肝癌组织中抗凝血酶Ⅲ基因表达的临床意义

目的 探讨肝癌组织中抗凝血酶Ⅲ(Antithrombin-Ⅲ,AT3)基因表达水平及其与临床特征和预后的关系。方法 收集公共数据库中214例肝癌组织的基因表达谱及相关临床数据,对样本中AT3基因表达水平与临床特征和预后的关系进行相关性分析。结果 单因素分析提示,AT3低表达组中,血清甲胎蛋白含量较高(P＜0.001),肿瘤体积较大(P=0.015),TNM分期较差(P=0.001),转移风险较高(P＜0.001)。生存分析提示,肿瘤体积较大(P=0.023)、多发结节(P=0.047)、合并肝硬化(P=0.016)、TNM分期较晚(P＜0.001)、高转移风险(P=0.001)及AT3低表达(P=0.005)与肝癌患者预后有关。多因素Cox回归分析亦提示AT3表达水平是肝癌患者预后的独立影响因素(HR=0.850,95%CI:0.745~0.970,P=0.016)。结论 肝癌组织中,AT3表达水平与患者临床特征及预后有关,其低表达可能是影响肝癌预后的危险因素之一。     

恩度联合放疗对移植瘤HIF-1α及GLUT-1表达的影响

目的观察抗血管生成药物恩度联合放疗对乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)和葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)的影响,并对其联合作用机制进行探讨。方法 建立Lewis肺癌移植瘤模型,将32只成瘤小鼠随机分为4组,分别为空白对照组、Endostar组(ES组)、放射治疗组(RT组)及Endostar+放射治疗组(ES+RT组)。从治疗当天开始,测量肿瘤最长直径(a)及最短直径(b),绘制肿瘤生长曲线,用Western blot方法对各处理组肿瘤组织中HIF-1α及GLUT-1的表达情况进行检测。结果 (1)在对小鼠的肿瘤生长抑制情况方面,ES+RT组与空白对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05),ES+RT组和ES组之间差异有统计学意义(P＜0.05);(2)以空白对照组为参照,ES组、RT组、ES+RT组GLTU-1蛋白的表达呈下降趋势,差异均具有统计学意义(P＜0.05);ES+RT组下降最明显,分别与ES组、RT组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05);(3)以空白对照组为参照,ES组、RT组、ES+RT组的HIF-1α蛋白表达量均下降明显,与空白对照组比较,RT组、ES+RT组差异具有统计学意义(P＜0.05),RT组与ES+RT组之间的差异具有统计学意义(P＜0.05);(4)HIF-1α与GLTU-1表达呈正相关(P＜0.01)。结论 恩度联合放疗能够抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长,通过抑制HIF-1α和GLTU-1蛋白的表达,改善肿瘤组织内乏氧状况和酸性微环境,可能是放疗增敏作用的机制之一。     

Copine-8在胃癌组织中的表达与临床病理特征及预后的相关性

目的 探讨Copine-8(CPNE8)在胃癌组织中的表达与患者临床病理特征及预后的相关性。方法 收集2011年3月—2014年3月于仙桃职业学院附属医院行胃癌根治术并经过病理证实的胃癌组织标本144例,采用免疫组织化学分析CPNE8在胃癌及其配对的癌旁组织中的表达情况,并分析其与胃癌临床病理参数及预后的关系。结果 免疫组织化学结果表明,CPNE8阳性表达率在胃癌组织中较癌旁组织中明显升高(63.9% vs. 26.4%,χ²=36.450,P＜0.001);CPNE8的表达与胃癌患者的TNM分期及有无淋巴结转移密切相关(χ²=5.993,P=0.014;χ²=6.703,P=0.009)。Kaplan-Meier生存分析发现,CPNE8高表达患者总生存时间(OS)和无病生存时间(DFS)均明显短于CPNE8低表达患者(χ²=23.130,P＜0.001;χ²=21.570,P＜0.001)。TNM分期(HR=1.297,95% CI:1.018~1.652,P=0.036)、淋巴结转移(HR=1.340,95% CI:1.027~1.749,P=0.031)和CPNE8蛋白表达(HR=1.531,95% CI:1.208~1.940,P＜0.001)是影响胃癌患者OS的独立危险因素;TNM分期(HR=1.280,95% CI:1.028~1.593,P=0.027)和CPNE8蛋白表达(HR=6.010,95% CI:1.355~26.661,P=0.018)是影响胃癌患者DFS的独立危险因素。结论 CPNE8在胃癌组织中显著表达上调,并与患者恶性病理特征密切相关,CPNE8可成为胃癌患者预后评估的标志物之一。     

