奥曲肽对EAE豚鼠外周血单个核细胞分泌IFN-γ、IL-4水平的影响

目的通过研究奥曲肽对急性实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)豚鼠外周血单个核细胞(PBMC)分泌γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平的影响,探讨奥曲肽对EAE发病保护作用的免疫学机制。方法将40只雌性豚鼠随机分为健康对照组、EAE对照组和EAE高、低剂量治疗组,每组各10只。EAE对照组及EAE高、低剂量治疗组采用粗制髓鞘碱性蛋白(cMBP)诱发急性EAE,EAE低、高剂量治疗组自造模前7 d始分别按体质量3、12 μg/(kg·d)予皮下注射奥曲肽直至试验结束。观察4组豚鼠神经功能障碍评分变化,并用ELISA法测定PBMC培养上清液中IFN-γ和IL-4水平变化。结果 EAE高、低剂量治疗组神经功能障碍评分较EAE对照组显著降低(P0.01,P0.05),且EAE高剂量治疗组降低更明显(P0.05)。PBMC分泌IFN-γ水平EAE低、高剂量治疗组、EAE对照组较健康对照组显著升高(P0.01),EAE高、低剂量治疗组较EAE对照组显著降低(均P0.01),且EAE高剂量治疗组降低更明显(P0.05)。PBMC分泌IL-4水平EAE对照组较健康对照组明显降低(P0.01),EAE高、低剂量较EAE对照组均明显增高(均P0.01),且EAE高剂量治疗组增高更明显(P0.05)。EAE对照组及EAE高、低剂量治疗组发病高峰期外周血IFN-γ/IL-4比值与神经功能障碍评分均呈正相关(r=0.753、P0.05,r=0.835、P0.01,r=0.779、P0.01)。结论奥曲肽对EAE豚鼠发病具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制IFN-γ生成、促进IL-4生成而发挥对Th1/Th2失衡的调节作用。     

咪唑克生对实验性自身免疫性脑脊髓炎的行为、病理和免疫的影响

目的探讨咪唑克生(Ida)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的行为、病理和脊髓IL-12p40、IL-10、GFAPmRNA表达的影响.方法用GPSCH免疫Wistar大鼠制作EAE模型,免疫后分别给予Ida0.5、1.5和4.5 mg·kg-1.比较各组行为学和组织学的变化,用RT-PCR法测脊髓IL-12p40、IL-10和GFAP mRNA的表达.结果与EAE组比Ida1.5mg·kg-1组和Ida4.5 mg·kg-1组的行为学和病理变化减轻,脊髓IL-12p40mRNA表达降低,IL-10和GFAPmRNA表达升高(P＜0.05).结论Ida对EAE有保护作用,可能与打乱促炎和抑炎细胞因子的平衡及促进星形胶质细胞增殖活化有关.     

左旋咪唑对实验性自身免疫性脑脊髓炎脊髓IFN-γ、TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:探讨左旋咪唑(LMS)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)脊髓IFN--γ、TGF-β1mRNA表达的影响。方法:用GPSCH免疫Wistar大鼠制作EAE模型,分别在免疫前(LMS1组)、免疫同时(LMS2组)、免疫后(LMS3组)给LMS10mg·kg-1。比较各组行为学和组织学的变化,用RT-PCR测脊髓IFN-和TGF-β1mRNA的表达。结果:LMS1组和LMS2组的行为学表现和炎细胞浸润加重(P<0.01,P<0.05)。LMS3组出现EAE复发。与EAE组比,LMS1组和LMS2组脊髓IFN-mRNA表达升高,TGF-β1mRNA表达降低,但仅LMS2组有统计学意义(P<0.05)。结论:LMS可升高脊髓IFN-mRNA表达,降低TGF-β1mRNA表达,提示LMS对EAE的促发作用可能与Th1/Th2失衡有关。     

左旋咪唑对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓IL- 10、IL-12/23 P40 mRNA表达的影响

