基于腺相关病毒载体的癌症免疫治疗研究进展

腺相关病毒(Adeno-associated virus, AAV)载体因其出色的基因传递能力和安全性已经成为基因治疗领域的重要工具。近年来，将AAV载体用于癌症免疫治疗已成为一个新的热点研究方向，主要包括以下几个方面：一是基于AAV载体的新型肿瘤疫苗的开发，通过AAV载体表达肿瘤相关抗原，激活机体的特异性抗肿瘤免疫反应；二是AAV载体介导的免疫细胞修饰，通过AAV载体对免疫细胞进行编辑并用于过继性细胞治疗；三是AAV载体介导的细胞因子的传递，通过AAV载体持续表达抑制肿瘤生长的细胞因子，调节肿瘤微环境和免疫平衡。这些策略均展现出了良好的应用前景，但在实际应用中也存在着一些挑战，如免疫消除、转导效率低等问题。文章将对近年来基于AAV载体的肿瘤免疫治疗的研究进展进行综述，并总结研究中存在的挑战及未来发展方向，以期对这一拥有广泛前景的领域的研究提供参考。     

腺相关病毒载体与基因治疗的研究进展

腺相关病毒(AAV)是基因治疗中最有希望的载体之一,它具有非致病性、对宿主免疫原性弱及广泛的细胞和组织亲嗜性等优点.本文着重探讨了AAV的血清分型与高滴度表达抑制转录因子的重组AAV的制备,并综述了AAV在基因治疗糖尿病及心血管病中的最新研究进展.     

遗传性视网膜疾病基因治疗的研究进展

遗传性视网膜疾病(IRD)是造成患者不可逆视力丧失或失明的重要原因,其预后差,临床缺乏有效的干预手段。基因治疗药物为该类疾病治疗创造了新的可能。腺相关病毒(AAV)是目前基因治疗中应用较广泛、较有前景的病毒载体之一。该文简述了AVV载体眼部应用的可行性,重点阐述了应用AAV递送系统治疗IRD的临床前及临床进展,并结合取得的数据评估其安全性及有效性。最后总结了基因治疗IRD的影响因素,展望今后的研究方向,以期为IRD治疗技术创新、AAV载体后续产品研发提供参考。     

基于AAV-ITR的基因表达微载体

常用的基因治疗表达载体有病毒表达载体和质粒表达载体,这两类传统基因治疗载体含有大量病毒或细菌DNA序列,会引发人体较严重的免疫反应、细胞炎症、细胞毒性副作用、以及基因表达沉默化,是基因治疗应用于人类疾病治疗的一大障碍。项目构建了一种新型的、基于腺相关病毒(AAV)倒置末端重复序列(ITR)的基因表达单链微载体(AAV-ITR mini vector),并用GFP基因作为报告基因。通过热变性的方法制备单链DNA,然后将带有GFP的质粒、双链DNA载体、AAV-ITR基因表达微载体转入真核表达细胞,采用荧光显微镜观察和流式细胞仪检测等较为简单的方法来检测其表达效率。实验结果显示,AAV-ITR基因表达微载体在293T细胞中具有较高的转染、表达效率,并且具有类似AAV病毒载体的特性。该研究结果将有助于进一步研发类似于AAV病毒载体的安全、无免疫原性的人造基因治疗载体。     

传递EPO基因的AAV载体技术

美国Avigen公司的研究者开发了一项基因治疗技术,即在小鼠中长期表达人红细胞生成素(EPO).此项研究是用Avigen公司的腺病毒伴随病毒(AAV)载体将EPO基因引入小鼠,EPO是一种能刺激红细胞生成的蛋白质.单剂肌肉注射携带EPO基因的AAV载体能使小鼠血清中的人EPO水平升高.并增高红细胞水平.这些水平在6周内逐渐升高,并在此后8个月中保持稳定.此项研究除了证实AAV载体的效力外,还显示了EPO基因治疗的潜力,它可取代EPO用于治疗肾功能衰竭、艾滋病或化疗引起的贫血.     

