miRNA196a2基因多态与食管鳞状上皮细胞癌相关性研究

目的:探讨miR-196a2基因(rs11614913)多态性及吸烟﹑饮酒在食管鳞癌发病中的交互作用,为食管鳞癌高危人群的筛选提供依据。方法:样品来自南通大学附属医院和南通市肿瘤医院病理检查确诊为食管鳞癌152例患者与同时期入住的152例非肿瘤患者或体检中心健康对照。抽取随机静脉血2 mL,提取基因组DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,检测miR-196a2的基因rs11614913位点的多态性,同时调查各研究对象的吸烟、饮酒情况,并结合基因多态性将上述因素进行分层分析。结果:携带突变型纯合子C/C基因型个体罹患食管鳞癌风险是携带野生型纯合子T/T基因型个体2.108倍(95%CI=1.032～4.305),差异有统计学意义(P=0.041)。结论:miR-196a2的基因rs11614913位点为突变型纯合子C/C或携带C等位基因者,罹患食管鳞癌风险增加,很可能是食管鳞癌发病的重要危险因素之一。     

蒙古族人MicroRNA-149和196a2单核苷酸多态性肝细胞癌易感性

目的研究蒙古族人肝细胞癌发展中的miR-196a2 rs2910164, miR-149 rs2292832的多态性,为进一步对蒙古族肝细胞癌的预防及诊断提供可靠的参考依据。方法收集2018年10月至2019年12月内蒙古医科大学属医院的蒙古族肝癌患者80例(各个盟市来我院的就诊患者)和蒙古族60例对照受试者,采集其血液,提取DNA进行PCR,酶切分析miR-196a2 rs2910164, miR-149 rs2292832的多态性。结果对照组miR-196a2rs11614913, miR-149 rs2292832的基因型分布符合哈迪-温伯格平衡定律,人口的抽样合格。miR-196a2rs11614913的TT基因型和T等位基因与CC基因型相比,肝细胞癌危险性分别增加了2.26倍和1.50倍。发现miR-196a2 rs11614913的TT基因型和T等位基因与肝细胞癌危险性增加有显著相关性。结论 miR-196a2rs11614913的多态性可以作为蒙古族人肝细胞癌的诊断标记。     

microRNA-196a2 T>C基因多态性与中国汉族人群肝硬化发生的相关性

目的探讨microRNA-196a2 T>C基因多态性与肝硬化发生的相关性。方法采用聚合酶链反应和连接酶检测反应法(PCR-LDR)检测110例肝硬化患者及391例健康对照者microRNA-196a2 T>C基因多态性,运用SPSS 10.0软件对结果进行统计学分析,并分别对男性及女性个体microRNA-196a2 T>C基因多态性进行分析。结果肝硬化组与对照组都是以CT基因型为主,CC基因型及等位基因C在肝硬化组的分布频率(0.191,0.423)低于健康对照组(0.235,0.487),但无统计学差异(P>0.05);该位点基因型及等位基因在男性或女性个体中的分布趋势与整体趋势相似,相关差异也无统计学意义(P>0.05)。结论在中国汉族人群中,microRNA-196a2 T>C基因多态性与肝硬化的发生并没有明显相关性。     

hOGG1 ser326cys基因多态性与宫颈癌遗传易感性的关系

目的探讨广东汉族妇女hOGG1 ser326cys基因多态性与宫颈癌关系,为宫颈癌的预防和治疗提供新的思路。方法利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,对86例宫颈癌患者和102名健康对照的hOGG1 ser326cys多态位点进行分型,采用非条件逻辑回归分析统计该多态位点与宫颈癌易感的相关性。结果ser/ser(CC)、ser/cys(CG)、cys/cys(GG)基因型在病例组中的频率分别为19.8%、52.3%和27.9%,在对照组中分别是23.5%、44.1%和32.4%,两组间基因型频率分布差异无统计学意义(2=1.26,P=0.532);携带hOGG1cys(G)变异等位基因与宫颈癌危险性无明显相关(OR=0.94,95%CI0.63～1.41,P=0.767)。结论hOGG1基因ser326cys多态位点与广东汉族妇女宫颈癌易感无相关性。     

