蛋白基因产物9.5在子宫内膜异位症患者在位及异位内膜中的表达情况

目的：探讨蛋白基因产物9.5（PGP 9.5）在子宫内膜异位症（EMs）患者的在位内膜以及异位内膜中的表达情况,并观察其表达量与EMs疼痛程度的关系。方法：应用免疫组化Envision二步法检测44例EMs患者（疼痛组28例,不痛组16例）的在位内膜、异位内膜及20例子宫肌瘤且不伴随疼痛的患者（对照组）子宫内膜中PGP 9.5的表达,探讨其与EMs患者痛经程度的相关性。结果：EMs患者在位内膜PGP 9.5的阳性表达率为72.9%,对照组在位内膜中PGP 9.5的阳性表达率为25.0%,差异有统计学意义（P＜0.05）。EMs患者异位内膜中PGP 9.5的阳性表达率为81.8%;其中疼痛组患者的阳性表达率为92.9%,不痛组的阳性表达率为62.5%,两者相比差异有统计学意义（P＜0.05）。EMs组在位内膜和异位内膜神经纤维密度均高于对照组（均P＜0.01）。PGP 9.5的表达与EMs的分期以及发生部位无关（均P＞0.05）;EMs患者疼痛与病灶发生部位无关（P＞0.05）,且与神经纤维密度无关（P＞0.05）。结论：PGP 9.5在EMs患者在位以及异位内膜中阳性率显著增高,同时其表达量增高,与患者痛经程度有一定相关性。     

子宫内膜异位症患者在位子宫内膜神经纤维分布的研究

目的:研究子宫内膜异位症(EMT)患者的在位子宫内膜的功能层中神经纤维的分布状况.方法:选取2005年1月至2008年12月以痛经为主诉并行子宫切除的EMT患者25例为研究组,随机选取同期无此疾病的行子宫切除的患者40例作为对照组,利用免疫组织化学技术,使用多克隆家兔抗人抗蛋白基因产物9.5染色标记子宫在位内膜的神经纤维,用数码相机照相,分析其神经纤维密度.结果:在EMT患者子宫内膜的功能层中出现神经纤维,而非EMT患者子宫内膜的功能层中未出现神经纤维(P<0.01).结论:EMT患者子宫内膜的功能层中神经纤维异常增多,可能与EMT患者的疼痛症状有关.     

子宫内膜异位症患者不同部位病灶中神经纤维分布及其与疼痛症状的关系

目的 探讨子宫内膜异位症(内异症)患者不旧部位病灶组织中神经纤维的分布差异及其与疼痛症状的关系.方法 以2007年9月至2008年9月在北京协和医院行腹腔镜手术治疗的120例内异症患者为研究对象,其中Ⅰ期19例,Ⅱ期29例,Ⅲ期44例,Ⅳ期28例,采用视觉模拟评分(VAS)法,对患并的疼痛症状进行评分,采用免疫组化染色方法检测不同部位内异症病灶组织中神经纤维的分布.结果 不同部位内异症病灶组织中神经纤维的数目依次为:宫骶韧带内异症病灶(29.74±17.33)条/mm~2、阴道直肠隔内异症病灶(24.53±13.34)条/mm~2、子宫直肠陷凹内异症病灶(17.09±10.09)条/mm~2、腹膜内异症病灶(6.77±4.21)条/mm~2、卵巢内异症囊肿壁(0.07±0.25)条/mm~2.其中官骶韧带内异症病灶中神经纤维的数目与痛经关系最密切(r=0.56),子官直肠陷凹以及阴道直肠隔内异症病灶中神经纤维的数目与肛门坠痛(r分别为0.58和0.41)、性交痛(r分别为0.82和0.67)有密切的相关性,均明显高于腹膜及卵巢的内异症病灶.而不同期别患者的内异症病灶组织中神经纤维数目比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 不同部位内异症病灶组织中神经纤维的数目有明显差异性,且与痛经、肛门坠痛、性交痛以及慢性盆腔痛等症状的程度具有相关性,而与临床分期无关.     