抑癌基因DKK2抑制儿童肾母细胞瘤细胞增殖的机制研究

目的 探讨WNT信号通路调控因子DKK2在儿童肾母细胞瘤细胞和组织中的表达,及对儿童肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖的影响,并初步探讨其作用机制。方法 通过RT-PCR、qRT-PCR和免疫蛋白印迹实验分析DKK2在儿童肾母细胞瘤细胞系和组织中的相对表达;将DKK2过表达的SK-NEP-1细胞设定为实验组(DKK2组),空白对照质粒组设定为对照组(Vector组),分别转染pcDNA3.1(+)-Flag-DKK2质粒(实验组)和pcDNA3.1(+)-Flag-Vector质粒(对照组)至SK-NEP-1细胞系,RT-PCR和免疫蛋白印迹实验验证DKK2的过表达;通过CCK-8实验和细胞克隆实验分析DKK2对细胞增殖的影响;流式细胞周期和凋亡实验验证DKK2过表达对细胞增殖的作用机制;裸鼠成瘤实验验证DKK2体外对细胞增殖的影响;通过qRT-PCR、WB及免疫组化分析DKK2对细胞增殖抑制的作用机制。结果 与正常肾上皮组织相比,DKK2 mRNA在儿童肾母细胞瘤细胞和组织中的中表达明显下调,差异具有统计学意义(P＜0.001);与对照组相比(100%),转染后24、48、72h实验组细胞活性受到明显的抑制(P＜0.05),同时实验组细胞克隆形成明显受到抑制(31.11±2.14)%(P＜0.05);流式细胞实验发现,与对照组相比,实验组细胞明显阻滞于G₁期(P＜0.001),实验组中细胞凋亡率明显升高(P＜0.001);与对照组相比,过表达DKK2后裸鼠肿瘤和体积大小明显降低(P＜0.001);过表达DKK2后,active-β-catenin及下游的基因受到了明显抑制。结论 DKK2在人皮肤肾母细胞瘤组织中表达下调,可能通过拮抗Wnt/β-catenin信号通路参与肾母细胞瘤的机制。     

ABL2在肺癌中的作用及机制研究

目的 探究ABL2在肺癌中的作用及其机制。方法 采用Realtime PCR方法检测ABL2在肺癌组织和癌旁组织中的表达情况。然后建立稳定低表达ABL2的肺腺癌A549细胞株;通过MTT、细胞迁移和克隆形成实验检测细胞增殖和迁移能力的变化情况;Western blot检测EMT、凋亡和PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况。结果 肺癌组织中ABL2的表达水平明显高于癌旁组织(P＜0.001)。在A549细胞系中沉默ABL2后,与对照组相比,48 h后细胞的迁移能力减弱(P＜0.001),从第3天开始细胞的生长速度开始明显减缓(P＜0.05),15天后形成的平均克隆数也减少(P＜0.01)。Western blot结果显示,沉默ABL2后上皮细胞标志物E-cadherin表达升高(P＜0.001),间质细胞标志物N-cadherin(P＜0.001)、Vimentin(P＜0.01)及Snail(P＜0.001)表达降低。凋亡相关蛋白Bcl-XL表达下降(P＜0.01),BAX表达上调(P＜0.001)。PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K P110(P＜0.05)、AKT(P＜0.01)和p-AKT(P＜0.05)蛋白的表达都明显降低。结论 沉默ABL2基因能够通过PI3K/AKT信号通路促进细胞凋亡,抑制肺癌细胞的增殖和迁移。     

