抑制作用越强。罗非昔布可成为胃癌综合治疗的重要药物之一     

苏林酸诱导结肠腺癌HT-29细胞凋亡的实验研究

为观察苏林酸对结肠腺癌HT-29细胞有无促凋亡作用,采用流式细胞仪检测、DN A电泳和透射电镜观察苏林酸对HT-29细胞的促凋亡作用.结果:流式细胞术、DNA电泳和透射电镜观察均显示苏林酸可诱导HT-29细胞凋亡,且具有时间和剂量依赖性.用0.3mmol/L 、0.6mmol/L和1.2mmol/L苏林酸处理48小时,凋亡细胞分别占5.8%、7.6%和11.7%,处理72 小时则分别升为12.5%、15.4%和24.2%,而对照组凋亡细胞分别占2.9%和5.1%,处理组和对照组差异显著(P＜0.05).以上结果表明,本实验条件下,苏林酸可诱导HT-29细胞凋亡,抑制其增殖.     

苦参碱对大肠癌细胞凋亡发生及Bad蛋白表达的影响

目的 观察苦参碱(matrine)对体外大肠癌细胞凋亡发生及Bad蛋白表达的影响.方法 大肠癌LOVO细胞株分为对照组和苦参碱不同浓度作用组,将终浓度分别为0.1、0.5、2.5g/L的苦参碱加入培养液中,观察大肠癌细胞形态学变化,测定各组苦参碱作用1、4、16h后的细胞活力(MTT法)、细胞凋亡率(流式细胞术)、Bad蛋白含量(免疫组化法和western blot法).结果 与对照组比较,苦参碱组出现细胞皱缩、脱壁、细胞漂浮及细胞破碎现象,细胞活力显著降低,细胞凋亡率增加,Bad蛋白表达增加,有明显的时间和浓度依赖关系.结论 苦参碱能提高大肠癌细胞凋亡发生率和Bad蛋白的表达.     

三氧化二砷诱导肠癌HT-29细胞周期阻滞及凋亡的研究

目的：探讨三氧化二砷（AsO3）对结肠癌细胞增殖的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响。方法：采用MTr法测定细胞增殖活力，通过细胞形态学观察细胞分裂及凋亡，应用流式细胞仪进行细胞周期解析、凋亡的检测。结果：As2O3呈剂量-时间依赖性抑制结肠癌HT-29细胞系的增殖，作用24、48及72h后抑制50％细胞生长的药物浓度（IC50）分别为40．03,13．76,4．53μmol/L，与对照组差异显著（P〈0．05）。2μmol/L与5μmol/L的As2O3作用24h后，细胞周期出现G2/M期阻滞及亚二倍体凋亡峰，随着作用时间的延长，凋亡细胞随岛，M期细胞减少而逐渐增多。细胞形态学观察分裂期细胞及凋亡细胞明显增加。结论：As12O3抑制结肠癌HT-29细胞的增殖，诱导G2/M期阻滞及细胞凋亡。     

生长激素对结肠癌肿瘤细胞体外影响

目的: 检测生长激素对体外培养的结直肠癌细胞的影响,并探讨其作用机制?方法:结肠癌细胞株Lovo细胞随机分组,加或不加不同浓度的生长激素孵育不同时间后,以MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡情况?结果:MTT法测定表明,生长激素对Lovo细胞有明显的促进增殖效应,12~24 h起效,48 h时达高峰,生长激素达到一定浓度后,其促增殖作用不再增加?流式细胞仪检测生长激素对结肠癌细胞的影响显示:浓度为200 ng/ml的生长激素作用Lovo细胞24 h后,G0/G1细胞比例下降,S期细胞比例明显上升,G2/M期细胞比例稍上升,凋亡指数无明显变化(P=0.187);72 h时, G0/G1期细胞下降更为明显,S期细胞比例上升亦更为明显,G2/M期细胞上升明显,凋亡细胞比例明显增高(P < 0.01)?结论:生长激素对Lovo细胞有明显的促增殖作用,并有受体饱和效应?该作用是通过改变细胞周期分布,促进G0/G1期细胞向S期?G2/M期细胞转变实现的?     