子宫内膜异位症异位病灶神经分布的研究进展

子宫内膜异位症（endometriosis，EMs）导致的疼痛症状长期以来一直困扰着患者和医生。近年来，对疼痛产生的机制进行了大量研究，包括遗传、炎症介质等方面，研究发现，子宫内膜异位症在位与异位内膜存在异常的神经分布，这些神经涉及感觉神经A8，感觉纤维C，胆碱能和肾上腺素能神经纤维等，并且常与增生的血管伴行。神经与血管能分泌疼痛介质及炎症因子，局部的炎症因子和疼痛介质亦可促进神经与血管的增生。神经纤维增生可能在子宫内膜异位症患者疼痛症状的产生及子宫内膜异位症的发病机制中起重要作用，异常的神经分布也可为子宫内膜异位症的诊断及治疗提供参考。     

子宫内膜异位症异位病灶神经分布的研究进展

子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)导致的疼痛症状长期以来一直困扰着患者和医生.近年来,对疼痛产生的机制进行了大量研究,包括遗传、炎症介质等方面,研究发现,子宫内膜异位症在位与异位内膜存在异常的神经分布.这些神经涉及感觉神经AB,感觉纤维C,胆碱能和肾上腺素能神经纤维等,并且常与增生的血管伴行.神经与血管能分泌疼痛介质及炎症因子,局部的炎症因子和疼痛介质亦可促进神经与血管的增生.神经纤维增生可能在子宫内膜异位症患者疼痛症状的产生及子宫内膜异位症的发病机制中起重要作用,异常的神经分布也可为子宫内膜异位症的诊断及治疗提供参考.     

子宫内膜异位症在位内膜神经纤维分布与疼痛关系的研究

目的:检测子宫内膜异位症(EMT)在位内膜中的神经纤维蛋白基因产物9.5(PGP9.5)、P物质(SP)和神经生长因子(NGF)的分布,探讨其与疼痛的关系。方法:选择EMT患者45例,按视觉模拟评分(VAS)法将患者分为EMT疼痛组(24例)和EMT无痛组(21例),其中轻度疼痛者4例,中度疼痛者7例,重度疼痛者13例;另选择同期患子宫肌瘤住院的患者25例作为对照组。应用免疫组化SP方法分别检测子宫内膜的PGP9.5标记的神经纤维密度(条/mm2)和SP、NGF的平均光密度(OD)值,并与VAS评分进行相关性分析。结果:EMT疼痛组中PGP9.5的密度和SP、NGF的OD值均高于EMT无痛组和对照组(P<0.05)。EMT重度疼痛组中PGP9.5的密度和SP、NGF的OD值明显高于轻度和中度疼痛组(P<0.05)。同时,EMT疼痛组中PGP9.5的密度和SP、NGF的OD值与患者的VAS疼痛评分呈正相关(r=0.745,0.624,0.628;P<0.05)。结论:EMT患者在位内膜存在神经纤维的异常分布。EMT中神经纤维的表达与疼痛的严重程度有关,神经纤维的异常高表达可能是EMT患者疼痛的原因之一。     