化疗联合手术治疗耐药性妊娠滋养细胞肿瘤的临床分析

目的 探究化疗联合手术治疗耐药性妊娠滋养细胞肿瘤(Gestational trophoblastic neoplasia,GTN)患者的临床效果。方法 选择耐药的高危型GTN患者76例,随机分为对照组和研究组,各38例;对照组使用足叶乙甙+甲氨蝶呤+放线菌素D/足叶乙甙,顺铂(etoposide,methotrexate,and actinomycin-D/etoposide and cisplatin,EMA/EP)方案化疗,研究组使用化疗联合手术治疗的方法治疗;比较两组的治疗效果、预后、外周血林白细胞亚群以及不良反应发生情况。结果 治疗6个月后研究组的客观缓解率(Objective response rate,ORR)高于对照组,差异具有统计学意义(P=0.024);研究组的耐药率和复发率低于对照组(P＜0.05);治疗前两组血清人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotropin,HCG)差异无统计学意义,治疗后两组HCG水平均降低(P＜0.001),治疗后6个月、12个月和末次随访研究组的血清HCG水平低于对照组(P＜0.001);治疗前两组外周血T细胞亚群水平差异无统计学意义,而治疗6个月后均有不同程度的改善;研究组的CD3⁺、CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺T细胞高于对照组(P＜0.001);研究组的中性粒细胞减少、血红蛋白降低、恶心呕吐、脱发的发生率则低于对照组(P＜0.05)。结论 对于一线耐药的高危GTN患者,化疗联合手术治疗具有更好的治疗效果,并可有效改善机体免疫水平,降低不良反应的发生。     

p53对绝经后HR阳性、HER-2阳性术后乳腺癌患者内分泌药物疗效的预测价值

目的 探讨p53蛋白表达对绝经后激素受体(HR)阳性、HER-2阳性术后乳腺癌患者辅助内分泌药物疗效的预测价值。方法 筛选符合条件的乳腺癌病例172例,经免疫组织化学SP法检测癌组织中ER、PR、HER-2、p53蛋白的表达情况,分析p53蛋白表达与不同临床病理特征之间的关系及其对患者预后的影响。结果 p53蛋白表达与肿瘤大小、淋巴结状态、组织学分级、ER及PR表达均无关。中位随访68个月(4~131个月),Log-rank单因素分析显示,淋巴结状态(χ²=46.602;P＜0.001)、是否放射治疗(χ²=9.617;P=0.002)与乳腺癌患者的无病生存期(DFS)有关,但p53表达与乳腺癌患者DFS无关(χ²=0.002,P=0.968)。Cox多因素分析显示,乳腺癌患者DFS仅与淋巴结转移数目有关(HR=2.121,95%CI:1.630~2.760,P＜0.001)。亚组分析显示,口服他莫昔芬(TAM)组患者中,p53阳性者DFS优于p53阴性者(χ²=4.695,P=0.030);而口服其芳香化酶抑制剂(AI)组患者中,p53阴性者DFS优于p53阳性者(χ²=5.995,P=0.014)。结论 p53蛋白阳性表达是TAM有效治疗的预测因子,而p53蛋白阴性表达是AI有效治疗的预测因子。     

KAI1在宫颈鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨KAI1在宫颈鳞癌组织中的表达, 及其与宫颈癌侵袭、转移的关系。方法 采用免疫组化S-P法、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot方法, 检测92例宫颈鳞癌组织中KAI1的表达。结果 免疫组化结果显示:KAI1在宫颈癌组织中的表达率明显低于宫颈正常上皮组和宫颈上皮内瘤变组, 差异有统计学意义(χ²=29.51, P＜0.01;χ²=22.38, P＜0.01), 且有淋巴结转移的癌变组织其表达情况明显低于未转移的宫颈癌组织, 差异显著(χ²=11.15, P＜0.01), KAI1在宫颈癌中的阳性表达与临床分期无关, 但随着病理分期的增加阳性表达率逐渐减少, 且有统计学意义(χ²=7.16, P＜0.05)。RT-PCR及Western blot同样证实:KAI1在宫颈癌组中的相对表达量明显低于宫颈正常上皮组(F=6.6, P＜0.01;F=9.73, P＜0.01)。结论 宫颈癌中KAI1的异常表达与宫颈癌的恶变程度有关。     

