核酶与抗病毒基因治疗

1　引　言核酶(ribozyme),是1981年由Cech和Alfman在研究四膜虫mRNA前体的剪接中首先发现的。此二人由此获得1989年的诺贝尔奖。核酶是一类具有酶催化活性的RNA分子,可与相应的特异序列的RNA底物结合,具有切割功能[1]。核酶切割RNA的功能特点,是其用于阻断基因表达和抗病毒治疗的主要依据。目前,研究人员多以人工手段合成具有催化活性的RNA小片段(又称人工核酶),再与相应的底物RNA结合,可将底物RNA切割成特异性片段,从而控制多种病毒感染和用于癌症的治疗,具有潜在的基因治疗价值。2　核酶的结构及其作用机制核酶具有锤头状、发夹…     

核酶在基因治疗中的研究进展

8 0年代初 ,由美国科学家Cech和Altman发现了核酶 (Ribozyme) ,随着人类基因工程研究的深入 ,部分临床实验室工作者和基础科学研究人员开始注意到Ribozym在基因治疗中的应用潜力。近几年来 ,人们利用Ribozyme可以特异性地切割靶RNA序列的特点 ,设计适合的Ribozyme阻断特定基因的表达 ,相继对艾滋病、肿瘤、生殖系统疾病、肝炎、白血病、移植排斥反应等疾病进行了大量研究。试验结果表明Ribozyme作为基因治疗的一种方法有着广阔的应用前景和极大的临床实用价值。     

核酶抗白血病作用的研究进展

核酶是具有酶催化活性的RNA分子,可以特异性地结合和切割靶序列抑制基因表达,用于人类疾病诊断治疗方面研究。本文概述了核酶对白血病抑制作用的研究进展和应用前景。     

核酶技术在白血病基因治疗中作用的研究进展

核酶是具有酶催化活性的RNA分子,可以特异性地结合和切割靶序列,从而在分子水平和细胞水平真正实现对失控基因或有害基因表达的有效阻断,已大量用于人类疾病诊断治疗方面的研究。本文概述核酶技术在白血病基因治疗中作用的研究进展和应用前景。     

核酶技术在白血病基因治疗中作用的研究进展

核酶是具有酶催化活性的RNA分子，可以特异性地结合和切割靶序列，从而在分子水平和细胞水平真正实现对失控基因苛有害基因表达的有效阻断，已大量用于人类疾病诊断治疗方面的研究。本文概述核酶技术在白血病基因治疗中作用的研究进展和应用前景。     

核酶抗白血病作用的研究进展

核酶是具有有酶催化活性的ＲＮＡ分子，可以特异地结合和切割靶序列抑制基因表达，用于人类疾病诊断治疗方面研究。本文概述了核酶对白血病抑制作用的研究进展和应用前景。     

锤头状核酶在白血病基因治疗中的应用

核酶 (ｒｉｂｏｚｙｍｅ)是一类具有生物催化功能的ＲＮＡ ,1 981年Ｃｅｃｈ等[1]在研究四膜虫时发现其大核ｒＲＮＡ的前体具有自我催化和剪切去除内含子的能力 ,从而改变了长期以来“酶是蛋白质”的传统概念。核酶最主要的功能是可以序列特异性的方式切割ＲＮＡ。利用这种特性 ,人们可以人工设计合成具有催化活性的核酶 ,针对特定的ＲＮＡ序列进行剪切 ,使其失活从而抑制有害基因的表达。已经发现的核酶包括Ｉ类内含子、Ⅱ类内含子、ＲＮＡａｓｅＰ、锤头状核酶、发夹状核酶和斧头状核酶。其中对锤头状核酶的研究最为深入 ,其原因是锤头状…     

锤头状核酶在抗白血病基因治疗中的作用

锤头状核酶是一类具有酶活性的RNA,可以序列特异性地定点切割靶RNA,从而阻断有害基因的表达.在基因调控、抗病毒复制、抑制癌基因方面有较大进展.本文主要阐述锤头状核酶在抗白血病基因治疗中的作用.     

