卵巢癌患者血清胸苷激酶1水平及其临床意义

目的 探讨卵巢癌患者血清胸苷激酶1(TK-1)水平及其临床意义。方法 研究2010年3月~2014年6月重庆市北部新区第一人民医院及重庆市西南医院就诊的初治卵巢癌患者116例(卵巢癌组),选择同期卵巢良性肿瘤患者54例(卵巢良性肿瘤组)及健康体检者56例(健康对照组)。记录三组一般情况、临床特征等资料,采集血清检测TK-1及CA125水平。对接受治疗患者定期随访,观察无进展生存情况。对影响无进展生存时间的危险因素进行多因素Logistic回归分析。采用Pearson和Spearman系数进行各指标间的相关性分析。结果 卵巢癌组患者TK-1[(4.89±1.85)pmol/L]及CA125[(647.08±208.83)pmol/L]水平显著高于卵巢良性肿瘤组[(0.59±0.23)、(22.71±9.62)pmol/L]及健康对照组[(0.61±0.20)、(22.11±9.94)pmol/L],且临床分期越高TK-1水平越高,有远处转移患者TK-1较无转移更高(均P<0.01)。血清TK-1与CA125水平及临床分期呈正相关(r=0.657、0.567,均P<0.01)。初始高TK-1水平(≥4.00 pmol/L)患者远期(30个月)无进展生存比率较低TK-1水平(<4.00 pmol/L)患者更低,差异有统计学意义(P=0.011)。临床分期、初始CA125及TK-1水平是无进展生存时间的负性影响因素。结论 卵巢癌患者血清TK-1显著升高,与临床分期及CA125水平相关。初始高TK-1水平预示预后较差,高临床分期、初始高CA125及TK-1水平影响治疗后无进展生存时间。     

卵巢癌患者联合检测血清TK1、CA125的临床价值

目的探讨血清胸苷激酶1（TK1）、糖类抗原125（CA125）联合检测对卵巢癌患者诊断的临床价值。方法采用免疫增强化学发光法对82例卵巢癌患者（卵巢癌组）、46例良性卵巢疾病患者（良性组）及35例健康体检者（对照组）血清TKl的浓度进行检测;采用化学发光法对上述各组标本进行血清CA125的浓度进行检测,并对检测结果进行统计分析。结果卵巢癌组的血清TK1、CA125水平均显著高于良性组及对照组（P〈0．01）。两项指标联合检测,其敏感性和特异性显著高于单项检测（P〈0．05）。结论血清TK1、CA125的水平对卵巢癌的诊断具有重要价值,两种标志物联合检测效果更佳。     

胸苷激酶1在上皮性卵巢癌诊断中的应用

目的探讨胸苷激酶1在上皮性卵巢癌术前诊断中的应用价值。方法选取2014年1月至2015年10间在安徽医科大学第一附属医院妇产科就诊的上皮性卵巢癌患者100例,另选取门诊女性健康体检者33例作为对照组,依据病理诊断和临床分期进行分组,其中门诊健康者(A组)33例作为对照组,上皮性卵巢癌Ⅰ期(B组)35例,上皮性卵巢癌Ⅱ期(C组)34例,上皮性卵巢癌Ⅲ期(D组)31例,所有病例均测量外周静脉血胸苷激酶1的浓度,统计各组患者胸苷激酶1数值,分析各组数据间差异。结果胸苷激酶1浓度在A、B、C、D四组分别为(0.963±0.36)pmol/L、(1.68±1.48)pmol/L、(2.96±2.17)pmol/L、(4.60±2.59)pmol/L,A组浓度值较B、C、D低,B组较C、D组低,C组较D组低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论上皮性卵巢癌患者的胸苷激酶1浓度较健康者升高,并与患者临床分期呈正比。     

血清HE4和TK1及CA199联合检测对卵巢癌的诊断分析

目的 探究血清HE4、TK1、CA199联合检测用于卵巢癌临床诊断中的价值和意义.方法 选取2018年2月至2019年11月本院妇产科收治的77例患者作为研究对象,以患者术后病理组织结果为依据分为实验一组(n=40)和实验二组(n=37).实验一组为卵巢癌患者,实验二组为卵巢良性疾病患者,另选择同期本院体检的40名健康...     

