非酒精性脂肪肝患者血清CK-18 M30水平的测定

目的：检测非酒精性脂肪肝（NAFLD）患者血清细胞角蛋白片段（CK-18M30）的水平,探讨其与患者生化指标的相关性。方法：采用ELISA法检测71例NAFLD患者血清CK-18M30的水平并与44例健康人比较。同时比较其中6例接受水飞蓟宾或多烯磷脂酰胆碱治疗好转前后患者血清CK-18 M30的水平。结果：NAFLD组患者血清CK-18 M30的浓度为（282．3743±184．7845）U／L,明显高于健康对照组的（100．0888±32．4828）U／L（P〈0．001）。通过腹部B超结合患者的临床症状及生化指标将71例患者分为轻度组、中度组、重度组,其血清CK-18M30的浓度分别为（148．6406±83．1094）U／L、（278．6333±142．6302）U/L与（471．2649±256．26571U／L,差异有统计学意义（P〈0．001）。NAFLD组患者血清CK-18M30的水平与血清中丙氨酸转氨酶呈正相关（r=0．449,P〈0．001）。6例治疗好转的NAFLD患者治疗后血清CK-18M30的水平[（265．0840±130．0400）U／L]低于治疗前[（435．9065±243．3389）U／L],但其治疗前后差异没有统计学意义（P=0．160）。结论：NAFLD患者的血清CK-18 M30水平明显升高,对于判断NAFLD的严重程度具有一定价值。     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏TLR4的表达

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是代谢综合征累及肝脏的表现。随着现代生活水平的提高,非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的发病率增高,由其引起的肝纤维化和肝硬化发病率也有上升趋势。但因其发病机制复杂,迄今为止未找到有效的治疗药物[1-2],探讨其发病机制是当前研究的热点问题。本研究通过观察     

非酒精性脂肪性肝炎形成中脂肪细胞因子的动态变化及意义

目的:研究非酒精性脂肪性肝炎(NASH)形成中脂肪细胞因子的动态变化特征。方法:SD大鼠40只,随机分成正常组10只,模型组30只;正常组大鼠以标准饲料喂养,模型组以高脂饲料喂养。模型组大鼠分别在实验开始后4、8、12周末3个时相点分批随机处死10只,正常组全部在12周末处死。采用HE染色观察肝组织病理组织学变化,ELISA法检测血清及肝组织TNF-α、Leptin、IL-6、ADP水平。结果:病理组织学表明,高脂喂养4周大鼠表现为单纯性脂肪肝;8周时脂肪变程度加重,有少量炎细胞浸润;12周时大鼠NASH形成。模型组大鼠从4周到8、12周,血清和肝组织TNF-α、IL-6水平及血清Leptin水平逐渐增高,而血清ADP水平则逐渐减少;模型组4周末血及肝组织TNF-α、IL-6、Leptin、ADP水平与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05),而12周末血和肝组织TNF-α、IL-6水平及血清Leptin、ADP水平均比正常组明显增高或降低(P<0.05,P<0.01)。结论:脂肪细胞因子的过度表达或异常缺失参与了NASH的发生、发展。     

大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型的制备

目的 建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的动物模型。方法 雄性SD大鼠20只,随机分为模型组（n=10）和正常对照组（n=10）。模型组喂养高脂饮食,即在普通饲料基础上加10％猪油、2％胆固醇、5％蛋黄粉。正常对照组喂养普通饲料。喂养12周后,观察一般情况,检测大鼠血清生化指标及炎症介质,并行肝组织病理检查。结果模型组体重、肝体比、血清甘油三脂（TG）、肿瘤坏死因子-a（TNF-a）均高于正常组;病理学均出现弥漫性肝细胞脂肪变性,且90％存在小叶内炎症,80％出现汇管区炎症;电镜示肝细胞索排列紊乱,胞浆脂滴大量出现、聚积、线粒体嵴肿胀,肝星形细胞和枯否细胞增生,细胞核变形,部分呈现核固缩表现。结论 通过12周的高脂肪、高胆固醇饮食成功地制备出大鼠NASH模型。     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏血管内皮生长因子表达的意义