锤头状核酶在抗白血病基因治疗中的作用

锤头状核酶是一类具有酶活性的RNA，可以序列特异性地定点切割靶RNA，从而阻断有害基因的表达。在基因调控、抗病毒复制、抑制癌基因方面有较大进展。本文主要阐述锤头状核酶在抗白血病基因治疗中的作用。     

肿瘤分子分型研究及其对检验医学的启迪

肿瘤分子分型是从系统生物学角度,采用现代新型高通量分子分析技术,在DNA、RNA或蛋白质水平根据分子遗传学或分子生物学改变特征对肿瘤进行分类分型.分子分型可对组织形态学诊断进行积极的补充.肿瘤分子分型与个体化诊治关系密切,体现了目前肿瘤基础和临床研究的最新成果,具有重要的临床意义.分子分型的最终目标是明确个体肿瘤的分子特征,针对该特征选择最适当的治疗方案或靶向药物,真正使患者最大程度获益.     

长链非编码RNASNHG9在不同肿瘤中的最新研究进展

长链非编码RNA（Inc RNA）是一类不具有蛋白编码阅读框、不能被翻译成特定蛋白发挥作用的RNA 分子。研究发现，lncRNA 具有恒定的组织特异性，并且在不同肿瘤的恶性生物学特征中发挥着重要作用。随着研究的不断深入，小核仁RNA 管家基因9（RNA SNHG9）已被证实能够通过不同的作用机制在诸如非小细胞肺癌、胶质母细胞瘤、胰腺癌、卵巢癌以及前列腺癌中发挥作用，或者作为良好的生物标志物为相关肿瘤的临床诊疗提供可靠依据，因此具有很高的研究价值和前景。该文对国内外SNHG9 在不同肿瘤中的最新研究现状进行综述。     

靶向C区基因的M1GS RNA核酶胞内抗乙型肝炎病毒的实验研究

目的探讨靶向作用于乙型肝炎病毒C区基因的M1GS RNA核酶胞内抗乙型肝炎病毒的作用。方法设计并应用PCR技术合成M1RNA核酶，应用pEGFP-C1载体构建M1GSRNA核酶的真核表达质粒，应用脂质体Lipofectamine TM 2000转染HepG2．2．15细胞，以ELISA法检测细胞培养液中病毒抗原，以反转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测细胞内病毒mRNA，以荧光定量PCR法检测分泌入培养液的HBVDNA含量，用MTT法检测核酶对细胞增殖活性的影响。结果质粒载体表达的M1GS RNA核酶能明显抑制细胞培养液中HBeAg的表达及病毒mRNA的表达，抑制率分别为31．58％，32．5％。但M1GS RNA核酶对培养液中的HBV DNA含量无明显影响，亦不影响HepG2．2．15细胞的增殖活性。结论M1GS RNA核酶能特异性抑制HepG2．2．15细胞内HBV C区基因表达，是一种很有潜力的抗HBV基因治疗方法。     

肿瘤循环RNA的研究进展

外周血循环RNA具有和肿瘤相一致的分子变化,它可能是以RNA-蛋白质复合体的形式存在,直径为0.2μm的微孔滤器可将其浓缩,利用分子生物学技术（RT-PCR）定量检测血清/血浆中RNA分子,可有助于肿瘤的早期诊断、鉴别诊断、有效观察及预后监测.     

端粒酶与胃癌关系的研究进展

端粒酶是以自身的RNA为模板合成端粒重复序列的反转录酶,其活性的变化与细胞衰老、永生化及癌变密切相关,在大多数恶性肿瘤中端粒酶活性增高。研究表明,端粒酶在胃癌的发生中具有重要作用,cyclinD1及bcl-2的异常高表达及HP感染等因素可能是端粒酶激活的重要途径。因此,以端粒酶为靶点的反转录酶抑制剂、反义寡聚核苷酸及核酶在肿瘤治疗中已显示出良好前景。     

