手性衍生化-反相高效液相色谱法测定L-肌肽的光学纯度

目的建立柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法(HPLC)测定L-肌肽对映体的纯度。方法以邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)为手性衍生化试剂,反应生成具有荧光吸收的一对非对映异构体衍生物,采用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流速1.0mL·min-1,50mmol·L-1乙酸铵缓冲溶液(pH6.0)-甲醇(70:30,V/V)流动相,柱温35℃,λex=350nm,λem=450nm。结果L-肌肽与其光学异构体分离度大于3,在0.104～2.68mg·L-1范围内,D-肌肽衍生物色谱峰面积与其浓度呈良好线性关系,检测限浓度为0.02mg·L-1。结论建立的L-肌肽光学异构体(杂质)手性衍生化-HPLC拆分检查法方便准确,可用于L-肌肽的光学纯度控制。     

柱前衍生化RP-HPLC法测定肌肽的含量

目的建立简单、快速测定肌肽含量的方法。方法采用2,4-二硝基氯苯柱前衍生化RP-HPLC法。衍生化试剂:2,4-二硝基氯苯;色谱柱:DiamonsilTM C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.15 mol.L-1乙酸钠缓冲溶液(体积比1∶5);流速:1.0 mL.min-1;检测波长:360 nm。结果肌肽质量浓度在2.0~20.0 mg.L-1(r=0.999 4)内与其衍生化物峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为96.8%,RSD为0.8%(n=9)。结论2,4-二硝基氯苯柱前衍生化RP-HPLC法可用于测定肌肽含量。     

HPLC法测定枸磺新啶片中枸橼酸喷托维林和盐酸溴己新含量

目的建立HPLC法测定枸磺新啶片中枸橼酸喷托维林和盐酸溴己新含量。方法色谱柱为Inertsil ODS-3(250 mm×4.6mm,5μm);流动相为10 mL.L-1磷酸溶液-10 mL·L-1三乙胺溶液-乙腈(35∶35∶30);检测波长:215 nm;流速:1.0 mL·min-1;柱温:35℃,进样量:20μL。结果线性范围分别为质量浓度73.8~172.2μg·mL-1(r=0.999 9)和51.1~119.3μg·mL-1(r=0.999 8),平均回收率分别为99.5%(RSD=0.5%)和100.2%(RSD=0.4%)。结论方法简便、准确、专属性强,可用于枸磺新啶片的质量控制。     

HPLC法测定人血清中丙戊酸的含量

目的 　建立柱前衍生 HPLC法测定血清样品中丙戊酸钠的含量。 方法 　以 Nova-pak C1 8( 3 .9× 15 0 mm)为色谱柱 ,流动相为甲醇 -水 ( 78∶ 2 2 ) ,检测波长为 2 45 nm。样品酸化提取后经α-溴苯乙酮衍生化后分析 ,环己烷羧酸为内标。结果 　线性范围为 5～ 2 5 0 mg· L- 1 ,r=0 .9998;平均回收率为 98.78% ,日内、日间 RSD均小于 3 .2 2 % ,最低检出浓度为 0 .0 8mg· L- 1 。 结论 　本法适用于 VPA的血药浓度测定。     

柱前衍生化RP-HPLC测定米格列奈钙光学纯度

目的 建立柱前衍生化-反相高效液相色谱法测定S-米格列奈钙的光学纯度。方法 采用手性衍生化试剂S-萘乙胺(S-NEA),以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)和1-羟基苯并三唑(HOBt)为偶联剂对样品S-米格列奈钙进行衍生化。衍生产物以乙腈- 0.01 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 2.5)(50∶50)为流动相,在Agilent Zorbax C18(250 mm × 4.6 mm,5 μm)色谱柱上进行分离,流速为1.5 mL·min-1,检测波长为225 nm,柱温为30 ℃。结果 R-米格列奈在0.3~3.0 μg·mL-1内线性关系良好,检测限和最低定量下限分别0.1和0.3 μg·mL-1,平均回收率为102.4%,日内日间精密度考察中RSD均小于5%。结论 该方法灵敏度高,衍生化产物稳定,重复性好,可用于S-米格列奈钙光学杂质的检测。     

