华蟾素诱导人膀胱癌细胞株T24凋亡研究

目的研究华蟾素注射液（cinobufacin,Cino）对膀胱癌细胞株T24的体外增殖抑制及诱导凋亡作用,探讨其对膀胱癌的l临床应用价值。方法不同浓度Cino单独作用和配伍丝裂霉素C（MMC）作用于膀膀癌T24细胞株后,通过流式细胞术（FCM）以及DNA凝胶电泳检测细胞的凋亡情况,应用光学显微镜观察细胞形态学的变化。结果除Cino（25mg／m1）组外,其它处理组均可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化。DNA琼脂糖电泳可见到凋亡的特征性“梯子”条带。流式细胞仪结果示,除高浓度的Cino（25mg／m1）组外．其余各组均见到在G0／G1期前出现亚二倍体峰（APO峰）,且阻滞细胞生长在G0／G1期。各药物浓度组与对照组的S期比率（SPF）和增殖指数（PI）分别进行比较（P〈O．05）有统计学差异。结论Cino对膀胱肿瘤1、24细胞有诱导凋亡和直接杀死的双重作用。具体表现为高浓度（25mg／m1）作用于细胞时,对细胞表现为直接杀死作用。而在较低浓度范围内（O．001～2．5mg/ml）,表现为对细胞诱导凋亡的作用,且具有一定的时效和量效关系：配伍丝裂霉素应用时．对T24细胞的诱导凋亡作用明显增强．两药有协同作用。具有治疗膀胱癌的临床价值     

华蟾素联合化疗药物经动脉灌注栓塞治疗原发性肝癌的临床研究

目的:探讨纯中药制剂华蟾素注射液在经动脉灌注栓塞治疗原发性肝癌中的价值。材料和方法:对18例不能手术切除的原发性肝癌经供氧血管(腹腔动脉或/和肠系膜上动脉分支)进行灌注栓塞,所用药物为华蟾素注射液100ml(含生药50g)、氟脲脱氧核苷2.5g、丝裂霉素10mg,间隔3～4周重复治疗一次,平     

肝细胞肝癌组织及细胞株中PTPeta的表达及意义研究

目的 检测人肝细胞肝癌组织及细胞株SMMC7721中蛋白酪氨酸磷酸酶eta(PTPeta)的表达,观察肿瘤细胞生长密度对其表达的影响.方法 采用免疫组化方法检测肝细胞肝癌组织及SMMC7721细胞中PTPeta蛋白的表达;采用RT-PCR法检测不同生长密度(1×103、5×103、l×104、5×104/cm2)SMMC7721细胞中PTPeta的表达变化情况.结果 免疫组化检测结果表明肝细胞肝癌组织中PTPeta表达呈阳性,SMMC7721细胞中存在PTPeta表达,且定位于细胞膜;RT-PCR检测结果显示,当细胞密度为l×103、5×103、l×104、5×104/cm2时,PTPeta mRNA的表达量分别为0.425±0.031、0.659±0.041、0.771±0.043、0.885±0.045,PTPeta表达随着肿瘤细胞生长密度的增高而增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 PTPeta在肝细胞肝癌组织及细胞中表达,且随肿瘤细胞生长密度增高而表达增加.PTPeta 可能通过增加肝癌细胞黏附、维持恶性肿瘤细胞内环境稳定等,在恶性肿瘤细胞增殖及播散转移的过程中起重要作用.     

化疗药物对胰腺癌细胞株Aspc-1和Bxpc-3生长抑制作用的研究

目的　探讨不同化疗药物浓度、作用时间及联合用药对胰腺癌细胞株 (Aspc 1和Bxpc 3)的生长抑制作用。方法　单独或联合使用不同浓度的 4种化疗药物 :5 氟尿嘧啶、丝裂霉素、顺铂和表柔比星 (浓度分为d1、d2、d3、d4 ) ,分别作用 2 4、4 8和 72h后 ,用四唑盐比色法检测药物对两株细胞的生长抑制作用 ,并对计算出的每组细胞生长抑制率行t检验分析。结果　两细胞株的生长抑制率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而显著上升 (P <0 .0 5 ) ,联合用药能显著提高药物对两细胞株的抑制作用 (P <0 .0 5 )。结论　通过动脉灌注或保留导管持续灌注以提高化疗药物局部浓度和延长药物作用时间 ,以及联合用药能够改善胰腺癌的化疗效果     

复方硫酸铝注射液体外及小鼠瘤体注射抗肿瘤作用的研究

目的考察复方硫酸铝注射液体外对膀胱肿瘤BIU87细胞生长的抑制作用及体内对小鼠移植肿瘤生长的抑制作用。方法用MTT法进行体外细胞毒性试验,采用瘤内一次注射给药法考察体内抑制肿瘤生长的作用。结果复方硫酸铝注射液对膀胱肿瘤BIU87细胞的半数抑制浓度为199.3μg·ml-1;瘤内注射对肿瘤生长有显著的抑制作用,有效成份是硫酸铝,复方注射液对肿瘤的抑制作用随硫酸铝浓度的增加而增大,浓度为0.117、0.175、0.234、0.292mol·L-1时,平均抑制率分别为23.0%、32.7%、45.4%和53.3%,表现出剂量正相关。处方中其它成分不影响小鼠移植肿瘤的生长。结论复方硫酸铝注射液体外对膀胱肿瘤细胞具有杀伤作用,小鼠移植肿瘤内一次注射能显著抑制肿瘤生长。     

