检测弓形虫IgM类抗体的改良ELISA

检测弓形虫ＩｇＭ类抗体的改良ＥＬＩＳＡ张阳根，黄邱朝，武建国（中国人民解放军第一七五医院，福建漳洲３６３０００）本文介绍用酶标记弓形虫抗原，建立的一种检测弓形虫ＩｇＭ类抗体的改良ＥＬＩＳＡ。１材料与方法１．１弓形虫抗原取弓形虫的速殖子接种小鼠腹腔，３...     

用ELISA检测乙型肝炎病毒IgM类核心抗体

本文报导了乙型肝炎病毒IgM 类核心抗体的ELISA 检测法及对104例各类肝炎病人血清的测定结果。试验利用羊抗人IgM、人IgM 固相吸附法,选择性结合已知抗原(HBc Ag),检出特异性IgM 类抗HBc。以高于正常人P/N 值均值的2个标准差(2.1)为阳性。乙型病毒性肝炎检测阳性率,急性黄疸型及无黄疸型为100%,慢性活动性75.6%,慢性迁延性66.7%;甲型病毒性肝炎及正常人无阳性。类风湿因子假阳性率为27.3%。本试验经酶标记羊抗人IgM、IgG 选择性结合、羊抗人IgM 封闭试验证实,羊抗人IgM 特异性好。试验稳定,易于推广。     

间接ELISA检测风疹病毒IgM抗体的应用

风疹是一种通过呼吸道传染,由风疹病毒（Rubellavirus,RV）引起的急性传染病。风疹病毒系披膜病毒科风疹病毒属的唯一成员,为正链单股RNA病毒,只有一个血清型,与其它披膜病毒未发现有抗原交叉。自然界人是风疹病毒的重要宿主。风疹多见于5－9岁儿童;流行期中青年和成人发病也不少见,但预后良好。妊娠期风疹感染可造成死胎,自然流产或严重的婴儿畸形,低度损害的婴儿或健康婴儿。感染的严重程度主要取决于感染发生在哪个妊娠时期。如妊娠前8周内感染自然流产率达20％,第12周几乎肯定致胎儿感染并出现后遗症。13－20周,5－10％的…     

ELISA法检测抗HGV IgM的初步应用

自 1995年Ｓｉｍｏｎｓ〔1〕和Ｌｉｎｎｅｎ〔2〕等报道发现庚型肝炎病毒 (ＨＧＶ)以来 ,国内外医学界进行了大量的实验研究 ,对免疫学检测在庚型肝炎病毒研究中的应用取得了一些进展。目前 ,对庚型肝炎病毒感染的诊断 ,仍依赖于逆转录聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)检测ＨＧＶＲＮＡ和ＥＬＩＳＡ法检测抗ＨＧＶＩｇＧ。我们采用捕获 -ＥＬＩＳＡ法对 35 4例血清标本进行抗ＨＧＶＩｇＭ检测 ,现报告如下。1　材料和方法1 1　标本来源　 12 0例正常人群为本院健康体检者 ,2 14例各型肝炎为传染科住院患者 ,2 0例血透病人由血透室提供。全部病例…     

类风湿因子对ELISA法检测肝炎病毒IgM类抗体的影响

类风湿因子(RF)是对变性免疫球蛋白IgG所产生的自身抗体，属多株系的自身抗体，主要为IgM型。在病毒性肝炎中RF阳性检出率较高，而人们已关注到RF在某种情况下可干扰部分病毒性肝炎免疫指标特别是IgM类抗体的检测。本实验用ELISA法测定肝炎病毒IgM类抗体阳性血清中的RF，然后用单抗人IgM诊断血清进行中和RF，再用ELIsA法进行重复检测，以了解RF对IgM类抗体检测的影响。     

嗜异性IgM抗体ELISA检测法的建立和初步应用

从小牛红细胞膜中提取，纯化嗜异性抗原，并以该抗原为包被抗原，配以ＨＲＰ酶标抗人ＩｇＭμ锭单抗建立了检测嗜异ＩｇＭ抗体的ＥＬＩＳＡ方法，并对临床标本与ＥＢＶ－ＩｇＭ细胞涂片酶酶免法进行了对比检测。本法简便快速，有推广应用价值。     

