哮喘患儿外周血单个核细胞趋化因子的分泌及意义

为探讨外周血单个核细胞 (PBMC)分泌的正常T细胞活化后所表达和分泌的调节蛋白 (RANTES)与哮喘临床表型的关系 ,选择不同发病状况的哮喘患儿45例 ,取外周血分离单个核细胞 ,进行细胞培养 ,用酶联免疫吸附 (ELISA)方法测定细胞培养上清的RANTES含量。结果缓解期与发作期哮喘患儿外周血单个核细胞均能分泌一定水平的RANTES ,经植物血凝素 (PHA)刺激后RANTES分泌水平显著增加 (P<0.05) ;特应性哮喘患儿PBMC经PHA刺激后分泌RANTES水平显著高于非特应性哮喘患儿(P<0.05) ,以血清总IgE增高患儿更为明显 ;哮喘患儿PBMC经刺激后分泌RANTES与血清总IgE水平及吸入性过敏原皮肤点刺检查阳性数呈显著相关(P<0.05)。表明除趋化作用外 ,RANTES可能促进IgE合成 ,从而在特应性哮喘发病中发挥重要作用     

哮喘患儿外周血单个核细胞诱生白细胞介素-2、白细胞介素-6及红霉素的调节作用

目的　探讨细胞因子白细胞介素 (IL) 2、IL 6在儿童哮喘发病中的作用及红霉素的调节作用。方法　采用双抗体夹心ELISA法测定 3 0例哮喘发作期、19例哮喘缓解期患儿外周血单个核细胞 (PBMC)经刺激后诱生IL 2、IL 6水平。 15例健康儿童做为对照组。观察培养液中加入红霉素后这些细胞因子的变化。结果　哮喘患儿发作期、缓解期PBMC经植物血凝素 (PHA)刺激后IL 6水平较对照组明显升高 (P <0 .0 1) ;加红霉素后患儿IL 2、IL 6水平恢复正常。结论　细胞因子失衡是儿童哮喘发病的重要原因 ,红霉素可下调IL 6、IL 2水平 ,使细胞因子偏移状态得到逆转     

支气管哮喘不同病期血浆及外周血单个核细胞诱生白细胞介素和肿瘤坏死因子α的变化

支气管哮喘不同病期血浆及外周血单个核细胞诱生白细胞介素和肿瘤坏死因子α的变化冯学斌刘凤黄薇房崇云于树莉马永红傅振荣董荣芝作者单位：２５６６０３滨州医学院儿科教研室（冯学斌、黄薇、于树莉、马永红、傅振荣、董荣芝），病理生理学教研室（刘凤），生物学教研室...     

急性肾小球肾炎患儿外周血单个核细胞白细胞介素10的表达及意义

目的 探讨白细胞介素10（IL－10）在急性肾小球肾炎（AGN）发病机制中的作用及其临床意义。方法 应用逆转录－多聚酶链反应（RT－PCR）及双抗体夹心ELISA法检测了33例AGN患儿外周血单个核细胞（PBMC）IL－10mRNA和蛋白水平。结果 1．AGN急性期IL－10 mNRA和蛋白水平较恢复期和正常对照组显著升高,恢复期降至正常水平。2．IL－10mRNA和蛋白水平与血清补体C3呈显著负相关。结论 AGN患儿存在Th1/Th2细胞免疫功能的失衡。PVMC IL－10可作为观察病情活动状态的免疫学指标之一。     