HSV1—TK逆转录病毒载体构建及表达

目的 构建含TK基因逆转录病毒载体并检测其在转染细胞中的表达，为肺癌基因治疗积累实验资料。方法 从PHSV106质粒中切下约2．4kbTK基因片段，插入逆转录病毒载体PLXSN多克隆位点，酶切筛选正、反向连接质粒。正向连接子电穿孔法转化肺癌细胞A549，用PCR、细胞原位杂交法分别检测TK基因整合和表达。结果 经酶切鉴定得到正向连接子、电穿孔法转导A549细胞，经G418筛选出了转基因细胞，TK基因已整合在转染细胞中并阳性表达。结论 成功构建了TK基因逆转录病毒载体，转导该载体的肺癌细胞可表达TK基因。     

癌超甲基化基因1与卵巢癌基因1在卵巢癌组织中的表达及意义

目的探究癌超甲基化基因1(HIC1)与卵巢癌基因1(OVCA1)在卵巢癌组织中的表达及意义。方法选择2012年‐2015年该院收治的35例手术切除且未经放、化疗的卵巢癌患者(恶性组),选择交界性卵巢肿瘤(交界性组)、良性卵巢肿瘤(良性组)及正常卵巢组织者(正常组)各20例作为对照组。分析以上4组卵巢组织中HIC1及OVCA1蛋白的表达,以及卵巢癌各临床病理特征组织中HIC1及OVCA1蛋白的表达。结果在HIC1蛋白表达量方面,组间比较具有统计学差异(P0.05);在OVCA1蛋白表达量方面,组间比较具有统计学差异(P0.05);HIC1蛋白表达量在不同卵巢癌病理类型、病理分级、病理分期中表达差异均无统计学意义(P0.05);在OVCA1蛋白表达量方面,Ⅲ、Ⅳ期显著低于Ι、Ⅱ期;不同卵巢癌病理分级和病理类型OVCA1蛋白表达量差异无统计学意义(P0.05)。结论在卵巢癌、卵巢良性肿瘤和交界性肿瘤中,HIC1蛋白、OVCA1蛋白表达存在差异,这些蛋白表达水平下调均可能参与卵巢癌发生和发展过程。     

沉默PARP-1对卵巢癌上皮细胞耐药性及肿瘤相关生物学行为的影响

目的 研究探讨沉默聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP-1)后,卵巢癌上皮细胞对顺铂药物的敏感性及相关生物学行为的变化。 方法 以人卵巢癌细胞株A2780为研究对象,采用小RNA干扰技术,沉默PARP-1的表达后,采用Western blot实验、RT-PCR实验、MTT实验等观察PARP-1蛋白、mRNA的表达及细胞存活率的变化趋势,采用方差分析进行比较。 结果 PARP1小RNA干扰序列(PARP1-siRNA)转染组PARP-1 mRNA表达量明显低于A2780组和阴性对照组接种转染组(NC-siRNA),3组PARP-1 mRNA表达量分别为(45.22±3.99)%、(24.13±5.24)%、(46.28±6.19)%(P＜0.05);PARP1-siRNA转染组PARP-1蛋白表达IOD值明显低于A2780组和NC-siRNA转染组(P＜0.05);与0 μmol/L相比,5 μmol/L和10 μmol/L组的PARP-1蛋白表达IOD值明显降低(P＜0.05);随着顺铂浓度的增高,PARP1-siRNA转染组的细胞存活率下降的速度最快。 结论 PARP1-siRNA转染明显下调人卵巢癌细胞株A2780的PARP-1表达后,该细胞对顺铂药物的敏感性增强,细胞的存活率明显下降。      