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）在非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝脏的表达及意义。方法 20只大鼠随机分为对照组（10只）和模型组（10只）,分别给予标准饮食和高脂饮食16周,进行肝脏病理学检查和血生化指标分析;采用超高频小动物超声诊断仪检测肝脏及其血流动力学改变,利用分子生物学方法检测肝组织VEGF表达水平。结果模型组大鼠ALT、AST和TC增高（P〈0.05）。肝组织病理表现为大小泡混合性脂肪变性,伴肝细胞气球样变性、炎性细胞浸润、碎片状坏死和少量纤维组织增生。超声结果为肝脏增大,肝缘圆钝,实质回声细密增强,后方组织明显衰减,与脂肪肝病理结果一致;门静脉内径增大,肝静脉内径减小（p〈0.05）,静脉流速降低。肝组织VEGF蛋白和mRNA表达明显增加（P〈0.05）,VEGF蛋白主要表达在肝细胞和窦内皮细胞。结论 NASH肝脏VEGF蛋白和mRNA表达明显增加,VEGF可能参与NASH肝脏血流动力学的异常。     

葡萄糖调节蛋白78在大鼠非酒精性脂肪性肝炎中的表达及意义

目的 观察高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)过程中内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白78的表达变化,探讨内质网应激在NASH发病机制中的作用.方法 建立大鼠高脂饮食诱导NASH模型,检测血清ALT、AST、FFA、TG和肝组织MDA的变化,用RT-PCR与Western blot方法 检测NASH形成过程中肝组织GRF78在基因和蛋白水平的表达变化.结果 NASH组大鼠血清ALT、AST、FFA、TG和肝组织MDA水平均较对照组有不同程度的升高.肝组织GRP78基因和蛋白表达也随NASH加重而增强,16周时升高最为显著(P<0.01).结论 高脂饮食可诱导GRP78表达增强,启动内质网应激,导致脂质异常沉积,其可能与NAsH的发病机制密切相关.     

活化转录因子6在非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织中的表达及意义

目的 研究活化转录因子6(ATF6)在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织中的表达变化及其意义.方法 采用高脂饲料诱导的方法建立NASH大鼠模型;采用RT-PCR和免疫组织化学法检测ATF6 mRNA及蛋白表达情况.结果 与正常对照组相比,NASH组大鼠血清FFA、ALT、AST水平均明显升高(P<0.05);在建模的第8周时,NASH组肝组织中ATF6 mRNA表达开始升高,16周时ATF6 mRNA表达最强(P＜0.01).结论 ATF6的高表达可能参与了NASH的发病机制,在NASH的发生发展过程中发生重要作用.     

导痰汤对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的影响

目的观察导痰汤对实验性大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的影响,并探讨其作用机制。方法采用高脂饮食复制大鼠NASH模型,以导痰汤低、中、高剂量分别进行干预,然后观察动物一般情况,计算肝指数,观察肝组织脂肪变性及炎症活动度,并查血清学指标ALT、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、高密度脂蛋白(HCL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。结果与空白模型组相比,各剂量治疗组大鼠肝指数明显降低(P<0.05),血清ALT及TG、TCH、LDL-C也有显著降低(P<0.01～0.05),但HCL-C无明显变化(P>0.05)。各治疗组大鼠肝脏炎症活动度也显著改善(P<0.05),但量效关系不明显。结论导痰汤有明显防治NASH作用,作用机制与其能减轻脂类在肝脏的积聚,降低肝内炎症有关。     