目的:探讨左旋咪唑(LMS)对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)脊髓IL-10、IL-12/23P40mRNA表达的影响。方法:用GPSCH和CFA混匀乳剂免疫Wistar大鼠制作EAE模型,分别在免疫前(LMS1组)、免疫同时(LMS2组)、免疫后(LMS3组)给LMS10mg·kg-1。比较各组行为学变化,用RT-PCR测脊髓IL-10和IL-12/23P40mRNA的表达。结果:LMS1组和LMS2组行为学表现加重(P<0.01,P<0.05)。LMS3组出现EAE复发。与EAE组比,LMS1组、LMS2组和LMS3组脊髓IL-12/23P40mRNA表达不同程度升高,IL-10mRNA表达不同程度降低。结论:LMS可升高脊髓IL-12/23P40mRNA表达,降低IL-10mRNA表达,提示LMS对EAE的促发作用可能与Th1/Th2失衡有关。     

咪唑克生对脂多糖诱导的皮质星形胶质细胞相关炎症细胞因子的影响

目的：了解咪唑克生（Ida）对炎症状态下的星形胶质细胞相关的炎症细胞因子的调节作用。方法：将纯度〉95％星形胶质细胞随机分为空白对照组、脂多糖刺激组和Ida炎症干预组，每组7瓶细胞。Ida 100μmol·L^-1，脂多糖10μg·mL^-1。Ida预处理6h、药物共处理12h、脂多糖处理12和24h时留上清液检测细胞因子，细胞提取RNA检测胶质酸性纤维蛋白和核转录因子κB（NF-κB）水平。结果：Ida能抑制促炎细胞因子（P〈0．01）和NF-κB的表达（P〈0．05）。结论：Ida具有抗炎作用。     

咪唑克生对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠小胶质细胞激活和白介素17、肿瘤坏死因子α表达的影响

目的观察咪唑克生对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脑组织中小胶质细胞、白介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法 SD大鼠30只随机分成3组:EAE-咪唑克生组(免疫当日开始给予咪唑克生2 mg·kg~(-1),腹腔注射,连续14 d)、EAE-生理盐水组(给予相同剂量生理盐水)和空白对照组。用豚鼠全脊髓匀浆免疫诱导制作EAE大鼠模型。每天观察评估各组大鼠神经功能变化;苏木精-伊红染色观察病理学改变;免疫组化法检测小胶质细胞(Iba1阳性)的激活与表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测发病高峰期(免疫后15 d)脑组织中IL-17,TNF-α表达水平。结果与EAE-生理盐水组比较,EAE-咪唑克生组(1)日均神经功能评分降低(P0.05),最大临床症状评分显著降低(P0.01);(2)苏木精-伊红染色:中枢炎症细胞浸润减少(P0.05);(3)免疫组化:Iba1阳性细胞表达减少(P0.05);而EAE-生理盐水组大鼠腰髓内Iba1阳性细胞表达较空白对照组明显升高(P0.01);(4)ELISA:炎性细胞因子IL-17和TNF-α表达明显降低(P0.01)。结论咪唑克生能够减缓大鼠EAE病情,其机制可能与抑制中枢神经系统小胶质细胞激活,下调中枢神经系统炎症因子IL-17和TNF-α的表达,扰乱中枢神经系统内炎症因子的平衡有关。     

咪唑克生对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠MCP-1、MIP-1α表达的影响

目的：探讨不同剂量咪唑克生（Ida）对Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）中枢神经系统（CNS）内单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1α）表达的影响。方法：以豚鼠脊髓匀浆加完全福氏佐剂免疫Wistar大鼠,建立EAE模型。观察Ida 0.5、1.5和4.5mg&#183;kg^-1剂量组对大鼠的EAE发病率、神经功能缺损评分的影响,应用苏木精-伊红和Kluver ＆ Barrera髓鞘染色方法观察大鼠CNS病理变化,采用免疫组织化学技术检测大鼠CNS内MCP-1、MIP-1α表达的变化。结果：Ida 1.5和4.5mg&#183;kg^-1组的EAE发病率和神经功能缺损评分均明显降低,Ida3个不同剂量Ida干预组的CNS内MCP-1、MIP-1α的表达呈现不同程度地减少。结论：不同剂量的Ida能改善EAE,以1.5和4.5mg&#183;kg^-1组的效果更显著。推测可能与咪唑啉2受体有关。     

