非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中PTEN mRNA表达的研究

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中PTENmRNA的表达及临床病理意义.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增45例非小细胞肺癌和15例癌旁组织中PTEN基因外显子1-8和5-9,并结合临床病理资料进行分析.结果 在45例非小细胞肺癌组织中,PTENmRNA的表达缺失率在外显子1-8和5-9分别为48.9%(22/45)、33.3%(15/45),而正常癌旁组织中全部呈阳性表达.二者在两组中表达缺失率的差别显著(P＜0.05).结论 非小细胞肺癌组织中存在较高比例的PTENmRNA表达缺失,表明PTEN基因转录水平异常在非小细胞肺癌的发生发展中起重要作用.     

WWOX基因在人非小细胞肺癌的杂合性丢失研究

目的检测WWOX(WW domain containing oxidoreductase)基因在人非小细胞肺癌中的杂合性丢失(LOH)情况,并探讨其与非小细胞肺癌临床病理指标之间的可能关系.方法提取52例非小细胞肺癌术后癌组织及相应的癌旁正常组织的DNA,扩增WWOX基因对应的染色体16q23.2～24.1区域的3个微卫星位点多肽性标记(D16S504、D16S3096、D16S3029),变性聚丙烯凝胶电泳、银染后行LOH认定,并分析LOH与患者性别、吸烟史、肿瘤组织类型及临床分期之间的可能关系.结果52例非小细胞肺癌组织样本中29例(55.8%)发现LOH,且LOH发生率男性为66.7%,明显高于女性的23.1%(P＜0.05);吸烟指数≥400年支者为75%明显高于＜400年支者的33.3%(P＜0.01);鳞癌为64.9%,明显高于腺癌的33.3%(P＜0.05);Ⅰ Ⅱ期(52.9%)与Ⅲ Ⅳ期(61.1%)相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论WWOX基因的杂合性丢失普遍存在于非小细胞肺癌中,LOH的发生率与性别、吸烟史、肿瘤组织类型有关,与临床分期无关.     

WWOX蛋白与突变型P53蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨WWOX与突变型P53蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)及癌旁组织中的表达与肿瘤临床病理参数的关系及两者表达的相关性.方法 用免疫组化elivision法分别检测WWOX及突变型P53蛋白在51例NSCLC及20例癌旁正常组织中表达情况.结果 WWOX蛋白在NSCLC组织中与癌旁正常组织中表达的阳性率分别为25.49％(13/51)和85.0％(17/20).突变型P53蛋白在NSCLC组织中与癌旁正常组织中表达的阳性率分别为58.82％(30/51)和10.0％(2/20).WWOX蛋白的阳性率与NSCLC的组织分化程度、病理类型、吸烟、有无淋巴结转移的表达差异有统计学意义(P＜0.05),而与患者的年龄、性别及肿瘤TNM分期无关(P＞0.05).突变型P53的阳性率与NSCLC的分化程度、肿瘤TNM分期、有无淋巴结转移有关(P＜0.05),而与患者的年龄、性别、吸烟、病理类型无关(P＞0.05).WWOX蛋白、突变型P53在NSCLC中的阳性表达呈负相关(r=-3.33,P＜0.05).结论 WWOX蛋白和突变型P53在NSCLC及癌旁组织的表达有显著差异.WWOX与突变型P53蛋白与NSCLC的发生、发展密切相关,并可能起协同作用,其综合检测对肺癌的病情判断和预后评价具有一定价值.     

湖南地区238 例非小细胞肺癌EGFR 基因突变状态分析

目的：评价湖南地区非小细胞肺癌患者EGFR基因突变状态及其与临床特征之间的关系。方法收集2012年1月至2013年6月中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院手术切除的非小细胞肺癌石蜡包埋组织238例,采用PCR扩增结合直接基因测序的方法,对组织DNA中EGFR基因第18-21外显子突变进行检测。结果在238例非小细胞肺癌中,EGFR突变的检出率为35.3％（84/238）。其中,第18、19、20、21号外显子突变占总突变的比例分别为2.4％（2/84）、67.9％（57/84）、3.6％（3/84）、26.2％（22/84）。19号外显子的突变均为第746-753密码子的碱基缺失,以Del E746-A750为主;21号外显子突变类型以L858R为主。女性EGFR基因的突变率显著高于男性,不吸烟者显著高于吸烟者（P〈0.05）。而EGFR基因的突变率与非小细胞肺癌患者的年龄、临床分期和淋巴结转移均无相关性（P〉0.05）。结论湖南地区的非小细胞肺癌EGFR基因突变以19、21外显子为主,且19外显子的突变率高于21外显子,多见于女性、腺癌、不吸烟患者。     

膀胱移行细胞癌组织中PTEN基因第5、8外显子的突变分析

目的：了解膀胱移行细胞癌（TCC）组织中PTEN基因第5外显子（Exon5）和第8外显子（Exon8）的突变情况及其与膀胱癌生物学行为的关系。方法：选择突变率较高的PTEN基因Exon5和Exon8，应用银染PCR—SSCP并结合基因测序方法分析46例TCC患者的PTEN突变情况。结果：PTEN的Exon5扩增产物为379bp，所有肿瘤组织均表现为3条迁移带（2条单链和1条双链），没有发现额外迁移带。Exon8扩增产物为550bp，经酶切为两个片段。所有肿瘤组织均表现为6条迁移带（4条单链和2条双链），没有发现额外迁移带。结论：TCC患者的肿瘤组织中PTEN基因Exon5和Exon8的突变不是一个常见事件，PTEN是否还存在其他灭活方式还需要进一步研究。     