SOD2和GSTP1基因多态与宫颈癌易感性的关系

目的：探讨超氧化物歧化酶2（superoxide dismutase 2,SOD2）rs4880和谷胱甘肽S转移酶P1（glutathione S?transferase Pi,GSTP1）rs1695基因位点单核苷酸多态性与宫颈癌发生的关系。方法：选择经组织学确诊的汉族395例新发宫颈癌患者作为病例组,与病例组人群不存在生物学相关的465例正常人群作为对照组,利用Taqman实时荧光定量PCR技术检测基因型,Logistic回归模型计算基因型与人群罹患宫颈癌的风险比（odds ratio,OR）及其95％可信区间（95％CI）。结果：与SOD2 rs4880 TT基因型比较,携带rs4880 TC基因型、CC基因型和TC/CC基因型的个体发生宫颈癌的风险分别升高15.1%、96.6%和18.7%,但差异无统计学意义（OR=1.15,95%CI：0.84~1.57,P=0.378;OR=1.97,95%CI：0.64~6.09,P=0.231;OR=1.19,95%CI：0.87~1.61,P=0.271）;与GSTP1 rs1695 AA基因型相比,携带rs1695 AG、GG及AG/GG基因型的个体罹患宫颈癌的风险无明显变化（P > 0.05）,该位点多态性与宫颈癌关系的Meta分析也提示rs1695遗传变异与宫颈癌的发生无明显相关性。结论：SOD2 rs4880和GSTP1 rs1695基因多态性可能与宫颈癌发生无关。     

miRNA-196a-2基因多态位点rs11614913与胃癌易感性的关联研究

目的：探讨miRNA-196a-2的单核苷酸多态（single nucleotide polymorphisms,SNPs）位点rsll614913与胃癌易感性的关系。方法：采用病例一对照研究设计,研究对象为232例经组织学确诊的胃癌病例和250例按年龄、性别进行匹配的无肿瘤史的社区对照人群。采用探针法SNP基因分型技术检测miRNA-196a-2基因的C／T多态的基因型,计算rsll614913多态位点基因型在病例与对照中的分布情况,采用logistic回归计算校正相对危险度（oddsratio,OR）和95％置信区间（95％confidenceinterval,95％CI）．评价基因型对胃癌易感性的影响。结果：miRNA-196a-2基因多态位点rsll614913CC、CT和1Tr基因型在胃癌人群中的分布频率为44．0％、47．0％和9．0％,与对照组（28．8％,54．4％和16．8％）相比差异有统计学意义（均P〈0．05）;与CC基因型相比,携带1Tr或CT基因型的个体胃癌发病危险度降低（OR=0．369,95％CI：0．204～0．659;OR=0．564,95％CI：0．387～0．830）;携带突变T碱基（CT／TT）的胃癌患者发生淋巴结转移的危险度降低（OR=0．618,95％CI：0．438～0．795;P=0．010）。讨论：miRNA-196a-2基因的C／T多态性与中国汉族人群胃癌的遗传易感性相关。     

miR-196a与ZEB2在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 探究miR-196a和E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)在结直肠癌(CRC)中的表达及临床意义。方法 收集30例CRC患者的癌组织及对应癌旁正常组织(距离肿瘤边缘>5 cm),分别采用实时定量聚合酶链式反应法和蛋白质印迹法检测组织中miR-196a和ZEB2蛋白的表达水平,分析CRC组织中miR-196a和ZEB2的表达水平与其临床病理特征之间的关系。结果 CRC肿瘤组织中miR-196a和ZEB2的表达水平分别为(1.60±0.27)、(1.40±0.26),均显著高于癌旁组组织的(1.09±0.24)、(0.89±0.29)(均P<0.001)。miR-196a与ZEB2的表达呈显著正相关(r=0.789,P<0.001);miR-196a和ZEB2的表达水平与CRC淋巴结转移、远处转移、肿瘤TNM分期显著相关(均P<0.001),与肿瘤分化程度、肿瘤大小、肿瘤所在部位无关(均P>0.05)。结论 miR-196a和ZEB2在CRC组织中均呈高表达状态,且两者的表达呈正相关;其表达水平与CRC的临床病理分期紧密相关,提示miR-196a和ZEB2可能共同参与了结直肠癌的发生发展和侵袭转移过程。     

