miR-17-5p在动脉粥样硬化小鼠中的作用机制研究

目的 探讨miR-17-5p在动脉粥样硬化发展中对组织炎症反应及氧化应激水平的影响.方法 高脂喂养ApoE-/ -小鼠12周构建动脉粥样硬化( AS)模型,尾静脉注射miR-17-5p拮抗剂. HE染色观察主动脉的病理变化;TUNEL染色观察细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达情况; ELISA 检测炎症因子的表达.通过检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶( SOD )和髓过氧化物酶(MPO)的活性评估氧化应激水平.结果 抑制 miR-17-5p减轻了AS小鼠主动脉的病变程度,减少了主动脉细胞凋亡,同时下调了 Bax、 cleaved-caspase-3、 cleaved-PARP 的表达,上调了Bcl-2 蛋白表达.抑制 miR-17-5p后,AS小鼠主动脉TNF-α、IL-6水平下降,IL-10水平上升,同时MDA含量及MPO活性受到抑制,SOD活性上调.结论 抑制miR-17-5p可以通过减轻动脉粥样硬化小鼠主动脉的炎症反应和氧化应激水平缓解动脉粥样硬化病变. miR-17-5p可能是治疗动脉粥样硬化的潜在靶点.     

血清miR-423-5p、miR-499-5p和miR-210-3p在慢性心力衰竭大鼠中的表达及意义

目的 探讨血清微小RNA-423-5p(miR-423-5p)、微小RNA-499-5p(miR-499-5p)、微小RNA-210-3p(miR-210-3p)在慢性心力衰竭(CHF)大鼠中的表达及意义。方法 SD大鼠随机分为对照(NC)组(n=15)和CHF组(n=15),采用腹腔注射阿霉素建立CHF模型。建模6周后检测两组心功能指标[左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、左室射血分数(LVEF)]、血清miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p表达水平及氨基末端脑利钠肽前体(NTpro-BNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平。采用Pearson法分析血清miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p与心功能指标、NTpro-BNP、cTnI相关性。结果 与NC组比较,CHF组心功能指标LVEDV和LVESV升高(P<0.05),miR-423-5p、miR-499-5p和miR-210-3p表达水平升高(P<0.05),NTpro-BNP和cTnI水平升高(P<0.05),LVEF降低(P&...     

miR-17-5p在非小细胞肺癌患者中的表达及其与临床病理特征的相关性

目的探讨miR-17-5p在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达差异及其与临床病理特征的相关性。 方法利用数据库分析miR-17-5p在NSCLC肿瘤组织与正常组织中的表达差异。分析60例NSCLC患者和60例健康受试者血清miR-17-5p表达,并结合临床资料分析其表达差异的临床意义;分析miR-17-5p、CEA、CYFRA21-1和CA125与临床病理特征的相关性。 结果数据库和临床分析发现,miR-17-5p在NSCLC组织和血清中的表达均显著高于健康对照组(P＜0.05),并且高表达患者的预后要比低表达患者差。通过AUC曲线测量的miR-17-5p诊断准确性为0.746,大于CEA、CYFRA21-1和CA125。临床分析发现,血清miR-17-5p高表达与患者的淋巴结转移相关。 结论血清miR-17-5p可作为潜在的NSCLC诊断和预后评价的分子标志物。NSCLC患者血清miR-17-5p表达升高,且与患者的预后关系密切。     

miR-17-5p及PTEN在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及其意义

目的:研究弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中微小RNA(miR)-17-5p及磷酸酶张力蛋白同系物(PTEN)表达及其临床意义。方法:应用荧光实时定量PCR检测82例DLBCL肿瘤组织及30例淋巴结反应性增生组织(对照组)中miR-17-5p及PTEN的表达,统计学分析组间表达差异及两者与临床病理特征之间的关系。根据miR-17-5p序列合成miR-17-5p抑制剂和抑制剂对照,并转染至DLBCL细胞系中,MTT细胞增殖实验及Transwell小室实验观察对肿瘤细胞增殖和侵袭能力的影响。采用Kaplan-Meier生存分析观察不同miR-17-5p及PTEN的表达水平与病人预后之间的差异。结果:肿瘤组织中miR-17-5p的相对表达量高于正常组织(P<0.01);肿瘤组织中PTEN的相对表达量低于正常组织(P<0.01)。Pearson线性相关分析结果表明,肿瘤组织中miR-17-5p与PTEN的表达呈负相关(r=-0.612,P<0.01)。病人肿瘤原发部位为节内、乳酸脱氢酶(LDH)≤245 U/L、临床分期为Ⅰ～Ⅱ期miR-17-5p表达高于节外、LDH>...     