miR-345在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨microRNA-345(miR-345)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,并进一步分析其与肿瘤的临床病理特征和预后关系。方法 利用Real-time PCR检测98例NSCLC患者组织及三种细胞系中miR-345的表达,分析miR-345的表达与临床预后的关系。结果 和对照组相比,miR-345的表达在NSCLC组织及细胞系中显著下调(P＜0.05);组织中miR-345的表达水平和临床病理指标包括淋巴结转移(P＜0.001)、远端转移(P=0.028)、TNM分级(P=0.004)以及病理分期(P=0.011)有关;低表达miR-345的NSCLC患者组和高表达miR-345的患者组相比,其总生存率较低(P=0.021)。多因素分析表明miR-345的表达是NSCLC预后的独立危险因素(HR=3.897,95% CI:2.263~10.440;P=0.012)。结论 miR-345在NSCLC组织及细胞系中的表达降低,低表达的miR-345和NSCLC的进展及预后有关,表明miR-345可能作为NSCLC的一个潜在临床诊断标记。     

长链非编码RNA OR3A4 促进结直肠癌细胞奥沙利铂耐药

目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）OR3A4在结直肠癌细胞奥沙利铂（L-OHP）耐药中的作用。方法:实时荧光定量（qPCR）检测结直肠癌组织和细胞中lncRNA OR3A4的表达。免疫印迹（Western blotting）检测OR3A4对耐药相关蛋白P-糖蛋白（P-GP）和多药耐药相关蛋白（MRP）表达的影响。利用细胞计数试剂盒（cell counting kit,CCK-8）检测半数抑制浓度（IC50）。结果:结直肠癌组织/细胞株中OR3A4的表达水平显著高于癌旁组织/正常结肠细胞株（P＜0.05）。L-OHP耐药组的结直肠癌细胞的IC50显著高于非耐药组,而且L-OHP耐药组中OR3A4的表达水平显著高于非耐药组（P＜0.05）。转染OR3A4 小干扰RNA的结直肠癌L-OHP耐药细胞中耐药蛋白表达水平以及IC50均显著低于未转染组（P＜0.05）。结论:lncRNA OR3A4促进结直肠癌细胞的奥沙利铂耐药性。     

多烯磷脂酰胆碱与奥沙利铂协同抗胃癌细胞增殖的研究

目的 探讨多烯磷脂酰胆碱联合奥沙利铂对胃癌细胞增殖的影响。方法 采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测多烯磷脂酰胆碱、奥沙利铂及两药联合对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;流式细胞术检测各组细胞周期分布及凋亡情况;Western blotting检测各组凋亡相关蛋白细胞色素c、Bcl-2、Bax、caspase-9、caspase-3和细胞周期调控蛋白细胞因子D1、细胞因子E的表达水平。结果 奥沙利铂显著抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,且呈剂量和时间依赖性（P＜0.05）;多烯磷脂酰胆碱促进胃癌SGC-7901细胞增殖,其作用呈剂量依赖性（P＜0.05）;两药联合表现为协同作用,与奥沙利铂单药组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。奥沙利铂使胃癌细胞增殖停滞在G0／G1期,并具有诱导胃癌细胞凋亡的作用;多烯磷脂酰胆碱可增强奥沙利铂诱导细胞凋亡及细胞周期停滞的作用,但这两种增强作用均与多烯磷脂酰胆碱的浓度无关（P＞0.05）。Western blotting检测结果显示,多烯磷脂酰胆碱联合奥沙利铂上调细胞色素c的水平并激活其下游蛋白Bcl-2、Bax、caspase-9、caspase-3,下调细胞因子D1、细胞因子E的表达水平。结论 多烯磷脂酰胆碱与奥沙利铂可抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖和诱导细胞凋亡,将细胞阻滞于G0／G1期,两药联合可能会产生协同抗肿瘤的作用。     

