新型雌激素化合物17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯抗肿瘤活性的初步研究

目的对新型雌激素化合物17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯进行体外和体内的抗肿瘤活性实验研究。方法采用MTT法进行药物体外对肺腺癌细胞A549和人肝癌细胞Bel-7402抗肿瘤实验,测定IC50;体内对小鼠肺腺癌LA795抑制作用采用常规抗肿瘤实验方法进行,腹腔给药观察抑瘤率,胸腺及脾重量、指数的变化。结果17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯体外肺腺癌细胞A549和人肝癌细胞Bel-7402的IC50分别为12.28μg·mL-1、17.79μg·mL-1;体内对小鼠肺腺癌LA795实体瘤最佳抑制率达60.0%,各给药组与空白对照组比较有非常显著性差异(P<0.01);脏器重量及指数与空白对照组比较无显著差异,而与阳性对照药环磷酰胺(CY)组存在显著性差异(P<0.01)。结论17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯体外和体内对实验肿瘤均有明显的抗肿瘤活性,而且在给药剂量下对实验动物未表现出任何毒性反应,值得深入研究。     

17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯抑瘤活性及与γ-射线协同增效作用研究

目的:研究新型雌激素17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯(DHEA)的抑瘤活性。方法:对DHEA进行肺腺癌细胞系A549、肝癌细胞系Bel-7402的体外抑瘤试验,计算半数抑制浓度(IC50);在小鼠体内进行宫颈癌细胞U14抑瘤实验及与γ-射线协同作用的肉瘤细胞S180的抑瘤增效实验,计算抑瘤率。结果:体外试验中DHEA对A549和Bel-7402的IC50分别为12.28、17.79μg·mL-1;体内实验中对U14抑瘤率最高达64.3%,对S180抑瘤率合用及DHEA单用的抑瘤率均高于50%,且合用组更高。结论:DHEA具有体内、外抑瘤活性,且与γ-射线合用具有协同增效作用。     

17-α雌二醇3-醚化合物的合成及初步生理活性研究

设计合成了4个17—α雌二醇3—醚化合物。4个化合物均末见文献报道，其结构经核磁共振谱、元素分析确证。其中17-α雌二醇3—β二乙胺基乙基醚经骨组织培养试验，初步表明具有促进骨形成作用。     

雌甾C_(17)位引入α-正丁基的研究——17α-正丁基雌二醇-3-环戊醚的合成

甾体雌激素类衍生物的活性和化学结构有密切的关系。为了探索雌活性的强弱和口服吸收的效果,拟合成17α-正丁基-雌二醇-3-珠戊醚(Ⅲ)。开始用丁基溴化镁在乙醚中与雌酚酮-3-环戊醚(Ⅰ)进行格氏加成反应,但所得产物经红外光谱、质谱和核磁共振光谱证明为     

17α-乙炔雌二醇对斑马鱼胚胎发育的致畸作用及其基因靶位

随着炔雌二醇临床适用范围的扩大和畜牧渔业中的滥用所导致的环境污染,使得建立准确、简便、快速的体内检测方法和开展对雌二醇的胚胎发育毒理研究愈显重要。本文以17α-乙炔雌二醇(17α-ethynylestradiol,EE2)为代表化合物,利用模式动物斑马鱼研究了EE2的致畸性、靶组织和靶基因及其对胚胎心律的影响。结果表明,EE2的半数致畸浓度(TC50)为0.8μg.mL-1,半数致死浓度(LD50)为3.3μg.mL-1;其致畸靶位涉及脑和眼、心、肌肉、骨骼、色素和内脏。EE2可导致胚胎心率异常。胚胎对EE2敏感期主要在器官形成期之前,且具有时间积累效应。RT-PCR结果显示,EE2可抑制头部发育基因如boz,促进躯干和尾部发育的基因如ntl、spt和成形素shh基因,干扰多功能的Nodal信号基因cyc、sqt和oep。本研究利用斑马鱼建立了快速、有效体内检测炔雌二醇类化合物胚胎毒性的方法。     

雌甾C17位引入α-正丁基的研究——17α-正丁基雌二醇-3-环戊醚的合成

N-Butyl lithium has been proved to be a convenient reagent for introducing nbutyl group onto C₁₇-position of estrone-3-cyclopentyl ether. Using conventional Grignard's organomagnesium reagent we obtained 3-O-cyclopentyl-3,17β-estradiol instead of the normal adduct.     

