幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠模型的研究

目的　建立稳定的Hp感染BALB/c小鼠模型 ,用于Hp致病、免疫和防治的研究。 方法　选用临床分离株 ,应用外科手术法向小鼠胃内直接接种Hp菌液 0 2ml(10 9CFU/ml) ;接种后不同时间取小鼠胃粘膜组织进行细菌学和病理学检查。结果　接种后 2～ 8周 ,小鼠胃内均可分离到Hp ,Hp分离阳性率为 95 %。病理学检查显示鼠胃粘膜明显炎症。感染鼠用阿莫西林治疗后 ,鼠胃组织Hp培养均转阴性。结论　使用Hp鼠胃接种法 ,能建立稳定的Hp感染BALB/c小鼠模型     

幽门螺杆菌感染BALB/c无菌小鼠的免疫应答

目的 探讨幽门螺杆菌感染步鼠的免疫就应答状况。方法 建立ＨＰ经口感染无菌小鼠的动物模型,设立感染免疫组、感染对照组与免疫对照组３组,分别进行试验。结果 感染免疫组抗ＨＰ的特异性ＩｇＧ有显著增高,且该组小鼠胃中的ＨＰ菌数大量减少。结论此种免疫应答以体液免疫为主,细胞免疫所占比例很少,不能彻底清除小鼠胃中的ＨＰ。     

建立幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠动物模型的实验研究

[目的]建立幽门螺杆菌(Hp)BALB/c小鼠感染动物模型。[方法]用cagA基因和vacA基因同时阳性的Hp小鼠适应株给BALB/c小鼠灌胃。[结果]经Hp小鼠适应株灌胃4周后,病理模型组10只感染的小鼠胃黏膜尿素酶试验、细菌学培养和组织病理学检查均为阳性,感染率为100%;正常对照组未见Hp生长,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]成功地建立了云南Hp小鼠适应株感染的BALB/c小鼠动物模型。这种ca gA基因和vacA基因同时阳性的Hp小鼠适应株毒力强容易定植;可在普通饲养条件下建立,即有利应用于云南地区Hp的相关研究,又可节约研究经费,易于推广使用。     

猪链球菌2型BALB/c小鼠动物感染模型的建立

目的研究猪链球菌2型(SS2)中国高致病株05ZYH33株对BALB/c小鼠的致病性,探讨其作为SS2动物感染模型的可行性。方法用猪链球菌活菌经腹腔注射感染小白鼠,并做阴性对照。通过LD50测定、临床症状观察、病理剖检、病原分离鉴定、菌株在各脏器内定植分布检测、细胞因子测定,观察和分析小鼠感染SS2后机体的一系列改变。结果 BALB/c小鼠对05ZYH33株易感,其LD50为4×107 CFU/ml,并可区分强毒株和无毒株毒力差异;病原分离鉴定证实各脏器感染菌株均为SS2;涂板计数表明野生株05ZYH33在小鼠各脏器定植量显著高于无毒株Δcps2B;病死鼠的特征性组织病理学变化表现为典型的弥漫性血管内凝血和微血栓形成;野生株及无毒株均可引起炎症因子IL-6及趋化因子MCP-1的释放,但无毒株△cps2B诱导细胞因子水平显著低于野生株(P0.05)。结论 BALB/c小鼠可被SS2感染并引发炎症反应。适龄SPF BALB/c小鼠是中国SS2强致病株良好的动物感染模型。     

球形幽门螺杆菌致小鼠感染

目的 证明球形幽门螺杆菌体内致病性。方法 用抗生素和水诱导幽门螺杆菌（Hp）球变,螺旋形和球形Hp分别经胃灌注接种BALB／c小鼠,实验组小鼠（各16只）接种Hp菌液0.4ml/只（10^9/ml）,接种4次,2w完成,对照组（10只）接种生理盐水,距最后一次接种后3和4w分别处死小鼠各半,取胃粘膜组织作细菌学检测（包括胃粘膜快速尿素酶试验,细菌培养鉴定,电镜观察）和组织学检测。结果 螺旋菌、抗生素旅为的球形菌、水中球形Hp这3个实验组的胃粘膜组织快速尿素酶试验阳性率分别为93.8%（15／16）、87.5%(14/16)、50％（8／16）,由此反映在的细菌定居量评分为1.75、1.30、0.56,细菌培养阳性率分别为87.5%(14/16)、75.0%（12／16）、68.8%（11／16）,对照组阴性,Hp感染3w和4w的实验结果无差异。电镜下可见3个实验组均有弯曲形、杆状和球形Hp粘附于胃粘膜上。组织学检验发现感染的小鼠胃粘膜呈正常、轻度或重度糜烂、溃疡等不同的表现,有炎症细胞浸润。水中球形Hp感染引起的胃粘膜损伤较轻。结论 球形Hp可致胃炎或溃疡。     