卵巢上皮性癌患者血清TK1浓度的检测及临床意义

目的 观察卵巢癌患者血清细胞质胸苷激酶(TK1)浓度的变化,初步探讨其临床意义.方法 免疫印迹增强发光法检测30例卵巢良性上皮性肿瘤、75例卵巢上皮性癌、40名健康妇女血清TK1浓度.结果 41.33%(31/75)宫颈癌患者患者血清TK1为阳性,平均浓度为(2.99±1.09) pM,显著高于卵巢良性肿瘤组或健康对照组(P<0.05);宫颈癌患者TK1浓度随临床分期的进展而增高,Ⅲ-Ⅳ患者的血清浓度出率高于Ⅰ、Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);术后宫颈癌患者血清TK1浓度为(1.09±0.31) pM,与术前相比显著降低(P<0.05).结论 血清TK1浓度对宫颈癌患者的诊断、预后及疗效的评价具有潜在的应用价值.     

耐药性卵巢癌的治疗

卵巢癌目前仍然是严重威胁女性生命的恶性肿瘤之一.因之难以早期发现,超过70%的患者诊断时已属于晚期.其规范治疗手段为肿瘤细胞减灭术后辅以多疗程联合化疗.多数(60%～75%)患者对初期治疗有反应而使其近期生存显著提高.但绝大多数患者终将复发并对化疗药物失去反应,即化疗耐药,这是最终影响卵巢癌患者长期生存的重要原因.因而,研究肿瘤产生耐药的机制,并在临床上预防耐药、对抗耐药并尝试逆转耐药就成为当前卵巢癌治疗中的热点和难题,成为提高卵巢癌的治疗率、改善卵巢癌患者生存的重要目标之一.     

CDH1基因与卵巢癌

目的:卵巢癌死亡率居于女性生殖器官肿瘤之首,是严重影响妇女生命健康的重要疾病,而卵巢癌的转移则更是直接造成患者死亡的主要因素。近年来,针对肿瘤的发生和转移有较多的研究,其中E型钙粘蛋白(E-cadherin,CDH1)与卵巢癌的关系越来越受关注,CDH1的结构变化及异常表达可以影响卵巢癌的发生与发展,并与其转移也存在着紧密的关系。本综述在检索近年最新文献的基础上,对CDH1基因的改变与卵巢癌的发生、发展及转移机理关系上进行了详细的阐述,为转移性卵巢癌的诊断及治疗提供新的研究思路。     

凋亡相关基因及蛋白的表达与人卵巢癌细胞顺铂耐药的关系

目的探讨COC1/DDP和COC1中凋亡相关基因及凋亡相关蛋白的表达与人卵巢癌顺铂耐药的关系。方法采用流式细胞仪检测不同浓度顺铂作用于COC1及COC1/DDP细胞48h后细胞凋亡率;RT-PCR及Western blot法检测凋亡相关基因及蛋白Bcl-2、Caspase-3、Smac和Survivin在COC1和COC1/DDP中的表达。结果DDP作用于COC1和COC1/DDP细胞48h后细胞随着DDP浓度的升高,凋亡率也相应增高。COC1/DDP中抗凋亡基因及蛋白Bcl-2、Survivin的表达明显高于COC1。COC1/DDP中促进凋亡的基因及蛋白Smac、Caspase-3的表达明显低于COC1。结论在COC1/DDP中抗凋亡基因及蛋白Bcl-2、Survivin的高表达以及促进凋亡的基因及蛋白Smac和Caspase-3的低表达可能参与COC1/DDP对DDP耐药的发生机制。     

