赤芍总苷对人黑色素瘤A375细胞迁移及侵袭活性的影响

目的观察赤芍总苷(total paeonyglucosides,TPG)对人黑色素瘤A375细胞迁移和侵袭能力的影响,探讨TPG抑制黑色素瘤细胞迁移和侵袭的相关机制。方法体外培养黑色素瘤细胞,分别加入5、15、20、25 mg/LTPG,细胞划痕实验测定迁移力;Transwell小室侵袭实验测定侵袭活性。RT-PCR和Western bolt方法检测黑色素瘤细胞MMP-2、MMP-9和TIMP-2 mRNA和蛋白的表达。结果 TPG能显著抑制黑色素瘤A375细胞的迁移和侵袭,与对照组比较,TPG组细胞MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达明显下降,TIMP-2 mRNA和蛋白表达显著上升(P<0.01)。结论 TPG可通过下调MMP-2、MMP-9,上调TIMP-2,调节MMP-TIMP平衡,发挥抑制黑色素瘤细胞迁移和侵袭的作用。     

赤芍总苷抑制人黑色素瘤A375细胞株增殖作用的研究

目的观察赤芍总苷(TPG)对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响及其作用机制。方法黑色素瘤A375细胞,分别加入12.5、25、50、100、200 mg/L TPG,对照组加等量0.9%氯化钠注射液,孵育48 h。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法测定细胞生长抑制率,用RT-PCR、Western blot法分别检测增殖细胞核抗原(PCNA)、P21、P27、P53 mRNA及其蛋白的表达水平。结果不同浓度(12.5、25、50、100、200 mg/L)TPG刺激后,对黑色素瘤细胞均具有明显的增殖抑制作用。100 mg/L TPG作用黑色素瘤细胞48 h,PCNA mRNA及其蛋白表达水平较对照组显著下降,而P21、P27、P53的mRNA及其蛋白表达水平较对照组显著上升,差异有统计学意义(P<0.01)。结论TPG抑制黑色素瘤A375细胞增殖,与下调PCNA表达及上调P21、P27、P53表达有关。     

赤芍总苷诱导扁平苔藓中T细胞免疫和凋亡机制的研究

目的：观察扁平苔藓(OLP)患者赤芍总苷(TPG)治疗前后 T 细胞免疫表达水平的变化,探讨影响细胞凋亡的机制。方法应用 TPG 局部治疗20例 OLP 患者,观察其治疗后的临床效果;且在治疗前后,较系统地对 TPG 诱导细胞凋亡情况进行比较;探讨 OLP 中的细胞凋亡情况及 CD4+、CD8+ T 细胞和 CD4+/CD8+比例的变化,分析 TPG 诱导 OLP 患者中的 T 细胞免疫与细胞凋亡的关系。结果TPG 治疗扁平苔藓临床疗效明显,治疗后患者 OLP 病变组织处网纹面积减小,糜烂面大小减少,患者疼痛指数明显降低。治疗后 CD4+和 CD8+表达较治疗前显著下降。结论TPG 的治疗可能是通过固有层中诱导炎性T 细胞的凋亡,T 细胞免疫受到调节,从而减轻 OLP 炎症的发生和发展,起到治疗 OLP 的作用。     

赤芍总苷对人黑色素瘤细胞A375血管生成因子VEGF和Ang-2的影响

目的探讨赤芍总苷(TPG)对人黑色素瘤A375细胞血管内皮生长因子(VEGF)和促血管生成素-2(Ang-2)表达的影响。方法体外培养人黑色素瘤A375细胞,分别加入12.5、25、50、100、200mg/LTPG,对照组加入等量生理盐水,孵育24h、48h后,MTT方法测定生长抑制率;RT-PCR、Western blot分别测定TPG处理48h后VEGF和Ang-2 mRNA和蛋白的表达。结果 MTT结果显示TPG对黑色素瘤细胞增殖有显著抑制作用;RT-PCR、Western blot结果显示,TPG可显著抑制人黑色素瘤细胞VEGF、Ang-2 mRNA水平及蛋白水平的表达。结论 TPG具有显著的抗黑色素瘤瘤血管生成的作用,其机制可能与下调VEGF、Ang-2的表达有关。     