激素敏感型肾病综合征患儿血清、外周血单个核细胞白细胞介素-18表达的意义

目的探讨小儿激素敏感型肾病综合征(SSNS)与白细胞介素-18(IL-18)的关系及地塞米松(DEX)对外周血单个核细胞(PBMC)体外培养表达IL-18的抑制作用。方法单纯型SSNS23例。采用ELISA测定患儿治疗前后血清、尿液IL-18水平和PBMC体外培养上清液中IL-18表达。对照组为相应年龄健康儿童15例;另18例年龄相似的呼吸道感染病例作为感染对照组。结果治疗前后血清、尿液IL-18水平有显著性差异(t=15.072,16.149Pa<0.001)。治疗前PBMC在植物血凝素(PHA)刺激下体外培养上清液中IL-18表达明显高于治疗后和正常对照组(t=6.526,5.585Pa<0.001)。培养液中加入DEX后PBMC表达IL-18水平明显低于未加DEX组(t=4.217P<0.001)。血、尿IL-18与24h尿蛋白定量呈显著正相关(r=0.768,0.638P<0.05)。血清IL-18与PBMC体外培养上清液中IL-18水平呈正相关(r=0.574P<0.05)。结论SSNS的发病与IL-18密切相关;PBMC高表达IL-18可能是其血清IL-18增高原因之一。     

紫癜性肾炎患儿外周血单个核细胞白细胞介素-13的变化

目的　探讨白细胞介素１３（ＩＬ－ １３） 在紫癜性肾炎（ＨＳＰＮ） 的变化。方法　应用逆转录－ 多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ） 及双抗体夹心ＥＬＩＳＡ 法,分别检测了３０ 例健康儿童和２０ 例ＨＳＰＮ 患儿活动期和恢复期外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ） 在植物血凝素（ＰＨＡ） 刺激下ＩＬ－ １３ ｍＲＮＡ和蛋白水平的变化。结果　①ＨＳＰＮ 活动期ＰＢＭＣ中ＩＬ－１３ ｍＲＮＡ 和蛋白水平均显著高于正常对照组（０ ．４８ ±０ ．１１ ｖｓ０．３６±０．１６ 和４７ ．８９ ±１１ ．６７ ｐｇ／ｍｌｖｓ３５．２２±４．４２ ｐｇ／ｍｌ, Ｐ均＜ ０．０１） ,恢复期与正常对照组相比无显著差异（０．３８±０．１２ ｖｓ０．３６±０ ．１６ 和３５ ．９４ ±５．６０ ｐｇ／ｍｌｖｓ ３５ ．２２±４ ．４２ ｐｇ／ｍｌ,Ｐ均＞ ０．０５）;②临床上表现为蛋白尿型、肾病综合征型及急性肾炎综合征型者,活动期ＰＢＭＣ中ＩＬ－ １３ ｍＲＮＡ和蛋白水平均显著高于正常对照组,而表现为单纯血尿型者与正常对照组相比无显著差异。结论　ＨＳＰＮ 患儿活动期ＩＬ－ １３ 表达异常,且与临床类型有一定的相关关系。     

支气管哮喘患儿血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素8含量及其相关关系

支气管哮喘患儿血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素８含量及其相关关系陈丽云吴兴利黄达枢支气管哮喘（简称哮喘）细胞因子在气道炎症发生和持续中的作用已受到重视。我们通过测定发作期、缓解期哮喘患儿血清肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）与白细胞介素８（ＩＬ－８）水平，分析...     

慢性乙型肝炎病毒携带儿童血清及外周血单个核细胞培养上清干扰素γ和白细胞介素-10的水平及其意义

目的探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带儿童血清及外周血单个核细胞(PBMC)经乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)刺激后培养上清干扰素γ(IFN-γ)和IL-10水平及临床意义。方法HBeAg阳性慢性HBV携带儿童21例(A组)、抗-HBe阳性慢性HBV携带儿童20例(B组)及正常儿童19例(C组),每例采集外周静脉血5 mL,分离血清及PBMC,PBMC体外单独培养或与HBcAg共培养72 h后,检测血清及培养上清IFN-γ和IL-10水平。结果血清IFN-γ在各组间无明显差异,A和B组血清IL-10较C组显著增高。经HBcAg处理后PBMC培养上清中,IFN-γ水平在B和C组较A组显著增高。同时,经HBcAg处理后A和B组PBMC培养上清中IL-10水平均较C组显著增高,尤以A组明显。结论IL-10水平及PBMC对HBcAg应答低下在儿童HBV携带者发病机制中起一定作用。     