miR-17-5p对动脉粥样硬化小鼠血管病变及VLDLR表达的影响

目的 探讨miR-17-5p对动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）小鼠血管病变及极低密度脂蛋白受体（VLDLR）表达的影响。 方法 用高脂饲养ApoE-/-小鼠15周构建AS小鼠模型,第13~15周尾静脉注射miR-17-5p抑制剂antagomiR-17-5p 20 mg/kg（antagomiR-17-5p组,n=10）干扰小鼠体内的miR-17-5p表达,并设AS模型组（同时点注射生理盐水,n=10）和NC miRNA组（同时点注射阴性对照抑制剂,n=10）,同时取10只C57BL/6小鼠正常饮食15周作为正常对照（NC组,同时点注射生理盐水）。HE染色检测各组小鼠动脉血管的病理变化并测量各组小鼠血管形态学改变。通过Targetscan靶基因预测数据库预测,VLDLR为miR-17-5p的靶基因,免疫荧光观察各组小鼠血管组织中VLDLR的分布变化;Real-time PCR和Western blot检测各组小鼠动脉组织中VLDLR mRNA和蛋白表达变化。 结果 HE染色结果显示AS模型组与NC组相比,其血管内皮形成了明显的斑块,平滑肌细胞排列紊乱,内膜增生,而antagomiR-17-5p处理的小鼠与NC miRNA组相比,病变程度明显减轻。AS模型组较NC组小鼠的内膜面积增加,抑制miR-17-5p的作用之后,内膜面积减少;各组小鼠中膜面积差异无统计学意义。血管管腔面积以及内膜/中膜比（I/M）值,AS模型组和NC-miRNA组小鼠比NC组减小,而antagomiR-17-5p组则缓解了这种作用（P<0.05）。免疫荧光显示:AS模型组VLDLR表达下降,antagomiR-17-5p组较NC miRNA组表达增多。AS模型组中VLDLR基因的表达量较NC组下降（P<0.01）,而antagomiR-17-5p组与NC miRNA组相比VLDLR基因的表达量上调（P<0.05）。Western blot检测的VLDLR表达结果类似。 结论 miR-17-5p抑制剂可能通过上调动脉组织中VLDLR的表达,有效缓解AS小鼠动脉血管的病理变化,有望成为治疗AS的新靶点。     

miR-324-5p和miR-215-5p在多发性骨髓瘤中的表达及预后分析

目的 检测多发性骨髓瘤（MM)患者血清中miR-324-5p和miR-215-5p的表达水平,研究其表达水平和预后的关系。方法收集60例MM患者血清标本,为初治组（20例）、巩固治疗组（20例）、复发难治组（20例）;20例健康人血清标本（健康对照组）,实时荧光定量PCR检测血清中miR-324-5p和miR-215-5p的表达水平。结果与健康对照组比较,MM患者血清中miR-215-5p表达水平下降（P<0.008 3）,初治组和难治复发组患者血清miR-324-5p表达水平下降（P<0.008 3）,巩固治疗组与健康对照组血清miR-324-5p表达水平差异无统计学意义（P>0.008 3）;巩固治疗组血清miR-324-5p表达水平高于初治组及难治复发组（P<0.008 3）;巩固治疗组血清miR-215-5p表达水平高于初治组（P<0.008 3）,巩固治疗和难治复发患者间差异无统计学意义（P>0.008 3）;初治组与复发难治组之间两种miRNAs表达水平差异无统计学意义（P>0.008 3）。miR-324-5p和miR-215-5p表达水平与β2微球蛋白和红细胞体积分布宽度呈负相关,与血红蛋白呈正相关。初治MM患者血清miR-324-5p和miR-215-5p高表达组无进展生存期高于低表达组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论miR-324-5p和miR-215-5p在MM血清中表达水平降低,miR-324-5p和miR-215-5p可能与疾病密切相关,其低表达可能提示预后不良。     

microRNA-371-5p在结肠癌中的表达及其临床意义

目的 通过检测microRNA-371-5p在结肠癌患者血浆中的表达变化并探讨其临床意义。 方法 选取结肠癌患者血浆50例作为实验组,另选择年龄、性别及种族与实验组相匹配的健康体检者的血浆30例作为健康对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血浆中microRNA-371-5p的表达水平并分析其在不同临床病理资料间的差异。应用受试者工作特征曲线(ROC)分析并计算曲线下面积(AUC),并利用曲线下面积(AUC)估计肿瘤标志物的诊断价值。 结果 microRNA-371-5p在结肠癌患者血浆中的相对表达量为3.03±0.55,显著低于健康体检者血浆中的相对表达量(3.98±0.47),差异具有统计学意义(t=-4.93,P<0.05);结肠癌患者血浆中的microRNA-371-5p与年龄、性别以及CEA水平无相关性,而与临床病理分级(TNM分级)、淋巴结转移与否成正相关(P<0.05)。miR-371a-5p作为结肠癌生物标志物(AUC)的曲线下面积为0.894,特异度为87%,灵敏度为86%。 结论 microRNA-371-5p在结肠癌患者血浆中呈低表达水平,推测microRNA-371-5p可能参与结肠癌的发生发展过程,有望成为预测结肠癌的检测指标之一。      