子宫内膜异位症患者疼痛与盆腔病灶解剖分布的关系

目的研究子宫内膜异位症（内异症）患者疼痛症状与盆腔病灶解剖分布特点的关系。方法详细记录130例内异症患者痛经、慢性盆腔痛（CPP）、性交痛及排便痛的发生情况。以腹腔镜检查为诊断标准。评价疼痛症状包括痛经、CPP、性交痛及排便痛与盆腔内不同部位内异症病灶的关系。结果130例内异症患者中,痛经100例（76．9％）,无痛经30例（23．1％）。轻、中度和重度痛经者分别为27例（20．8％）、41例（31．5％）、32例（24．6％）,性交痛46例（35．4％）,CPP45例（34．6％）,排便痛67例（51．5％）。痛经者深部宫骶韧带结节、阴道直肠隔结节发生率分别为45．0％、16．0％,无痛经者深部宫骶韧带结节、阴道直肠隔结节发生率为13．3％、0,两者分别比较,差异均有统计学意义（P=0．00、P=0．01）;痛经者与无痛经者比较,子宫直肠窝封闭的比例增加（分别为41．0％、10．0％,P=0．00）,深部浸润型内异症（DIE）比例增加（分别为51．0％、16．7％,P=0．00）。痛经程度与宫骶韧带结节的数目（P=0．005,r=0．302）、宫骶韧带结节浸润深度（P=0．017,r=0．227）呈线性相关。痛经伴卵巢内异症囊肿患者中,发生中、重度盆腔粘连的比例增加（分别为29．1％、8．3％,P=0．029）。与无CPP的患者比较,CPP患者深部宫骶韧带结节（分别为51．1％、30．6％,P=0．018）以及DIE（分别为57．8％、35．3％,P=0．011）比例明显升高。与无排便痛的患者比较,排便痛患者深部宫骶韧带结节（分别为46．3％、28．6％,P=0．028）、阴道直肠隔结节（分别为19．4％、4．8％,P=0．01）、子宫直肠窝封闭（分别为44．8％、22．2％,P=0．005）以及DIE（分别为53．7％、31．7％,P=0．01）的比例升高。阴道直肠隔结节是性交痛的独立危险因素（OR=3．61）。结论痛经、CPP、性交痛以及排便痛与盆腔内异症病灶的部位和浸润深度有关,位于盆腔后部的深部浸润病灶以及子宫直肠窝封闭与疼痛症状关系密切。     

子宫内膜异位症发病机理研究进展

一个世纪以来，已提出了多种有关子宫内膜异位症(内异症)病因学说，其中，Sampson提出的“种植学说”被广泛接受。目前的研究推测，盆腔内异症的发生应有5个关键步骤：内膜细胞黏附到腹膜表面并侵入腹膜间皮细胞层，种植灶部位炎症细胞募集，病灶周围新生血管生成，内膜细胞增殖及异位病灶形成。人子宫内膜移植的动物实验也证实了上述内异症的发展过程。本文就上述参与和影响盆腔内异症发生的因素的研究进展作一综述。     

子宫内膜与腹膜粘附过程中相互作用的研究

目的:通过建立人腹膜组织与子宫内膜组织共培养的离体实验模型,观察子宫内膜异位症早期粘附过程中相应的变化以探讨子宫内膜异位症的发生机理。方法:取前腹膜将其剪成5mm×5mm大,贴于预先包埋了鼠尾胶的24孔板中,取处理过的子宫内膜约15mg(湿重)滴在已经贴壁的腹膜组织上共培养。利用HE染色,免疫组化及扫描电镜进行观察,测定粘附情况。结果:(1)子宫内膜可以粘附在腹膜上,而且共培养1h就有粘附。增生期、分泌期的子宫内膜粘附率无差异;(2)粘附部位的子宫内膜组织中既有内膜腺上皮也有内膜间质细胞;(3)多数粘附部位没有完整的腹膜间皮细胞层。结论:子宫内膜腺上皮及间质细胞都参与了早期粘附过程,粘附率与子宫内膜的周期无关,在位内膜的特性可能与粘附率有关。     

子宫内膜异位症患者子宫内膜IL-18表达的研究

目的 :研究子宫内膜异位症患者子宫在位内膜和异位内膜IL 18的表达 ,探讨IL 18在内异症发病机制中的意义。方法 :用免疫组化和半定量逆转录聚合酶链反应法检测对照组子宫内膜、子宫腺肌症患者子宫内膜和内异症患者的子宫在位内膜与异位内膜IL 18蛋白的表达位置及其mRNA表达水平。结果 :各组标本IL 18蛋白和mRNA的表达均阳性 ,内异症患者子宫在位内膜与异位内膜的IL 18mRNA表达水平分别为 1.0 5±0 .4 0、0 .77± 0 .39,均低于对照组子宫内膜 (1.6 5± 0 .6 4) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;子宫腺肌症组IL 18mRNA表达水平为 1.6 3± 0 .6 0 ,与对照组子宫内膜IL 18mRNA表达水平差异无显著性。结论 :IL 18可能参与了子宫内膜异位症的发病 ,IL 18mRNA在内异症患者在位和异位内膜的低水平表达 ,可能是影响内异症形成和发展的重要因素之一。     