HPLC法测定米索前列醇缓释栓的含量

目的测定米索前列醇缓释栓的含量。方法采用HPLC法,色谱柱:C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(50∶50);检测波长:210nm;衍生化HPLC法,色谱柱:C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(50∶50);检测波长:280nm。结果直接法:米索前列醇在4.08～81.6mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9999),低、中、高浓度回收率分别为99.3%,99.7%和99.0%,检测限和定量限为2和8ng。衍生化法:米索前列醇在4.08～81.6mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9997),低、中、高浓度回收率分别为99.4%,99.6%和99.1%,检测限和定量限为0.8和2ng。结论2种方法均可用于制剂的含量和有关物质测定。     

高效液相色谱法测定土霉素及其盐酸盐的含量和有关物质

目的 :采用高效液相色谱法测定土霉素的含量及有关物质。方法 :SGEW5C18-AR柱为分析柱 ,流动相为 0 0 5mol·L-1草酸铵 -二甲基甲酰胺 - 0 2mol·L-1磷酸氢二铵 (75∶2 0∶5 ) ,用氨试液调节pH至 8 0± 0 2 ,柱温 35℃ ,流速 0 8mL·min-1,检测波长 2 80nm ,峰面积外标法。结果 :土霉素在 5～ 90 μg·mL-1范围内呈良好的线性关系 ,r=0 9994,平均回收率为 10 0 1% (n =7) ,RSD =0 87% (n =7)。结论 :本方法简便 ,快速 ,结果准确 ,可靠 ,重现性好。     

柱前衍生化HPLC法测定硫酸庆大霉素和硫酸新霉素的含量

目的 :建立一种测定硫酸庆大霉素滴眼液中庆大霉素和复方地塞米松滴眼液中硫酸新霉素含量的HPLC法。方法 :硫酸庆大霉素和硫酸新霉素经氯甲酸芴甲酯 (FMOC Cl)衍生化后用HPLC法分析。采用AgilentC18柱 (15 0mm× 4 6mm ,5 μm)为色谱柱 ,乙腈 -水 (95∶5 ,V/V)为流动相 ,紫外检测波长 2 6 5nm ,流速 1mL·min-1,柱温 2 5℃。结果 :硫酸庆大霉素在 2～ 10 0mg·L-1浓度范围内有良好的线性关系 (r=0 9997,n =6 ) ,回收率为 (98 5± 0 6 5 ) % ,RSD =0 6 6 % ,(n =9) ,最低检测质量浓度为 1mg·L-1;硫酸新霉素在 1～ 10 0mg·L-1浓度范围内有良好的线性关系 (r =0 9993,n =7) ,回收率为 (99 2 6± 1 70 ) % ,RSD =1 71% ,(n =9) ,最低检测质量浓度为 0 5mg·L-1。结论 :本方法可以用于硫酸庆大霉素滴眼液和复方地塞米松滴眼液的质量控制     

柱前衍生HPLC法测定依达拉奉注射液中L-半胱氨酸含量

目的建立柱前衍生化HPLC法测定依达拉奉注射液中L-半胱氨酸盐酸盐含量的方法。方法以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1mol.L-1醋酸钠溶液(用冰醋液调节pH至6.5)(45∶55),流速为1.0mL·min-1,检测波长254nm。结果 L-半胱氨酸盐酸盐衍生物浓度在0.4～4.0μg·mL-1范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998);平均回收率100.5%,RSD为1.4%(n=9)。结论本方法快速准确。     

薄层色谱衍生法测定丙戊酸血药浓度

目的采用薄层色谱衍生化法建立一个快速测定人血清中丙戊酸浓度的方法.方法采用正庚酸为内标,以α-溴代苯乙酮为衍生化试剂,用TLC法分离,GF254硅胶板,正己烷∶丙醚=8∶2为展开剂.结果在浓度为10～140mg*L-1呈线性关系,r=0.9973,回收率为(100.3±3.2)%.日内和日间的RSD分别为2.94%和3.81%.结论薄层色谱衍生化法快速测定血清中丙戊酸浓度,为临床药物浓度监测提供方法.