RASSF10 mRNA在肺癌组织中表达的研究

目的探讨RASSF10基因在肺癌组织中的表达情况。方法采用反转录聚合酶链反应(RTPCR)技术检测RASSF10mRNA在37例肺癌组织及15例癌旁正常组织中的表达情况,37例肺癌组织中,鳞状细胞癌18例、腺癌12例、小细胞肺癌7例。结果 RASSF10mRNA在癌旁正常组织中的表达阳性率为93%(14/15),明显高于其在肺癌组织中的19%(7/37)(P<0.05);且在肺癌组织中,RASSF10 mRNA在鳞状细胞癌、腺癌、小细胞癌中的阳性表达率分别为22%(4/18)、25%(3/12)、0(0/7),差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 RASSF10基因的异常改变可能参与了肺癌的发生发展过程;RASSF10可作为肺癌诊断的新的肿瘤标志,并可能成为新的治疗靶点。     

非小细胞癌组织和血清中表皮生长因子受体突变一致性

目的对非小细胞癌(NSCLC)组织和血清中表皮生长因子受体(EGFR)突变的一致性进行分析研究。方法抽取90例NSCLC患者的肿瘤组织及匹配的血清标本,采用直接测序法检测EGFR基因中第19和21外显子的突变状态,分析肿瘤组织和EGFR中基因突变的一致性。结论肿瘤组织总突变检测率为32.2%,血清总突变检出率5.6%。直接测序法检测血清EGFR活化性突变的特异度为100%,灵敏度为17.2%,血清和肿瘤组织EGFR活化性突变的一致率为5.6%。结论血清的突变检出率明显低于肿瘤组织,肿瘤组织可作为评价NSCLC患者EGFR基因突变状态的依据。     

WWOX、p53及Bcl-xl基因在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨WWOX、p53及Bcl-xl基因在食管鳞癌组织中的表达及其与临床病理学特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测10例高分化鳞癌、28例中分化鳞癌、14例低分化鳞癌及52例癌旁正常组织中WWOX、p53及Bcl-xl基因的表达并分析其与临床病理指标的相关性。结果 WW0X在食管鳞癌组织中的表达明显降低,与癌旁正常组织相比较其差异有统计学意义（P〈0.01）,且WWOX的表达与癌组织的分化程度、肿瘤的浸润深度及淋巴结转移情况密切相关（P〈0.05）,在低分化鳞癌中的表达低于高、中分化鳞癌。p53（突变型）基因在食管癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,二者比较其差异具有统计学意义（P〈0.05）,其表达与癌组织的分化程度、肿瘤的浸润深度及淋巴结转移情况密切相关（P〈0.05）,以上两种基因的表达与患者的年龄和性别无关（P〉0.05）。Bcl-xl基因在食管鳞癌组织中的表达高于癌旁正常组织（P〈0.05）,其表达与癌组织的分化程度有关（P〈0.05）,与肿瘤的浸润深度及淋巴结转移情况及患者的年龄性别无关（P〉0.05）。WWOX基因与p53基因及Bcl-xl基因的表达均呈负相关。结论 WWOX在食管鳞癌组织呈低表达,p53（突变型）及Bcl-xl基因在食管鳞癌组织呈高表达。三基因在食管癌的发生、发展及转移过程中有明显的协同作用。     

非小细胞肺癌中EGFR基因突变和扩增的检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌中EGFR基因突变和扩增的检测方法及其临床意义。方法收集200例肺癌组织,通过聚合酶链反应扩增DNA直接测序法检测肺癌DNA中EGFR基因突变和扩增,重点是检测肺癌中EGFR外显子19～21在性别不同中的突变和扩增情况以及在分化不同的癌症中的突变和扩增情况,同时分析其在临床中的意义。结果经聚合酶链反应扩增DNA直接测序法检测发现,非小细胞肺癌中EGFR基因总的突变和扩增数为68例,突变和扩增率为34%,肺癌中EGFR外显子20无明显突变和扩增情况发生,外显子19突变和扩增情况最多有49例,占总数的72.1%,外显子21突变和扩增情况较多有19例,占总数的27.9%,其中女性肺癌患者的EGFR基因突变和扩增情况多于男性肺癌患者,同时基因突变和扩增在腺癌和腺鳞混合癌中发生情况最多,其他次之。结论非小细胞肺癌中EGFR基因突变和扩增多发生于女性肺癌患者,其中又以外显子19和21发生较多,多发生伴有腺癌和腺鳞混合癌的情况下,同时聚合酶链反应扩增DNA直接测序法技术稳定可靠,为临床研究提供有效的依据。     

肺癌中PTEN基因表达及其与凋亡的关系

目的:探讨非小细胞肺癌组织中PTEN的表达及临床意义与细胞凋亡的关系。方法:72例肺癌组织(NSGLG和SCLC)、16例癌旁正常肺组织和7例肺良性病变组织PTEN的表达采用免疫组织化学S-P法检测,34例SCLC组织肿瘤细胞凋亡采用TUNEL法检测。结果:PTEN基因在肺癌组织中的阳性表达率为54.16%,显著低于肺良性病变组织的93.75%(P<0.01)。小细胞癌组织中的阳性率为31.8%,显著低于鳞癌组织(62.96%)和腺癌组织(50.00%)(P<0.05)。结论:PTEN基因的缺失与肺癌的发生与发展密切相关,并可能影响肿瘤的分化和癌细胞凋亡。