猪链球菌BALB/c小鼠感染模型的初步建立

目的观察猪链球菌（Streptococcus suis）感染小鼠后的临床、病理变化,为将小鼠作为实验室研究猪链球菌的实验动物提供依据。方法用猪链球菌活菌经腹腔注射感染小白鼠,并做阴性对照,观察其临床症状,剖解病死小鼠,制作病理切片观察病理变化。并对病死小鼠做病原分离,通过培养特性鉴定、生化试验以及PCR鉴定确定其为猪链球菌。结果小鼠确由感染猪链球菌而致死,体内各组织、器官均产生典型的败血症病变。结论小鼠对猪链球菌易感,能够作为实验室研究猪链球菌良好的实验动物。     

经腹腔注射建立免疫抑制BALB/c小鼠系统念珠菌感染模型的研究

目的经腹腔注射建立免疫抑制BALB/c小鼠系统念珠菌感染模型。方法 BALB/c小鼠用环磷酰胺致免疫低下后,腹腔注射不同浓度白色念珠菌SC5314,观察小鼠不同时间血液常规、肾脏真菌载量和组织病理变化。结果白色念珠菌SC5314孢子浓度在2×106～5×107个/ml间的5种0.1ml菌液均造成小鼠系统感染白色念珠菌,病理表现以注射2×107个/ml孢子组小鼠最为典型,在心、肺、肾、脑、横膈、肠系膜等组织内均可见真菌孢子和菌丝。结论经腹腔注射白色念珠菌SC5314可成功建立免疫抑制BALB/c小鼠系统念珠菌感染模型,最适感染剂量为每鼠0.1ml的1×107～2×107个孢子/ml菌液。     

华支睾吸虫感染BALB/c小鼠肝胆管纤维化模型的建立

目的建立华支睾吸虫感染BALB/c小鼠肝胆管纤维化模型。方法将BALB/c小鼠随机分为4组,分别以50个、100个和150个囊蚴采用胃饲感染,同时设胃饲生理盐水组为对照。感染后20 d开始采用加藤卡茨法检测小鼠粪便;感染后8周,取小鼠肝脏右外叶组织进行HE和Masson染色,取小鼠肝脏左叶组织进行总蛋白提取,分析肝脏α-SMA的表达情况。结果感染后31 d小鼠粪便开始检测到华支睾吸虫卵,39 d所有感染组小组均检测到感染。HE及Masson结果显示,与对照组相比,感染组小鼠汇管区出现明显的纤维化改变,且随着胃饲囊蚴数量的增加纤维化越明显,差异具有统计学意义(F=86,P<0.01)。蛋白质免疫印迹试验发现感染小鼠肝脏α-SMA蛋白表达明显高于对照组,且随着胃饲囊蚴数量增加而递增,差异有统计学意义(F=86.5,P<0.05)。结论成功建立了华支睾吸虫感染BALB/c小鼠肝胆管纤维化模型,为后续研究华支睾吸虫致肝胆管纤维化机制奠定了基础。     

幽门螺杆菌感染动物模型菌株及其研究进展

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）菌株间基因水平的差异明显,因此在动物实验中,菌株的选择也是决定实验结果的重要方面。目前,动物模型中使用的菌株主要有Hp外的螺杆菌属其他菌株、临床分离株及幽门螺杆菌小动物适应株。这些菌株用于模拟Hp感染人后的病程,以便进行致病机制的研究和治疗效果的评价。本文就建立动物模型过程中使用的主要螺杆菌株及其适应范围作一综述。     

