天然杀伤细胞免疫球蛋白样受体的研究进展

天然杀伤细胞(NK细胞)能直接杀伤靶细胞、介导AD-CC作用及参与免疫调节。杀伤细胞免疫球蛋白样受体(K IR)是一种主要表达在NK细胞和部分T细胞表面的受体,其基因位于人染色体19q13.4,呈现高度多态性。K IR能特异性地识别细胞表面MHCⅠ类分子并与之结合,从而发挥免疫调节功能。K     

杀伤细胞受体KIRs的研究进展

自然杀伤(Natural killer,NK)细胞是骨髓来源的大颗粒淋巴细胞,NK细胞不同于T、B淋巴细胞,它不表达抗原特异性受体,其功能的发挥主要依赖于NK细胞能够表达多种能与MHC或非MHC配体结合的免疫球蛋白样受体(Killerim munoglobulin-like receptors,KIRs)KIRs为免疫球蛋白超家族成员,表达于NK细胞和某些T细胞亚群.KIRs包括抑制型和激活型受体,其通过识别表达于靶细胞上的人类白细胞抗原1(MHC-1)类分子,调节NK细胞的杀伤活性,在自身免疫性疾病、妊娠、移植、肿瘤免疫等生理病理过程中起重要的作用.     

杀伤细胞免疫球蛋白样受体和血液相关疾病研究进展

近年发现NK细胞及杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）在造血干细胞移植中与移植物抗宿主病发生关系密切。KIR一配体不合的移植在慢性粒细胞白血病患者中能减少分子和血液学的复发，不增加急性或慢性移植物抗宿主病的发病率；前B急性淋巴细胞白血病能够选择性抵抗抑制型KIR缺失（除外KIR2DL4）的NK-92的细胞毒作用。特定的KIR与配体结合对免疫介导的骨髓衰竭有易感性。本文就KIR和血液相关疾病的研究进展作一综述。     

杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因及其配体相合或错配对单倍相合骨髓移植效果的影响

本研究分析杀伤细胞免疫球蛋白样受体（killer cell Ig-like receptor,KIR）及其配体分子相合与否对单倍体相合骨髓移植效果的影响。分析了74例KIR基因及其配体分子HLA-Cw的分布频率和特点,同时比较KIR分子配体缺失与否对单倍相合骨髓移植患者总体生存、无病生存、GVHD发生以及复发等的影响。结果表明：19个KIR基因表型中2DL1、2DL4和3DL2-3在所有个体100%分布,其他高频率分布的还有3DP1（98.6%）、2DP1（98.6%）、3DL1（97.3%）、2DL3（97.3%）;抑制型基因分布频次是活化型的1.37倍;所有单倍体都含有2DL1、KIR3DL2、3DL3和2DL4,其中每个单倍体中均含有2DL2和/或2DL3。HLA-C14个等位基因中Cw7分布频率最高为37.8%;KIR2DL2/2DL3识别配体Group2（HLA-Cw1,3,7,8,13,14）组占43.2%。32例单倍相合骨髓移植中KIR基因错配发生比例为43.8%,其中9/14例为2DL不相合、5/14为2DL2或3DL1不相合;46对单倍相合骨髓移植中HLA-Cw全相合者29例,不相合者14例,HLA-Cw发生完全错配比例为30.4%,全相合比例为63.4%。14例KIR基因不相合和13例KIR基因相合移植病例中,KIR基因相合组生存率高于KIR基因不相合者（p=0.032）;17例KIR分子配体HLA-Cw不相合移植患者的DFS明显高于24例相合者（p=0.024）。按供受者KIR配体是缺失的GVHD矢量组生存率高于非GVHD矢量组（p=0.015）。急性重症GVHD发生与活化型KIR2DS1/2DS2有关,2DS1/2DS2不相合组高发急性重症GVHD同时复发减低,而2DS1/2DS2相合组低GVHD但是复发增多。14例KIR配体不相合髓系白血病患者骨髓移植后1例复发死亡,而12例KIR配体相合组患者有4例复发死亡。结论：单倍体相合骨髓移植的主要特点就是HLA不全相合,KIR基因表型不一致性及其配体缺失也是其主要免疫学特征,供者型KIR配体的缺失与移植效果有密切关系,在单倍相合移植中分析KIR基因及其配体对于供者选择和判断预后有重要意义。     

