胶质细胞源性神经营养因子

胶质细胞源性神经营养因子 (ＧＤＮＦ) ,1933年始由大鼠胶质瘤细胞系Ｂ4 9中分离出来 ,是一种含有134个氨基酸残基的同二聚体蛋白质 ,分子量为33— 35ＫＤ ,7个保守的半胱氨酸残基在分子中的位置与转化生长因子—β(ＴＧＥ—β)超家族相同 ,因而被看作是ＴＧＦ—β超家族的一员 ,人和大鼠的ＧＤＮＦｍ93%的同源性〔1〕。ＧＤＮＦ在神经系统中有广泛的分布 ,ＲＴ—ＰＣＲ法显示ＧＤＮＦ的ＲＮＡ定位于接受多巴胺 (ＤＡ)能神经之投射的纹状体、苍白球腹侧区、嗅结节、梨状区 ,在非ＤＡ能脑区的小脑原基、出生前脊髓背梭、新生大鼠丘脑、基底前…     

胶质细胞源性神经营养因子研究进展

胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line—derived neurotrophic factor,GDNF）在神经系统的发育、生长、损伤及修复等过程中发挥重要的神经营养作用,在神经系统中的分布广泛,其神经营养活性较高,不仅可以保护多巴胺（DA）运动神经元,对于中枢及外周的运动神经元、感觉神经元及交感神经元等多种神经元具有同等的营养作用,     

胶质源性神经营养因子在成年大鼠中枢神经系统中的表达

为探讨胶质源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）在中枢神经系统中的表达，采用免疫组化法检测该因子在成年大鼠中枢神经系统部分区域的分布。结果发现大脑皮质各层有极弱阳性的神经元；小脑皮质分子层及蒲肯野细胞呈强阳性反应；脊髓灰质中阳性神经元广为分布，尤以前角、后角Ⅰ、Ⅱ板层及Ｃｌａｒｋ核明显。此外，脊髓胶质细胞和中央管室管膜上皮均有ＧＤＮＦ阳性信号表达，表明ＧＤＮＦ对成年大鼠中枢神经系统内的多种神经元群均有功能作用。     

胶质细胞源性神经营养因子在链霉菌的分泌表达

目的：构建胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）表达质粒，实现GDNF在链霉菌的分泌表达。方法：从人基因组中克隆GDNF成熟肽编码基因，与链霉菌酪蛋白酶melC1启动子和信号肽DNA序列融合。melC1信号肽DNA与GDNF融合后地翻译框呆的漂移，且GDNF的转录受控于melC1启动子。融合基因与链霉菌载体pIJ702连接并转化Slividans TK24原生质体。结果：经抗性筛选及限制性酶切分析获得重组质粒pIJMC。携带pIJMG的链霉菌培养上清存在约15000的特异性表达带，与GDNF成熟肽的分子质量吻合。结论：GDNF在MelC1信号肽指导下可以在链霉菌分泌表达。     

胶质细胞源性神经营养因子及其受体与疼痛

胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)是转化生长因子β(transforminggrowth fartor-β,TGF-β)超家族成员,具有多种重要的生物学活性,不仅特异性地促进多巴胺能神经元的存活,还对外周神经系统及非神经系统具有广泛的作用。文中就近年来对GDNF及其受体在神经系统中的作用,特别是痛觉调制中作用的国内外研究进展作一综述。     

大鼠弥漫性脑损伤后脑源性及胶质细胞源性神经营养因子时序性表达的实验研究

目的探讨胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）和脑源性神经营养因子（BDNF）在大鼠脑组织中的表达水平随损伤时间的变化规律,以期为脑损伤时间的推断提供新的实验依据。方法将90只无特定病原体（SPF）SD大鼠随机分为正常对照组（n=10）及实验组（n=80）,对实验组大鼠建立改良的大鼠弥漫性脑损伤模型,并根据伤后时间分为1、3、6、12、24、48、72、120 h组,每组各10只。采用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑组织中GDNF和BDNF表达,比较各组大鼠脑组织不同部位及损伤时间GDNF、BDNF的表达和变化规律。结果大脑、小脑、脑干组织中GDNF和BDNF阳性信号灰度在损伤后1 h组表达升高,6 h组达最高峰,12 h组开始回落;1、3、6、12、24、48、72、120 h组大脑、小脑、脑干组织中GDNF阳性信号灰度值均显著高于正常对照组（P〈0.05）,各组各部位阳性信号面积密度比较,差异无统计学意义（P＆gt;0.05）。结论 BDNF、GDNF可以作为大鼠弥漫性脑损伤后经过时间推断的实验指标。     