hMSH2基因多态与乳头状甲状腺癌的遗传易感性

目的 探讨中国汉族人群中错配修复基因hMSH2多态与乳头状甲状腺癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）易感性的关系.方法 采用以医院为基础的1∶1配对病例对照研究设计;应用PIRA-PCR-RFLP和PCR-RFLP方法检测204对病例和对照的hMSH2基因多态.结果 以TT基因型为参照,拥有gIVS12-6 TC和CC基因型者,其PTC发病风险增加,OR值分别为1.48（95%CI：0.99-2.23）和2.23（95%CI：1.06-4.73）,呈现基因剂量-效应关系（χ^2趋势=6.27,P=0.012）;拥有突变基因型TC＋CC者,其PTC发病风险亦增加,OR值为1.58（95%CI：1.09-2.33）.未发现hMSH2基因-118 T＞C多态与PTC的关联,但叉生分析显示,当同时拥有gIVS12-6 T＞C和-118 T＞C位点突变基因型时,其PTC发病风险增加,OR值为1.80（95%CI：1.02-3.17）.由gIVS12-6 T＞C和-118 T＞C多态位点组成的单倍型频率在病例组和对照组具有统计学差异（P=0.046）,CgIVS12-6T-118单倍型在病例组的频率高于对照组,差异有统计学意义（P=0.036）;以TgIVS12-6T-118单倍型为参照,CgIVS12-6T-118单倍型可以使PTC的发病风险增加,OR值为1.43（95%CI：1.02-2.00）.gIVS12-6 T＞C多态与吸烟之间存在相乘交互作用,既吸烟又拥有突变纯合CC基因型者,其PTC发病风险明显增加,OR值为19.79（95%CI：1.57-24.82）.结论 hMSH2 gIVS12-6 T＞C多态能增加PTC的发病风险,同时拥有gIVS12-6 T＞C和-118 T＞C突变基因型者,PTC发病风险进一步增加,CgIVS12-6T-118单倍型可以使PTC发病风险升高,gIVS12-6T＞C多态与吸烟间可能存在相乘交互作用.     

hMSH2-118T>C基因多态性与宫颈癌易感的相关性研究

目的探讨hMSH2-118T>C基因多态性与广东汉族妇女宫颈癌易感的相关性。方法采用分子流行病学研究方法,收集113例经病理学确诊为宫颈癌的新发患者为病例组,280例年龄相匹配的健康体检者作为对照组;采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,对hMSH2基因-118T>C多态位点进行分型,采用非条件逻辑回归分析统计该多态位点与宫颈癌易感的相关性。结果病例组与对照组间基因型频率分布差异无统计学意义(P=0.91);以TT基因型作为参照,TC、CC基因型均没有显著增加个体患宫颈癌的风险(OR分别为1.10和1.14,95%CI分别为0.69-1.77和0.34-3.82)。结论 hMSH2基因-118T>C多态性与广东汉族妇女宫颈癌易感性无关。     

血清miRNA-196a、miRNA-92a表达水平与宫颈癌根治术后复发的关系

目的 探讨血清微小RNA(miRNA)-196a、miRNA-92a表达水平与宫颈癌根治术后复发的关系。方法 选取2015年1月至2016年6月甘肃省肿瘤医院收治的113例行宫颈癌根治术患者为宫颈癌组,68名体检健康女性为对照组,qRT-PCR检测两组血清miRNA-196a、miRNA-92a表达。分析宫颈癌患者血清miRNA-196a、miRNA-92a水平与临床病理特征的关系。术后随访5年,根据血清miRNA-196a、miRNA-92a水平均值将宫颈癌患者分为高表达和低表达。比较高表达和低表达宫颈癌患者复发率。多因素Cox回归分析宫颈癌根治术后复发的影响因素。受试者操作特征（ROC）曲线分析血清miRNA-196a、miRNA-92a水平对宫颈癌根治术后复发的预测价值。结果 宫颈癌组血清miRNA-196a、miRNA-92a表达高于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。不同国际妇产科联盟（FIGO）分期、间质浸润深度、淋巴结转移的宫颈癌患者血清miRNA-196a、miRNA-92a水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）。截至末次随访,113例宫颈癌患...     

miR-196a2成熟区单核苷酸多态性对靶基因LSP1表达的影响

目的:研究miR-196a2成熟区单核苷酸多态性rs11614913(T/C)对预测靶基因LSP1表达的影响.方法:构建含有不同基因型miR-196a2的真核表达载体pCDNA3.1-miR196a2-C和pCDNA3.1-miR196a2-T;同时利用化学合成含有不同基因型的成熟miR-196a2探针miR-196a2-C和miR-196a2-U.将靶基因LSP1的3'UTR序列克隆至pMIR-REPORTTM Luciferase载体中而获得LSP1报告基因载体pMIR-LSP1.采用所构建的miR-196a2真核表达载体以及化学合成的成熟miR-196a2探针分别与靶基因LSP1报告基因载体组建两套转染体系.分别共转染于HEK293、A549和CHO 三种细胞后进行荧光素酶活性分析.结果:miR-196a2真核表达载体与靶基因LSP1报告基因表达载体共转染于HEK293、A549和CHO三种细胞后进行荧光素酶活性分析.pCDNA3.1-miR196a2-C等位基因荧光素酶相对活性与pCDNA3.1-miR196a2-T等位基因相比均有显著降低(P<0.05);含不同基因型的化学合成的成熟miR-196a2探针与靶基因LSP1报告质粒共转染HEK293、A549和CHO三种细胞,miR-196a2-C等佗基因荧光素酶活性与miR196a2-T等位基因相比也有显著降低(P<0.05).结论:荧光索酶活性强弱间接反映了miR-196a2与靶基因LSP1结合能力的大小.当miR-196a2成熟区rs11614913位点为C时,miR-196a2可能更为有效地与预测靶基因LSP1结合,从而在转录后水平调控靶基因表达.     