2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脊髓胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨咪唑啉Ⅱ类受体(I2R)高选择性配体2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉(2-BFI)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脊髓胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法 C57BL/6小鼠30只,随机分成EAE组、2-BFI组和对照组,每组10只。EAE组及2-BFI组给予皮下注射抗原液诱导为EAE模型;2-BFI组同日起腹腔注射2-BFI共14 d。各组每日进行2次神经功能缺损评分;第19 d进行脊髓病理学检查,免疫组化法观察脊髓炎症细胞浸润、髓鞘脱失程度及GFAP表达。结果 2-BFI组神经功能缺损评分(4.17±3.65)明显低于EAE组(10.41±3.02)(P<0.01);脊髓病理评分(1.10±0.59)较EAE组(2.38±0.86)显著减少(P<0.01);GFAP阳性细胞数[(18.83±2.31)个/HP]明显多于EAE组[(12.25±2.66)个/HP](P<0.05)。结论 2-BFI能减缓小鼠EAE疾病发展,可能与促进中枢神经系统中GFAP的表达有关。     

地塞米松对MS的IFN-γ及IL-10分泌性T细胞的影响

目的　检测多发性硬化 (MS)患者外周血单个核细胞在地塞米松 (Dex)影响下的 IFN- γ和 IL- 10的分泌细胞水平。方法　采用酶联免疫斑点技术 (EL ISPOT)检测体外培养的外周血单个核细胞 (MNC)在 CNS髓鞘素抗原 MBP刺激下的地塞米松对照试验 ,检测 IFN -γ和 IL - 10分泌性 T细胞水平 ,并与其他神经疾病 (OND)组及健康对照组的检测结果进行对比。结果　显示 MS患者 IFN- γ分泌细胞水平高于对照组 ,Dex使 MS患者 IFN- γ分泌细胞减少 ,对 IL- 10分泌细胞无明显影响。结论　MS患者存在 Th1/ Th2细胞因子的失衡 ,Dex能抑制 MS Th1类细胞因子 IFN- γ,其治疗作用可能与此有关。     

2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠小胶质细胞活化及氧化应激的影响

目的观察2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉(2-BFI)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠CNS小胶质细胞活化及氧化应激的影响。方法将27只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、EAE组和2-BFI干预组,每组9只。采用MOG_(35-55)免疫法制作经典EAE模型。2-BFI干预组小鼠于EAE造模后当日起腹腔注射2-BFI 20 mg/kg,2次/d,连续14 d。正常对照组和EAE组以等量生理盐水代替。每日观察并记录动物的行为学变化、进行神经功能缺损评分。免疫后第20 d处死各组小鼠,采用HE染色和LFB染色观察组织学变化;免疫组化法测定诱导型小鼠CNS中一氧化氮合成酶(iNOS)蛋白和离子钙接头分子(Iba-1)的表达,比色法检测丙二醛(MDA)的含量;并对活化的小胶质细胞数量和iNOS蛋白表达水平进行线性相关分析。结果正常对照组小鼠未见神经系统受损的表现。与EAE组相比,2-BFI干预组日均神经功能缺损评分明显降低,CNS脊髓炎性细胞浸润明显减少,髓鞘脱失严重程度明显减轻,活化的小胶质细胞数量减少,iNOS蛋白表达明显减少,MDA含量降低(P0.05~0.01)。相关分析结果显示,iNOS表达水平与活化的小胶质细胞数量呈正相关(r=0.596,P0.01)。结论 2-BFI能减轻EAE小鼠临床症状和组织学改变,2-BFI对EAE小鼠的神经保护作用于小胶质细胞激活和减轻氧化应激相关。