KIR的检测技术及其与自身免疫病的研究进展

杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell Ig-like receptor,KIR)是位于天然杀伤细胞(natural killer cell,NK)及部分T细胞表面的一种Ig样受体,具有高度多态性。KIR与其配体MHC-I及相关分子结合、相互作用,可调节自身活化阈值,决定NK细胞的活化或者抑制。KIR的检测方法正向高通量、快速、准确方向发展。部分自身免疫病现已证明与KIR及其受体的多态性有关。     

体外不去T细胞单倍体造血干细胞移植后NK细胞免疫球蛋白样受体重建的影响因素

目的探讨造血干细胞移植（HSCT）后早期NK细胞免疫球蛋白样受体（KIR）恢复的影响因素。方法借助三色和四色荧光标记技术，用流式细胞术对24例行体外不去T细胞的HLA不相合HSCT的患者（移植前、＋30天、＋60天）及其供者外周血中NK细胞KIR的表达进行了测定，包括CD158a（KIR2DL1）、CD158b（KIR2DL2）和CD158e（KIR3DL1）；同时用流式细胞术对移植物中CD3、CD4、CD8、CD14、CD34的含量进行了测定。结果发生Ⅱ～Ⅳ度急性移植物抗宿主病（aGVHD）患者在＋30天NK细胞KIR的表达明显低于0～I度aGVHD患者，CD158b[分别为（19．27±9．40）％和（28．92±10．59）％，P=0．018]和CD158aCD158b[分别为（7．30±4．73）％和（14．26±9．71）％，P=0．016]尤为显著。多因素分析表明移植物中CD4^＋T细胞是引起aGVHD的危险因素。进一步的相关分析表明每千克体重输入的CD4^＋T细胞数与移植后早期NK细胞上CD158a、CD158aCD158b和CD158e的表达呈明显的负相关。结论体外不去T细胞的HLA不相合的HSCT中，不仅移植后aGVHD的发生或其相应的治疗措施抑制了移植后早期NK细胞上KIR的恢复；而且移植物中T细胞也直接或间接影响了移植后早期NK细胞上KIR的重建，进而影响了NK细胞功能的恢复。     

自建NK细胞表面受体KIR2DS1基因mRNA表达的方法及验证

摘要:目的：建立检测NK细胞表面免疫球蛋白样受体基因 KIR2DS1 mRNA表达水平的荧光定量PCR方法并评价其性能。 方法：以行异基因造血干细胞移植的供患者共57对为研究对象，针对 KIR2DS1 基因设计特异性引物及探针，构建TaqMan-MGB荧光定量PCR反应体系，并评价该实验方法的性能，包括：总符合率、重复性、灵敏度及仪器适用范围、技术人员再现性。 结果：以KIR-SSO基因定性分型法为金标准，通过检测其中35例样品，荧光定量PCR方法对 KIR2DS1 基因阳性及阴性检测率均为100%。在重复性试验中，选取Ct值分别为高、中、低值3个样品的批内、批间CV分别为0.09%～0.46%、0.71%～1.13%。该方法的灵敏度达10² copies/μL，且对拷贝数为10² copies/μL的3个样品进行5次重复试验的CV分别为5.37%、2.71%、5.51%。仪器比对结果显示，参比仪器ABI-7500与实验仪器LC-480之间的拟合直线回归方程为Y=0.973 6X+0.118 3（R²=0.961 9，R²＞0.95）。2名技术人员对10个 KIR2DS1 基因阳性样品的再现性比对试验结果显示其偏倚（%）均＜±5%。 结论：建立了TaqMan-MGB荧光定量PCR检测 KIR2DS1 mRNA表达水平的检测方法，其性能良好。     