17β-雌二醇后处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的研究

目的：探讨17β-雌二醇（17β-estradiol,E2）后处理对缺血再灌注损伤离体大鼠心肌的影响。方法：采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型,随机分3组,其中后处理组（Pos组）在复灌时给予3次30s短暂开放／30s阻断,雌激素组（E2组）灌注液中含有17B-雌二醇。定时收集冠脉流出液测定冠脉流量（CF）;检测缺血前及复灌后冠脉流出液中LDH、SOD、CK的含量;测定缺血区心肌梗死面积,电镜下观察心肌超微结构变化。结果：复灌后各时点CF值在Pos,E2组较Isc组恢复好（P〈0．05）,复灌30min后Pos,E2组中CK、LDH漏出量较少,SOD含量较高伙0．05）,Pos,E2组心肌梗死面积减小（P〈0．05）。结论：机械后处理、17β-雌二醇后处理,对离体大鼠心肌有保护作用．雌激素抗氧化功能是后处理的重要机制之一。     

17-β雌二醇对SKOV3细胞HOXA10基因表达及甲基化的影响

目的 探讨17-β雌二醇(17-β E2)对人卵巢癌细胞株SKOV3中HOXA10基因表达及基因启动子区CpG岛DNA甲基化的影响.方法 体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3,按实验目的分别加入1×10-6、1×10-7、1×10-8 mol/L的17-β E2培养48 h后,收集细胞,分别采用实时荧光定量RT-PCR反应和Western blot检测HOXA10 mRNA和蛋白表达;提取SKOV3细胞基因组DNA,纯化、修饰后用甲基化特异性聚合酶链反应检测HOXA10基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态.结果 与对照组相比,不同浓度的17-βE2可显著提高SKOV3细胞中HOXA10基因mRNA和蛋白表达(P＜0.05).同时17-β E2作用后HOXA10基因呈部分甲基化状态.结论 17-β 2可以逆转SKOV3细胞中HOXA10基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态,使HOXA10基因的表达上调.     

芪术口服液对环磷酰胺所致小鼠骨髓造血功能损伤的保护作用

目的:观察芪术口服液对环磷酰胺所致小鼠骨髓造血功能损伤的保护作用.方法:对小鼠腹腔注射100 mg/kg环磷酰胺后,观察芪术口服液对小鼠外周血象、骨髓有核细胞和胸腺、脾脏指数的影响.结果:芪术口服液能升高受损小鼠白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白和骨髓有核细胞数量,并能使小鼠胸腺、脾脏指数升高.结论:芪术口服液对环磷酰胺引起的小鼠骨髓造血功能损伤有一定的保护作用.     

海牡方对环磷酰胺所致小鼠造血功能损伤的保护作用

目的 研究中药复方制剂海牡方对小鼠造血功能损伤的保护作用。方法 单次尾静脉给予大剂量(250 mg/kg)的环磷酰胺建立小鼠白细胞减少症模型;灌胃给予不同剂量的海牡方受试物,观察对小鼠血细胞、骨髓细胞DNA含量等的影响。结果 海牡方可以促进模型小鼠的白细胞、红细胞及血小板计数水平的恢复(p<0.01),缓解骨髓细胞DNA含量的降低。结论 海牡方能促进环磷酰胺模型小鼠造血机能的恢复,对环磷酰胺所致骨髓损伤具有一定的保护作用。     