小鼠模型中蔓越莓汁防治幽门螺杆菌感染的实验研究

背景:根除幽门螺杆菌(H.pylori)感染有助于消化性溃疡和胃黏膜炎症的愈合,蔓越莓汁已被证实可预防尿路感染的复发。目的:探讨蔓越莓汁是否能根除或预防H.pylori感染。方法:治疗实验中,以H.pylori感染C57BL/6小鼠。感染后2周,80只小鼠随机分为4组,每组20只。A组:经口灌胃予蔓越莓汁(0.5 ml/只,1次/d)共30天;B组:三联疗法(阿莫西林50 mg/kg、枸橼酸铋6.15 mg/kg和甲硝唑22.5 mg/kg,1次/d)共14天;C组:蔓越莓汁加三联疗法:对照组:H.pylori感染后不予任何治疗。治疗实验结束后24 h和4周,各组分别处死10只小鼠,用快速尿素酶试验、细菌培养和组织病理学方法检测H.pylori感染情况。预防实验中,40只小鼠经口灌胃予蔓越莓汁(0.5 ml/只,1次/d)共25天,第26～30天时将小鼠随机分为4组,每组10只。在第26、28和30天,A组:不给予蔓越莓汁,而予H.pylori攻击3次;B组:先将H. pylori在蔓越莓汁中孵育30 min,然后再攻击小鼠;C组:给予蔓越莓汁后6 h予H. pylori攻击;对照组:不给予蔓越莓汁而仅予H. pylori攻击。在第27和29天,各组仍给予蔓越莓汁。预防实验结束后2周处死小鼠检测H. pylori感染情况。结果:治疗实验结束后24 h,A、B、C组的H. pylori清除率分别为80％、100％和90％,均显著高于对照组(P<0.01);治疗实验结束后4周,A组     

蒙古沙鼠感染幽门螺杆菌后的胃部病理学变化研究

目的　建立幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)的蒙古沙鼠长期感染模型并观察其胃内的病理学改变。 方法　蒙古沙鼠 (8周龄 ) 80只 ,随机分为实验组 (40只 )和对照组 (40只 ) ,所有沙鼠禁食水 1d ,第 2天灌喂 5 0 %的乙醇 0 3ml,试验组第 3天及第 4天分 3次灌喂cagA Hp菌液 (10 9cfu/ml) ,0 5ml/只·次 ,对照组灌喂相同量无菌肉汤。最后一次灌喂后 2h进食水。距最后一次灌菌后 4、8、12、2 0、2 4周分别剖杀动物 ,每次实验组、对照组各 8只 ,进行微生物学检查 (粘膜涂片染色镜检、分离培养、快速尿素酶试验 )、血清学检查 (ELISA测抗Hp抗体 )和病理学检查。结果　实验组沙鼠在不同时间Hp感染率均达到 10 0 %。从第 4周开始 ,可见所有实验组沙鼠胃组织中有大量炎性细胞浸润 ,随着时间推移形成淋巴滤泡。部分沙鼠在第 12周后至 2 4周可见明显出血、慢性活动性胃炎及溃疡 ,有的溃疡可深达肌层。对照组沙鼠均无Hp定植及组织学病变。结论　蒙古沙鼠感染Hp后 ,可出现与人极相似的病理组织学改变 ,对于研究Hp的致病机制及疫苗具有重要价值     

幽门螺杆菌感染Balb/c 小鼠模型的建立及对N-甲基-N-亚硝基脲诱发胃癌的影响

目的建立一种稳定的造模周期短的幽门螺杆菌(Hp)感染模型,观察Hp对小鼠胃黏膜的损害程度,同时研究Hp感染是否促进亚硝基类化合物的致癌作用.方法 94只Balb/c小鼠分为4组.第1组单用N-甲基-N-亚硝基脲(MNU);第2、3组小鼠用灌胃法定植Hp,第3组小鼠加用MNU灌胃;第4组为正常对照.36周后处死全部小鼠,分别用尿素酶、Giemsa染色和微需氧细菌培养检测Hp定植;H-E染色进行鼠胃黏膜病理诊断.结果 Balb/c小鼠Hp定植率达93.9%.Hp单一处理组中度以上炎症占100.0%,其中萎缩性胃炎占20.0%;而Hp和MNU联合处理组中度以上炎症占100.0%,其中萎缩性胃炎占23.1%,不典型增生占42.3%和57.7%(胃体和胃窦),并发现2只小鼠有低分化腺癌,占7.1%.Hp处理组和Hp MNU联合处理组在炎症程度上与正常对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.01).结论本实验成功建立了Hp感染小鼠模型,验证了Hp和胃癌的发生有高度相关性,证实Hp在协同MNU致癌性中的作用,提示胃癌的发生并非Hp感染单一因素的结果,而和多因素共同作用有关.     