赤芍总苷的生产工艺条件研究

赤芍以70％乙醇回流提取，减压浓缩，过大孔吸附树脂柱，先用水洗，再用20％乙醇洗脱，收集醇洗脱液，减压浓缩得赤芍总苷，收率为5．0％，其中芍药苷的含量占本品的75％以上。     

赤芍总苷对荷瘤小鼠抗肿瘤作用的免疫机理研究

在临床上常用赤芍治疗肿瘤及血瘀证，但尚无免疫药理学研究报道，本文选用荷瘤小鼠作为研究对象，观察了赤芍总苷(TGC)对CD4、CDs分子的表达，探讨TGC的抗肿瘤效应的免疫学机理，以期获得TGC对免疫系统调节作用的全面认识，为TGC的临床应用提供理论依据。     

赤芍总苷对大鼠血瘀证模型的影响

目的 研究赤芍总苷对大鼠血瘀证及大鼠动静脉旁路血栓质量及抑制率的影响.方法 采用冰水刺激和注射肾上腺素的方法,造成大鼠血瘀证模型,颈总动脉取血测定各项血液指标;采用造成大鼠动静脉旁路血栓的方法,测定血栓的湿、干质量.结果 赤芍总苷可显著降低血小板聚集和红细胞聚集,增强红细胞变形能力,延长PT、APTT时间,降低全血黏度(低切),减少血栓的生成.结论 赤芍总苷具有活血化瘀作用.     

赤芍总苷对环磷酰胺免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的 通过观察赤芍总苷对化疗药环磷酰胺(CTX)所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响,探讨赤芍总苷促进免疫功能的作用.方法 除正常组小鼠外,所有小鼠经腹腔注射CTX(100mg/kg),隔天注射1次,第2天开始给予实验组小鼠灌胃不同剂量的赤芍总苷[120、240mg/(kg·d)],阳性对照组给予香菇多糖,模型组给予等量生理盐水,连续干预10d.所有小鼠均于末次给药12h后处死,测定小鼠体重,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,溶血空斑实验,外周血淋巴细胞转化实验,流式细胞仪检测淋巴细胞亚群.结果 赤芍总苷增加免疫抑制小鼠的体重,提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数,B细胞产生抗体能力和T淋巴细胞增值能力均增强,调节CD4+/CD8+细胞的比例.结论 赤芍总苷具有调节免疫功能,赤芍总苷能促进小鼠免疫功能,具有逆转化疗后小鼠免疫抑制状态的作用,调节免疫系统的失衡.     

赤芍总苷退黄降酶的作用及机制研究

目的 探讨赤芍总苷退黄降酶的作用及机制。方法 ICR小鼠随机分成正常对照组,模型对照组,赤芍总苷低、中、高剂量组和苯巴比妥钠组;灌胃α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导小鼠黄疸模型,分别在实验第6天和第12天观察各组药物对小鼠总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、胆汁酸(TBA)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)等血清学指标及对小鼠胆汁分泌量和肝组织中尿苷二磷酸葡萄糖酸转移酶(UDPG-T)活性的影响,实验第6天观察各组药物对戊巴比妥钠睡眠时间的影响。结果 与模型对照组比较,除第6天赤芍总苷中剂量组ALT、第12天低剂量组AST无显著差异外,赤芍总苷3个剂量组血清学指标均明显下降(P<0.05或P<0.01);赤芍总苷中、高剂量组胆汁分泌量显著增加(P<0.01或P<0.05);3个剂量组和苯巴比妥钠组睡眠时间均明显缩短(P<0.01);赤芍总苷组肝组织UDPG-T活性明显提高(P<0.05)。结论 赤芍总苷具有退黄降酶作用,其作用机制可能与增加胆汁分泌量、提高肝药酶及UDPG-T活性有关。     

赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤细胞凋亡的影响

目的探讨赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤生长及肿瘤细胞凋亡的影响及其机制。方法60只健康昆明小鼠,随机分5组,分别为模型组,环磷酰胺(100mg/kg)组,赤芍总苷(240、120mg/kg)组,环磷酰胺(100mg/kg) 赤芍总苷(240mg/kg)组。复制小鼠HepA肝癌皮下移植模型后,第2天ig给药,连续给药7d,第8天处死,取肿瘤组织,计算抑瘤率,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率和分析细胞周期,以及免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果赤芍总苷高、低剂量明显抑制HepA肝癌小鼠肿瘤的生长;肿瘤细胞凋亡指数增加;抑制肿瘤细胞G0/G1期比例,向S期细胞转化,凋亡率增高;下调肿瘤细胞中Bcl-2蛋白的表达,同时明显提高肿瘤细胞中Bax蛋白的表达。结论赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤生长有明显抑制作用,并诱导肿瘤细胞凋亡,其主要机制与调节Bcl-2和Bax蛋白表达有关。     

快中子治疗恶性黑色素瘤

目的：观察快中子治疗恶性黑色素瘤的疗效。方法：复习１９９１年１２月至１９９８年１月用快中子治疗的２１例恶赤色素瘤。结果：２１例患者中存活１年以上者１１例,存活３年以上者７例,２例存活５年以上。结论：快中子是治疗恶性黑色素瘤的一种有效的方法。     

肢端恶性黑素瘤局部切除疗效观察

目的 观察21例肢端恶性黑素瘤(acral malignant melanoma,AMM)局部切除后疗效.方法 7例切除后直接缝合;13例较大损害,切除后植皮,切除范围距病灶0.5～3 cm;1例甲周损害截趾.结果 病理肢端原位黑素瘤8例全部存活;侵袭性黑素瘤13例,存活11例,死亡2例,5～11年存活率84.6%.结论 肢端恶性黑素瘤(AMM)依据损害形态,初步确定是原位或侵袭性,再确定切除范围,侵袭性恶性黑素瘤(MM)术后5～11年存活率为84.6%;原位恶性黑素瘤术后存活率100%.     

白藜芦醇对恶性黑色素瘤生长抑制作用的体外及体内研究

目的:研究白藜芦醇在体外和体内对恶性黑色素瘤的抗肿瘤效果.方法:采用MTT法测定白藜芦醇对小鼠B16及人A375细胞的增殖抑制率;用Western blot方法检测白藜芦醇对B16细胞中p-Akt蛋白表达的影响;建立B16皮下种植瘤小鼠模型,观察不同剂量的白藜芦醇对小鼠皮下瘤的生长抑制作用.结果:体外实验发现在白藜芦醇对B16及A375细胞均显示了良好的浓度依赖性;Western blot显示了不M浓度的白藜芦醇有效的抑制了p-Akt蛋白的表达,提示其抗肿瘤机制可能与此有关;体内实验证实不同浓度的白藜芦醇对恶性黑色素瘤的生长产生了明显的抑制作用.结论:体外和体内实验证实白藜芦醇有效的抑制了恶性黑色素瘤的生长,并且发现其抗肿瘤机制可能通过抑制p-Akt蛋白的表达来实现.这为白藜芦醇在恶性黑色素瘤的临床治疗的可能应用提供了实验基础,也为我国中草药的抗肿瘤效果的开发提供了具体思路.     

Selective Expression of Progesterone Receptor in Malignant Melanoma Was Inversely Correlated with PCNA

To investigate the role of progesterone receptor （PR） expression in malignant melanoma （MM）, PR and proliferative cell nuclear antigen （PCNA） expression were immunohistochemistrically evaluated in a series of 35 specimens of MM, and the correlation between the immunohistochemistrical findings and clinicopathological data was also analyzed. PR expression was detected in 25.7% （9/35） of the patients with MM. No PR expression was observed in nevi. PR expression was inversely correlated with PCNA expression （r=-0.353, P=-0.026）. PR expression was slightly increased in females, subjects aged under 55 y, those with ulceration, non-acral subtype and diagnosis delay longer than 1 y, but the difference was not statistically significant. Selective expression of progesterone receptor in malignant melanoma might be correlated with inhibited tumor growth.     