miR-106a靶向调控TIMP2对人胃癌细胞增殖、转移及EMT的影响

目的 探讨微小RNA-106a(miR-106a)在人胃癌组织中的表达及其与癌细胞增殖、转移的关系。方法 收集人胃癌和配对癌旁福尔马林固定-石蜡包埋样本共50对,Real-time PCR法检测miR-106a在人胃癌组织中的表达;培养人低分化胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823、MKN-45和永生化人胃黏膜上皮细胞GES-1,Real-time PCR法检测miR-106a在人胃癌细胞中的表达;MTT法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移和侵袭,生物信息学和双荧光素酶法鉴定miR-106a靶基因,Western blot检测靶蛋白TIMP2、MMP2、MMP9、E-cadherin、N-cadherin表达。结果 Real-time PCR检测显示,与癌旁组织比较,miR-106a在人胃癌组织中高表达,差异有统计学意义(P＜0.001);与GES-1细胞比较,miR-106a在人胃癌细胞SGC-7901、BGC-823、MKN-45中普遍高表达,差异有统计学意义(P＜0.001)。MTT检测显示抑制miR-106a后胃癌细胞SGC-7901、BGC-823增殖能力下降(P＜0.01)。Transwell显示胃癌细胞BGC-823迁移、侵袭能力下降(P＜0.001)。双荧光素酶法显示TIMP2野生型报告基因与miR-106a mimic共转后,其荧光素酶活性较miR-106a NC组明显下降(P＜0.001),但TIMP2突变型报告基因无明显变化。Western blot显示抑制miR-106a后TIMP2表达升高,MMP2、MMP9表达下降,E-cadherin表达升高,N-cadherin表达下降。结论 miR-106a在人胃癌中的高表达可能通过靶向TIMP2而影响癌细胞的增殖、转移和上皮-间质转化。     

芹菜素激活TRAIL死亡受体参与诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究

目的： 研究芹菜素（API）对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,并探讨API诱导胃癌细胞凋亡的机制。方法： 设置对照组及不同浓度（20、40、60、80 μmol/L）的API组,分别作用SGC-7901细胞12、24和48 h后,CCK-8法检测细胞增殖率。选择作用24 h为后续处理时间点,采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测TRAIL通路中死亡受体DR4、DR5蛋白的表达水平;采用RNAi技术,用DR4 siRNA和DR5 siRNA分别沉默TRAIL通路中死亡受体DR4和DR5表达,设置对照组、API组、DR4 siRNA+API组、DR5 siRNA+API组,作用细胞24 h后,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果： 细胞增殖检测结果提示API对人胃癌SGC-7901细胞的增殖率具有明显抑制作用,呈现浓度依赖性（r_{12 h}=-0.99,r_{24 h}=-0.88,r_{48 h}=-0.89,均为P < 0.05）;流式细胞术检测结果提示细胞凋亡率随着API作用浓度的增加而升高（r=0.96,P < 0.05）;Western blot检测发现API作用可上调细胞中DR4、DR5蛋白的表达水平;DR4 siRNA和DR5 siRNA分别沉默DR4和DR5的表达后,与API组相比,DR4 siRNA+API组和DR5 siRNA+API组的细胞凋亡率均降低（P < 0.05）。结论： 芹菜素具有抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与TRAIL通路中死亡受体DR4、DR5蛋白的表达被激活有关。     