浙江汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性研究

本研究的目的是分析浙江汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）基因的多态性及基因型.采用序列特异性引物PCR法（PCR-SSP）进行KIR基因低分辨率检测和基因型分析.结果表明：①在浙江汉族人群中共检出目前已知的17个KIR基因.2DL4、3DL2和3DL3基因存在于所有个体,其基因频率为1.00.2DL1、2DL3、2DP1、3DP1＊003、3DL1、2DS4＊001/002基因较为常见,频率分别为0.902、0.902、0.902、0.902、0.7598、0.5615;而2DL2、2DL5A、2DL5B、2DS1、2DS2、2DS3、2DS4＊003、2DS5、3DS1和3DP1＊001/002基因频率较低.②浙江汉族人群中以A型单倍型为主,频率高达74.7%.在检测样本中共明确检出12种单倍型,最常见的是单倍型2,频率为53.0%.③共检出26种基因型,最常见为AJ（2,2）、AF（1,2）型,其次为AH（2,5）、NN2（2,6）、AI（1,5）和AG（1,1）.其中有15种基因型在白人中尚未见报道,4种基因型无法根据相关文献标准分析出单倍型.结论：浙江汉族人群有其独特的KIR基因频率和基因型频率分布.     

杀伤细胞免疫球蛋白样受体对造血干细胞移植的影响

自然杀伤(NK)细胞表面的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR),可通过与人类白细胞抗原(HLA)相互作用,影响NK细胞活性,进而影响异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的预后.在去T淋巴细胞allo-HSCT中,KIR/HLA错配的异源反应性NK细胞,在抗急性髓细胞白血病(AML)中发挥了重要作用;而未去T淋巴细胞allo-HSCT中,KIR/HLA错配对患者预后影响迥异.研究者提出,在自体造血干细胞移植(auto-HSCT)中也存在移植物抗白血病(GVL)效应,并且患者存在不同KIR对移植预后影响不同.笔者拟就KIR/HLA错配在造血干细胞移植中作用的研究进展进行综述.     

杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因检测专家共识

杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因家族具有复杂的遗传多态性，既有等位基因水平的多态性，同时还存在KIR单体型组成、基因拷贝数的差异性。为了规范KIR基因检测，中国输血协会人类组织抗原专业委员会与深圳市血液中心组织专家依据国内外文献和实践经验，制定了此专家共识，对KIR基因多态性检测方法、质量控制、检测报告和应用等进行了阐述，旨在提高KIR基因检测的准确性。     

杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性与宫颈癌的相关性分析

摘要:目的：探讨杀伤细胞免疫球蛋白（Ig）样受体(KIR)基因多态性与宫颈癌的相关性。 方法：收集167例宫颈上皮内瘤变3级(CIN3)/宫颈癌患者和163例年龄匹配的无血缘关系健康女性外周血标本。采用SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR分析KIR基因及基因型频率在两组人群间的差异。 结果：CIN3/宫颈癌组的KIR2DL2和2DS2基因频率低于健康人对照组（10.2% vs 28.8%, P=0.000; 9.6% vs 25.2%, P=0.000）。KIR2DL2/2DS2共表达个体的频率在病例组低于健康人对照组（9.0% vs 22.7%, P=0.001), 与降低疾病的患病风险有关（OR=0.336）。基因型AA1和BX8与增加CIN3/宫颈癌的患病风险有关（49.1% vs 35.6%, OR=1.746,P=0.013; 10.8% vs 4.3%, OR=2.692,P=0.026）,而BX4与降低疾病的患病风险有关（2.4%vs 7.4%, OR=0.309,P=0.036）。 结论：KIR2DL2/2DS2对宫颈癌的发生可能具有保护性作用。     