RNA干扰与其他阻断基因表达的基因治疗技术的比较

抑制或阻断基因表达的基因治疗技术主要有三种：反义寡核苷酸、核酶和RNA干扰技术。在过去20年左右的时间里，反义核酸及核酶技术在抑制或阻断基因表达方面扮演了重要角色，然而它们封闭蛋白质表达的效果仍难于达到治疗疾病的水平。RNA干扰作为一种基因治疗技术的研究虽然才刚刚开始，但与上述技术相比具有更大的优势，相信随着该项技术的稳定和发展，未来将有越来越多的疾病和疾病相关基因被列入RNA干扰基因治疗的行列。     

microRNAs对应激反应的调节及其在肿瘤研究中的意义

肿瘤发生、发展、治疗后反应中普遍存在着应激现象,研究肿瘤细胞的特殊应激反应及其分子机制,无疑对肿瘤生物治疗具有重要意义。近期大量研究表明,microRNA在机体应激反应中具有重要调节作用,这些特异性的调节反应包括特定microRNA的表达水平的改变;miRNA/Argonaute复合体在不同亚细胞小室的重新定位和功能转换;通过招募特定RNA结合蛋白而反向活化靶基因表达等等。这些microRNA相关应激反应对肿瘤细胞在极端环境下的功能快速调节,适应和存活具有重要意义。因此,本文重点论述了应激后特定microRNA群的功能调节机制,并论述了其在肿瘤学研究中的意义,以期加深对肿瘤发展机制的理解,并为肿瘤治疗提供新的研究方向。     

microRNA与肺癌相关性研究的新进展

肺癌是当今世界上对人类健康与生命危害最大的恶性肿瘤之一,肺癌的发生、发展是1个多基因参与、多步骤、多阶段的复杂过程,其相关分子致病机制的研究具有重要临床意义[1]。microRNA(mi RNA)是一类由18~23个核苷酸构成的单链非编码RNA分子,mi RNA通过调控基因表达广泛参与肿瘤的发生、浸润和转移等一系列过程。本文就其与肺癌相关     

切割瘢痕组织的TIMP－1核酶计算机辅助设计及体外表达载体的构建

目的设计能特异性切割人类瘢痕组织中TIMP－1mRNA的核酶,为解决增生性瘢痕问题寻找新的基因治疗的途径。方法根据Symons的"锤头结构",以人TIMP－1的mRNA为靶RNA,用计算机对其可能成为核酶切割位点的部位进行分析以寻找最佳切点;对底物、核酶及嵌入U6snRNA后核酶的二级结构进行预测;依据分子生物学的克隆技术构建其体外高效表达载体。结果针对第123、299和353位点设计了3个核酶,均能与底物切点两翼碱基结合形成锤头结构,嵌入U6snRNA后,核酶与底物的结合能量变化不大。成功构建了核酶的高效表达载体。结论计算机辅助设计是研究核酶过程中不可或缺的重要步骤;核酶嵌入U6snRNA可能是解决目前核酶研究中存在问题的较好途径;TIMP－1mRNA上第123、299、353位可能是核酶的最佳切割位点。     

肿瘤循环RNA的研究进展

外周血循环RNA具有和肿瘤相一致的分子变化,它可能是以RNA-蛋白质复合体的形式存在,直径为0.2μm的微孔滤器可将其浓缩,利用分子生物学技术(RT-PCR)定量检测血清/血浆中RNA分子,可有助于肿瘤的早期诊断、鉴别诊断、有效观察及预后监测。     

长链非编码RNA在肿瘤发生及发展中的作用机制

长链非编码RNA(lncRNA)是一类转录本长度＞200个核苷酸的非编码RNA(ncRNA),其在肿瘤的发生、发展中发挥重要作用.IncRNA具有多种生物学功能,可以通过诱饵分子、支架分子和向导分子等形式,在表观遗传学水平、转录水平及转录后水平,调控蛋白质编码基因的表达.lncRNA与肿瘤细胞生长和凋亡、侵袭和转移等生物学行为密切相关.进一步阐明IncRNA在肿瘤发生、发展过程中的作用机制,有望为研究者开发肿瘤诊断和治疗的新方法提供思路.笔者拟就lncRNA调控基因表达的作用机制,及其在肿瘤诊断及治疗中的作用进行综述.