咪喹莫特——一种新型免疫调节剂

免疫调节剂咪喹莫特 ,通过增强抗原递呈细胞活力 ,促进B淋巴细胞增殖和分化 ,增强T淋巴细胞免疫 ,调节Th1/Th2细胞因子产生 ,从而具有重要的抗病毒、抗增殖和抗肿瘤能力 ,在临床上应用于多种疾病的治疗均取得良好效果。近年来的研究资料提示咪喹莫特是一种疗效好、副作用小、有应用前景的免疫调节剂。     

咪喹莫特——一种新型免疫调节剂

免疫调节剂咪喹莫特，通过增强抗原递呈细胞活力，促进B淋巴细胞增殖和分化，增强T淋巴细胞免疫，调节Thl/Th2细胞因子产生，从而具有重要的抗病毒、抗增殖和抗肿瘤能力，在临床上应用于多种疾病的治疗均取得良好效果。近年来的研究资料提示咪喹莫特是一种疗效好、副作用小、有应用前景的免疫调节剂。     

胞质转导肽-HBcAg18-27-Tapasin诱导C57BL/6小鼠T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及HBV特异性CTL的表达

目的 观察融合蛋白胞质转导肽(CTP)-HBcAg18-27-Tapasin诱导C57BL/6小鼠T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及HBV特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的表达.方法 C57BL/6小鼠随机分为实验组CTP-HBcAg18-27-Tapasin、对照组CTPHBcAg18-27、HBcAg18-27-Tapasin及空白组(生理盐水).经肌肉免疫小鼠,ELISA检测T淋巴细胞分泌细胞因子;流式细胞术(FCM)检测T淋巴细胞内的细胞因子;CCK-8法检测T淋巴细胞增殖活性.结果 实验组能有效刺激小鼠T细胞分泌Th1型细胞因子;FCM检测实验组融合蛋白诱导的CTL水平明显高于其他组;且实验组T淋巴细胞增殖活性明显高于对照组及空白组.结论 CTP-HBcAg18-27-Tapasin融合蛋白免疫C57BL/6小鼠后,能提高T淋巴细胞增殖活性,能有效刺激T淋巴细胞分泌Th1型细胞因子及增加CTLs的表达.     

间充质干细胞联合胰岛移植对受体鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)与胰岛共移植时,探讨MSCs如何通过T淋巴细胞亚群发挥免疫抑制作用。方法 Balb/c小鼠骨髓MSCs,与C57LB/6小鼠脾脏分离的T淋巴细胞和Balb/c小鼠脾淋巴细胞共培养,监测对T淋巴细胞增殖能力和细胞周期影响。与C57LB/6小鼠来源的T淋巴细胞共培养,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群的变化。用Balb/c小鼠的骨髓MSCs和胰岛联合移植到C57BL/6糖尿病模型鼠,流式细胞术分析受体鼠T淋巴细胞亚群的变化。结果 MSCs可明显抑制T淋巴细胞增殖能力,使T细胞滞留在G0/G1期。使Th1/Th2和Tc1/Tc2比值向Th2和Tc2倾斜,对初始和记忆T细胞具有明显的抑制作用。MSCs联合胰岛移植可使免疫排斥反应减轻。结论 MSCs可抑制T淋巴细胞的增殖,Th1/Th2和Tc1/Tc2比值向Th2和Tc2倾斜,下调初始和记忆T细胞,以发挥免疫抑制作用。     

