益气清络方对类风湿关节炎患者miR-146a表达和Th17、Treg水平的影响

目的:探讨益气清络方对类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-146a的表达及辅助性T细胞(Th)17、调节性T细胞(Treg)水平的影响。方法:纳入60例RA患者,随机分为治疗组(n=30)和对照组(n=30),同时纳入30例健康志愿者作为健康对照组。所有患者均给予甲氨蝶呤(MTX)治疗,治疗组患者辅以益气清络方口服,对照组患者辅以安慰剂口服,两组治疗周期均为12周。分别于治疗前后检测所有患者的PBMC中miR-146a的表达及Th17、Treg水平,且采用相同方法检测所有健康志愿者的PBMC中miR-146a的表达及Th17、Treg水平。结果:(1)与健康志愿者比较,RA患者的PBMC中miR-146a的相对表达量和Th17水平均显著升高(P0.05,P0.01),Treg水平明显降低(P0.01)。(2)治疗后,两组患者的PBMC中miR-146a相对表达量及Treg水平较治疗前均明显升高(P0.05,P0.01),Th17水平明显下降(P0.01);且治疗组患者的PBMC中miR-146a的相对表达量及Treg水平均明显高于对照组(P0.01),Th17水平明显低于对照组(P0.01)。结论:益气清络方结合传统西药治疗RA的机制可能与上调miR-146a的表达,调节Th17、Treg水平相关。     

原苏木素A对心脏移植后大鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨苏木醇提单体原苏木素A对心脏移植后大鼠T淋巴细胞亚群的免疫抑制和对心肌的保护作用。方法应用大鼠腹腔同种异位心脏移植模型。实验分为原苏木素A组、环孢素组、对照组A（手术不给药组）、对照组B（不给药不手术组）。术前2天给药,术后第7天采血,应用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群的变化,并检测心肌组织的病理改变。结朵与心脏移植对照组比较,原苏木素A组、环孢素A组术后3天和7天时均减轻心脏移植后急性排斥反应所引起的心肌病理损害（P〈0．01）;与对照组B相比较,对照组ACD4^＋／CD8^＋明显升高（P〈0．01）,环孢索A组、原苏木素A组则可抑制CD4^＋／CD8^＋的升高。结论苏木醇提单体原苏木素A对心脏移植后发生的急性免疫排斥反应有明显的抑制作用,对心肌有明显的保护作用。     

慢性乙型肝炎患者体内不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达

目的：通过检测慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达, 了解不同来源标本中2种miRNAs表达的相关性,为研究miRNA在肝病中的作用机制提供标本选择的理论依据。 方法：采用real-time PCR对41例CHB患者核苷(酸)类似物抗病毒治疗基线期和第104周血浆、外周血单个核细胞和肝 组织中miR-146a和miR-155的表达进行检测,分析3种来源标本中这2种miRNAs表达的相关性。结果：治疗第104周时 血浆、外周血单个核细胞和肝组织miR-146a和miR-155的表达水平均较基线期显著下调(P<0.05)。基线期血浆和肝组 织(r=0.560,P=0.007)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.428,P=0.047)miR-146a的表达均相关。基线期血浆和肝组织 (r=0.587,P=0.004)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.483,P=0.023)miR-155的表达相关,miR-146a和miR-155在血浆中 的表达与外周血单个核细胞中的表达不相关(P>0.05)。结论：与外周血单个核细胞相比,血浆中miR-146a和miR-155的 表达能更好地反映和预测肝组织miR-146a和miR-155的表达,血浆可作为研究miR-146a和miR-155在肝病中作用机制的 标本来源。     

CD4+CD25+Treg细胞对角膜移植免疫排斥反应的影响

角膜移植排斥反应是由多种免疫细胞和免疫分子参与的复杂的免疫反应过程。CD4~+CD25~+Treg细胞介导的移植耐受,利用免疫系统的原始功能诱导供体产生特异性免疫耐受而不影响免疫系统的其它功能,为移植免疫排斥反应的防治提供新的思路。总结CD4~+CD25~+Treg细胞介导的移植耐受对角膜移植免疫排斥反应的影响,为深入了解Treg细胞功能及其相关免疫负调节机制对于角膜移植免疫排斥反应的影响提供理论依据。     

结缔组织生长因子在大鼠移植心脏急性排斥反应期的表达

目的:检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在大鼠移植心脏急性排斥期(acute rejection,AR)的表达,并探讨其与移植心脏心肌纤维化的关系.方法:取Wister大鼠16只作为供体,取SD大鼠16只作为受体,进行腹部异位心脏移植,采用10 mg/(kg·d) 环孢霉素A,40 mg/(kg·d)骁悉和3 mg/(kg·d)甲泼尼龙三联免疫抑制疗法,2周后取其中10例移植心脏标本作为实验组,10例健康Wister大鼠心脏标本作为对照组(normal heart,NH).采用HE及van Gieson染色观察心肌病理形态、心脏血管狭窄程度;并进行纤维化的半定量评分.采用免疫组化半定量方法检测CTGF在心脏组织中的表达,并分析其与心肌纤维化的相关性.结果:移植心脏血管壁及心肌间质组织内有大量粒细胞浸润,呈典型的急性排斥反应期改变;移植心脏血管内膜及大量纤维组织增生,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);CTGF在移植心脏组织中有明显表达,且主要表达于血管壁及心肌损伤部位,而正常心脏无表达,CTGF灰度值为 (AR vs NH: 103.52±6.42 vs. 182.61±8.72,P<0.05).CTGF灰度值与移植心脏纤维化显著负相关(r=-0.734,P<0.01).结论:CTGF在急性移植心脏组织中有明显表达且可能与移植心脏心肌纤维化相关.     