AQP-5对结直肠癌细胞生长的影响及机制

目的 探讨水通道蛋白-5(AQP-5)对细胞增殖及凋亡影响及可能的机制.方法 体外常规培养人结直肠癌COLO 205和SW480细胞,取对数生长期的细胞用于实验.通过siRNA技术抑制内源性AQP-5的表达,并经免疫荧光、PCR检测AQP-5-siRNA转染效率,利用MTT法检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI和TUNEL检测细胞凋亡情况,RT-PCR和Western blot检测Bax、Bcl-2表达变化.结果 在COLO 205和SW480细胞株中,转染AQP-5-siRNA后AQP-5表达下调达90%.MTT分析结果显示,与转染NS-siRNA组相比,转染AQP-5-siRNA组的细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05);流式细胞分析结果发现,与NS-siRNA组细胞相比,转染AQP-5-siRNA后细胞凋亡率显著增加(P<0.05);荧光实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果显示:与转染NS-siRNA组相比,转染AQP-5-siRNA明显提升Bax/Bcl-2 mRNA和蛋白的表达.结论 AQP-5-siRNA可体外促进结直肠癌细胞凋亡,其机制可能与Bax/Bcl表达有关.     

肝细胞生长因子和MAPK途径在大肠癌细胞体外侵袭中的作用

目的:探讨肝细胞生长因子/离散因子(HGF/SF)在大肠癌细胞体外侵袭中的作用。方法:用细胞迁移系统分析HGF、PD98059和SB203580处理的大肠癌细胞Caco-2和Colo320体外迁移能力;用逆转录聚合酶链反应检测Caco-2细胞中MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2的mRNA表达。结果:HGF对Colo320细胞迁移无影响。细胞培养48 h后,Caco-2细胞迁移数HGF组和PD98059组与对照组比较、HGF组和PD98059组比较,差异显著[对照组(104.40±4.77/)ml,HGF/SF组(126.80±5.40/)ml,PD98059组(82.80±4.15/)ml,P<0.01]。HGF组MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2都有表达,MMP-2高表达;PD98059组TIMP-1和TIMP-2高表达。结论:HGF促使Caco-2细胞迁移。HGF/SF上调Caco-2细胞中MMP-2和MMP-9的表达,使肿瘤细胞破坏周围基底膜能力增强而容易形成转移。HGF对某些大肠癌细胞发挥促进侵袭、促进转移的作用,MAPK途径在HGF/SF诱导的大肠癌细胞Caco-2中发挥生物学效应。     

STAT3磷酸化抑制剂隐丹参酮提高5-FU诱导的结直肠癌细胞凋亡

目的 探究结直肠癌细胞中利用信号转导蛋白和转录激活因子3(STAT3)磷酸化抑制剂隐丹参酮(CTS)抑制STAT3 705位点磷酸化对5-氟尿嘧啶(5-FU)效果的影响.方法 采用Western印迹法检测5株结直肠癌细胞中STAT3的磷酸化水平,挑选磷酸化程度最高的2株细胞进行后续实验研究.采用Western印迹法检测5-FU处理后结直肠癌细胞STAT3磷酸化水平的变化.应用MTT实验评价5-FU与CTS联合处理结直肠癌细胞对细胞活性影响.利用流式细胞仪检测5-FU与CTS联合处理细胞后对细胞凋亡的影响,同时利用Western印迹法检测抗凋亡蛋白Bcl2的变化情况.结果 5-FU能够降低结直肠癌细胞STAT3 705位点磷酸化水平,利用CTS抑制STAT3磷酸化极大的增强了5-FU的作用效果,降低了结直肠癌细胞活性,促进了细胞凋亡.同时进一步机制研究表明CTS与5-FU联合作用降低了Bcl2蛋白水平.结论 结直肠癌细胞中,利用STAT3磷酸化抑制剂CTS抑制STAT3磷酸化水平能够明显提高5-FU的作用效果.     