α-ZAL、GST和17β E_2对去势食饵性大鼠HHCY所致血管内皮损伤的保护作用

目的复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用。方法实验分为6组:①正常对照组(Control);②假手术+2.5%蛋氨酸组(Sham);③切除卵巢+2.5%蛋氨酸组(OVX);④OVX+2.5%蛋氨酸+α-ZAL组(OVX+α-ZAL);⑤OVX+2.5%蛋氨酸+GST组(OVX+GST);⑥OVX+2.5%蛋氨酸+17βE2组(OVX+17βE2)。α-ZAL、GST和17βE2分别隔日肌注250μg/0.25ml,共12wk。双抗夹心法测定HCY和ET-1浓度,RT-PCR法检测主动脉组织ET-1 mRNA表达;主动脉作病理制片。结果血浆HCY含量(μmol.L-1):Sham与Con组比较明显升高,P<0.05;OVX组与Sham组相比明显升高,P<0.05;而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.01。血浆ET-1(ng.L-1)含量:OVX组与Sham组相比较ET-1升高,P<0.01,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.01。主动脉组织ET-1 mRNA的表达:OVX组与Sham组相比较升高,P<0.05,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.05,其它各组ET-1 mRNA表达均无变化。病理:OVX组血管内皮明显损伤,Sham组、α-ZAL、GST和17βE2组血管内膜大致正常,内皮细胞基本完整,未见明显的炎性细胞浸润。结论α-ZAL、GST和17βE2均能通过降低HCY含量和减少ET-1分泌、表达而保护血管内皮,三者的内皮保护作用相似。     

17α-乙炔雌二醇对斑马鱼胚胎发育的致畸作用及其基因靶位

随着炔雌二醇临床适用范围的扩大和畜牧渔业中的滥用所导致的环境污染, 使得建立准确、简便、快速的体内检测方法和开展对雌二醇的胚胎发育毒理研究愈显重要。本文以17α-乙炔雌二醇 (17α-ethynylestradiol, EE2) 为代表化合物, 利用模式动物斑马鱼研究了EE2的致畸性、靶组织和靶基因及其对胚胎心律的影响。结果表明, EE2的半数致畸浓度 (TC₅₀) 为0.8 μg·mL⁻¹, 半数致死浓度 (LD₅₀) 为3.3 μg·mL⁻¹; 其致畸靶位涉及脑和眼、心、肌肉、骨骼、色素和内脏。EE2可导致胚胎心率异常。胚胎对EE2敏感期主要在器官形成期之前, 且具有时间积累效应。RT-PCR结果显示, EE2可抑制头部发育基因如boz, 促进躯干和尾部发育的基因如ntl、spt和成形素shh基因, 干扰多功能的Nodal信号基因cyc、sqt和oep。本研究利用斑马鱼建立了快速、有效体内检测炔雌二醇类化合物胚胎毒性的方法。     

灌胃α-硫辛酸对豚鼠噪声性听力损伤的防护作用研究

目的 观察自由基清除剂α-硫辛酸对噪声性听力损伤的保护作用。方法 24只体重为250~300 g的雄性纯白色豚鼠,按体重随机分为α-硫辛酸低、中、高剂量组(n=3×6)、噪声对照组(n=6)。各组动物暴露倍频程噪声(4 kHz中心频率)115 dB SPL(sound pressure level,声压级) 4 h。α-硫辛酸组动物暴露前2 d、暴露当天至暴露后7 d连续灌胃给予α-硫辛酸30 mg/(kg·d)(低剂量组)、60 mg/(kg·d)(中剂量组)、120 mg/(kg·d)(高剂量组);对照组动物相应时间灌胃给予等量的生理盐水。暴露后不同时间(3、7、10 d)测试各组动物在不同频率(8、16、24、32 kHz)下的听觉脑干反应(auditory brainstem response,ABR)值,组织学检查内外毛细胞缺失和损伤程度,以测试时的听阈值与暴露前听阈差值(听阈偏移)反映听力受损情况。结果 暴露后3 d,低、中、高剂量组在8、16 kHz频率下,与噪声对照组相比较具有显著性差异;低、高剂量组在24、32 kHz频率下与噪声对照组相比较具有显著性差异;暴露后7 d,中、高剂量组在8、16、24 kHz频率下与噪声对照组相比较具有显著性差异;低、高剂量组在32 kHz频率下与噪声对照组相比较具有显著性差异;暴露后10 d,高剂量组与噪声对照组比较具有显著性差异。组织学检查,α-硫辛酸组动物无明显内外毛细胞缺失,毛细胞形态结构破坏较轻。对照组动物内耳外毛细胞显示水肿、空泡变性等病变。结论 高、中、低剂量的α-硫辛酸对噪声性听力损伤均有一定的预防作用;高剂量的α-硫辛酸对噪声性听力损伤具有很好的预防和治疗作用。     

