元气实质试探及其他

目的 探讨中医学元气的实质及肾先天之本的意义。方法 从中医传统元气观点出发,结合现代生物学、细胞学、中药药理学等理论,从细胞水平综研阐明。结果 中医学元气的生理作用和病理变化与细胞的生理特征和病理变化有其本质的联系,由此发现肾对本体不俱有“先天之本”的意义。结论 元气的实质是构成人体生命基本单位的细胞的物质结构和生命特征及遗传信息;肾“先天之本”的意义,只是对子代而言;补肾疗法用以我种病症的实质是由于方药俱高选择性作用所致。     

树突状细胞在部分乳腺癌中的表达及意义

目的 通过测定乳腺癌组织中树突状细胞的计数,探讨其与乳腺癌临床病理特征(病理分类、组织分化程度、腋窝淋巴结转移、患者年龄、月经状况)的关系,阐明乳腺癌中树突状细胞的分布表达与其临床预后的相关性.方法 应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)方法检测60例乳腺癌组织中树突状细胞的表达.结果 树突状细胞主要分布于肿瘤间质中,少量散布于肿瘤细胞之间,呈卵圆形或不规则形,胞浆丰富,细胞表面突起较短或无突起,与淋巴细胞相伴浸润.树突状细胞计数随着乳腺癌组织分化程度增高而增多,高分化与中分化、低分化之间树突状细胞计数差异有统计学意义(P<0.05);树突状细胞计数在患者年龄、月经状况、病理学分类及淋巴结是否转移差异均无统计学意义(P>0.05).乳腺癌患者树突状细胞数目与预后呈正相关(r＝0.280,P<0 05).结论 树突状细胞的计数随着乳腺癌组织分化程度增高而增多,其数目与乳腺癌患者生存期呈正相关.     

树突状细胞在大鼠穿透性角膜移植排斥反应中的作用

目的 观察大鼠角膜组织中树突状细胞的分布,以了解树突状细胞在穿透性角膜移植排斥反应中的作用.方法 制作大鼠穿透性角膜移植模型,观察角膜透明度、新生血管.采用免疫组织化学方法检测OX-62 树突状细胞在角膜的分布.结果 术后角膜植片均出现不同程度的新生血管、角膜水肿、混浊、基质增厚.排斥反应发生率100%.正常角膜组织中未见OX-62 树突状细胞分布,在发生急性排斥反应的角膜上皮层中有阳性细胞表达.脾脏阳性细胞表达与文献报道一致.结论 OX-62 树突状细胞出现在移植后发生排斥的角膜组织中,角膜组织中的树突状细胞可能参与角膜移植后的免疫反应.     

蜕膜组织中树突状细胞DEC-205及HLA-G的表达与子痫前期的关系研究

目的 探讨蜕膜组织中抗原提呈细胞-树突状细胞(Dcs)的数量及对HLA-G的抗原提呈作用与子痫前期发病的关系.方法 取36例子痫前期患者(试验组)及36例年龄配对的正常产妇的蜕膜组织(对照组),应用免疫组化法分别检测两组胎盘蜕膜组织树突状细胞中DEC-205+和HLA-G+的表达差异.结果 与对照组相比,子痫前期患者胎盘蜕膜组织中DEC-205+树突状细胞明显增多,而蜕膜组织中HLA-G+树突状细胞明显减少,差异有显著性.结论 子痫前期患者胎盘蜕膜组织中树突状细胞数量明显增多,而HLA-G表达明显下降,说明蜕膜组织中树突状细胞对HLA-G的抗原提呈作用降低与子痫前期的发病有一定关系.     

胎盘组织匀浆上清对BALB/c小鼠脾脏DC生物学特征的影响

目的通过观察胎盘组织匀浆上清(PTHS)对小鼠脾脏树突状细胞(DC)生物学特征的影响,探讨妊娠免疫耐受的机制。方法分离妊娠及正常BALB/C小鼠脾脏单个核细胞,诱导分化为树突状细胞,经PTHS作用后,流式细胞仪检测树突状细胞的表面标志和抗原摄取能力,MTT法检测其同种异基因淋巴细胞刺激能力,ELISA方法检测其产生的细胞因子水平。结果妊娠小鼠脾脏树突状细胞的生物学特征与正常对照小鼠比较差异无统计学意义,而经PTHS作用后的妊娠小鼠及正常对照小鼠的脾脏CD11b+树突状细胞明显降低,而CD8α+树突状细胞明显增高(P<0.01);树突状细胞的抗原摄取能力及刺激同种异基因的淋巴细胞反应的能力也明显低于正常小鼠(P<0.01);PTHS作用后的树突状细胞产生较高水平的IL-10和较低水平的IL-12,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PTHS可向下调节BALB/c小鼠脾脏树突状细胞的生物学特征,可能与妊娠免疫抑制有关。     