腺病毒载体用于基因治疗的研究进展

基因治疗作为一种新兴的医疗手段,为人类疾病治疗开辟了一条新的途径.基因治疗最关键的问题之一是要选择合适的载体以使治疗基因安全、高效地导入靶细胞.腺病毒(adenovirus, Ad)因具有诸多优点而作为基因治疗中应用最广泛的运载工具,特别是用于肿瘤基因治疗,然而其缺点在一定程度上限制了作为载体的应用.近几年来,随着对腺病毒分子结构与感染机制的进一步深入研究,人们对原有的腺病毒载体进行了一些改进,取得了很好的效果.因此,如何能有机地结合多项改进策略,最大限度地提高腺病毒载体在今后临床应用中的高效性、安全性将是未来研究的重点.本文就基因治疗中腺病毒载体的特点以及改造取得的一些进展做一综述.     

在肠道中生产重组蛋白

美国Somatix治疗公司已获得许可拥有耶鲁大学开发的、用腺病毒伴随病毒(AAV)载体在分裂和未分裂细胞中存放DNA的技术.公司计划用AAV载体将基因传递给消化道细胞,这些细胞在体内产生治疗性蛋白,直接把它释放到循环系统中.AAV不致病,但能感染消化道衬细胞,包括直接位于循环床上的细胞.此项技术可用于生产凝血因子Ⅷ和Ⅸ等蛋白,将上述蛋白基因插入AAV载体,被血友病患者摄入后,释放到胃肠道粘膜中.肠道毛细血管侧细胞就产生凝血因子,虽然有些凝血因子可能被消化酶破坏,但是应有足量凝血因子直接进入循环系统.由AAV载体传递的基因在靶细胞中的表达能持续4～12个月,意味着血友病患者每年仅需重复治疗数次即可保持增高的因子Ⅷ和Ⅸ水平.推测口服AAV可将肿瘤相关抗原(TAA)基因序列传递给肠道细胞,一旦这些细胞把特定的TAA分泌到血流中,这种抗原就可在病人体内引起对携有TAA的肿瘤的免疫应答.     

靶向基因转移系统的研究进展

基因治疗已在治疗多种人类重大疾病如遗传病、肿瘤等方面显示出良好的应用前景,但也面临着巨大的挑战,主要是如何选择安全、高效、靶向的载体系统。基因治疗的靶向性研究近年来取得了许多新的进展,如应用重组病毒载体,借助抗体或配体将治疗基因定向导入靶细胞。纳米生物材料由于其良好的生物安全性,可方便有效地实现基因的靶向性及高效表达,成为制备高效、靶向的基因治疗载体系统的良好介质,在基因治疗载体系统中日益受到广泛重视。本文综述了目前国内外在靶向基因转移系统中的最新研究进展。     

基因治疗在肾脏疾病中的应用进展

基因治疗是利用DNA重组和基因转移技术在基因水平对疾病进行治疗的一种方法。目前用作基因治疗载体的主要有病毒载体、细菌载体、人工载体和脂质体载体等。病毒载体常用的是逆转录病毒、腺病毒(Ad)、腺相关病毒(AAV)、慢病毒和单纯疱疹病毒(HSV)。细菌载体和人工载体则还处于研究阶段。     

腺病毒载体研究新进展

与其他真核基因表达载体相比,腺病毒载体在基因治疗方面已显示出独特优越性,并被广泛研究和应用.但由于未经改进的腺病毒载体往往诱导机体产生破坏性细胞免疫应答,从而导致重组腺病毒在体内表达短暂.近年来,一些新型腺病毒载体和宿主细胞系相继问世,腺病毒载体在基因治疗方面的应用也日益广泛,并成为基因治疗研究的焦点之一.一些进展主要表现在尽可能缺失更多的腺病毒基因并建立相应的互补细胞系.本文就近年来腺病毒载体的最新研究进展作一介绍.