肺炎支原体IgM抗体ELISA检测试剂盒临床应用评价

目的 比较不同酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒对肺炎支原体(MP)特异性抗体IgM的检出率.方法 以德国欧蒙公司(EURO)、美国ZEUS公司(ZEUS)、深圳亚辉龙(YHLO)公司生产的3种试剂盒对82例呼吸道感染患者血清MP-IgM抗体进行检测,通过EP evaluator软件进行定性(QMC)方法学比对分析.结果 EURO、ZEUS、YHLO检测血清MP-IgM抗体的敏感性分别为90.4%、98.1%和94.2%,特异性分别为100.0%、66.7%和86.7%,符合率分别为97.6%、86.6%和91.5%.经Kappa一致性统计分析,ZEUS与EURO、YHLO相比,Cohen's Kappa系数分别为0.63和0.74,差异均有统计学意义(P<0.001或P<0.01);YHLO与EURO 相比较,Cohen's Kappa系数为0.87,差异无统计学意义(P>0.05).结论 3种试剂盒检测敏感性从高到低分别为ZEUS、YHLO、EURO,特异性则为EURO、YHLO、ZEUS.YHLO与EURO具有较好的一致性.临床在开展MP-IgM ELISA检测时应进行预试验.     

捕获ELISA检测人巨细胞病毒IgM抗体

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)属疱疹病毒科 ,其感染极为普遍 ,在免疫抑制患者及孕妇中常可导致严重后果。本实验采用重组ＨＣＭＶ (ｒｈＣＭＶ) ｇｐ5 2蛋白[1] 作抗原和辣根过氧化物酶(ＨＲＰ)标记的鼠抗 ｇｐ5 2单克隆抗体[2 ] ,建立了捕获ＥＬＩＳＡ ,检测血清中的ＨＣＭＶＩｇＭ抗体。现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　抗原浓度的确定　ｒｈＣＭＶ ｇｐ5 2蛋白[1] 纯度达 95 %。在捕获ＥＬＩＳＡ检测程序中加入不同浓度的ｇｐ5 2抗原 ,每个浓度重复 3孔 ,将同一抗原浓度的 3个阳性血清Ａ值分别除以 3份阴性血清的平均Ａ值 ,求得Ｐ/Ｎ值…     

检测莱姆疏螺旋体IgM抗体的ELISA改进法

莱姆疏螺旋体病是由博氏疏螺旋体所致的多系统感染,其临床确诊主要靠特异抗体的检出,早期IgM的检测尤其重要.目前检测特异的IgM 是间接ELI-SA 和μ-捕获ELISA 两类。但前者因IgM 类风湿因子(RF)的干扰而产生假阳性和因抗原部位受特异IgG 竞争而呈现假阴性,上述缺点可用μ-捕获的原理加以克服。     

人细小病毒B19IgM抗体间接ELISA检测方法的初步建立

目的：利用原核表达并纯化的人细小病毒B19（HPV B19）结构蛋白VP1初步建立HPV B19 IgM酶联免疫吸附试验（ELISA）的检测方法。方法以纯化的重组蛋白包被酶标板,建立IgM 间接ELISA检测方法,确定Cut-off值,并进行初步的应用。结果建立间接 ELISA方法Cut-off值为0．25,灵敏度为84．60％,特异性为99．70％,与对照试剂盒检测结果符合率为99．47％;用自产试剂盒检测115份孕妇和1700份健康献血志愿者血清中B19 IgM抗体,阳性率分别为12．17％和1．59％。结论通过包被 HPV B19-VP1蛋白建立的间接ELISA检测方法可用于 HPV B19早期感染或急性感染的辅助诊断。     

应用ELISA法检测结核抗体的初步探讨

应用ＥＬＩＳＡ法检测结核抗体的初步探讨赵伯和如皋市第三人民医院巫盘泉如皋市人民医院结核病是长期危害人民身体健康的最常见严重疾病之一。在实验诊断常规检查方法中，用涂片法查菌阳性率较低，细菌培养一般需时４～８周，动物接种手续繁琐，因此对结核病的诊断，尤其...     