hEXO1A238G基因多态性与宫颈癌的易感相关性研究

目的 探讨hEXO1基因多态性与广东汉族妇女宫颈癌易感的相关性.方法 采用分子流行病学研究方法,收集123例经病理学确诊为宫颈癌的新发患者为病例组,274例年龄相匹配的健康妇女作为对照组;采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,对hEXO1基因A238G多态位点进行分型,采用非条件logistic回归分析统计该多态位点与宫颈癌易感的相关性.结果 病例组与对照组间基因型频率分布差异无统计学意义(2=0.318,P=0.85);以GG基因型作为参照,AG、AA基因型均没有显著增加个体患宫颈癌的风险(OR分别为0.80和0.79,95% CI分别为0.342～1.873和0.347～1.802).结论 hEXO1基因A238G多态性与广东汉族妇女宫颈癌易感性无关.     

FAT4基因功能性单核苷酸多态性和中国江苏人群胃癌易感性相关

目的:探讨FAT4基因单核苷酸多态性与江苏人群胃癌遗传易感性的关系?方法:采用人群为基础的病例对照研究对来自江苏的783例经组织病理学确诊的胃癌新发病例和按照性别年龄匹配的855例健康对照,利用实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法对FAT4基因上非同义氨基酸多态性位点进行基因分型,比较各位点不同基因型与胃癌发病风险的关系?结果:利用Logistic回归模型在相加模型中进行了分析的结果显示,在调整性别?年龄?吸烟和饮酒等因素后,携带rs1039808 A等位基因的个体胃癌发病风险显著低于携带野生纯合子(GG)的个体(OR = 0.74,95%CI:0.62~0.88,P = 0.001)?分层分析显示,在各亚组间rs1039808不同基因型与胃癌发病风险的关联强度没有显著差异?结论:FAT4基因单核苷酸多态性rs1039808 A等位基因能显著降低胃癌发病风险?     

Polymorphism of the DNA repair gene XPA and susceptibility to lung cancer

Objective： To study the relationship between one polymorphism in the promoter of the DNA repair gene XPA and the susceptibility to lung cancer. Methods： Genotypes were determined by the PCR-restriction fragment length polymorphism （PCR-RFLP） method in 310 histologically-confirmed lung cancer cases and 341 age and sex frequency-matched cancer-free controls. Results： The XPA A23G genotype frequencies were 27.1% （AA）, 42.9% （AG）, and 30.0% （GG） in case patients and21.1% （AA）, 5218% （AG）, and 26.1% （C-G） in control subjects. Multivariate logistic regression analysis revealed that individuals carrying at least one 23G variant allele （AG ＋ GG genotypes） had a significantly decreased risk for lung cancer （adjusted OR = 0.66; 95 % CI = 0.44- 0.98） compared with the wild-type genotype （23AA）. Stratified analysis showed that the protective effect was more evident in subjects with a family history of cancer. Conclusion： These results suggest that the XPA A23G polymorphism may have a role in lung cancer susceptibility in this study population.     

miR-146a前体多态性对宫颈癌细胞增殖的影响

目的:通过转染miR-146a前体(Pre-miR-146a)多态性真核表达质粒,观察miR-146a多态性对miR-146a表达情况和宫颈癌HeLa细胞增殖能力的影响并探讨可能的作用机制?方法:PCR扩增含多态性位点的Pre-miR-146a目的片段,连接入pcDNA3.1(+)质粒表达载体得到Pre-miR-146a-G及Pre-miR-146a-C重组质粒,将重组质粒转染宫颈癌HeLa细胞?实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测miR-146a的表达,CCK8法检测HeLa细胞的增殖情况,real-time PCR以及Western blot检测miR-146a靶基因肿瘤坏死因子受体相关激酶-6(TNF receptor-associated factor 6,TRAF6)的表达?结果:成功将miR-146a多态性前体片段克隆入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,获得Pre-miR-146a-G及Pre-miR-146a-C重组质粒;转染重组质粒能够在HeLa细胞内高效和特异地表达miR-146a(P < 0.05),且转染Pre-miR-146a-C质粒组miR-146a表达量较Pre-miR-146a-G质粒组高,差异有统计学意义(P < 0.05);HeLa细胞转染重组质粒48 h后,其细胞存活率较对照组显著增加(P < 0.05),细胞内TRAF6的蛋白水平显著下降(P < 0.05),但TRAF6的mRNA水平无变化,差异无统计学意义(P > 0.05)?结论:Pre-miR-146a多态性位点能影响成熟miR-146a表达,过表达miR-146a可能通过下调TRAF6基因抑制NF-κB信号通路,从而促进HeLa细胞增殖?     