淬灭胃癌SGC-7901细胞内活性氧对维生素E琥珀酸脂诱导内质网应激的影响

目的：探讨淬灭胃癌SGC-7901细胞内活性氧（ROS）对维生素E琥珀酸脂（VES）诱导内质网应激的影响。方法：将不同浓度（1、5、10和20 mmol/L）N-乙酰半胱氨酸（NAC）作用胃癌SGC-7901细胞2 h,再加入20 μg/mL VES处理12 h,经2,7-二氢二氯荧光黄双乙酸钠（DCFH-DA）染色后,采用激光共聚焦显微镜观察细胞内ROS水平。另将20 mmol/L NAC作用SGC-7901细胞2 h,再加入20 μg/mL VES处理细胞12 h,经DCFH-DA染色后,流式细胞术进一步检测细胞内ROS水平。将20 mmol/L NAC作用SGC-7901细胞2 h,再加入20 μg/mL VES分别处理15和24 h后,分别采用逆转录PCR（RT-PCR）和Western blotting法检测内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白GRP78和CHOP mRNA及蛋白的表达。结果：与单纯VES处理组相比,20 mmol/L NAC预处理组胃癌细胞内ROS下降最为明显（P < 0.05）。与对照组相比,20 μg/mL VES能够诱导胃癌细胞内GRP78和CHOP mRNA及蛋白的表达明显增加（P < 0.05）;而与单纯20 μg/mL VES处理组相比,20 mmol/L NAC对VES诱导GRP78和CHOP mRNA及蛋白表达具有显著的抑制作用（P < 0.05）。结论：在体外,淬灭胃癌细胞内ROS能够抑制VES诱导的内质网应激反应。     

血清肿瘤标志物对肺癌患者支气管镜活检病理组织学分型的预测价值

目的 探讨血清肿瘤标志物水平与支气管镜活检组织病理学分型的关系。方法 本研究纳入2013年1月—2018年12月于哈尔滨医科大学附属肿瘤医院行支气管镜下活检病理检查,且完成相关血清肿瘤标志物(SCCA、CYFRA21-1、CEA、CA125、NSE)检测的356例肺癌患者(140例小细胞癌、122例鳞状细胞癌、94例腺癌),对患者进行回顾性分析。结果 在支气管镜活检的肺癌患者中,五种血清肿瘤标志物的组合(SCCA+CYFRA21-1+CEA+CA125+NSE,AUC=0.948,P<0.001)对小细胞肺癌与非小细胞肺癌的辅助诊断价值更高;三种(SCC+CEA+NSE,AUC=0.901,P<0.001)或四种(SCC+CYFRA21-1+CEA+NSE,AUC=0.901,P<0.001)标志物联合鉴别鳞状细胞癌与腺癌准确性更高;而在非小细胞肺癌中鉴别鳞状细胞癌与腺癌,三种标志物组合(SCCA+CEA+CA125,AUC=0.831,P<0.001)的价值更高。结论 对于不同病理分型的肺癌患者,不同血清肿瘤标志物组合对支气管镜下活检病理的分型有一定的辅助诊断...     

胃癌组织中miR-320a和CYLD的表达及与临床病理特征及预后的关系

目的 研究miR-320a和头帕肿瘤综合征蛋白(CYLD)在胃癌患者中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2013年3月—2014年11月在我院行肿瘤切除术的460例胃癌患者作为研究对象, 分别收集患者肿瘤组织及癌旁非肿瘤胃粘膜组织, 采用荧光定量PCR检测miR-320a和CYLD mRNA表达水平, 采用免疫组织化学染色法检测CYLD蛋白表达, 分析miR-320a和CYLD表达水平及其与临床病理特征及预后的关系。结果 miR-320a和CYLD mRNA在肿瘤组织中的相对表达量为(0.37±0.09)、(0.91±0.23), 在癌旁非肿瘤组织中的相对表达量为(0.86±0.15), (1.56±0.42), miR-320a和CYLD mRNA在肿瘤组织中的相对表达量与非肿瘤组织比较, 差异具有统计学意义(t=60.078, 29.113, P＜0.001);CYLD蛋白在肿瘤组织中的阳性表达率43.48%与癌旁非肿瘤组织73.91%比较, 差异具有统计学意义(χ²=86.624, P=0.003);miR-320a表达水平与患者肿瘤直径和淋巴结转移有关(χ²=25.859, 13.742, P＜0.05);YLD表达水平与患者TNM分期和肿瘤分化程度有关(χ²=37.725, 59.323, P＜0.05)。miR-320a低表达患者中位生存期(20.36±0.56)(95% CI:19.252~21.462)与miR-320a高表达患者中位生存期(28.29个月95% CI:27.158~29.412个月)比较, 差异具有统计学意义(χ²=87.967, P＜0.001);CYLD阴性表达患者中位生存期(17.70个月95% CI:16.599~18.796个月)与CYLD阳性表达患者中位生存期(26.74个月95% CI:25.474~27.997个月)比较, 差异具有统计学意义(χ²=109.887, P＜0.001);miR-320a和CYLD共表达患者中位生存期(29.01个月95% CI:26.831~28.946个月)与非共表达患者中位生存期(17.13个月95% CI:17.214~19.568个月)比较, 差异具有统计学意义(χ²=117.680, P＜0.001)。肿瘤组织miR-320a与CYLD mRNA表达水平呈正相关(r=0.607, P＜0.001);miR-320a低表达、CYLD阴性表达、TNM分期、淋巴结转移及肿瘤分化程度是影响胃癌患者预后的独立危险因素(HR=1.939、2.180、1.561、1.719、1.608, 95% CI:1.141~3.295, 1.252~3.796, 1.014~2.403, 1.115~2.650, 1.097~2.357, P＜0.05)。结论 miR-320a和CYLD在胃癌患者肿瘤组织中表达量明显降低, 与疾病发生发展及不良预后有关, 是潜在的胃癌诊断及治疗新靶点。     