TLR7激动剂咪喹莫特对MRL/lpr狼疮小鼠RORγt~+Th17细胞的影响

目的初步探讨TLR7激动剂咪喹莫特干预RORγt~+Th17细胞治疗MRL/lpr狼疮小鼠的免疫机理。方法将16周Balb/c正常小鼠和16周MRL/lpr狼疮小鼠随机分为生理盐水组、0.05 mg/kg咪喹莫特组、1 mg/kg地塞米组,每组5只,腹腔注射给药,1次/d,连续4周;采用流式细胞术检测小鼠脾脏中Th17(CD4~+IL-17A~+)细胞的比例和转录因子RORγt(RORγt~+Th17细胞)的表达水平,并分析细胞因子IL-17A(CD4~+IL-17A~+)和转录因子RORγt的相关性。结果 Balb/c正常小鼠中,咪喹莫特能降低脾脏中Th17细胞的比例(P0.05),对Th17细胞转录因子RORγt的表达有下调趋势,但无统计学差异(P=0.616);MRL/lpr狼疮小鼠中,咪喹莫特能明显下调小鼠脾脏中Th17细胞的比例(P0.01)和转录因子RORγt的表达(P0.01);细胞因子IL-17A和转录因子RORγt呈显著的正相关性(r=0.911,P0.000 1)。结论 TLR7激动剂咪喹莫特下调MRL/lpr狼疮小鼠脾脏中Th17细胞与转录因子RORγt的表达,降低IL-17的分泌,减缓SLE的发生,为咪喹莫特有望成为治疗SLE的药物提供了新的实验数据。     

057 辅助性T淋巴细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用

机体抗肿瘤免疫反应中起重要作用的是细胞免疫,近年来辅助性T淋巴细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用越来越为人们所重视.Th细胞不仅可以分泌细胞因子调控肿瘤免疫,而且具有免疫记忆和直接杀伤肿瘤细胞的作用,随着一系列被Th细胞识别的肿瘤抗原被鉴定出来,人们对于Th细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用有了进一步的认识.本文综述了近年来Th抗肿瘤作用机理及Th细胞表位研究进展.     

HMGB1对淋巴细胞增殖、凋亡及Th1/Th2、Tc1/Tc2漂移的影响

目的:探索HMGB1是否参与淋巴细胞免疫功能的调节.方法:系列浓度HMGB1单独或与ConA联合刺激培养小鼠脾淋巴细胞.MTT法检测细胞增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡、细胞表面CD3、CD8及细胞内IL-4、IFN-γ表达.结果:(1)HMGB1时间-剂量依赖性调节淋巴细胞增殖,而不影响其凋亡.(2)不同HMGB1浓度和刺激时间不影响淋巴细胞Th1、Th2及Th1/Th2变化,但10 μg/L和100 μg/L HMGB1刺激12～24 h,Th1亚群占优势;培养12～24 h,淋巴细胞Tc1亚群明显减少,Tc2无变化.Tc1/Tc2变化显示,1 μg/L和10 μg/L HMGB1刺激,Tc1亚群占优势.(3)培养12～24 h,上清中IL-2增加,sIL-2R减少,IL-2/sIL-2R比例升高20～50倍,尤以10 μg/L HMGB1刺激明显.结论:低剂量HMGB1可增强淋巴细胞免疫功能.     

056 树突状细胞与T辅助细胞分化

病原体感染或抗原刺激可诱导树突状细胞(DC)分化为DC1和DC2并迁移进入淋巴组织,在淋巴组织中,DC1和DC2通过抗原特异性信号(递呈抗原)、协同刺激信号(诱导Th充分活化)和分化或极化信号(主要是IL-12,也包括DC的表面分子)分别诱导Th分化为Th1和Th2,各种抗原相关的、感染组织相关的和免疫相关的因素通过调节IL-12的分泌水平和协同刺激分子的表达水平,或调节Th对DC的敏感性而调控Th的分化.这些相互作用使机体能快速选择合适的免疫应答方式清除相应的抗原.本文介绍了DC诱导Th分化机理的最新进展.     