理气化痰祛瘀方抗大鼠非酒精性脂肪性肝炎实验研究

目的观察理气化痰祛瘀方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的影响,探讨其防治NASH的作用机制。方法采用高脂饮食复制NASH大鼠模型,用不同剂量理气化痰祛瘀方治疗,以易善复为对照,观察其对NASH大鼠血清肝功能、血脂、细胞因子水平以及肝组织匀浆中CHO、TG含量的影响;并同时观察各组大鼠肝组织的病理改变。结果模型组大鼠的肝指数、血清ALT、AST、CHO、LDL-C、FFA、TNF-α、Leptin水平以及肝组织中CHO和TG含量较正常组明显增加;而血清HDL-C和TG水平显著下降;同时出现了严重脂肪变和不同程度炎症细胞浸润、肝细胞坏死、汇管区渗出。应用理气化痰祛瘀方进行干预后,大鼠肝组织脂肪变程度和炎症活动程度较模型大鼠显著降低,肝功能明显改善,血清FFA、TNF-α、Leptin以及CHO、LDL-C水平明显下降同时HDL-C明显升高,同时肝组织中CHO和TG含量也明显下降。结论理气化痰祛瘀方对NASH有防治作用,其作用机制可能与阻断细胞因子网络有关。     

消、补法在非酒精性脂肪性肝炎治疗中的应用

1980年Ludwig等提出了非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的名称,用于描述一组发生于肥胖、糖尿病女性患者中,其组织学改变和酒精性肝炎相似的综合征,但患者否认饮酒史。近年来随着对NASH研究的深入,发现其并非一良性疾病,而是可导致严重临床结果的一种疾病,是非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)中最严重的一种类型。NAFLD在世界范围内是一个不断增长的疾患,在对随机死亡和普通人群筛选分析后认为,NAFLD在普通人群中的发病率约为20%,NASH为2%~3%,2型糖尿病和肥胖患者发病率高于此…     

妊娠滋养细胞疾病中EMT相关蛋白CK-18、波形蛋白的表达及意义

目的 检测上皮细胞间质细胞转化（EMT）相关蛋白--细胞角蛋白18（CK-18）和波形蛋白（vimentin）在正常早孕绒毛、葡萄胎及妊娠滋养细胞肿瘤中的表达及与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化法（SP法）检测39例正常早孕绒毛组织、33例葡萄胎组织和32例妊娠滋养细胞肿瘤组织（侵袭性葡萄胎27例、绒毛膜癌5例）中CK-18、vimentin的定位及表达情况。结果 CK-18在各种类型滋养细胞中呈强阳性表达,正常绒毛组的CK-18表达水平高于葡萄胎组及妊娠滋养细胞肿瘤组,差异有统计学意义（P<0.01）,葡萄胎组CK-18表达高于滋养细胞肿瘤组,差异有统计学意义（P<0.01）;vimentin于各组滋养细胞中呈弱阳性表达,各组间的表达差异无统计学意义（P>0.05）。在葡萄胎滋养细胞轻度增生组,CK-18蛋白的相对表达量高于滋养细胞中或重度增生组（P<0.01）。在滋养细胞肿瘤解剖学Ⅰ期组CK-18蛋白的相对表达量高于解剖学Ⅱ期及以上组（P<0.001）。结论 伴随着滋养细胞恶性度的升高CK-18的表达逐渐降低,提示EMT可能与滋养细胞的恶性转化有相关性。     

声速匹配组织量化技术对非酒精性脂肪性肝炎定量评价的初步应用研究

目的探讨声速匹配组织量化（SVQ）技术定量评价非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的可行性和临床应用价值。方法选取经肝穿刺或临床资料证实的非酒精性单纯性脂肪肝（NAFL）及NASH患者各20例,并选取健康体检者20例作为对照组,分别采集3组受试者临床相关资料,进行SVQ检测,采集声速匹配值（ZSI）和组织声速（SV）。结果3组受试者在年龄、身高、体重方面均无统计学差异（均P＞0.05）,BMI、ZSI和SV均存在统计学差异（均P＜0.01）。SVQ技术诊断NASH的AUC为0.801。以SV=1527m/s作为临界点,判断NASH的灵敏度、特异度分别为95.20%、70.60%。结论SVQ技术定量评价NASH是可行的,具有很好的临床应用价值。     