短程全反式维甲酸对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨短程全反式维甲酸(ATRA)对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测ATRA对LoVo细胞的生长抑制率并筛选合适的药物用量,流式细胞仪检测ATRA诱导的肿瘤细胞周期和凋亡率变化。结果选择1.0μmol·L-1ATRA作为进一步实验的工作浓度。1.0μmol·L-1ATRA作用12 h后G1期细胞开始增多,48 h后G1期细胞明显增多并伴S期、G2/M期细胞减少(P<0.05)。1.0μmol·L-1ATRA作用48、72 h组的早期凋亡率和总凋亡率与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);ATRA作用48、72 h组的早期凋亡率和总凋亡率的组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论短程1.0μmol·L-1ATRA主要通过阻滞LoVo细胞于G1期并诱导其细胞发生早期凋亡,可明显抑制肿瘤细胞的增殖。     

结直肠癌组织中卷曲螺旋结构域12蛋白表达与肿瘤生长侵袭的关系

目的观察结直肠癌组织中卷曲螺旋结构域12（CCDC12）蛋白的表达情况,并探讨CCDC12蛋白与肿瘤生长侵袭的关系。方法免疫组织化学SP法检测94 例结直肠癌组织及癌旁正常肠黏膜组织中CCDC12蛋白的表达,同时检测与肿瘤生长侵袭有关的蛋白质Cyclin D1、P21、MMP-9 及TIMP-1 蛋白表达。记录患者肿瘤生物学特征,分析CCDC12 蛋白与结直肠癌生物学特征及Cyclin D1、P21、MMP-9及TIMP-1蛋白的关系。结果CCDC12、CyclinD1、MMP-9 及TIMP-1 蛋白在结直肠癌组织中阳性表达率均高于癌旁正常肠黏膜组织（χ2=38.480、30.312、38.368 及7.667,均P<0.01）,P21 蛋白在两种组织中差异无统计学意义（χ2=0.862,P =0.353）。在结直肠癌组织中CCDC12 蛋白阳性表达与肿瘤细胞分化、浸润深度、淋巴结转移及TNM 分期有关（χ2=5.130、5.902、9.760 及4.458,P =0.024、0.015、0.002 及0.035）。Spearman 相关性分析发现,CCDC12 与Cyclin D1、MMP-9蛋白表达呈正相关（r =0.302和0.365,p =0.003和0.001）,CCDC12与P21表达呈负相关（r =-0.287,p =0.005）。结论结直肠癌中存在CCDC12 蛋白表达增高现象,CCDC12 可能通过与CyclinD1、P21及MMP-9 蛋白的相互作用参与了结直肠癌的生长及侵袭过程。     

RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及其对癌细胞生物学行为的影响

目的 探究RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及对癌细胞生物学功能的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测不同结直肠癌细胞系DiFi、SNU175、HT-29、HCT-15细胞中RasGRF1mRNA;体外培养人结肠癌细胞,随机分为si-RasGRF1-NC组（阴性对照）、si-RasGRF1组（沉默RasGRF1表达）、NG组（空白对照）。采用qRT-PCR检测各组RasGRF1 mRNA,CCK-8法检测细胞存活情况,AnnexinV/PITC双染法检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞PI3K/Akt通路蛋白。结果 DiFi细胞中RasGRF1 mRNA相对表达量最高（P <0.05）,选择DiFi细胞进行后续实验。si-RasGRF1组光密度值低于NG组、si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组细胞凋亡率高于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量低于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <...     

Effect of c-Met inhibitor SU11274 on human colon cancer cell growth

Background Colon cancer is one of the major malignancies worldwide and it still remains resistant to much of the currently available chemotherapy. Downregulation of HGF/c-Met signaling pathway is an emerging therapy for cancer treatment.

Methods In this study, the inhibitory effects of c-Met phosphorylation were observed with SU11274 on different colon cancer cell lines in vitro.

Results The results revealed the significant inhibitory effects of SU11274 on cell proliferation and cell survival, in a time and dose-dependent manner. Furthermore, the inhibitory effects of SU11274 on different subgroups of colon cancer cells via the HGF/c-Met signaling pathway were implicated in this study.

Conclusion The results suggested the possible selective therapeutic effects of c-Met inhibitor on colon cancer.