17β-雌二醇对抗癫痫药物造成的未成熟脑损伤的保护作用

目的:探讨17β-雌二醇对抗癫痫药物短期应用导致的未成熟脑受体表达降低的保护作用。方法:3 d、7 d、14 d、21 d SD大鼠各7窝,共28窝,随机分为对照组、抗癫痫药物组及雌二醇组,抗癫痫药物组又分为苯巴比妥组、托吡酯组以及联合用药组,每组SD大鼠12只。HE染色了解海马CA1区结构,免疫组化标记海马CA1区谷氨酸受体(GluR1、NR2B),灰度分析检测受体表达情况。结果:各年龄段17β-雌二醇药物保护组较未使用17β-雌二醇保护的抗癫痫药物组GluR1、NR2B受体表达均增多(P<0.01);但各17β-雌二醇保护组受体表达较对照组仍有降低(P<0.01)。结论:17β-雌二醇对抗癫痫药物造成的脑损伤有保护作用,但保护作用尚有限。     

5-孕甾烯-3β,17α-双醇-20-酮-3-醋酸酯-17α-脂肪酸酯类的合成及其构效关系研究

本文报告薯蓣皂甙元的降解物孕甾双烯醇酮醋酸酯通过环氧化、开环反应所得开环物Ⅰ经20％钯-碳催化氢解脱溴反应合成Ⅱ,进而合成Ⅲ,Ⅳ(未知物)和Ⅴ,并对这些化合物做了抗炎作用的试验,探寻其结构与抗炎活性的关系。本文还对Ⅱ与酸性活性氧化铝或碱作用后的产物结构进行了初步确证。     

纳米α-亚麻酸对病毒性心肌炎小鼠心肌损伤的保护作用

目的：探讨果王素活性成分纳米α-亚麻酸对病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌损伤的保护作用。方法：30只BALB/C小鼠腹腔无菌注射柯萨奇病毒（CVB3）制作病毒性心肌炎模型,造模后小鼠随机分为生理氯化钠溶液(NS)对照组和纳米α-亚麻酸高、低剂量治疗组(180,60 mg&#8226;kg-1),灌胃7 d,每组10只。另取20只BALB/C小鼠腹腔无菌注射病毒培养液,分别给予NS和纳米α-亚麻酸对照组（180 mg&#8226;kg-1,灌胃给药,7 d）。测定小鼠给药前后的心率变化率,计算死亡率;14 d后处死小鼠,并取血检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白（cTn-T）和B-型钠尿肽（BNP）水平。结果：心肌炎小鼠NS对照组的心率增加率、血清CK-MB、cTn-T和BNP表达水平均显著高于非感染小鼠(P<0. 01);与心肌炎小鼠NS对照组比较,纳米α-亚麻酸180 mg&#8226;kg-1治疗组小鼠心率增加率［(38.2±8.7)% vs (12.6±1.9)%,P<0.05］和死亡率均明显降低［50% vs 10%,P<0.05］,CK-MB,BNP和cTn-T表达水平均显著下降(P<0.01)。结论：纳米α-亚麻酸可以提高病毒性心肌炎小鼠的生存率,减轻心肌损害。     

11β，17α-二羟基-17-丙酰基-1，4-雄甾二烯-3-酮的合成

目的 制备17-丙酰基功能化的甾体化合物11β,17α-二羟基-17-丙酰基-1,4-雄甾二烯-3-酮.方法 以泼尼松龙为原料,经5步反应合成目标物.结果 和结论 总收率为67.4%,通过NMR、MS等确证了中间体和目标物的结构.     