树突状细胞在小鼠移植瘤中的分布和形态学观察

目的 探讨树突状细胞(dendritic cell,DC)在小鼠移植瘤中的分布和形态学特征.方法 采用光镜、透射电镜和免疫组织化学方法观察30只小鼠移植瘤中树突状细胞分布及形态.结果 树突状细胞主要分布在小鼠移植瘤周边区及瘤巢内,实验组树突状细胞的数量比对照组明显增多(P＜0.01).电镜下,树突状细胞体积大,形态不规则,表面有许多树枝状突起,核不规则,有切迹.胞浆内有丰富的线粒体、核糖体和内质网.树突状细胞具有两种形态,一种表现为突起多,细胞器丰富;另一种表现为突起较少,细胞器也较少.树突状细胞与瘤细胞、树突状细胞与淋巴细胞、淋巴细胞与瘤细胞之间存在多种接触形式.同时可见淋巴细胞与淋巴细胞,树突状细胞与树突状细胞之间也有紧密接触.还可见树突状细胞与瘤细胞接触,接触部位有颗粒物质,瘤细胞趋于凋亡状态.结论 树突状细胞在小鼠移植瘤组织中有两种类型,且在肿瘤组织中数量显著高于正常组织.     

经腹输卵管结扎术后肥胖的中医治疗(附1例报告)

经腹输卵管结扎是农村绝育手术最常用的手术措施之一,但术后发胖而就诊者临床屡见不鲜。《杂病源流犀蚀》所谓:“谷气盛元气,其人肥而不寿”,《金匮要略.血痹虚劳脉证并治》亦云:“夫尊荣人骨弱肌肤盛,……。”徒见形体肥胖,实则元气已虚。《中医临证备要》曰:“体胖人逐渐瘦弱     

慢病毒介导的自杀基因对树突状细胞的杀伤作用

目的 探讨慢病毒介导的自杀基因胸腺激酶（TK）对小鼠树突状细胞（DC）的杀伤作用.方法 构建含自杀基因TK的慢病毒载体质粒,转染树突状细胞后通过更昔洛韦激活自杀基因使细胞死亡.结果 阳性重组质粒酶切及测序鉴定与预期结果相符,成功构建其真核表达载体.收集含自杀基因的慢病毒,测其效价为2×109TU/ml,达到实验要求.慢病毒转染树突状细胞后,观察树突状细胞的形态、大小及数量与对照组比较无明显差异,经流式细胞仪检测绿色荧光蛋白（GFP）表达率为96.43％.CCK-8法检测发现,树突状细胞随着更昔洛韦药物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐上升.药物浓度100μ g/ml作用时间48h时,为药物对细胞的最佳杀伤作用时间;更昔洛韦该药物对正常的树突状细胞未发现有毒性作用.结论 慢病毒介导的自杀基因TK对小鼠树突状细胞具有显著的杀伤作用.     

人DeltaNp73α基因修饰的树突状细胞抗瘤免疫学效应研究

目的 研究DeltaNp73α重组腺病毒转染树突状细胞诱导的特异性免疫抗瘤作用.方法 人脐静脉血经梯度离心及IL-4、GM-CSF诱导培养树突状细胞;DeltaNp73α重组腺病毒增强离心法转染树突状细胞,观察DeltaNp73α对树突状细胞活化、凋亡的影响;同时检测其所诱导的DeltaNp73α特异性细胞毒性T淋巴细胞对不同DeltaNp73α表达水平肿瘤细胞的细胞毒性作用.结果 Western blot证实重组腺病毒转染树突状细胞后DeltaNp73α的有效表达;DeltaNp73α修饰的树突状细胞凋亡率显著低于对照组;DeltaNp73α修饰树突状细胞诱导的细胞毒性T细胞可以有效的杀伤DeltaNp73α高表达的A549/DeltaNp73α细胞、K-562细胞;且这种免疫抗瘤作用可能与靶肿瘤细胞DeltaNp73α水平相关.结论 DeltaNp73α修饰的树突状细胞,其凋亡率降低;并可以有效诱导针对DeltaNp73α高表达肿瘤细胞的特异免疫抗瘤作用.     

树突状细胞的培养及成熟的鉴定

目的 探讨人体外周血树突状细胞在体外培养诱导其成熟的方法,通过得到成熟的细胞培养技术,对树突状细胞功能的研究奠定实验基础.方法 通过Ficoll-Hypaque梯度离心法得到单个核细胞,再诱导使其分化、扩增、纯化形成稳定的树突状细胞,通过树突状细胞自身形态、特异性表型,抗原摄取能力,鉴别培养的细胞,从而得到具有典型特征的树突状细胞.结果 树突状细胞培养第7天,加入LPS后,倒置显微镜及扫描电镜下观察,树突状细胞成熟中,细胞胞质增大,细胞膜表面能形成大量树突状突起,表面标志物CD80、CD86、CD11c、HLA-DR的表达增高(P＜0.05),共聚焦显微镜下,成熟的树突状细胞对抗原的吞噬能力减弱.结论 Ficoll-Hypaque梯度离心法能够得到稳定的树突状细胞体外培养体系.