细胞免疫激活对杀伤细胞抑制性受体(KIR) P58+细胞的影响

本研究的目的是观察细胞免疫激活对P5 8基因表达的影响 ,探讨免疫激活与抑制的相互调节关系 ,为临床干细胞移植后的移植物抗宿主病 (GVHD)防治提供理论依据。用IL 2 ,膜抗原 (LP)和ConA分别或联合与人外周血单个核细胞培养 72小时 ,流式细胞术分析单个核细胞中总P5 8.1+ ,P5 8.2 + 细胞及CD3+ ,CD4 + ,CD8+ 和CD16 + CD5 6 + 细胞亚群中的P5 8.1+ 和P5 8.2 + 细胞比率变化。结果发现 ,IL 2 ,LP和ConA分别均可使CD3+ ,CD4 + ,CD8+ 和CD16 + CD5 6 +细胞比率增加 (P <0 .0 1) ,IL 2 ,LP和ConA联合与人外周血单个核细胞培养 72小时有协同刺激P5 8基因表达的作用 (P <0 .0 5 )。结论 :IL 2 ,LP和ConA均可在激活细胞免疫的同时刺激P5 8基因表达或P5 8.1+ 和P5 8.2 + 细胞增殖 ,表明P5 8基因的表达受免疫激活因子调控 ,存在激活诱导表达机制。     

特发性血小板减少性紫癜患者治疗前后CD8^＋T细胞的KIR 3DL1表达改变

目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体3DL1（KIR 3DL1）与特发性血小板减少性紫癜（ITP）发病的相关性。方法采用流式细胞术检测38例ITP患者治疗前、缓解后及20例对照组外周血CD8^＋T细胞表面KIR 3DL1的表达。结果ITP患者治疗前外周血CD8^＋T细胞KIR 3DL1（中位数=2．30％,四分住数=1．71％）表达低于ITP患者缓解后（中住数=3．11％,四分位间距：2．18％）,差异有统计学意义（Z=3．95,P〈0．05）;ITP患者治疗前外周血CD8^＋T细胞KIR 3DL1表达亦低于对照组（中位数=4．03％,四分位间距=2．47％）,差异有统计学意义（Z=3．45,P〈0．05）。结论ITP患者外周血CD8^＋T细胞KIR 3DL1表达下调,血小板破坏增加。KIR 3DL1在ITP发病中起一定作用。     

免疫活性细胞表达杀伤细胞抑制性受体与造血干细胞移植后移植物抗宿主病的关系

本研究的目的是探讨造血干细胞移植后杀伤细胞抑制性受体(KIR)CD158和CD94与GVHD发生的关系。用流式细胞术检测分析T淋巴细胞和NK细胞表达CD158a，CD158b和CD94表达状况，同时用PCR方法分析供受HLA—Cw配型，比较异基因外周血造血干细胞移植(allb-PBSCT)和脐血移植(UCBT)后该KIR分子变化和HLA—Cw相合或错配与GVHD发生的关系。结果表明：无论是PBSCT或是UCBT，移植后CD3^ CD158a^ 和CD3^ CD158b^ T细胞均增高并以CD8^ CD158b^ 细胞升高为主。发生急性与慢性GVHD组CD3^ CD158b^ 细胞均呈不同程度升高，在急性GVHD病例中升高最明显。急性GVHD期(即移植早期)KIR表达增高，慢性GVHD阶段(即移植后期)KIR呈减低趋势。CD94主要表达于CD3^ CD8^ T细胞，在UCBT或PBSCT后CD94在CD4^ T细胞和CD8^ T细胞均明显增高。5例HLA—Cw相合无1例发生重症GVHD；2例HLA—Cw不相合病例，有1例发生急重症GVHD，并死于间质性肺炎(IP)，另1例为AML(M5)，完全植入，无重度GVHD发生，但于53天后复发。4例相关相合移植中2例无急性GVHD，而无关相合4例均发生不同程度GVHD。结论：GVHD的发生与KIR表达有一定关系。CD158b分子可能是移植后早期T淋巴细胞活化的负调控分子。从T细胞表达KIR来理解GVHD发生机理，特别是与HLA-Cw特异性识别结合将有利于寻找一条新的特异性建立免疫耐受和减低GVHD的新策略。     

杀伤细胞免疫球蛋白样受体与肿瘤相关性的研究进展

杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)定位于19号染色体白细胞受体复合物(LRC)100～200 kb区域.在功能上KIR分为抑制性与活化性受体,主要表达在自然杀伤(NK)细胞表面.肿瘤细胞可通过下调细胞表面HLA分子的表达,躲避NK细胞的杀伤作用.KIR分子则通过与人类白细胞抗原(HLA)分子结合传导抑制性与活化性信号,...     