汉族人胶质细胞源性神经营养因子前体cDNA的核苷酸序列分析及其功能研究

目的：对汉族人胶质细胞源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）前体ｃＤＮＡ进行核苷酸旬分析及功能研究。方法：通过ＲＴ－ＰＣＲ法扩增汉族人ＧＤＮＦ前体ｃＤＮＡ,利用昆虫杜状病毒表达系统（ＢＥＳ）表达此前体ｃＤＮＡ,原代培养中脑多巴胺能神经元对表达产物进行活性测定。结果：汉族人ＧＤＮＦ前体ｃＤＮＡ为截短的５５５ｂｐ的转录体,其在昆虫细胞中的分泌表达产物能促进多巴胺能神经元的存活和分化。结论：汉族人ＧＤＮＦ前体ｃ尤     

胶质源性神经营养因子对脊髓损伤后前角运动神经 …

目的：探讨胶质细胞源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）对唯物事运动神经元的保护作用。方法：大鼠分为假手术组、生理盐水（ＮＳ）组和ＧＤＮＦ组,改良Ａｌｌｅｎ法撞击致伤Ｔ１２脊髓,蛛网膜下腔分别给予ＮＳ和ＧＤＮＦ,分别取不同时间的伤段脊髓进行切片,应用酶组织化学染色方法显示脊髓前角外侧核运动神经元中胆碱酯酶（ＣｈＥ）和酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性,并结合计算机进行图像分析。结果：ＧＤＮＦ组较ＮＳ组ＣｈＥ活性显著增     

恒河猴脊髓半横断损伤后脊髓腹角及对侧皮质前运动区胶质细胞源性神经营养因子的表达

目的:探讨恒河猴脊髓损伤后脊髓腹角及对侧大脑皮质前运动区胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的变化.方法:18只成年恒河猴随机分为假手术组和脊髓半横断损伤(hSCI)后7 d、14 d、1个月、2个月和3个月组,每组3只.假手术组术后24 h取材;各损伤组于第11胸髓节段切断左侧半脊髓,在相应时间点取材.取脊髓损伤处近、远段5 mm组织及损伤对侧大脑皮质前运动区组织,制作冰冻切片,采用免疫组织化学SP法检测GDNF,计数阳性神经元数目.结果:恒河猴hSCI后3个月内,损伤处脊髓近、远段损伤侧与未损伤侧腹角GDNF阳性神经元数均较假手术组减少(P＜0.05),并且表现为先降低后增加,晚期逐渐减少;hSCI 1个月以后损伤侧GDNF阳性神经元数目多于未损伤侧;对侧皮质前运动区GDNF阳性神经元在损伤早期急剧减少,此后增加,至hSCI后3个月时恢复至正常数量.结论:损伤局部GDNF的缺乏是影响脊髓损伤后再生修复的原因之一;适时补充外源性GDNF可能会促进神经修复;应用GDNF治疗SCI的最佳时机在损伤早期.     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后功能和体质量的影响

&&胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后功能和体质量的影响@宋海涛 @贾连顺 @陈哲宇 @沈强 @路长林 @强华&&&&&&&&     

Effect of glial cell line-derived neurotrophic factor on peripheral nerve regeneration in adult rat

Objective: To study the effect of glial cell line-derived neurotrophic (GDNF) on adult peripheral nerve regeneration. Methods: Transectioned sciatic nerve in adult rats was sutured into silicone channel. GDNF or SAL solution was injected into the silicone channels during operation. Four weeks later, the effect of GDNF on axonal regeneration was evaluated by degenerative neurofiber staining and HRP retrograde tracing. Results: Compared with SAL group, the percentage of degenerative neurofiber areas decreased from 17.3% to 1.9% ( P＜0.01 ) and the ratio of labeled spinal somas number was significantly increased from 43.5% to 68.3% ( P＜0.01 ) in GDNF group. Conclusion: The results suggest that exogenous GDNF can obviously enhance adult peripheral nerve regeneration.     

嗅鞘细胞培养上清胶质源性神经生长因子含量的测定

目的观察嗅鞘细胞培养上清胶质源性神经生长因子(GDNF)的含量随培养时间的变化关系，为选择嗅鞘细胞移植的最佳时间提供理论依据。方法采用差速贴壁纯化培养方法培养嗅球及嗅粘膜嗅鞘细胞，培养21天，3天留取标本一次，采用ELISA法对上清GDNF进行测定。结果GDNF的含量随培养时间的延长逐渐升高，但绝对含量很低。结论培养的嗅鞘细胞能分泌GDNF，细胞移植在14天以后为宜。     