Up-regulation of Human Leukocyte Antigen G Expression in Primary Cutaneous Malignant Melanoma Associated with Host-vs-tumor Immune Response

Human leukocyte antigen G （HLA-G） is one of the molecules implicated in immunotolerance. To investigate the role of HLA-G in primary cutaneous malignant melanoma （CMM）, a series of 47 skin melanocytic lesions were immunohistochemically evaluated. The correlation between HLA-G expression and CMM clinicohistopahtological data and Bcl-2 expression was also analyzed. HLA-G expression was detected in a variety of cell types. No significant difference in HLA-G expression was observed between malignant and non-malignant melanocytic lesions. HLA-G expression was significantly correlated with the inflammatory infiltration and Bcl-2 expression, whereas no significant correlation with ulceration, tumor thickness, clinical stage, histopathological subtypes were observed. HLA-G expression may be the result of host immune reaction in tumor microenvironment rather than a malignant feature of CMM.     

Genistein抑制Livin基因对恶性黑色素瘤LiBr细胞凋亡、周期及增殖的影响

目的观察genistein抑制Livin基因对恶性黑色素瘤LiBr细胞凋亡、周期及增殖的影响。方法应用RT-PCR检测不同浓度genistein作用LiBr细胞48 h后Livin的表达变化;取最适浓度的genistein作用LiBr细胞后应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响,应用PI单染流式细胞术分析对细胞周期的改变,应用Western blot检测其对凋亡效应蛋白Ccaspase-3表达的影响及应用MTT比色法检测其对细胞增殖的作用。结果 Genistein可增加LiBr细胞早、晚期凋亡率[分别为(27.87±5.38)%和(11.87±3.86)%],诱导LiBr细胞凋亡(P<0.01);引起细胞G0/G1期阻滞[G0/G1=(72.11±5.89)%、S=(14.53±3.47)%、G2/M=(12.36±2.64)%];下调caspase-3蛋白表达及抑制细胞增殖(P<0.01)。结论 Genistein可诱导LiBr细胞凋亡、使细胞增殖周期进展受阻、抑制细胞增殖。     

恶性黑色素瘤免疫组化观察——附12例报告

目的： 探讨波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ） 、Ｓ １００ 、ＨＭＢ４５ 、细胞角蛋白（Ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ） 的表达在恶性黑色素瘤（ 下称恶黑） 鉴别诊断中的意义。方法：１２ 例恶黑取石蜡切片各一张,用免疫组化链霉素 生物素（ＬＳＡＢ） 法,分别作Ｖｉ ｍｅｎｔｉｎ 、ＨＭＢ４５ 、Ｓ １００ 、Ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ 染色。结果： 每例Ｖｉｍｅｎｔｉｎ 、Ｓ １００ 、ＨＭＢ４５ 标记均呈阳性表达。Ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ 表达情况为,皮肤原发恶黑９ 例中有４ 例阳性,阳性者中２ 例为无色素性恶黑;３ 例淋巴结内转移性恶黑１ 例阳性。结论： Ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ 阳性不能排除恶黑的诊断     

b-FGF在恶性黑色素瘤中的表达及其与血管微密度的关系

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)在恶性黑色素瘤中的表达及其生物学意义,并探讨其与肿瘤血管形成及淋巴结转移的关系.方法 用免疫组化(S-P法)染色技术对42例黑色素瘤石蜡组织标本的b-FGF及肿瘤内微血管密度(MVD)进行检测和分析.结果 b-FGF在恶性黑色素瘤中高表达与TNM分期、MVD及淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 b-FGF在促进肿瘤血管形成和转移方面可能起作用,b-FGF的检测对于判断黑色素瘤转移和预后及治疗具有临床应用价值.