miR-145-5p在正常大鼠与2型糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中的表达比较

背景 糖尿病会导致骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)的成骨分化能力降低,mi RNA在此过程中发挥重要作用,其中miR-145-5p对细胞成骨成软骨分化有重要的调节作用。然而miR-145-5p对糖尿病源BMMSCs成骨分化的影响尚不清楚。目的 比较正常大鼠与2型糖尿病大鼠BMMSCs成骨分化能力,初步探讨在成骨分化中miR-145-5p及其靶基因SEMA3A和Wnt通路关键蛋白β-catenin表达的差异。方法 12只GK大鼠采用高糖高脂饲料喂养构建2型糖尿病大鼠模型,12只Wistar大鼠常规饲养作为对照组。无菌条件下分离大鼠股骨,全骨髓培养法培养正常大鼠和2型糖尿病大鼠BMMSCs (分别对应WT-BMMSCs和GK-BMMSCs);CCK-8检测细胞增殖能力;结晶紫染色检测细胞集落形成能力;碱性磷酸酶染色及半定量分析检测碱性磷酸酶活性;茜素红染色检测矿化基质形成;qRT-PCR和Western blot检测成骨相关标志物、miRNA-145-5p、SEMA3A和β-catenin的表达。结果 干细胞培养4～9 ...     

miR-219-5p靶向SOX5在口腔癌中的作用初探

  目的  研究miR-219-5p 与SOX5在口腔鳞状细胞癌中是否存在差异性表达,并探讨miR-219-5p 对SOX5的靶向调控作用,  方法  运用口腔鳞状细胞癌细胞株SCC4及SCC9,人正常皮肤成纤维细胞系（HF）作为对照,对miR-219-5p与SOX5在个细胞系中的表达情况进行检测（RT-qPCR、Western blot）;并在SCC4及SCC9细胞株中验证miR-219-5p对SOX5表达的靶向调控作用。  结果  与正常人纤维细胞相比,miR-219-5p的表达水平显著降低,而SOX5的表达水平显著增加,差异有统计学意义（P < 0.05）;miR-219-5p与SOX5的表达水平具有负相关（P < 0.05）;在SCC4及SCC9细胞中,miR-219-5p通过结合3' 非编码区（3'-UTR）靶向调控SOX5的表达。  结论  miR-219-5p可能通过对SOX5的靶向调控参与了口腔鳞状细胞癌的发生发展,为协助临床预后评估和/或筛选治疗的新候选药物提供了科学依据。     

血浆MicroRNA-17-5p和microRNA-20水平与肺动脉高压预后的相关性研究

目的:探讨患者血浆MicroRNA-17-5p和microRNA-20水平与与肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)严重程度、预后的相关性.方法:采用微阵列法筛选112例PAH患者和100例健康对照者的血浆总RNA,采用实时定量聚合酶链反应测定miRNA-17-5p和miRNA-20a含量,测量PAH患者血浆中miRNA-17-5p、miRNA-20a的浓度.结果:在血浆miRNA浓度测定中,总共有58例miRNA血浆浓度在病例组和对照组中差异具有显著性.在PAH组中,miRNA-17-5p和miRNA-20a上调最为明显.ROC曲线分析显示血浆miRNA-17-5p、miRNA-20a的浓度与PAH患者两年生存率相关.Cox回归分析证实miRNA-17-5p和miRNA-20a水平是PAH生存率的重要预测因素.年龄、心脏指数、WHO分级、6min步行距离、疾病持续时间、红细胞分布宽度也可作为生存率的预测因子,加入这些协变量的多变量模型验证miRNA-17-5p和miRNA-20a水平是PAH两年生存率的独立预测因子.结论:血浆中miRNA-17-5p和miRNA-20a水平的增加与PAH患者的不良预后有关.     