神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后GDNF基因表达的影响及意义

目的:探讨神经干细胞(NSC)移植对大鼠脊髓损伤后胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响及其意义。方法:NSC提取自新生Wistar大鼠的海马区,经培养、鉴定。制作大鼠脊髓损伤(SCI)模型,于伤后第7d移植NSC。实验分为3组:NSC移植组(A组)、DMEM填充组(B组)、正常对照组(C组)。应用RT-PCR法和免疫组化法观察细胞移植后不同时间点GDNF基因的表达变化。结果:RT-PCR结果分析,移植术后第1,3,5d,A组GDNF mRNA的表达量明显高于B组,差别有显著性意义(P<0.05)。组化结果分析,移植术后第7,14,28d GDNF的表达量明显高于B组,差别有显著性意义(P<0.05)。结论:NSC在移植后可上调神经营养因子GDNF基因的表达,是修复脊髓损伤的机制之一。     

蛛网膜下隙局部应用GDNF对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的 研究周围神经损伤后经蛛网膜下隙置管局部应用外源性胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neu-rotrophic factor,GDNF)对脊髓前角运动神经元的保护作用. 方法 成年SD大鼠随机分为2组:GDNF组(坐骨神经切断术后给予GDNF)和NS组(术后给予生理盐水).切断两组大鼠左侧坐骨神经致相应脊髓前角运动神经元部分损伤,行蛛网膜下隙置管,实验组注入外源性GDNF(10 μg/ml),对照组注入同等剂量的生理盐水,于2,4,8周行坐骨神经功能指数检测;取L4-6节段脊髓标本冰冻切片,行胆碱酯酶(ChE)和酸性磷酸酶(ACP)染色并进行图像分析. 结果 GDNF组脊髓前角运动神经元ChE阳性颗粒面积比NS组有明显提高(P<0.05),ACP阳性颗粒面积低于NS组(P<0.05);GDNF组坐骨神经功能指数亦优于NS组. 结论 周围神经损伤后通过蛛网膜下隙注入外源性GDNF对相应的脊髓运动神经元有保护作用.     

胶质细胞源性神经营养因子在肠易激综合征大鼠模型中的表达

目的:探讨胶质细胞性神经营养因子(GDNF)在肠易激综合征(IBS)大鼠模型中的表达及其作用。方法:45只大鼠随机分为ISB1组、ISB2组及空白对照组,ISB1组、ISB2组分别采用乙酸及慢性激怒的方法制造肠易激综合征大鼠模型,空白对照组不做任何处理,采用免疫组化的方法检测3组大鼠结肠肌间神经丛内GDNF蛋白的表达,并进行比较。结果:ISB1组GDNF表达明显高于ISB2组和空白对照组(P<0.05),而ISB2组与空白对照组GDNF的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GD-NF在炎症后肠易激综合征中的表达增加,提示神经元及神经胶质细胞对GDNF需求增加,推测GDNF对结肠肌间神经丛内神经元起保护和促进再生的作用,继而参与调解肠道炎症过程,且可能有保护和促进感染后肠易激综合征肠粘膜恢复的作用。     

GDNF基因活化的细胞外基质对大鼠坐骨神经缺损的修复作用

目的 探讨GDNF基因活化的细胞外基质对神经元、再生轴突和靶肌肉的保护作用.方法 通过化学萃取获得大鼠坐骨神经细胞外基质,复合上编码GDNF的质粒DNA,构建成基因活化的细胞外基质支架.90只成年Wistar大鼠按随机数字法分为3组:GDNF基因活化的细胞外基质桥接组(A组,n=30), ECM桥接组(B组,n=30),自体神经桥接组(C组,n=30),12周时用激光共聚焦显微镜等形态学方法及电生理学等方法来评价再生神经功能.结果 GDNF基因活化的细胞外基质能作为局部的基因缓释系统来释放GDNF,高效表达12周以上;再生轴突数达(2 117±294),坐骨神经指数恢复到(30.92±2.98)%.结论 GDNF基因活化的细胞外基质可以促进大鼠坐骨神经功能的恢复,有希望成为自体神经移植的替代品.     

神经干细胞联合胶质细胞源性神经营养因子脑内移植治疗帕金森病的实验研究

目的：探讨胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF）对脑内移植神经干细胞（neural stem cells,NSCs）的存活、分化及对帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）模型大鼠的治疗作用.方法：采用原代培养胚胎14.5天的胎鼠腹侧中脑NSCs,单独或经GDNF预处理后移植入PD模型大鼠的纹状体,观察NSCs在纹状体的分化情况,以及PD模型大鼠旋转行为的变化.结果：联合GDNF移植NSCs比单纯移植的NSCs较多的转化为多巴胺能神经元,并能够改善PD模型大鼠的旋转行为.结论：GDNF可以促进中脑来源的NSCs向多巴胺能神经元转化,并对PD模型大鼠有较好的治疗作用.