MDR1 and MDR3 Genes and Drug Resistance to Cisplatin of Ovarian Cancer Cells

To investigate the relationship between MDR1 and MDR3 gene and drug resistance to cisplatin of ovarian cancer cells. Two siRNAs (MDR1, MDR3) which specifically targeted MDR1 and MDR3 genes were transfered into A2780/DDP cells. Then double staining with Annexin- V-FITC/PI was used to detect cell apoptosis by the flow cytometry (FCM). A2780/DDP cell viability was determined by MTT. MDR1 and MDR3 mRNA were assessed by RT-PCR. Caspase-3 protein was detected by Western blotting. Transfection of MDR1 and MDR3 siRNA into A2780/DDP cells failed to reverse the drug-resistance of A2780/DDP cells to cisplatin (P>0.05). No significant differ- ence in the apoptosis efficiency was observed between the MDR1 and MDR3 siRNA, pSuppressor- Neo vector transfection cells and untreated cells (P>0.05). In the presence of cisplatin of different concentrations, the viability of A2780/DDP cells was not significantly decreased after the transfection. No changes in MDR1 and MDR3 mRNA were found in MDR1 and MDR3 siRNA-transfected A2780/DDP cells. As compared with pSuppressorNeo and untreated groups, no significant difference existed in the expression of MDR1 and MDR3 mRNA (P>0.05). The expression of caspase-3 protein in MDR1 and MDR3 siRNA transfected A2780/DDP cells was not significantly increased. It is con- cluded that multidrug resistance induced by cisplatin in ovarian carcinoma cell lines is not due to overexpression of MDR1 and MDR3 gene. The drug resistance of ovarian carcinoma cells to cisplatin is not mediated by P-glycoprotein.     

MDR1 and MDR3 genes and drug resistance to cisplatin of ovarian cancer cells

Summary To investigate the relationship between MDR1 and MDR3 gene and drug resistance to cisplatin of ovarian cancer cells. Two siRNAs (MDR1, MDR3) which specifically targeted MDR1 and MDR3 genes were transfered into A2780/DDP cells. Then double staining with Annexin-V-FITC/PI was used to detect cell apoptosis by the flow cytometry (FCM). A2780/DDP cell viability was determined by MTT. MDR1 and MDR3 mRNA were assessed by RT-PCR. Caspase-3 protein was detected by Western blotting. Transfection of MDR1 and MDR3 siRNA into A2780/DDP cells failed to reverse the drug-resistance of A2780/DDP cells to cisplatin (P>0.05). No significant difference in the apoptosis efficiency was observed between the MDR1 and MDR3 siRNA, pSuppressorNeo vector transfection cells and untreated cells (P>0.05). In the presence of cisplatin of different concentrations, the viability of A2780/DDP cells was not significantly decreased after the transfection. No changes in MDR1 and MDR3 mRNA were found in MDR1 and MDR3 siRNA-transfected A2780/DDP cells. As compared with pSuppressorNeo and untreated groups, no significant difference existed in the expression of MDR1 and MDR3 mRNA (P>0.05). The expression of caspase-3 protein in MDR1 and MDR3 siRNA transfected A2780/DDP cells was not significantly increased. It is concluded that multidrug resistance induced by cisplatin in ovarian carcinoma cell lines is not due to overexpression of MDR1 and MDR3 gene. The drug resistance of ovarian carcinoma cells to cisplatin is not mediated by P-glycoprotein.     

UTP23在上皮性卵巢癌中的表达及化疗耐药性研究

目的 探讨UTP23在上皮性卵巢癌中的表达水平及其与化疗耐药的关系。 方法 采用免疫组化方法对64例上皮性卵巢癌患者和40例卵巢组织良性增生患者组织中的UTP23蛋白表达进行测定,并分析UTP23表达水平与临床病理特征、化疗耐药及预后的关系。 结果 UTP23蛋白表达于上皮性卵巢癌细胞的胞浆中,呈棕黄色颗粒染色。上皮性卵巢癌患者UTP23低表达为46例,明显高于卵巢组织良性增生组的6例,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗耐药组患者UTP23低表达为29例,明显高于化疗敏感组的17例,差异有统计学意义(P<0.05)。UTP23低表达与年龄、病理类型、有无腹水、残余病灶大小等无关(P>0.05),与分化程度、临床分期、有无淋巴结转移等有关(P<0.05)。UTP23低表达患者生存时间明显短于高表达组患者,差异有统计学意义(P<0.05),COX回归单因素分析显示,UTP23表达与总生存时间相关[RR=0.587,P=0.032,95%CI:0.336(0.361~0.986)]。 结论 UTP23低表达与上皮性卵巢癌患者疾病进展、化疗耐药及预后等密切相关,提示UTP23可能作为一个新的判断化疗效果和评估预后的指标。      