Reduced apoptosis in BALB/c mice infected with Heligmosomoides polygyrus

We evaluated levels of apoptosis and the immune response ex vivo in BALB/c mice infected with Heligmosomoides polygyrus. Cell proliferation, apoptosis and cytokine production were measured in mesenteric lymph nodes (MLN) without exposure to H. polygyrus antigens in culture. The inhibited apoptosis and cytokine production reported might reflect a state of cell hyporesponsiveness in the prepatent phase of infection. These changes were accompanied by changes in the percentage of CD4+ cells in MLN and popliteal lymph nodes (PLN). The prolonged reduction in apoptosis coexisted with induced cell proliferation, elevated TNF-alpha, IL-12p70, IFN-gamma, IL-6, IL-10 and TGF-beta synthesis, but lowered IL-4 and IL-2 levels. In the chronic phase of infection an increasing production of IFN-gamma, monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1), IL-10 and TGF-beta with decreasing concentrations of other cytokines resulted in restored apoptosis. The cytokine response in serum showed moderate production of TNF-alpha, temporary involvement of IL-12p70, induction of IFN-gamma and IL-10 synthesis, as well as growing IL-6 and MCP-1 production. It is suggested that a synchronized synthesis of distinct cytokines is accompanied by different levels of inhibited apoptosis during the prepatent and chronic phases of H. polygyrus infection in BALB/c mice. We suggest that immunosuppression provoked by the nematode is not the outcome of parasite-induced apoptosis, but rather results from a hyporesponsiveness experienced by cells during H. polygyrus infection.     

BALB/c小鼠寄生螨虫及对其皮肤的损伤

用实验动物体外寄生虫监测常规方法,观察了螨虫在ＢＡＬＢ／ｃ小鼠体外寄生状况。结果显示感染率为１４％,寄生螨虫的种类为鼠癣螨,螨虫的寄生部位通常在脸,颈和背部,并将卵产于毛干上。     

结核分枝杆菌感染对BALB/c小鼠B细胞发育分化的影响

目的 探讨结核分枝杆菌感染对小鼠B淋巴细胞分化发育的影响。方法 建立Mtb感染BALB/c小鼠模型,在感染早期(4周)及晚期(8周)分别取小鼠骨髓细胞及脾脏细胞,或经培养后,荧光抗体染色,用流式细胞术对感染早期及晚期小鼠的B细胞表型进行分析,设生理盐水处理的小鼠作为对照。结果 Mtb感染组与对照组比较,pro-B细胞(CD45R⁺CD43⁺)(4周:t=2.886,P<0.05)、未成熟B细胞(CD45R⁺IgM⁺IgD^-)(4周:t=4.760,P<0.05)减少,骨髓成熟B细胞(CD45R⁺IgM^+/-IgD⁺)(4周:t=-3.485,P<0.05;8周:t=-2.594,P<0.05)与脾脏成熟B细胞(CD45R⁺IgMlowIgDhi)(4周:t=-2.275,P<0.05;8周:t=-2.97,P<0.05)增多;小鼠脾脏B细胞活化分子CD69表达升高(4周:t=-2.271,P<0.05;8周:t=-2.052,P<0.05);小鼠脾脏记忆性B细胞 (CD45R⁺CD27⁺IgD^+/-)升高(4周:t=-4.203,P<0.05;8周:t=-5.280,P<0.05)。结论 Mtb感染能影响B细胞的分化发育,促使B细胞向成熟细胞分化,并能促使B细胞活化,使机体更有利于抗结核的感染。     

幽门螺杆菌靶向核酸疫苗的构建及免疫学评价

目的:为了提高幽门螺杆菌DNA疫苗的免疫原性,构建具有靶向作用于APC细胞的核酸疫苗.方法:利用基因工程技术,将靶向基因片段和过氧化氢酶基因融合构建了核酸疫苗.体外转染293T细胞,间接免疫荧光和ELISA检测其基因表达情况.用该核酸疫苗肌肉免疫注射BALB/c小鼠后,测定其血清IgG、IgG1和IgG2a水平.结果:间接免疫荧光检测转染DNA疫苗的293T细胞,表明该疫苗能在真核细胞中表达目的抗原,通过ELISA方法测定表明其仍具有IgG抗体结合能力.BALB/c小鼠免疫后血清测定结果表明,该靶向核酸疫苗诱导的抗体水平高于对照质粒pDNAkat,抗体分型实验显示靶向核酸疫苗pcDNAkathIgz和pcDNAkat,促进了免疫反应类型由Th2向Th1的部分偏转.结论:成功构建了靶向APC细胞的幽门螺杆菌核酸疫苗,并在小鼠体内诱导了较高的抗体水平.     

22L毒株感染雌性BALB/c小鼠的生物学特征检测

“唯蛋白”假说指出,朊蛋白PrP^C的错误折叠体PrP^Sc是朊病毒病的重要的感染因子。本文中,用22L Scraipe毒株感染BALB/c小鼠,在脑内注射后,130 d左右小鼠出现明显的神经症状,150 d陆续出现濒死症状。对濒死期患病小鼠进行检测,表现出典型的朊病毒病的病理特征:抗PK酶消化,神经纤维网内出现空泡结构,神经元消失,朊蛋白聚集,星形胶质细胞增多等。