系统感染白色念珠菌的Balb/c小鼠免疫功能探讨

目的 探讨Balb/c小鼠系统感染白色念珠菌后免疫功能的动态变化. 方法 MTT法检测ConA诱导的T淋巴细胞增殖功能;ELISA法测定血清IL-18 、IFN-γ和IL-4水平;RBC-C3bRR法观察红细胞的黏附功能;真菌培养计算左肾白色念珠菌数.结果 高低剂量组感染组T淋巴细胞增殖功能呈上升趋势,至感染后第 7天达正常水平;IL-18水平均从感染第1天骤降后,至感染后第7天达正常水平;而IFN-γ始终高于正常对照组及免疫功能低下组;IL-4于感染1 d后降低,至第7天后高于正常对照组.低剂量组感染白色念珠菌后对RBC-C3bRR有刺激增强作用 .高低剂量组的白色念珠菌的廓清能力随时间延长均增强.结论 Balb/c 小鼠高低剂量感染白色念珠菌时,对ConA诱导的T淋巴细胞增殖功能有一定的刺激增强作用;感染早期多以Th1 型细胞应答为主,后期Th1/Th2型细胞因子均升高,示体液免疫也参与了机体抗白色念珠菌感染.Blab/c小鼠低剂量感染白色念珠菌对RBC-C3bRR有刺激增强作用.Blab/c小鼠高低剂量感染白色念珠菌后,其廓清能力随时间延长而不断增强.     

伴慢性HCV感染海洛因依赖者血清中不同亚类T淋巴细胞产生主要细胞因子水平的观察

研究海洛因依赖者伴慢性HCV感染机体的免疫功能有现实意义.细胞因子作为细胞间信号传递分子,主要参与调节免疫应答、免疫细胞分化发育、介导炎症反应等,细胞因子含量测定可作为了解机体免疫功能的一项重要指标.对伴慢性HCV感染海洛因依赖者这一特殊人群的免疫功能从不同亚类T淋巴细、Th1、Th2、Th3、Th9、Th17)产生主要细胞因子(IFN-γ、IL-4、TGF-β1、IL-9、IL-17)水平进行研究,国内罕见报道.     

人表皮朗格汉斯细胞的分离纯化及其对咪喹莫特免疫刺激作用的反应

目的：探讨获取较高纯度和活性人表皮朗格汉斯细胞（Langerhans cell, LC）的实验方法,并观察分选所获人表皮LC接受免疫调节剂咪喹莫特刺激后细胞因子mRNA表达的变化.方法：联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分选后的细胞用结合有FITC的鼠抗人CD1a单抗标记,经流式细胞仪检测LC纯化率,采用0.4%台盼蓝染色检测细胞的活性.将人表皮LC分为实验组和对照组,实验组加5 μg/ml咪喹莫特,对照组不加药,处理4小时后提取总RNA,采用RT-PCR法检测各组细胞中细胞因子TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA的表达量.结果：流式细胞仪检测分选后LC纯化率为84.48%,台盼蓝染色显示细胞活性＞95%.LC经咪喹莫特处理后的实验组TNF-α、IL-1β及IL-6三种细胞因子mRNA表达量均较对照组显著增高（P＜0.05）.结论：联合应用密度梯度离心和免疫磁珠法,可获得较高纯度、有活性的LC细胞,且具有操作简单、易于无菌条件下分离纯化的优点.LC能接受咪喹莫特刺激而上调细胞因子mRNA的表达.     

大鼠骨髓间充质干细胞与Sertoli细胞体外共培育的免疫负调作用

目的 探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）与Sertoli细胞（SCs）体外共培育时对免疫应答的调节作用,为两者联合应用于移植修复提供线索.方法 用密度梯度离心法分离SD大鼠脾脏单个核细胞（简称L）,羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记细胞后,将其加入按照不同的比例混合的BMSCs与SCs共培育体系,设立L细胞为对照组,L＋刀豆蛋白A（ConA）、BMSCs＋L＋ConA、SCs＋L＋ConA、BMSCs＋SCs＋L＋ConA四大组细胞为实验组.培养4 d,通过流式细胞术分析T淋巴细胞的增殖情况.结果 单个核细胞培养体系中加入ConA可以显著刺激T淋巴细胞增殖.BMSCs、SCs均可抑制淋巴细胞增殖,抑制作用随加入BMSCs和SCs的比例增加而增强,BMSCs和SCs混合培养后对淋巴细胞增殖抑制作用进一步增强,且在某些浓度时呈现协同性.结论 BMSCs与SCs体外共培育时可增强免疫抑制作用.     