姜黄素-3脂质体对小鼠四氯化碳急性肝损伤的保护作用及其机制

目的：研究姜黄素-3脂质体对肝损伤的保护作用及机制。方法：取昆明种小鼠40只,随机分成4组,每组10只：正常对照组、四氯化碳（CCl4）肝损伤模型组、姜黄素-3注射剂组、姜黄素-3脂质体组。采用腹腔注射CCl4致小鼠肝损伤模型,测定动物血清ALT、AST的活性和肝组织脂质过氧化产物丙二醛（MDA）的含量;研究肝组织病理变化。结果：模型组血清ALT、AST及肝组织MDA较正常对照组明显增高,肝组织切片出现肝小叶内炎细胞浸润;治疗组小鼠各生化指标及炎症程度较模型组均明显减轻,脂质体组对肝损伤的药效明显优于注射剂组。结论：姜黄素-3脂质体对小鼠四氯化碳性肝损伤有显著的保护作用,可通过降低肝内脂质的过氧化反应而增加其对肝脏内皮细胞的保护作用。     

3，4，5，6-四羟基Ⅱ山酮对高糖所致内皮细胞损伤的保护作用

目的研究3,4,5,6-四羟基(口山)酮对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用.方法在培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)高浓度葡萄糖(30 mmol·L-1)处理48 h引起细胞损伤.荧光分光光度法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、一氧化氮(NO)生成量与细胞脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量;MTT比色法检测细胞存活数量;流式细胞仪检测细胞周期.结果①3,4,5,6-四羟基(口山)酮能显著抑制高糖所致内皮细胞LDH释放、NO和MDA生成增加;②3,4,5,6-四羟基山酮能显著抑制高糖所致的活细胞数减少;③3,4,5,6-四羟基(口山)酮能显著减轻高糖所致内皮细胞增殖的抑制.结论3,4,5,6-四羟基山酮减轻高糖所致的人脐静脉内皮细胞损伤,其保护作用与抗氧化减少氧自由基生成有关.     

17β-雌二醇对乳腺癌细胞迁移的影响及CANP-FN通路的介导作用

目的探讨17β-雌二醇(E2)对人乳腺癌细胞迁移活动的影响及其信号机制。方法以雌激素受体(ER)阳性MCF-7和ER阴性MDA-MB-468乳腺癌细胞为研究模型,E2处理诱导细胞迁移。采用划痕实验检测细胞迁移能力,小分子RNA(siRNA)转染模型细胞沉默纤连蛋白(FN)基因表达,Western blot法检测蛋白水平,钙蛋白酶(CANP)特异性抑制剂Calpeptin(Cal)预处理细胞干预胞内CANP活性。结果(1)E2(50 nmol·L~(-1))处理24 h可明显促进MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,迁移率分别增加(51.55±5.50)%(P<0.05)和(40.78±4.78)%(P<0.01);(2)E2明显上调MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞FN蛋白表达水平,分别为对照组的2.11倍(P<0.05)和1.86倍(P<0.01);(3)Cal(10μmol·L~(-1))可明显抑制E2诱导的MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,抑制率分别为(49.55±6.44)%(P<0.05)和(36.85±4.40)%(P<0.01);(4)Cal能明显抑制MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞FN蛋白表达上调,抑制率分别为(80.12±4.55)%和(78.84±5.70)%(P<0.01);(5)siRNA沉默FN能抑制E2诱导MCF-7和MDA-MB-468乳腺癌细胞迁移,抑制率分别为(40.65±5.80)%(P<0.01)和(40.88±6.02)%(P<0.05)。结论E2可促进ER阳性或阴性乳腺癌细胞的迁移,而CANP-FN信号通路可能参与介导E2的促细胞迁移效应。