ELISA法检测抗病毒IgM抗体的方法及问题

ELISA法是目前病毒性疾病诊断的最常用方法。它是一项定位、定性和定量的综合性技术，具有特异、快速、敏感、方便等优点，便于基层使用。IgM抗体是蛋白质抗原反应中首先产生的抗体，可用来进行病人的早期诊断，也是病毒近期感染的重要感染指标。     

改良ELISA快速检测风疹病毒IgM抗体方法的建立

目的　建立快速检测风疹病毒特异性IgM抗体的改良ELISA法。 方法　利用聚乙二醇 (PEG )能加速抗原抗体反应 ,促使其沉淀的特点 ,在常规间接ELISA法的一抗和二抗中加入 4%的PEG ,以缩短反应时间。结果　用该法测定 39份风疹阳性血清和 183份阴性血清的风疹病毒IgM抗体 ,阳性血清检出率为 97.4% ,与常规间接ELISA检测结果 (92 .3% )一致 ;阴性血清的检出率为 95 .1% ,高于间接ELISA(87.5 % ) ,经配对资料的 χ2 检验 ,差别有统计学意义。结论　在风疹IgM间接ELISA法稀释液中加入PEG ,可以缩短试验时间 ,提高检测的准确性     

甲型肝炎IgM抗体ELISA试剂的制备

感染甲型肝炎病毒(HAV)后,甲型肝炎IgM型抗体(抗-HAVIgM)是血清中最早出现的标志之一,是诊断甲型病毒性肝炎的主要依据。 为了能普及病毒性肝炎血清学诊断方法,自给试剂,我们按照全军病毒性肝炎血清学标志检测班的方法,制备了ELISA检测抗-HAV,抗-HAVIgM、HAAg、抗-HBc,抗-HBcIgM,抗-HBe、HBeAg等试剂。检测抗-HAVIgM试剂的制备与效果如下。     

用基因工程抗原建立ELISA检测莱病特异IgM抗体

目的 利用伯氏疏螺旋体基因工程抗原外膜蛋白C（OspC)建立间接ELISA，检测莱姆病特异性抗体IgM。方法 基因工程抗原OspC的包被浓度和酶标抗μ链单抗所用浓度及血清稀释倍数，均由方阵滴定法确定，并进行精密度、特异性试验、阻断试验和干扰试验。结果 OspC最佳浓度为150μg/L，批内平均变异系数4．6％，批间平均变异系数14．2％，用ELISA测定临床已确诊莱姆病33例，57例正常体检者，同时与进口ELISA试剂盒比较，两方法符合率97．8％。结论 该方法特异性强、敏感性高、实验结果可靠,是莱姆病早期诊断的好方法。     

捕获ELISA法检测特异性IgM抗体早期诊断流行性出血热

用捕获ＥＬＩＳＡ法检测流行性出血热（ＥＨＦ）特异性ＩｇＭ抗体对ＥＨＦ早期诊断有重要价值。该法经特异性与灵敏性的检查效果满意：测定５例已知ＥＨＦ病人血清，结果均为阳性；测定１２例肝炎与乙脑病人及５例健康人血清，结果均为阴性；阳性血清用２－巯基乙醇破坏ＩｇＭ，结果为阴性；阴性血清加ＲＦ阳性血清，结果无假阳性。病程３日的血清，荧光法检查为阴性，而该法为阳性。对ＥＨＦ不同病日的系列血清检测结果：病程２日即可出现阳性，３日达８０％，４日以后为１００％。因此早期诊断的价值很大。检查临床疑似ＥＨＦ的１５例病人，８例阳性。由于早期病人血清阳性率并非１００％，因此对可疑病人早期标本阴性结果，有必要进行第２份血清样品检测。