缺血再灌注损伤对移植心脏急性排斥反应的影响

目的:探讨缺血再灌注损伤对移植心脏急性排斥反应的影响.方法:分别建立有IRI(同种系和异系)和避免IRI(同种系和异系)4种大鼠异位心脏移植模型,并设立空白对照组,于术后第7天取供心检测移植心脏,采用RT-PCR方法检测移植心脏MHC-2 mRNA、B7-1/B7-2 mRNA表达情况及应用免疫组织化学染色方法观察CD4+T细胞在供心的浸润情况.结果:同种系两组心脏移植研究表明,IRI增强了移植心脏的免疫源性,但CD4+T细胞浸润情况两组间无明显差异(P>0.05);结合同种异系两组心脏移植研究表明,同种异系移植心脏的免疫源性比同种系两组心脏移植均明显增强,且IRI的异系组增加更明显,CD4+T细胞浸润情况更显著(P<0.05).结论:IRI促进移植心脏排斥反应的发生,不停跳心脏移植由于避免了IRI,因此有助于减轻急性排斥反应发生的强度或延缓急性排斥反应的发生.     

急性血管性异种排斥反应中心肌的病理变化与T细胞的免疫组织化学研究

目的用仓鼠对小鼠心脏移植模型 ,探讨T细胞在异种急性血管性排斥反应中的作用。方法建立仓鼠对小鼠颈部异位心脏移植模型。分三组 :仓鼠—Balb/c小鼠 ,仓鼠—Balb/c裸小鼠 ,仓鼠—裸小鼠 (移植术后第 1 0 0日自小鼠尾静脉输 3× 1 0 7Balb/c脾细胞 )。观察移植物的平均存活时间及病理学变化 ,移植心组织内CD4+及CD8+T细胞的浸润。结果各组移植心的平均存活时间分别为 3 .3 8± 0 .5 2、>1 0 0、8.3 3± 2 .1 4日 ;排斥的移植心病检提示为典型的异种急性血管性排斥反应 ,可见CD4+T细胞浸润 ;而移植于裸鼠的长期存活移植心结构完整 ,未见细胞浸润。结论排斥反应依赖于T细胞的存在 ,CD4+T细胞在介导该排斥反应中起重要作用     

雷公藤内酯醇抗心脏移植排斥反应的实验研究

目的验证雷公藤内酯醇的抗移植排斥反应作用。方法应用小鼠同种异位心肌移植模型。结果和结论雷公藤内酯醇可明显延长移植心的存活期,其免疫抑制效果与用药剂量和给药时机有关,术后给药可明显延长移植物存活期。     

类风湿关节炎患者外周血miR-146a及miR-16的表达及与病情活动的相关性研究

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中miR-146a及miR-16的表达及与RA病情活动的相关性。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应检测RA患者活动组24例、缓解组16例及健康对照16例PBMCs-miR-146a、miR-16的表达水平,并且与RA患者临床指标进行相关性分析。结果 RA患者组miR-146a、miR-16的表达高于健康对照组(P<0.05);在RA活动组与缓解组的比较中发现活动组miR-146a、miR-16表达水平高于缓解组(P<0.05)。RA患者组miR-146a、miR-16的表达与ESR、CRP及DAS28评分之间呈正相关(P均<0.01),与RF无相关性(P>0.05)。结论 RA患者外周血miR-146a和miR-16表达上调,其表达水平与RA病情活动相关,提示miR-146a和miR-16的检测可作为RA病情活动的判断指标。     

miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮患者中的表达

目的通过检测miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)和血浆中的表达,探讨miR-155和miR-146a的表达在SLE发病中的作用。方法 SLE患者20例,健康对照组15例。取外周血分离PBMC和血浆,提取和纯化miRNA,实时定量PCR检测miR-155和miR-146a的表达,以小分子RNAU6作为内对照,计算标准化后的2-△Ct值表示miRNA的相对表达含量。结果 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a的表达水平是健康对照组的3.07倍(P<0.01)和1.91倍(P=0.056);SLE患者血浆中miR-155和miR-146a的表达水平比对照组低,但差异无统计学意义;同时SLE患者中蛋白尿阳性组血浆中两种miRNAs表达水平有降低的趋势,活动组患者血浆中两种miRNAs表达水平也有降低的趋势,但差异无统计学意义。结论 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a异常高表达,但血浆miR-155和miR-146a的表达水平有下降的趋势。     