缺氧诱导基因2诱导甘油三酯堆积稳态失衡促进肝癌发生的研究

目的 探讨缺氧诱导基因2（hypoxia-inducible gene 2, HIG2）在肝癌发生发展中的作用和意义。方法 正常肝细胞（QZG）、肝癌细胞系（HepG2、SMMC7721）常规培养,采用Western Blot 法检测HIG2蛋白的表达水平;通过甘油三酯检测试剂盒检测每6×106个正常肝细胞系（QZG）和肝癌细胞系（HepG2、SMMC7721）甘油三酯含量;使用涂有Matrigel的聚碳酸酯膜的Transwell小室测定细胞侵袭和迁移能力,划痕实验比较转染了对照质粒以及转染了HIG2过表达质粒的HepG2细胞的细胞迁移率;实时定量荧光PCR分析30例肝癌组织和对应肝癌癌旁组织中HIG2蛋白的表达;免疫组织化学方法检测肝癌癌旁组织和肝癌组织中HIG2蛋白的表达及部位。结果 肝癌细胞系HepG2和SMMC7721比正常肝细胞系QZG中HIG2蛋白水平增加（P<0.05）,同时肝癌细胞系HepG2和SMMC7721甘油三酯含量[（16.94±0.33）mg/dL,（16.04±1.02）mg/dL]均显著高于正常肝细胞系QZG[（4.90±0.39）mg/dL],差异比较具有统计学意义（P<0.05）;与转染对照质粒组比较,HIG2的过表达质粒显著增加了HepG2细胞的迁移率和划痕愈合百分比（P<0.05）;实时定量荧光PCR结果显示与肝癌癌旁组织比较,肝癌组织中HIG2的丰度增加（P<0.05）;Western Blot结果显示与肝癌癌旁组织比较,肝癌组织中HIG2蛋白水平增加（P<0.05）;免疫组化显示HIG2在肝癌组织中高表达且主要在胞浆中。结论 HIG2蛋白可以显著诱导肝癌细胞的甘油三酯的堆积,同时促进了肝癌细胞的侵袭和转移潜力。     

紫杉醇、顺铂及丝裂霉素对3种人卵巢癌细胞株体外作用的研究

 目的 观察临床常用抗肿瘤药紫杉醇、顺铂和丝裂霉素对3种人卵巢癌细胞株体外生长的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,测定紫杉醇、顺铂和丝裂霉素对人卵巢癌细胞株3AO、SKOV3和OVCAR3生长的抑制作用,并与空白组进行对比.结果 药物浓度达到10及100 μmol/L时,紫杉醇、顺铂及丝裂霉素对3种卵巢癌细胞均具有较好的抑制作用;顺铂和丝裂霉素的抑制作用较紫杉醇强(P<0.05).结论 在治疗卵巢癌时可采用不同种类的抗肿瘤药物的联合治疗方法.     

异鼠李素对人肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡影响的实验研究

目的：观察异鼠李素对人肝癌HepG-2细胞的增殖周期及凋亡的影响。方法噻唑蓝（Mar）法检测异鼠李素对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪检测异鼠李素对肿瘤细胞周期及凋亡的影响。结果MTr结果提示异鼠李素对人肝癌细胞的增殖有明显抑制作用,并随着作用浓度的增大,抑制作用逐渐增强,以100mg／L的异鼠李素培养基抑制作用最明显。流式细胞仪检测可见亚二倍体峰,提示异鼠李素有诱导入肝癌细胞凋亡作用。异鼠李素可通过诱导人肝癌细胞凋亡并将细胞阻滞在G0—G1期,使细胞不能进入s期进行DNA合成,最终使瘤细胞的体外增殖受到抑制。结论异鼠李素抑制人肝癌细胞的增殖。阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,可能具有一定抗肝癌作用。     

索拉非尼联合顺铂抑制肝癌HepG2细胞生长的体外研究

目的探讨索拉非尼联合顺铂(DDP)对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用及其可能的分子机制。方法实验细胞分为4组:空白对照组、索拉非尼单药组、顺铂单药组、索拉非尼联合顺铂组。索拉非尼和顺铂单独或联合作用于细胞,以MTT法检测24、48、72、96h时间点药物对HepG2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测24、48h时间点的细胞周期与凋亡率。在药物作用后24h,用荧光染料罗丹明123(Rh123)染色细胞,流式细胞仪测定线粒体跨膜电位(ΔΨm),分光光度法检测caspase-3活性。结果索拉非尼及顺铂单独应用对HepG2生长均有抑制作用,且低剂量联合具有协同作用。联合用药可以使细胞周期阻滞于G0/G1期和G2期,且凋亡率明显高于单药组(P<0.05)。单独应用顺铂和索拉非尼均能使线粒体跨膜电位降低,而联合组作用强于单药组(P<0.05)。药物作用后caspase-3活性增高,联合组高于单药组(P<0.05)。结论索拉非尼联合顺铂能更好地抑制肝癌HepG2细胞增殖,并促进其凋亡,其机制可能与细胞周期阻滞、线粒体跨膜电位降低及caspase-3活性增加有关。     

Notch信号通路参与肝癌细胞侵袭迁移临床机制研究

目的探讨Notch信号通路参与肝癌细胞侵袭迁移的临床机制。方法体外培养肝癌细胞系SMMC-7721、MHCC97H及健康细胞状态正常非肿瘤干细胞系HL-7702。应用Transwell小室、BCA蛋白定量法评估并检测Notch信号通路表达情况。结果肝癌组织当中的Notch阳性表达同肝癌分期、静脉癌栓等呈正相关(P<0.05);正常非肿瘤肝细胞系与不同肝癌细胞系迁移侵袭能力比较,差异有显著统计学意义(P<0.05);γ-分泌酶抑制剂(DAPT)、NS-398(高活性COX-2抑制剂)对肝癌细胞的迁移侵袭能力有显著影响(P<0.05)。结论肝癌细胞迁移侵袭过程当中,Notch信号通路有重要影响,作用机制同Snail及COX-2表达存在联系。