姜黄素对非酒精性脂肪性肝炎肝细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 探讨姜黄素对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）肝细胞凋亡的影响及其相关机制。 方法 将HL-7702细胞分为对照组、模型组和治疗组,其中对照组给予普通培养基培养,模型组培养基内加入1mmol/L的游离脂肪酸（FFA）诱导NASH模型,治疗组在加入FFA的同时给予20μmol/L的姜黄素干预。48小时后收集细胞,检测细胞凋亡率、活性氧（ROS）含量及线粒体膜电位水平。 结果 模型组肝细胞的早期凋亡率及总凋亡率均明显高于对照组[（10.34±0.13）% vs.（0.55±0.08）%,P<0.05; （13.30±0.10）% vs.（2.15±0.91）%,P<0.05],治疗组与模型组相比,肝细胞早期凋亡率及总凋亡率均明显降低[（0.83±0.35）% vs.（10.34±0.13）%,P<0.05;（3.11±1.06）% vs.（13.30±0.10）%;P<0.05];模型组肝细胞内ROS含量明显高于对照组（233.58±8.00 vs. 187.24±10.60,P<0.05）,而线粒体膜电位水平则明显低于对照组（1.08±0.03 vs. 1.25±0.04,P<0.05）;治疗组肝细胞内ROS含量较模型组显著降低（192.57±23.86 vs. 233.58±8.00,P<0.05）,而线粒体膜电位水平则显著升高（1.17±0.04 vs. 1.08±0.03,P<0.05）。 结论 姜黄素可调节NASH肝细胞凋亡,该作用可能与其线粒体保护作用相关。     

二甲双胍联合双环醇治疗非乙醇性脂肪肝55例疗效观察

目的:观察二甲双胍联合双环醇治疗非乙醇性脂肪肝的疗效。方法:将110例非乙醇性脂肪肝患者随机分为治疗组(n=55)及对照组(n=55)。治疗组在综合治疗基础上给予双环醇联合二甲双胍治疗;对照组综合治疗基础上,给予应用二甲双胍。全部病例均连续治疗12周,观察治疗前后临床症状、生化指标、肝脏B彩超的变化及药物不良反应。结果:治疗组患者临床表现、生化指标、肝脏彩超改变与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:应用双环醇联合二甲双胍治疗脂肪肝患者疗效、安全性好,值得推广应用。     

清肝化痰活血方对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠的干预作用

目的观察清肝化痰活血方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型大鼠的影响,并探讨其作用机制。方法雄性SD大鼠36只分为对照组6只、模型组10只、清肝化痰活血方干预组(清肝组)10只、胆宁片干预组(胆宁组)10只。对照组普通饲料喂养;其余3组均采用高脂饮食复制NASH动物模型,清肝组、胆宁组分别给予清肝化痰活血方药液和胆宁片混悬液灌胃,对照组和模型组同时予生理盐水灌胃。造模12周末处死各组大鼠,检测体质量、肝指数、炎症活动度计分、血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、门冬氨酸氨基转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)含量和肝组织中TG、FFA、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果第12周时模型组和胆宁组大鼠体质量、肝指数、炎症活动度计分、血清AST、ALT、γ-GT、TG、TC、FFA水平、肝组织TG、MDA、FFA含量均高于对照组和清肝组(P<0.05),SOD活性均低于对照组和清肝组(P<0.05);胆宁组体质量、肝指数、炎症活动度计分及血清ALT、TG、TC和FFA水平、肝组织TG、FFA均较模型组降低(P<0.05);与对照组比较,清肝组炎症活动度计分、血清TG增高(P<0.05),肝组织SOD活性降低(P<0.05)。结论清肝化痰活血方对NASH模型大鼠有良好的防治作用,其作用机制可能是通过调节脂质代谢,减轻脂类在肝脏的积聚,抗脂质过氧化,缓解氧化应激。     