米非司酮对卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP增敏作用研究

目的探讨米非司酮对卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP的增敏作用。方法采用RPMI1640培养液对COC1/DDP细胞株进行培养,实验分2批进行,第一批将COC1/DDP细胞株分5组:对照组(不加任何药物)、顺铂组(2μg/ml)、高剂量米非司酮组(15μg/ml)、中剂量米非司酮组(10μg/ml)、低剂量米非司酮组(5μg/ml);第二批将COC1/DDP细胞株分5组:对照组(不加任何药物)、顺铂组(2μg/ml)、高剂量米非司酮加顺铂组(15μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)、中剂量米非司酮加顺铂组(10μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)、低剂量米非司酮加顺铂组(5μg/ml米非司酮和2μg/ml顺铂)。培养结束后采用MTT法观察各组COC1/DDP细胞株增殖活力和生存率的变化。结果与对照组比较,顺铂组和低剂量米非司酮组对细胞增殖活力的影响,差异均无统计学意义(P>0.05);随着米非司酮浓度的升高,对COC1/DDP细胞抑制作用逐渐增强,中、低剂量米非司酮组与顺铂组比较细胞增殖活力和生存率差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),高剂量组与低剂量组比较有统计学意义(P<0.01);各剂量米非司酮加顺铂组与顺铂组比较对细胞增殖活力和生存率的影响,差异有统计学意义,且随着米非司酮浓度的升高,对COC1/DDP细胞抑制作用逐渐增强(P<0.05或P<0.01)。结论单药米非司酮和联合顺铂对COC1/DDP细胞增殖活力均具有显著抑制作用,米非司酮可提高顺铂化疗的敏感性,且与米非司酮的浓度呈剂量依赖关系。     

卵巢癌耐药机制与靶向治疗策略的研究进展

手术结合化疗是卵巢上皮性癌的主要治疗手段,其中以R0为目标的卵巢癌肿瘤细胞减灭术结合个体化的化疗方案的应用,使得部分患者5年生存率有了很大的提升.但是晚期患者的耐药与复发仍然是困扰广大临床医师与科研工作者的难题,而化疗耐药因其病因不清、机制复杂,是临床亟待解决的难题和热点.近年来围绕此问题开展的基础与临床相结合的卵巢癌...     

GDF15、TK1在卵巢癌患者血清中的表达及与预后的Cox回归分析

目的 探索生长分化因子15（recombinant growth differentiation factor 15,GDF15）、胸苷激酶（thymidine kinase 1,TKI）在卵巢癌患者血清中的表达及与预后Cox回归相关性。方法 前瞻性选取50例接受血清检测的健康体检者（对照组）、52例卵巢良性疾病组（良性组）、51例卵巢癌患者（卵巢癌组）,均进行了血清GDF15、TK1检测,比较三组GDF15、TK1表达水平。同时对卵巢癌患者随访2年,根据是否生存分为两组,即生存组（n=41）、死亡组（n=10）,比较两组临床病理特征,再经Cox回归模型分析生存情况与临床病理特征关系。结果 卵巢癌组血清GDF15表达（816.65±88.46）ng/L、TK1表达水平（1.46±0.65）pmol/L高于良性组、对照组（P<0.05）。经ROC曲线分析,GDF15、TK1及两项联合预测卵巢癌的AUC分别为0.879、0.813、0.884。卵巢癌患者接受2年随访,生存组随访生存时间（22.56±1.15）个月高于死亡组生存时间（14.16±2.65）个月,差异有统计学意义（t=1...     

分割剂量电离辐射对卵巢癌耐药细胞自噬性死亡的影响

目的:研究不同电离辐射方式对卵巢癌耐药细胞株SKVCR自噬性细胞死亡的影响,并探讨其相关机制.方法:实验分为假照组、分割照射组(2 Gy·d-1×5)及单次照射组(10 Gy·d-1×1).采用MTT法检测各组细胞对长春新碱(VCR)、依托泊苷(VP-16)及顺铂(DDP)的药物敏感性,MDC染色及流式细胞术检测自噬发...