IL-23/IL-17炎症轴在咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮肤损害中的作用

 目的：观察IL-23/IL-17炎症轴在咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损形成过程中的作用及变化规律。方法：雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组和咪喹莫特组,采用PASI评分观察银屑病样小鼠模型皮损动态变化;光镜观察皮损组织形态学变化;细胞因子抗体芯片技术对比检测两组小鼠血清及皮损组织中细胞因子谱的变化;采用流式细胞小球微阵列术、实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹分析技术对小鼠血清及皮肤组织中细胞因子含量、mRNA和蛋白表达水平进行检测;流式细胞术分析外周血及脾细胞成分。结果：咪喹莫特诱导小鼠产生红斑、鳞屑、增厚等典型的银屑病样皮损,并随着给药时间的延长呈现一个抛物线型的动态变化;经咪喹莫特外用刺激后,小鼠皮肤及血清中IL-23/IL-17轴相关细胞因子、Th1、Th2和Treg类细胞因子含量及表达水平均显著升高。IL-23/IL-17轴细胞因子表达也呈现一个先升高后降低的动态变化过程。咪喹莫特组小鼠外周血及脾细胞中树突状细胞比例显著升高,脾细胞中Th17细胞比例升高,约为正常对照组的3～4倍,Treg细胞比例约为正常对照组的2倍。结论：咪喹莫特诱导小鼠产生的皮损症状、病理学特征及细胞因子改变都与银屑病相似,是进行银屑病研究可行的动物模型,该模型制备后第1～8天可模拟疾病的发展阶段。Th17细胞活化及IL-23/IL-17轴参与了该模型皮损的形成,并呈现一个先升高后降低的动态变化过程。Th1细胞介导的炎症反应也参与了该模型皮损的形成,并且伴随Treg 和Th2类细胞因子的反馈性升高。     

Th17/Treg失衡在包虫所致过敏反应中作用的研究进展

包虫病是一种由T细胞亚群参与,以Treg介导的免疫抑制作用为主的慢性寄生虫感染性疾病。Treg和Th17被定义为2个不同的亚群,在自身免疫性疾病和炎症性疾病的发病过程中发挥相反作用。Th17/Treg平衡对控制炎症以及介导免疫逃逸起重要作用。研究指出,囊性包虫病患者外周血Treg数量、相关细胞因子(IL-10和TGF-β)及转录因子(Foxp3)水平均显著升高,而Th17数量、相关细胞因子(IL-17和IL-23)及转录因子(RORγt)水平则显著降低,提示棘球蚴寄生过程中Th17/Treg相关细胞因子失衡可能也参与肝包虫所致免疫逃逸。免疫逃逸与过敏反应息息相关,文章结合目前情况就Th17/Treg失衡在包虫所致过敏反应中的作用展开综述。     

102 类风湿关节炎发病机制的研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种以滑膜慢性炎症为主要表现的自身免疫性疾病,病因和发病机制尚不明确.本文从细胞因子、Th1/Th2细胞平衡、细胞凋亡、性激素和原癌基因与RA之间的关系阐述RA的发病机制.     