杀伤细胞免疫球蛋白样受体在造血干细胞移植中的作用

杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)是自然杀伤(NK)细胞表达的重要受体.KIR与其配体HLA-Ⅰ类分子之间的相互作用对NK细胞的杀伤作用及移植预后有着重要影响.本文主要对KIR、KIR与HLA相互关系以及对移植的影响作一综述.     

去甲基化处理对NK-92MI细胞系抑制性受体KIR表达的影响

为分析NK细胞系NK-92MI细胞中抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体（killercellimmnoglobulin-likere—ceptor,KIR）的基因启动子区的甲基化模式及去甲基化处理对基因表达的影响,探讨基因kir可能的表达调控机制,采用亚硫酸氢盐测序法检测NK-92MI细胞kir2DL1和kir2DL2／2DL3基因启动予区的甲基化水平,应用甲基化抑制剂5-氮胞苷处理NK-92MI细胞以诱导CpG岛去甲基化,RT—PCR方法检测其基因表达。结果显示：kir2DL1和kir2DL2／2DL3基因启动子区CpG二核苷酸甲基化频率依次在25％-88％、5％-80％之间;应用甲基化抑制剂5-氮胞苷可以诱导NK-92MI细胞重新表达kir2DL1基因,并使kir2DL1、kir2DL2和kir2DL3基因表达量增加。结论：启动子甲基化参与调控NK-92MI细胞基因kir表达。     

中国汉族人群骨肿瘤杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性初步分析

目的:探讨中国汉族骨肿瘤患者发病与自然杀伤细胞(NK)免疫球蛋白样受体(KIR)多态性的相关性。方法:采用PCR/SSP法检测57例汉族原发性骨肿瘤患者外周血中KIR的表达。所有病例均经临床和病理确诊,其中恶性骨肿瘤30例,良性骨肿瘤13例,骨巨细胞瘤14例。87名上海地区无血缘关系的随机健康个体为正常对照。结果:骨巨细胞瘤组KIR3DL1基因频率较正常对照组降低(54.0%比100.0%,P<0.001)。而在良性及恶性骨肿瘤组中,未发现KIR基因频率与正常对照组间有统计学差异。各病例组与对照组之间未发现KIR单倍型频率有统计学差异。与正常对照组比较,AE基因型频率在恶性骨肿瘤组中升高(16.7%比3.5%,P<0.05);AE和B基因型在良性骨肿瘤组中升高〔分别为23.1%比3.5%(P<0.05)和7.7%比0%(P<0.05)〕;AN和F基因型在骨巨细胞瘤组中升高(均为7.1%比0%,P<0.05)。结论:KIR3DL1与中国汉族人骨巨细胞瘤发生呈负相关,该基因表达缺失可能易致骨巨细胞瘤发生。同时,AE、B、AN和F等KIR基因型可能与骨肿瘤的发生也具一定相关性。     

杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多样性与中国南方汉族人群鼻咽癌相关性的研究

本研究探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因多样性与中国南方汉族人群鼻咽癌的相关性。采用序列特异性引物-PCR(PCR-SSP)方法,对67名临床诊断为鼻咽癌(NPC)的南方汉族患者的血样和77例随机健康对照组血样进行KIR基因定型,并采用Wolf法计算相对危险度值。结果表明,与对照组相比KIR2DL3基因频率在患者组显著降低(χ2>3.84,p<0.05,RR=0.08),具有统计学差异;KIR2DS5和KIR2DL5B基因频率在患者组显著升高(χ2>3.84,p<0.05,RR值均>1),具有统计学差异,而其它各KIR基因频率差异无统计学意义。结论 :南方汉族人群NPC患者中KIR2DL3、KIR2DS5和KIR2DL5B基因可能与NPC发病相关。