影响抗A杂交瘤细胞抗体分泌的部分因素

目的 研究影响抗Ａ杂交瘤细胞抗体分泌的部分因素。方法 通过试管法和玻片法检测Ａ抗体的效价和亲和力。结果 ０．２５ｍｍｏｌ／Ｌ、０．５ｍｍｏｌ／Ｌ丁酸钠和０．０１Ｕ／ｍＬ胰岛 能明显提高抗Ａ抗体的效价和亲和力,ＨＡ 筛上体积细胞迅速死亡,抗Ａ抗体的效价和新和力明显提高。结论 丁酸钠、胰岛素和ＨＡＴ重筛选可提高抗Ａ杂交瘤细胞抗体的分泌。     

用甲基纤维素半固体培养基筛选杂交瘤细胞

制备单克隆抗体一个必不可少的步骤就是使融合后的细胞进行单克隆培养。融合细胞的克隆化方法主要采用有限稀释法［见：徐新来．细胞培养在杂交瘤技术中的应用见：鄂征主编．组织培养和分子细胞学技术．北京：北京出版社,１９９５：２０７～２１４］。由于需要反复克隆...     

抗人全T细胞单克隆抗体大鼠杂交瘤细胞株的建立

通过融合大鼠免疫细胞株IR983F和经T细胞株HPB—ALL免疫大鼠脾细胞,获得分泌单克隆抗体LO—CD6a的杂交瘤细胞株。实验证实,LO—CD6a是人全T细胞特异性的。     

添加剂对杂交瘤细胞生长和McAb分泌的影响

以血清浓度为１％、５％和１０％的ＲＰＭＩ－１６４０培养基为基础，分为以下３组不同和添加剂培养基：Ｉ号，转铁蛋白＋胰岛素＋亚硒酸钠；Ⅱ号，ＩＬ－２＋ＩＬ－６；Ⅲ号，Ｉ号＋Ⅱ号。观察不同添加剂对杂交瘤体外细胞生长和ＭｃＡｂ产生的影响。结果Ｉ号添加剂组杂交瘤细胞数与对照组无显著差异，Ⅱ、Ⅲ号添加剂组活细胞数分别为对照组的２０９．１％和２２６．５％。Ｉ、Ⅱ、Ⅲ号添加剂组的最高ＭｃＡｂ滴度分别为对照组的２倍     

杂交瘤细胞的无血清无蛋白培养

随着单克隆抗体在体内治疗中的广泛应用，杂交瘤细胞的无血清无蛋白培养日益受到重视。本文讨论了杂交瘤细胞无血清无蛋白培养基的常用添加成分和它们的功能，综述了用无血清无蛋白培养基培养杂交瘤细胞技术的进展     

杂交瘤腹水抗体效价的不稳定性及其对策

自1980年以来，本实验室陆陆续续共制备了针对200余种抗原的约2000余株单克隆抗体（mAb）杂交瘤细胞系。在后续工作中发现大部分抗体分泌能力和效价长期稳定，但遇到有3株出现了不同程度的抗体分泌能力下降，腹水mAb效价由原有的1：10^7降至1：10^4或更低。对此，我们采取了再次克隆化的方法，发现这些细胞系中出现高比例的抗体分泌阴性细胞。不仅证明了腹水mAb效价下降是由于mAb分泌阴性细胞竞争性扩增引起的，而且成功地挽救了这些得来不易的宝贵的杂交瘤细胞系。     

杂交瘤细胞核糖核酸抗病毒作用

目的：从分泌抗狂犬病毒糖蛋白单克隆抗体（ＩｇＭ）杂交瘤细胞中提取核糖核酸,研究其抗狂犬病毒的作用。方法：注射该种核糖核酸４ｗ后后用狂犬病毒ＣＶＳ株进行颅腔击。结果：该核糖核酸能明显延长的生存时间。结论：该核糖核酸对狂犬病毒且有一定的抵抗作用。     