子宫腺肌病患者子宫内膜神经纤维的分布及其临床意义

目的 探讨子宫腺肌病(腺肌病)患者子宫内膜神经纤维分布与腺肌病发病以及痛经的关系.方法 选择经手术切除子宫的患者74例,其中腺肌病组32例(包括有痛经22例,无痛经10例),子宫肌瘤(肌瘤)组42例(包括有痛经15例,无痛经27例).应用免疫组化Envision二步法检测子宫内膜神经纤维的分布,分别用抗神经微丝蛋白(NF)抗体与抗蛋白基因产物9.5(PGP9.5)抗体检测有髓与无髓神经纤维.结果 腺肌病和肌瘤组有痛经者的子宫内膜功能层PGP9.5免疫反应阳性神经纤维检出率分别为64%(14/22)和67%(10/15),PGP9.5免疫反应阳性神经纤维密度分别为0.6(0～9.4)和0.6(0～6.0)条/mm2;两组分别比较,差异均无统计学意义(P均＞0.05);两组均无NF免疫反应阳性神经纤维检出.腺肌病和肌瘤组无痛经者的子宫内膜功能层均无神经纤维检出.腺肌病组痛经者与无痛经者的子宫内膜基底层PGP9.5免疫反应阳性神经纤维检出率和神经纤维密度分别为64%(14/22)和1.1(0～12.0)条/mm2、50%(5/10)和0.6(0～3.0)条/mm2;NF免疫反应阳性神经纤维检出率和神经纤维密度分别为23%(5/22)和0(0～0.6)条/mm2、20%(2/10)和0(0～1.0)条/mm2.肌瘤组痛经者与无痛经者的子宫内膜基底层PGP9.5免疫反应阳性神经纤维检出率和神经纤维密度分别为80%(12/15)和1.6(0～10.0)条/mm2、44%(12/27)和0(0～5.0)条/mm2;NF免疫反应阳性神经纤维检出率和神经纤维密度分别为40%(6/15)和0(0～0.4)条/mm2、15%(4/27)和0(0～1.0)条/mm2;子宫内膜基底层PGP9.5和NF免疫反应阳性神经纤维密度在腺肌病和肌瘤组痛经者间以及在无痛经者间比较,差异均无统计学意义(P均＞0.05),但两组痛经者子宫内膜基底层PGP9.5免疫反应阳性神经纤维密度均显著高于同组无痛经者(P均＜0.05).结论 子宫内膜PGP9.5免疫反应阳性神经纤维可能参与痛经的发生;NF免疫反应阳性神经纤维可能与痛经的发生无关;子宫内膜神经纤维增生可能与疾病本身无关.     

子宫腺肌病神经纤维的分布及其临床意义

目的:探讨子宫腺肌病病灶中神经纤维的分布及其与临床痛经的关系。方法:选择经手术切除子宫的患者64例,其中腺肌病组40例,对照组24例。分别用抗S-100蛋白、P物质(SP)、神经丝蛋白(NF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经蛋白基因产物9.5(PGP9.5)抗体应用免疫组化法检测子宫肌层神经纤维的分布。结果:子宫腺肌病组与对照组子宫平滑肌组织中SP表达阳性率及阳性神经纤维密度分别为70%(28/40)和(0.70±0.32)条/mm2、29.1%(7/24)和(0.24±0.21)条/mm2。腺肌病组病灶中SP阳性神经纤维密度及阳性率均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);子宫腺肌病组与对照组子宫平滑肌组织中NF表达阳性率及阳性神经纤维密度分别为92.5%(37/40)和(1.44±0.98)条/mm2、20.8%(5/24)和(0.31±0.29)条/mm2。腺肌病组病灶中NF阳性神经纤维密度及阳性率均显著高于对照组(P均<0.05);腺肌病组病灶中NF阳性神经纤维密度与患者疼痛程度呈正相关关系(r=0.703,P<0.05)。而S-100,NSE,PGP9.5阳性的神经纤维密度及阳性率在两组中差异无统计学意义(P均>0.05)。结论:子宫腺肌病NF和SP免疫反应阳性神经纤维可能参与腺肌病痛经的发生。     