miR-98在哮喘患儿外周血单个核细胞中的表达及意义

目的 探讨支气管哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMCs)中miR-98的表达及其临床意义.方法 收集43例发作期和缓解期哮喘患儿,30例健康儿童(对照组)的外周血标本,分离PBMCs,采用实时定量PCR法检测PBMCs中miR-98及IL-13、IL-4 mRNA的相对表达量.结果 miR-98在哮喘发作期患儿PBMCs中的表达低于缓解期和对照组儿童,而IL-13、IL-4在哮喘发作期患儿PBMCs中的mRNA水平均高于缓解期和对照组,差异有统计学意义(P均<0.01);缓解期患儿和对照组间miR-98、IL-4 mRNA和IL-13 mRNA水平差异无统计学意义(P均>0.05).哮喘患儿发作期,miR-98水平与IL-4、IL-13 mRNA相对表达量均呈负相关(r=-0.794、-0.804,P均<0.001),IL-4和IL-13 mRNA相对表达量呈正相关(r=0.853,P<0.001).结论 miR-98在哮喘发作期患儿PBMCs中表达降低,可能与小儿哮喘的发作相关.     

小儿肾病综合征激素治疗前后与外周血单个核细胞凋亡关系

为观察小儿肾病综合征(NS)泼尼松治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)的凋亡变化,探讨泼尼松诱导细胞凋亡关系及其临床意义,对50例肾病综合征患儿分别在泼尼松治疗前和治疗后第2、4、6、8周采血,进行细胞凋亡形态观察,计算百分率。结果:治疗前凋亡率为(9.94±6.27)％;第2周为(17.30±5.83)％,第4周为(15.60±4.58)％,第6周为(13.60±6.06)％,第8周为(10.18±4.01)％。治疗前与治疗后2、4、6周比较,均P<0.01,差异有显著性;与第8周(减药2周后)比较,P>0.05,差异无显著性。提示NS患儿使用足量泼尼松治疗可诱导外周血PBMC细胞凋亡增加,也诱导大部分患儿病情缓解,当泼尼松减量后诱导细胞凋亡随之减少。观察外周血单个核细胞的细胞凋亡变化对观察NS的激素治疗有一定的临床意义。     

热性惊厥儿血清干扰素α,白细胞介素2和肿瘤坏死因子α测定 …

目的探讨热性惊厥(FC)的免疫作用机制。 方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)对30例FC儿进行血清干扰素α(IFN-α)、白细胞介素2(IL-2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)测定,并与20例正常儿童比较。 结果FC组血清IFN-α、IL-2、TNF-α水平均明显高于对照组(t＝5．29,2．19,5．22P分别＜0．001,＜0．05,＜0．001),相关分析发现FC患儿IFN-α与IL-α之间呈显著正相关(r＝0．527P＜0．005)。 结论FC儿存在细胞免疫功能异常,其参与了FC的发病过程,且与FC复发可能有一定的关系。     

重组白细胞介素2及肿瘤坏死因子协同诱导的LAK细胞对ALL细胞…

用１０００Ｕ／ｍｌ重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ－２）诱导的正常人淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）对１１例初诊或复发未治的小儿急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）细胞进行了３７次外杀伤检测，结果全部表现ＬＡＫ细胞杀伤活性（３５．８％±９．４０％）；另一组ｒｈＩＬ－０２２５０Ｕ／ｍｌ＋重组人肿瘤坏死因子α（ｒｈＴＮＦａ）５００Ｕ／ｍｌ共同诱导的正常人ＬＡＫ细胞对相同１１例小儿ＡＬＬ细胞进行了３３次体外杀伤检     