尖锐湿疣患者外周血Thl/Th2及Tc1/Tc2亚群的检测及意义

目的 探讨辅助性T淋巴细胞(Th细胞)和细胞毒性T淋巴细胞(Tc细胞)的极化情况在尖锐湿疣(CA)发病机理中的作用及其与疾病复发的关系.方法 采用三色荧光抗体染色流式细胞术检测细胞内细胞因子的方法 ,检测30例CA患者和20名健康对照者外周血CD3+CD8-/IFN-γ+(Th1)、CD3+CD8-/IL4+(Th2)、CD3+CD8+/IFN-γ+(Tc1)和CD3+CD8+,IL-4+(Tc2)细胞比例.结果 与健康对照组比较,CA患者外周血中Thl细胞含量显著减少(P<0.01),Tc1细胞含量、Th1/Th2比值、Tc1/Tc2比值均减少(P<0.05);其中15例复发CA患者的Th1/Th2比值较正常对照显著减少(P<0.01),而Te1/Te2比值与健康对照组比较差异无统计学意义.结论 CA患者外周血Th1和Tc1细胞数减少,而Th2和Tc2细胞相对占优势,复发的CA患者这种失衡更趋严重.CA患者机体免疫状态可能存在Th1→Th2、Tc1→Tc2方向的漂移,这种漂移可能是人乳头瘤病毒(HPV)不易被有效清除或CA反复发生的一种免疫机制.     

树突状细胞与T辅助细胞分化

病原体感染或抗原刺激可诱导树突状细胞 (DC)分化为DC1和DC2并迁移进入淋巴组织 ,在淋巴组织中 ,DC1和DC2通过抗原特异性信号 (递呈抗原 )、协同刺激信号 (诱导Th充分活化 )和分化或极化信号 (主要是IL 12 ,也包括DC的表面分子 )分别诱导Th分化为Th1和Th2 ,各种抗原相关的、感染组织相关的和免疫相关的因素通过调节IL 12的分泌水平和协同刺激分子的表达水平 ,或调节Th对DC的敏感性而调控Th的分化。这些相互作用使机体能快速选择合适的免疫应答方式清除相应的抗原。本文介绍了DC诱导Th分化机理的最新进展     

辅助性T淋巴细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用

机体抗肿瘤免疫反应中起重要作用的是细胞免疫 ,近年来辅助性T淋巴细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用越来越为人们所重视。Th细胞不仅可以分泌细胞因子调控肿瘤免疫 ,而且具有免疫记忆和直接杀伤肿瘤细胞的作用 ,随着一系列被Th细胞识别的肿瘤抗原被鉴定出来 ,人们对于Th细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用有了进一步的认识。本文综述了近年来Th抗肿瘤作用机理及Th细胞表位研究进展     

蝎素SCVIII对荷瘤小鼠淋巴细胞转化及TNF-α水平的影响

具有增强或调节机体有效抗病能力的药物 ,称为生物应答调节剂 (ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｓｐｏｎｓｅｍｏｄｉｆｉｅｒｓ ,ＢＲＭ ) [1 ] 。国内学者在寻找中药ＢＲＭ方面已经做了大量工作。近年来 ,中药全蝎及蝎毒的抗肿瘤作用已引起了广泛注意 ,已有许多体外研究证明 ,蝎素对Ｈｅｌａ细胞、Ｅｃａ10 9细胞等多种细胞株的生长具有抑制作用。但目前关于蝎素对机体免疫功能的影响研究较少 ,我们通过研究蝎素对机体免疫功能的影响 ,证明蝎素确为一种生物应答调节剂。1　材料和方法1.1　材料　以白血病患者外周血Ｔ淋巴细胞建立的Ｊｕｒｋａｔ…     

辅助性T淋巴细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用

机体抗肿免疫反应中起重要作用的是细胞免疫，近年来辅助性T淋巴细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用越来越为人们所重视。Th细胞不仅可以分泌细胞因子调控肿瘤免疫，而且具有免疫记忆和直接杀伤肿瘤细胞的作用，随着一系列被Th细胞识别的肿瘤抗原被鉴定出来，人们对于Th细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用有了进一步的认识。4西方综述了近年来Th抗肿瘤作用机理及Th细胞表位研究进展。