ZNF436在胃癌中的表达及调控WNT/β-catenin对胃癌细胞迁移及侵袭的影响

目的 探讨锌指蛋白ZNF436在人胃癌细胞系和组织中的相对表达,及ZNF436对胃癌细胞MKN-28迁移和侵袭的影响和机制。方法 以人胃癌细胞系,胃癌、配对癌旁组织和正常人胃组织为研究对象;实时定量PCR和免疫组织化学法分析ZNF436在胃癌细胞系,胃癌、配对癌旁组织和正常人胃组织中的相对表达;在线数据分析ZNF436的表达与预后关系;ZNF436-siRNA(实验组)、NC-siRNA(对照组)质粒转染人胃癌MKN028细胞,转染后48 h实时定量PCR验证ZNF436的敲降效率,Transwell实验分析敲降ZNF436后对实验组细胞迁移和侵袭影响;裸鼠转移瘤实验验证ZNF436体内对细胞转移的影响;免疫蛋白印迹实验验证ZNF436对WNT/β-catenin信号通路的影响。结果 与正常胃上皮细胞系相比,ZNF436在人胃癌细胞系中高表达(P＜0.001);同时与癌旁组织和正常人胃组织相比,ZNF436在胃癌组织中高表达(P＜0.001);在线数据发现ZNF436的表达与胃癌的预后有关(P=0.0028);ZNF436基因表达越高,患者预后越差(P＜0.001);与对照组相比,实验组细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制(P＜0.001);实验组中裸鼠转移瘤的瘤大小和体积明显低于实验组(P＜0.001);低表达ZNF436后,WNT/β-catenin信号通路及其下游细胞因子明显受到抑制。结论 ZNF436作为潜在癌基因在人胃癌组织中表达上调,通过促进WNT/β-catenin信号通路参与胃癌的进程。     

m白术内酯Ⅰ通过TLR4/MyD88通路调控肺癌A549细胞增殖侵袭的研究

目的 探究白术内酯Ⅰ在肺癌进程中的作用及分子机制。方法 用qRT-PCR和免疫组化实验检测肺癌组织和癌旁组织中TLR4及MyD88的mRNA和蛋白的表达;Transwell侵袭实验及MTT实验检测白术内酯Ⅰ(100 μM/L)对A549细胞侵袭、增殖能力的影响;Western blot检测白术内酯Ⅰ对TLR4及MyD88蛋白表达的作用。结果 qRT-PCR及免疫组化结果显示,相对于癌旁组织,TLR4及MyD88的mRNA和蛋白在肺癌组织中高表达(P＜0.05);与对照组相比,白术内酯Ⅰ处理组A549细胞侵袭能力显著下降,增殖活力显著抑制(P＜0.05);Western blot结果显示,白术内酯Ⅰ抑制TLR4及MyD88蛋白表达水平(P＜0.05)。结论 白术内酯Ⅰ通过抑制TLR4/MyD88通路抑制肺癌A549细胞侵袭转移。