Overexpression of nerve growth factor in peritoneal fluid from women with endometriosis may promote neurite outgrowth in endometriotic lesions

To investigate the role of the nerve growth factor (NGF) in the endometriosis-associated innervation in the development of endometriosis-associated symptoms, 41 peritoneal fluid samples (PF) from patients with surgically and histologically proven endometriosis and 20 PF from patients with other gynecologic conditions were analyzed with Western blot and a novel in vitro model using dorsal root ganglia (DRG) to show neuronal outgrowth; endometrial cells also were analyzed. The results suggest that the PF of endometriosis patients and endometriotic lesions have neurotropic properties, because the Western blot analysis and the cell culture stainings showed NGF expression, and the neurite outgrowth of DRG treated with PF of patients with endometriosis was significantly higher than when treated with PF of patients without endometriosis. Furthermore, blocking NGF with both anti-NGF and K252a leads to a significant decrease in neurite outgrowth.     

Nerve fibers and menstrual cycle in peritoneal endometriosis

There was no difference in the density of nerve fibers across the menstrual cycle in peritoneal endometriotic lesions. These findings may explain why patients with peritoneal endometriosis often have painful symptoms throughout the menstrual cycle.     

乙状结肠代阴道成形术后阴道黏膜中蛋白基因产物9.5、血管活性肠肽和神经肽Y的表达

目的 探讨乙状结肠代阴道成形术后阴道黏膜神经再分布的变化.方法 2002年1月至2010年12月,取在河北医科大学第二医院接受乙状结肠代阴道成形术的20例先天性无阴道患者的人工阴道黏膜组织,采用免疫组化方法检测局部组织中蛋白基因产物9.5(PGP 9.5)的表达及血管活性肠肽(VIP)能神经和神经肽Y(NPY)能神经的分布,取材时间在术后1～3年,并与原位乙状结肠黏膜进行比较.结果 (1)神经纤维密度:人工阴道黏膜组织的黏膜层、黏膜下层和肌层均可见丰富的PGP9.5阳性表达的神经纤维,VIP和NPY阳性表达的神经纤维主要分布在血管周围和肌层;人工阴道黏膜组织中PGP 9.5阳性表达的神经纤维密度为17±6,高于VIP(2.9±1.0)和NPY(2.5±0.8)阳性表达的神经纤维密度,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)人工阴道黏膜PGP 9.5的表达:术后1年,人工阴道黏膜PGP 9.5的表达水平为14±4,低于原位乙状结肠黏膜的28±7,差异有统计学意义(P＜0.05);术后2～3年,PGP 9.5的表达水平逐步升高,术后第3年,PGP 9.5的表达水平达22±7,且这种变化以黏膜下层最为明显.(3)人工阴道黏膜VIP和NPY的表达:术后1年,阴道黏膜VIP和NPY的表达水平分别为2.3±0.7、2.5±1.1,低于原位乙状结肠黏膜的5.3±1.4、5.5±1.1,差异均有统计学意义(P＜0.05);术后2～3年,VIP表达水平逐渐回升,术后3年为3.7±0.7,明显高于术后1年的2.3±0.7,差异有统计学意义(P＜0.05),NPY表达水平在术后3年内回升不明显.结论 乙状结肠代阴道成形术后,阴道黏膜的神经分布特征与原位乙状结肠相似.在术后1～3年内,人工阴道黏膜神经纤维密度降低后又有逐步回升趋势.