外周血单个核细胞冻存后诱导为CIK细胞及其抗肿瘤效应的研究

目的研究低温冻存对处周血单个核细胞(PBMNCs)诱导为CIK(cytokine-inducedkiller)细胞及抗肿瘤效应的影响。方法采用非程控降温方法冻存外周血单个核细胞,复苏后诱导为CIK细胞,与新鲜的未经冻存的外周血单个核细胞诱导的CIK细胞进行扩增能力、细胞纯度、细胞毒活性等比较。结果冻存后的外周血单个核细胞诱导生成的CIK细胞在扩增能力、细胞纯度、细胞毒活性等方面与新鲜细胞直接诱导生成的CIK细胞无显著性差异。结论冻存后的外周血单个核细胞可以诱导生成具有抗肿瘤活性的CIK细胞,研究结果对CIK细胞的应用具有重要意义。     

哮喘综合治疗对哮喘儿童Th1／Th2免疫状态的影响

目的本研究拟测定健康儿童及支气管哮喘儿童外周血单个核细胞（PBMC）分泌白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）、γ干扰素（IFN-γ）的水平以及哮喘综合治疗后的变化，以观察哮喘和健康儿童PBMC中Th1／Th2的平衡状态及哮喘综合治疗对其的影响。方法支气管哮喘患儿64例（哮喘组），哮喘组中又分未正规治疗组26例，综合治疗组38例。对照组为32例健康儿童，采静脉血3ml，分离PBMC，体外经植物血凝素（PHA—P）刺激，细胞培养48h，用ELISA法检测培养上清液中自细胞介素-4、白细胞介素-10和γ干扰素含量。结果（1）哮喘未正规治疗患儿外周血单个核细胞分泌细胞因子IL-4、IL-10水平高于正常对照组，差异有显著性（P〈0．01～0．05），而IFN-γ水平则较正常对照组低，两者差异有显著性（P〈0．05）。（2）综合治疗8～12周后，综合治疗组较未正规治疗组PBMC分泌IL-4、IL-10水平下降、IFN-γ水平升高，与未正规治疗组比较，差异有显著性（P〈0．05）。结论哮喘未正规治疗患儿PBMC中Th2类因子（IL-4、IL-10）强势表达。以吸入糖皮质激素为主的综合治疗可显著下调IL-4、IL-10水平，上调IFN-γ水平，从而减轻气道炎症，有效地防止哮喘的发作。     

肿瘤坏死因子-α干预对热性惊厥患儿外周血单个核细胞ICAM-1和LFA-1表达的影响

目的：探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 对热性惊厥(FS) 患儿外周血单个核细胞（PBMC）细胞间黏附分子-1(ICAM-1) 及配体淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1) 表达的影响。方法：16例FS患儿随机分为FS对照组和TNF-α干预组。TNF-α干预组采用1.0 ng/mL 的TNF-α进行干预。对照组16例,为年龄和性别相匹配的同期体检健康儿童。进行外周血PBMC培养。流式细胞仪检测PBMC表面ICAM-1 和 LFA-1的表达。结果：FS 对照组在体外培养的PBMC表面ICAM-1和LFA-1表达水平分别为(20±9)% 和(43±16)%,明显高于正常对照组［(14±7)%,(30±16)%］（P＜0.05）;TNF-α干预组的PBMC表面ICAM-1表达水平［(27±11)%］明显高于FS对照组(P＜0.05),LFA-1表达［（52±21）%］较FS对照组有增高趋势,但差异无统计学意义。结论：炎症介质TNF-α刺激可使FS患儿的LFA-1 和 ICAM-1表达上调。     