诱导型一氧化氮合酶mRNA在心脏移植急性排斥反应中的表达

目的研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达与心脏移植急性排斥反应的动态关系,以探讨iNOS基因mRNA表达能否作为心脏移植急性排斥反应的监测指标.方法复制大鼠同种异位心脏移植模型,并采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测移植心心肌iNOS基因mRNA表达水平.结果实验组第3、5、7、9、11天移植心心肌表达iNOS mRNA吸光度测定依次为:(0.44±0.19、0.97±0.25、1.20±0.45、0.89±0.27、0.77±0.22)以β-actin为内参照.对照组移植后各天均无iNOSmRNA表达.结论急性排斥反应中移植心心肌iNOS基因mRNA表达早且表达水平显著升高,故iNOS基因mRNA表达可作为心脏移植急性排斥反应早期的一个监测指标.     

miR-146a在食管鳞癌中的表达及意义

目的： 分析食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)组织中miR-146a的表达情况及其与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。方法： 采用茎环结构的逆转录实时定量PCR方法检测50例ESCC患者癌组织及癌旁正常组织中miR-146a的表达情况,并分析其与临床病理特征间的关系。结果： miR 146a在癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织（Z=-3.162;P<0.01）;miR-146a的高表达分别与食管癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期显著相关（P<0.01）。结论： miR-146a的高表达在ESCC的发生发展中发挥重要作用。     

新疆妇女宫颈病变组织 miR-146a/133b 的表达及临床意义

目的：探讨miR-146 a/133 b在新疆维、汉民族宫颈组织中的差异性表达及其临床意义。方法采用RT-qPCR法检测 miR-146a/133b 在石蜡包埋的宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌组织中的相对表达量,分析其在宫颈癌发生、发展中的临床意义。结果与宫颈炎组织比,CIN 和宫颈癌组织 miR-146a/133b 的表达水平显著升高(P <0.05),且随宫颈病变的加重,两者的表达水平逐渐升高,宫颈癌组织中维、汉民族 miR-146a 存在差异性表达(P <0.05)。结婚年龄小于20岁、肿瘤直径大于或等于4 cm、有 HPV 感染的宫颈癌组织中 miR-146a/133b 呈高表达(P <0.05)。结论miR-146a/133b 参与宫颈癌的发生、发展,可能成为宫颈癌病情预测及评估新的分子标志物。     

IL-17在小鼠肾移植急性排斥反应早期诊断中的作用

目的:研究Th17细胞及相关因子白细胞介素17 (IL-17)在小鼠肾移植排斥反应中的表达及意义.方法:建立小鼠肾移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组;在移植术后3,7d分别应用ELISA检测2组小鼠血清中IFN-γ和IL-17的含量,应用流式细胞技术检测移植肾中浸润淋巴细胞中Th1和Th17细胞数量,取移植肾经10％甲醛固定后行常规病理检查.结果:与同系移植组相比,急性排斥反应组术后第3天血清IFN-γ含量无明显差异而II-17含量显著增高(P＜0.05),术后第7天血清IFN-γ和IL-17含量均显著增高(P＜0.05);急性排斥反应组中血清IFN-γ和IL-17含量术后第7天较第3天均显著增高(P＜0.05);急性排斥反应组移植肾中浸润淋巴细胞中Th1与Th17细胞比例在术后第3天及第7天较同系移植组均明显增多(P＜0.05);急性排斥反应组中移植肾中浸润淋巴细胞中Th1与Th17细胞比例术后第7天明显高于第3天(P＜0.05);病理组织学检查急性排斥反应组随着移植时间的延长,排斥反应逐渐增强.结论:Th17细胞在肾移植排斥反应的发生发展中可能起着非常重要的作用,对受体血清中细胞因子IL-17的检测可作为急性排斥反应早期诊断的预见性和特异性指标.     

IL-17在小鼠肾移植急性排斥反应早期诊断中的作用

目的:研究Th17细胞及相关因子白细胞介素17 (IL-17)在小鼠肾移植排斥反应中的表达及意义.方法:建立小鼠肾移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组;在移植术后3,7d分别应用ELISA检测2组小鼠血清中IFN-γ和IL-17的含量,应用流式细胞技术检测移植肾中浸润淋巴细胞中Th1和Th17细胞数量,...     

血清miR-146a在脓毒症早期诊断中的价值

目的 评价血清miR-146a在脓毒症早期诊断中的价值。方法 采集2012年1月至2013年2月山东大学齐鲁医院重症监护病房内脓毒症患者45例(A组)、普通外科术后出现全身炎症反应综合征(SIRS)的患者30例(B组)及同期内在体检中心接受查体的健康人员20例(C组)的血样,并记录各研究对象的年龄、性别等一般信息,采用Taqman探针法实时定量PCR检测其血清miR-146a的表达水平,ROC曲线法分析其对脓毒症的诊断性能。结果 与C组比较,A、B两组患者血清miR-146a表达水平明显降低(P＜0.05),且A组患者血清miR-146a表达水平较B组患者亦降低(P＜0.05);血清miR-146a诊断脓毒症的敏感性及特异性分别为99.0%、68.0%,其ROC曲线下面积为0.82。结论 血清miR-146a作为脓毒症早期诊断指标具较高的特异性与敏感性,且可较好区分脓毒症与SIRS。