Surfactant protein a polymorphism is associated with susceptibility to chronic obstructive pulmonary disease in Chinese Uighur population

This study investigatedexamined the correlation between surfactant protein-A (SP-A) polymorphism and the susceptibility of cvhronic obstructive pulmonary disease (COPD) in Xinjiang Uighurs. Genomic DNA was extracted from peripheral blood of 194 COPD smokers and 201 healthy smokers of Uighur who were hospitalized in or paid a visit to one of the four Xingjiang-based hospi-tals involved in the study, betweenfrom March 2009 to December 2010. Single nucleotide polymor-phisms (SNPs) were studied on A/G atwithin amino acid aa62 (CCA/CCG rs1136451) and C/T within aa219 (CGG/TGG, rs4253527) in SP-A. Genotypes were determined by using the TaqMan polymerase chain reaction (PCR). Our results showed that genotype frequencies were different be-tween the COPD and normal smokers infor aa62 (χx2=6.852, P=0.033). There were also significant differences in allele genotype frequencies between the COPD and the control and allele G might de-crease the risk COPD (χx2=6.545, P=0.011; OR=0.663; 95% CI: 0.484-0.909). The result suggested We were led to conclude that polymorphism of aa62 (CCA/CCG, rs1136451) of SP-A may be asso-ciated with the susceptibility to COPD in Xingjiang Uighurs.     

miR-29a在宫颈癌组织中的表达及其上调后对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响

目的检测微小RNA（miR）-29a 在宫颈癌组织和不同种类宫颈癌细胞系中的表达情况及其上调后对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移等恶性生物学行为的影响。方法①组织标本检测：收集2014 年7 月-2016 年7 月西南医科大学附属医院活检或手术切除的宫颈组织标本160 例,采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-29a 的表达情况,并分析宫颈癌组织中miR-29a 的表达与临床病理特征的关系。②细胞学实验：采用qRT-PCR检测miR-29a在不同种类的人宫颈癌细胞系（SiHa、HeLa、Caski及C33a）和人正常宫颈细胞系Ect1/E6E7中的表达水平,选取miR-29a表达最低的宫颈癌细胞系SiHa进行后续研究,使用miR-29a mimics转染SiHa细胞,qRT-PCR检测转染后细胞miR-29a 的表达变化,CCK-8 法检测转染后细胞增殖活力的变化,流式细胞仪检测转染后细胞凋亡率的变化,Transwell实验检测转染后细胞迁移和侵袭能力的变化。结果宫颈鳞癌组织中miR-29a 表达低于HSIL、LSIL及正常宫颈组织（p <0.05）;HSIL组织中miR-29a表达低于LSIL及正常宫颈组织（p <0.05）,LSIL与正常宫颈组织间miR-29a的表达差异无统计学意义（p >0.05）。宫颈鳞癌组织中miR-29a的表达与患者临床分期和淋巴结转移密切相关（p <0.05）。miR-29a在人宫颈癌细胞系（SiHa、HeLa、Caski和C33a）中的表达低于人正常宫颈细胞系Ect1/E6E7（p <0.05）。SiHa细胞转染miR-29a mimics后,miR-29a表达水平增高（p <0.05）,细胞增殖活力降低（p <0.05）,细胞凋亡率增高（p <0.05）,细胞迁移和侵袭能力下降（p <0.05）。结论miR-29a在宫颈癌组织和细胞中均呈低表达,上调miR-29a的表达能够抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖及侵袭迁移能力,促进细胞的凋亡。     

Genetic susceptibility of cervical cancer

Epidemiological and laboratory-based studies have identified infection with one of 15 high-risk human papillo-mavirus (HPV) types as a necessary but not sufficient cause of cervical cancer. The prevalence of genital HPV in-fections is high in young women, but most of the infections regress without interventions. Host genetic variations in genes involved in immune response pathways may be related to HPV clearance, and HPV E6/E7 oncoproteins interacting or downstream genes, both coding and non-coding, may con...