杂交瘤细胞P35染色体丢失与其分泌单克隆抗体的特性

单克隆抗体 (mAb)具有特异性强、均一性好、可大量生产等诸多优点 ,已被广泛用于各种实验研究。但分泌mAb的杂交瘤细胞长期保存于液氮中 ,其染色体会不会丢失 ?丢失染色体的杂交瘤细胞可否影响其分泌mAb的特性 ?尚未见有关深入的研究。为此 ,我们将在液氮中保存了 10年 (1992～2 0 0 2年 )的分泌抗人肺腺癌mAb的杂交瘤细胞P3 5,进行复苏并传代培养后 ,检查了其染色体的变化和分泌mAbN3 5的能力 ,并鉴定了该株mAb的部分特性。1　材料和方法1.1　材料　分泌抗人肺腺癌细胞GLC 82mAb的杂交瘤细胞P3 5由本室于 1992年建株 ,在液氮中冻存已…     

抗人IFN—α单克隆抗体杂交瘤细胞的建株及应用研究

人ＩＦＮα在治疗淋巴细胞瘤、黑色素瘤、白血病和肾癌等肿瘤疾病,以及预防感冒、治疗乙型肝炎、单纯疱疹等病毒性疾病中,具有广泛的应用前景。据统计,我国约有肿瘤患者３００～４００万人,慢性乙肝患者近１００万人,单纯疱疹及带状疱疹患者约有１亿人以上,估计每年对ＩＦＮα的总需求量大约为５～６亿支。由于应用于临床（尤其是注射用）的ＩＦＮα纯度要求极高,因此作为治疗用的ＩＦＮα必须进行高度纯化。应用ｍＡｂ技术进行ＩＦＮα的分离纯化,具有操作简便、回收率高、可重复使用等优点,尤适合大规模地对重组和天然…     

无蛋白培养中杂交瘤细胞的生长与单克隆抗体分泌

目的：建立应用无蛋白培养基大量制备单克隆抗体（McAb)的生产方法。方法：本实验以3株猪瘟病毒特异单抗杂交瘤细胞为研究对象,通过与常规的有血清培养法比较,研究了无蛋白培养基中杂交瘤的细胞生长特性、抗体分泌效率、活性和纯度。结果：无蛋白培养基中单抗的产量与效价比有血清培养的单抗高2－4倍,而且单抗的纯度显著提高。结论：无蛋白培养基可完全取代常规的有血清培养基,用于生产高滴度、高纯度单克隆抗体。     

抗8种主要呼吸道病毒单抗杂交瘤细胞库的建立和临床应用

目的：为了对流感病毒甲型和乙型、副流感病毒１、２和３型、呼吸道合胞病毒及腺病毒３、７型主要呼吸道病毒进行快诊。方法：从１９８６至１９９７年应用杂交瘤单抗技术,制备出上４类８种抗病毒单抗细胞库,连同用于连接物的抗碱性磷酸酶单抗细胞株,共有１１７株单抗细胞株。将以上４类８种病毒单抗连接抗碱性磷酸酶单抗复合物,以兔抗鼠搭桥进行ＡＰＡＡＰ桥联快速诊断。结果：获得满意结果,此技术结果清晰,无内源性酶干扰,只     

分泌抗登革病毒单抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立

将纯化的登革３型病毒（ＤＥＮ－３）单克隆抗体３Ｄ３（ＡｂＩ）连结到载体分子ＫＬＨ上，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与Ｓｐ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合。用ＥＬＩＳＡ夹心法检测阳性克隆，融合率达１００％，阳性率为５％，经２－３次克隆化，获得了６株分泌抗登革病毒单抗的独特型抗体（ＭｃＡｂ２）的杂交瘤细胞系。在进行阳性筛选及特异鉴定时，选择了以３－５μｇ／ｍｌ的最适Ａｂ１包被浓度，并用正常小鼠Ｉｇ及ＫＬＨ分     

固定杂交瘤细胞间接免疫荧光法检测抗独特型抗体

<正> 在制备多克隆抗独特型抗体(简称抗Id抗体)过程中,检测抗Id抗体通用方法是用纯化独特型抗体(简称 Id 抗体)的 ELISA或RIA。由于分泌Id抗体的杂交瘤细胞表面表达有均一的Id抗体分子,Kennedy等人曾采用分泌Id抗体的新鲜杂交瘤细胞间接免疫荧光试管法检测抗Id抗体的活性及特异性,以节省纯化Id抗体的用量和提高初步检测的速度。我们在检测自制的多克隆抗Id抗体的过程中,对该法进行了改进,即用固定杂交瘤细胞间接免疫荧光玻片法检