Abstract：

Objective To investigate re-innervation in the neovaginal mucosa of patients underwent sigmoid colon vaginoplasty in treatment of Mayer-Rokitansky-Kistner-Hauser Syndrome (MRKHS).Methods Biopsies in the upper third of the posterior neovagina were taken in 20 patients treated by sigmoid colon vaginoplasty at 1, 2 and 3 years after surgery, respectively. Protein gene product 9. 5 ( PGP 9. 5 ),vasoactive intestinal peptide (VIP) and neuropeptide Y (NPY) were detected by immunohistochemical method and compared with those in intact sigmoid colon mucosa. Results ( 1 ) Density of nerve fiber:abundant distribution of PGP 9. 5 nerve fibers were observed in the mucosal muscle layer, submucosa, and smooth muscle layer of the neovagina. The nerve fibers of VIP and NPY immunoreactivity were mainly distributed around blood vessels and in the smooth muscles. In the neovagina, the density of nerve fibers of PGP 9. 5 of 17 ± 6 were much more than VIP of 2. 9 ± 1.0 and NPY of 2. 5 ± 0. 8 significantly ( P ＜ 0. 05 ).( 2 ) Expression of PGP 9. 5 in neovagina: at 1 year after surgery, PGP 9. 5 positive expression of 14 ± 4 was significantly lower in the neovagina than 28 ± 7 in the intact sigmoid colon( P ＜ 0. 05 ). However, after 2 to 3 years, its expression displayed an upgrade tendency in the neovagina and was significantly higher at the 3 year postoperatively than that at the 1 years postoperatively ( 22 ± 7 vs. 14 ± 4, P ＜ 0. 05 ). The changes were much more obvious in submucosa. (3) The expression of VIP and NPY in neovagina: at 1 year after surgery, VIP and NPY positive nerve fibers were also decreased in the neovagina when compared with those in the intact sigmoid colon ( 2. 3 ± 0. 7 vs. 5.3 ± 1.4, P ＜ 0. 05; 2.5 ± 1. 1 vs. 5.5 ± 1.1, P ＜ 0. 05 ) . At 2 to 3 years after surgery, the positive VIP fiber showed initially decreased and subsequently increased tendency. The density of VIP of 3.7 ± 0. 7 in the neovagina at 3 years postoperatively was higher than 2. 3 ±0. 7 at 1 years postoperatively (P ＜ 0. 05 ). No significant up-regulation was observed in NPY-positive expression in the neovagina within 3 years after operation. Conclusions Distribution of sensory PGP 9. 5,VIP and NPY immunoreactive nerve fibers was similar to the pattern observed within the intact sigmoid colon wall. The number of nerve fibers in the neovagina decreased after surgery and then increased subsequently within 3 years after surgery.     

The influence of peritoneal endometriotic lesions on the generation of endometriosis-related pain and pain reduction after surgical excision

Purpose  To investigate the influence of different kinds of endometriotic lesions, especially peritoneal endometriotic implants in pain generation and the pain reduction after surgical excision in a prospective study. Methods  Fifty-one pre-menopausal patients underwent surgical laparoscopy due to chronic pelvic pain, dysmenorrhoea and/or for ovarian cysts. In 44 patients, endometriosis was diagnosed. The pre- and post-operative pain score was determined using a standardized questionnaire with a visual analogue scale. Patients with peritoneal endometriosis were divided into two different groups depending on their pre-operative pain score: group A had a pain score of 3 or more, while group B a pain score of 2 or less. Patients without peritoneal endometriosis were classified as group C, and patients without endometriosis were classified as group D. The pre- and post-operative pelvic pain and/or dysmenorrhoea was analysed according to the different types of endometriotic lesions. Results  In groups A and C, the post-operative pain score decreased by at least 2 grades or more (p < 0.0). In group D, the post-operative pain score showed no significant reduction. Conclusion  The present study suggests that the surgical excision of endometriotic lesions—including peritoneal implants—is an effective treatment of endometriosis-associated pelvic pain and/or dysmenorrhoea.