支气管哮喘患儿血清白细胞介素-5测定及意义

近１０ａ来随着分子免疫学的发展,细胞因子在哮喘发病机制中作用的研究十分活跃。许多细胞因子相互影响,共同参与哮喘的发病［１］。本文检测了２６例患儿急性发作期血清白细胞介素－５（ＩＬ－５）水平的变化,并探讨其意义。对象和方法一、对象　根据１９９３年第３届全国小儿呼吸道疾病学术会议制定的哮喘诊断标准［２］,选择哮喘急性发作患儿２６例,其中男１４例,女１２例,年龄２～１２ａ,平均６ａ４ｍｏ;据病情轻重分轻症组１９例,男１０例,女９例;中、重症７例,男４例,女３例。对照组２０例,男１２例,女８例,年龄３ａ…     

肾病综合征患儿外周血单个核细胞转化生长因子β的变化及其意义

目的探讨转化生长因子β(TGF β)在小儿原发性肾病综合征(INS)中的变化及其意义.方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)及原位逆转录多聚酶链反应(In Situ-RT PCR)方法,分别检测了30例健康儿童和35例原发性肾病综合征患儿活动期(35例)与缓解期(25例)外周血单个核细胞(PBMC)在内毒素(LPS)刺激下TGF β蛋白水平和TGF β mRNA表达的变化;同时观察激素治疗中PBMC的TGF β的变化.结果 (1) INS (单纯型和肾炎型)患儿活动期TGF β蛋白水平 (247±26)ng/L和TGF βmRNA表达(0.57±0.18)明显高于缓解期和对照组(P均<0.01);而缓解期TGF β蛋白水平(125±16)ng/L和TGF β mRNA表达(0.30±0.12)与对照组比较差异也有显著性 (P＜0.05).(2) INS活动期肾炎型与单纯型比较,TGF β蛋白水平[(275±26 )ng/L、(220±18)ng/L]差异有显著性(t=6.45,P＜0.01),mRNA表达(0.58±0.15、0.55±0.16)差异无显著性;肾炎型和单纯型与对照组比较差异均有显著性(P均<0.01).(3)激素敏感型治疗后TGF β蛋白水平和mRNA表达明显低于治疗前(P＜0.01);而激素耐药型则变化不明显(P＞0.05);除治疗前mRNA两型差异无显著性外,激素耐药型无论是治疗前还是治疗后都明显高于激素敏感型(P均<0.01).结论 TGF β在INS的发病机制中发挥着重要作用,测定PBMC中TGF β蛋白水平的变化及mRNA表达可作为观察病情活动状态的一个免疫学指标,具有一定的临床意义.     

单纯性肾病综合征患儿外周血单个核细胞病毒分子表达的研究

目的　探讨外周血单个核细胞 (PBMC)呼吸道病毒感染与糖皮质激素敏感型单纯性肾病综合征 (SSNS)的发生和反复的关系。方法　采用免疫组化、原位杂交、酶联免疫吸附和病毒分离技术 ,对青岛大学医学院附属医院儿科和滨州医学院附属医院 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 2年 12月收治的 36例初发组、15例反复组和 2 1例缓解组SSNS患儿检测了PBMC病毒分子表达和血清中病毒特异性IgM抗体水平。结果　初发组与反复组比较 ,PBMC中呼吸道合胞病毒抗原和肠道病毒基因表达的阳性率差异均无显著性 ;而初发组与缓解组和对照组比较及反复组与缓解组和对照组比较 ,PBMC中两种病毒感染的阳性率差异均有显著性 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。初发组与其他各组比较 ,不同病毒的特异性IgM抗体阳性率明显增高 ( P <0 0 5 ) ;而反复组与缓解组和对照组比较 ,多种病毒的特异性IgM抗体的阳性率差异均无显著性。 结论　初发和反复SSNS患儿的PBMC均易被病毒感染 ,糖皮质激素的应用并不影响细胞内病毒抗原和基因的表达 ,但可使病毒特异性IgM抗体的产生明显减少 ;PBMC内病毒抗原或基因表达阳性可做为SSNS有反复倾向的重要分子标志之一。