黄芩苷治疗非酒精性脂肪性肝炎大鼠抗炎的疗效

目的 观察黄芩苷对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的治疗效果及其抗炎疗效。 方法 采用高脂饮食诱导建立大鼠NASH模型,给予不同剂量的黄芩苷(15 、30、60 mg/kg·d)治疗后,测定大鼠肝质量及体质量变化,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化,并测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,比色法测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)酶活性及丙二醛(MDA)含量变化,酶联免疫吸附(ELASA)测定肝组织肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)含量变化。 结果 经黄芩苷治疗后,NASH大鼠的体质量及肝质量减轻(F=1609.79, P<0.001;F=155.17, P<0.001),二指标随剂量增加而下降。经不同剂量黄芩苷治疗后,病理学可见肝细胞脂肪变性逐渐减轻,小叶间炎性细胞浸润逐渐减少。治疗后,血清ALT和AST减少(F=177.16,P<0.001;F=2 998.11,P<0.001),随剂量增加而减少。而肝脏GSH、SOD酶活性经黄芩苷治疗后增加(F=398.47,P<0.001;F=256.07,P<0.001),随治疗浓度增加而增加。肝组织MDA的变化则相反(F=237.98,P<0.001),随治疗浓度增加而下降。肝组织TNFα、IL-1β、IL-6含量经黄芩苷治疗后均降低(F=399.15,P<0.001;F=314.76,P<0.001;F=108.38,P<0.001),三者随治疗浓度增加而下降。 结论 黄芩苷能减轻NASH大鼠的脂肪变性程度,通过增加GSH、SOD酶的活性,减少TNFα、IL-1β、IL-6炎性因子的产生,缓解肝脏的炎症,发挥其抗炎作用。     

罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂质过氧化的影响

目的探讨罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis,NASH）大鼠脂质过氧化的影响。方法 30只雄性SD大鼠均分为正常组、模型组和罗格列酮预防组,每组各10只。模型组和罗格列酮预防组高脂喂养12周制备NASH模型,罗格列酮预防组同时每天予4mg/kg罗格列酮灌胃。第12周末处死动物,并收集血清和肝组织,检测糖代谢、脂代谢、肝功能和脂质过氧化指标变化。结果与正常组相比,模型组空腹血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数（HOMA-IRI）升高,血清和肝匀浆脂代谢紊乱,ALT、AST和γ-谷氨酰转移酶（GGT）明显升高。与模型组相比,罗格列酮预防组糖脂代谢、ALT、AST等指标明显下降（P〈0.01）。模型组血清和肝匀浆总抗氧化能力（total anti-oxidation competence,T-AOC）、超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-PX）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）较正常组变化明显,而罗格列酮预防组可显著改善上述脂质过氧化指标（P〈0.05）。结论罗格列酮可全面、有效地减轻NASH大鼠脂质过氧化紊乱,改善胰岛素抵抗。     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏、骨骼肌、脂肪组织脂联素受体的表达

目的 探讨非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏、骨骼肌,腊肪组织脂联素受体表达的变化.方法 高脂餐喂养20周,建立NASH大鼠模型,设普通饲料对照组,观察体质量、血搪、血脂,肝功能和肝组织病理,并以实时荧光定量PCR法检测大鼠肝脏、骨骼肌,内脏脂肪纽织AdipoR1、AdipoR2mRNA的表达.结果 与普通饲料对照组相比,模型组大鼠的体质量、血搪、TG,TCH、ALT和AST升高,肝组织脂防变(Z=-2.304,P=0.021),炎症(Z=-2.541,P=0.011)、纤维化(Z=-2.408,P=0.016)王著增加,肝脏的AdipoR1(0.98±0.04vs2.13±0.13)和AdipoR2(0.34±0.10vs1.75±0.19)表达降低,脂肪组织AdipoR1(0.19±0.11vs1.39±0.14)和AdipoR2(0.47±0.07vs1.58±0.18)表达降低,骨骼肌AdipoR1(6.98±0.56vs2.47±0.66)和AdipoR2(4.52±0.97vs0.46±0.15)表达上升,差异均有统计学意义(p<0.05).结论 高脂餐诱导的NASH大鼠肝脏及脂肪组织AdipoR1、AdipoR2mRNA表达降低,骨骼肌AdipoR1、AdipoR2表达增加,提示NASH发病可能涉及肝脏,骨骼肌、脂肪组织脂联素受体表达异常.