三阴性乳腺癌组织长链非编码RNA-P21、microRNA-17-3p的表达及其临床意义

目的 探讨三阴性乳腺癌组织中长链非编码RNA-P21 (LncRNA-P21)、microRNA-17-3p(miR-17-3p)的表达,分析其与三阴性乳腺癌患者的临床病理特征及预后的关系。方法 选取2016年1月—2017年5月南通大学附属医院收治的106例三阴性乳腺癌患者经手术切除的癌组织和癌旁组织（距离癌组织至少5 cm）标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中LncRNA-P21和miR-17-3p的表达;收集患者的临床病理特征资料,分析LncRNA-P21、miR-17-3p表达与临床病理特征的关系;术后随访5年,采用Kaplan-Meier法绘制不同LncRNA-P21、miR-17-3p表达三阴性乳腺癌患者的生存曲线;Cox回归分析影响三阴性乳腺癌患者预后的因素。结果 癌组织LncRNA-P21 mRNA相对表达量低于癌旁组织（P <0.05）;癌组织miR-17-3p mRNA相对表达量高于癌旁组织（P <0.05）。临床Ⅲ期、腋窝淋巴结转移、Ki-67≥30%三阴性乳腺癌组织中LncRNA-P21 mRNA相对表达量低于临床Ⅰ、Ⅱ期,无腋窝...     

非小细胞肺癌组织长链非编码RNA LINC00265、microRNA-98-5p的表达及其临床意义

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00265、microRNA-98-5p(miR-98-5p)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义.方法 选取2016年1月—2017年12月乐山市人民医院收治的97例NSCLC患者的癌组织、相应癌旁正常组织进行研究.利用实时荧光定量聚合酶链反应测定癌组...     

miRNA"海绵"重组质粒的构建及对miR-483-5p的敲减

目的 建立microRNA失功能(loss of function)研究模型,为功能研究提供实验材料.方法 针对miR-483-5p成熟体序列设计含6个拷贝反义序列的DNA片段,称为"S-483",将其连接入含CAG启动子的pCAGGs载体中,构建pCAGGs-S-483重组质粒.利用脂质体技术瞬时转染Hep1-6细胞...     

miR-17-5p与乳腺癌侵袭及预后的相关性研究

目的探讨miR-17-5p在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌侵袭、转移及预后的关系。方法对88例乳腺癌原发肿瘤和20例癌旁乳腺组织的石蜡组织块重新切片,提取RNA,采用实时定量PCR方法测定miR-17-5p表达水平;Mann Whitney-U非参数检验分析miR-17-5p表达水平与乳腺癌临床病理参数的关系,预后分析采用Kaplan-Meier生存分析法和Log-rank检验。结果在人表皮生长因子受体-2(HER-2)过表达或伴有脉管侵犯的乳腺癌中,miR-17-5p表达水平明显低于HER-2阴性、无脉管侵犯的乳腺癌(P<0.05或P<0.001);miR-17-5p表达与乳腺癌肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级、雌激素受体(ER)表达、孕激素受体(PR)表达、组织学类型、肿瘤病理分期、是否复发及患者月经状态等无明显相关(P>0.05)。以平均值2-△Ct=0.836作为截断值,Kaplan-Meier生存分析显示,miR-17-5p表达水平与乳腺癌无复发生存率或总生存率无显著相关(P>0.05)。结论 miR-17-5p表达与乳腺癌HER-2基因表达及脉管侵犯呈负相关,可做为乳腺癌侵袭潜能的预测指标;miR-17-5p表达水平不影响乳腺癌的预后,其作用机制值得进一步研究阐明。     

MiR-17-5p调控STAT3信号通路在心肌慢性缺氧适应中意义的研究

目的 探讨心肌慢性缺氧环境下,miR-17-5p的表达变化以及miR-17-5p对STAT3信号通路的调控对于缺氧心肌细胞的影响.方法 ①选取新桥医院心外科2014年8月至2015年4月期间先心病患儿20例,其中紫绀型(年龄61.5±46.5月,术后诊断为法洛氏四联症)与非紫绀型(年龄43.2 ±32.1月,术后诊断为室缺伴右心室流出道狭窄)各10例.术中取右室流出道心肌组织作为标本,采用RT-PCR检测两组先心病患儿心肌组织miR-17-5p的表达情况.②建立大鼠源H9c2心肌细胞慢性缺氧适应模型,分为缺氧0、12、24、48、72 h组(n=5),RT-PCR分别检测各组miR-17-5p的表达.③脂质体转染antagomir miR-17-5p和agomir miR-17-5p至H9c2心肌细胞,建立过表达miR-17-5p和沉默miR-17-5p的H9c2心肌细胞系,慢性缺氧培养48 h,CCK8实验检测细胞增殖情况,TUNNEL实验检测细胞凋亡情况,Western blot检测STAT3,p-Tyr-705-STAT3及其下游调控蛋白c-myc蛋白表达.结果 ①与非紫绀组(0.482 ±0.163)相比,紫绀组(1.450±0.705)患儿miR-17-5p表达明显升高(P＜0.01).②慢性缺氧细胞模型研究结果显示慢性缺氧时H9c2细胞miR-17-5p表达逐渐增高(P＜0.01).③缺氧环境下miR-17-5p过表达明显抑制p-Tyr-705-STAT3、STAT3、c-myc表达,引起心肌心肌细胞增殖受抑制,凋亡增加(P＜0.01);而抑制miR-17-5p对p-Tyr-705-STAT3、STAT3、c-myc表达改变不明显,且对于心肌细胞的增殖和凋亡改变也不明显(P＞0.05).结论 在心肌慢性缺氧过程中,miR-17-5p可能参与调控STAT3-c-myc信号通路,对于心肌细胞的存活和功能调节有重要意义.     

肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血患者miR-183-5p水平与经颈静脉肝内门腔静脉分流术后再出血的关系

目的 探究肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血患者micro RNA-183-5p(miR-183-5p)水平与经颈静脉肝内门腔静脉分流术(TIPS)后再出血的关系。方法 前瞻性选取2017年2月—2020年10月在西安交通大学医学院附属三二〇一医院接受TIPS治疗的食管胃底静脉曲张破裂出血患者178例作为研究对象。根据随访过程中是否再出血将患者分为再出血组和未再出血组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测患者TIPS前(T₁)、TIPS后24 h(T₂)和TIPS后7 d(T₃)的miR-183-5p水平。随访患者TIPS后再出血情况,分析miR-183-5p与TIPS后再出血的关系。结果 两组患者性别、年龄、肝硬化病因、Child-Pugh分级、血小板计数、凝血酶原时间和国际标准化比率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。再出血组的白蛋白、血钠和血钙水平均低于未再出血组(P<0.05),门静脉内径大于未再出血组,重度食管静脉曲张占比高于未再出血组(P<0.05)。两组患者T₁、T     

MicroRNA-183-5p在动脉粥样硬化患者中的表达及其临床意义

目的 分析microRNA-183-5p (miR-183-5p)在动脉粥样硬化患者中的表达及其临床意义。方法 选取2021年1月—2022年8月四川省人民医院收治的经血管造影确诊的103例动脉粥样硬化患者为研究组,选取同期该院年龄相当的90例健康体检者为健康组。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测两组患者血清miR-183-5p的表达,绘制受试者工作特征（ROC）曲线,分析miR-183-5p在动脉粥样硬化中的诊断价值。结果 研究组血清miR-183-5p mRNA相对表达量高于健康组（P <0.05）;研究组中高Gensini积分组患者血清miR-183-5p mRNA相对表达量高于低Gensini积分组（P <0.05）;Pearson相关性分析结果显示,miR-183-5p与C反应蛋白、颈动脉内中膜厚度及Gensini积分呈正相关（r=0.664、0.571和0.712,均P <0.05）;ROC曲线分析结果显示,miR-183-5p诊断动脉粥样硬化的截断值为2.08,敏感性和特异性分别为87.8%(95%CI:0.832,0.924)和91.6...     

MicroRNA-129-5p、SOX4在宫颈癌组织中的表达及其与患者临床病理特征、预后的关系

目的 探讨宫颈癌组织中micro RNA-129-5p(mi R-129-5p）、性别决定区Y框蛋白4(SOX4）表达与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2017年6月—2019年8月湖北民族大学附属民大医院101例宫颈癌患者的宫颈癌组织、癌旁组织标本及其临床资料,根据患者生存情况将其分为生存组79例和死亡组22例。采用免疫组织化学法检测SOX4蛋白阳性表达,采用实时荧光定量聚合酶链反应（q RT-PCR）检测mi R-129-5p m RNA相对表达量。绘制Kaplan-Meier曲线分析mi R-129-5p、SOX4表达与宫颈癌患者3年生存率的关系;采用多因素Cox回归分析宫颈癌患者预后的影响因素。结果 宫颈癌组织mi R-129-5p m RNA相对表达量低于癌旁组织（P<0.05),SOX4蛋白阳性表达率高于癌旁组织（P<0.05）。FIGO分期Ⅱ期、低分化、有淋巴结转移的宫颈癌患者组织中mi R-129-5p高表达、SOX4蛋白阳性表达率高于FIGO分期Ⅰ期、中/高分化、无淋巴结转移患者（P<0.05）。mi R-129-5p低表达患者3年生存率低...