异氟醚对老龄大鼠海马蛋白质组的影响

目的 探讨异氟醚对老龄大鼠海马蛋白质组的影响.方法 清洁级老龄雌性SD大鼠75只,22月龄,随机分为对照组(C组,n=35)和异氟醚组(I组,n=40).C组吸入含40%氧气的空气2 h,I组通过异氟醚挥发罐的调节使麻醉箱内异氟醚浓度为3%,待翻正反射消失后将异氟醚浓度降至1.2%,维持2 h.I组苏醒后24 h采用Y型迷宫实验检测认知功能,麻醉结束后24 h和72 h分别随机取5只大鼠,取海马行双向凝胶电泳和质谱分析.结果 与c组比较,I组麻醉结束后24 h和48 h正确反应次数和主动回避次数降低,全天总反应时间延长(P＜0.05);学习能力I组低于C组(P＜0.05).2组麻醉结束后24 h差异表达蛋白17种,其中6种蛋白质表达上调,11种蛋白质表达下调;2组麻醉结束后72 h差异表达蛋白16个,其中10种蛋白质表达上调,6种蛋白质表达下调.结论 异氟醚麻醉后早期老龄大鼠认知功能下降具有可逆性,这种现象可能与海马蛋白质组变化有关.     

异氟醚对老龄和成龄大鼠海马synaptotagmin-Ⅰ蛋白质的影响

目的探讨异氟醚对成龄及老龄大鼠海马synaptotagmin-Ⅰ(Syt-Ⅰ)蛋白表达的影响。方法用蛋白质印迹方法对吸入2h异氟醚的全身麻醉模型和吸氧对照的成龄及老龄大鼠,取24h后的海马组织检测Syt-Ⅰ蛋白的表达水平。结果异氟醚麻醉后24h老龄大鼠海马组织Syt-Ⅰ蛋白质与对照组比较表达量下调(P<0.05),而成龄大鼠海马组织Syt-Ⅰ蛋白质表达量与对照组比较没有明显变化。结论异氟醚麻醉后的老龄大鼠早期海马Syt-Ⅰ蛋白质可能参与异氟醚麻醉后延迟相大鼠的学习和记忆功能改变。     

异氟醚麻醉对老龄大鼠海马突触体蛋白质组的影响

目的 评价异氟醚麻醉对老龄大鼠海马突触体蛋白质组的影响.方法 雌性SD大鼠27只,22月龄,体重480～550 g,采用随机数字表法,将其随机分为2组:对照组(C组,n=6)和异氟醚麻醉组(Ⅰ组,n=21).C组吸入含80％氧气的空氧混合气体2h,Ⅰ组吸入3％异氟醚麻醉诱导后,经口明视气管插管,吸入2％异氟醚+80％氧气维持麻醉2h.麻醉结束后24h时,进行Y型迷宫实验测试大鼠认知功能,记录训练次数.以训练次数＞ 75次为判断认知功能低下的标准,将Ⅰ组大鼠分为2组:认知功能低下组(IA组)和认知功能未低下组(IB组).Y型迷宫实验结束后,处死大鼠,取双侧海马组织,提取突触体,进行双向凝胶电泳和质谱分析.结果 Ⅰ组有6只大鼠发生认知功能低下,有13只大鼠未发生认知功能低下.与C组和IB组比较,IA组训练次数增多(P＜0.05);C组和IB组间比较训练次数差异无统计学意义(P＞0.05).IB组和IA组差异表达的蛋白质有21个,其中11个蛋白质表达上调,10个蛋白质表达下调.C组和IA组差异表达的蛋白质有19个,其中12个蛋白质表达上调,7个蛋白质表达下调.经质谱分析鉴定出31个蛋白质.结论 异氟醚麻醉导致老龄大鼠认知功能低下可能与突触部位能量代谢相关蛋白、突触部位的细胞骨架结构及调节蛋白的改变有关.     

手术对异氟醚麻醉下老龄大鼠术后认知功能的影响

目的 探讨手术对老龄大鼠异氟醚麻醉下术后认知功能的影响.方法 健康雄性老龄SD大鼠72只,年龄20月,体重500～600 g,随机分为3组(n=24):对照组(C组)、异氟醚麻醉组(I组)和手术组(O组).C组吸入30%氧气2 h,I组吸入1.5%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h,O组吸入1.5%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h,并实施腹部手术.于麻醉结束后或术后24 h时随机取8只大鼠,取海马组织,采用免疫组织化学法和RT-PCR法分别测定神经元胆碱乙酰转移酶(ChAT)及ChAT mRNA的表达水平,其余大鼠进行Morris水迷宫实验,测定认知功能.结果 与C组比较,I组和O组逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,穿越原平台次数减少,海马神经元ChAT mRNA及其蛋白表达水平降低(P<0.05);与I组比较,O组术后第4、5天逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,海马神经元ChAT mRNA及其蛋白表达水平降低(P<0.05);与麻醉结束后或术后第3天比较,C组第4、5天逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),I组和O组逃避潜伏期延长(P<0.05);I组和O组麻醉结束后或术后第4、5天逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05).结论 手术操作可加重异氟醚引起的老龄大鼠术后认知功能障碍,其机制可能与海马胆碱能神经元受损有关.     

异氟醚通过上调NMDA受体导致发育期大鼠海马神经元凋亡

目的探讨异氟醚麻醉对新生大鼠海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚基及凋亡的影响。方法新生1d的SD大鼠36只,雌雄不拘,取海马组织进行原代培养。采用随机数字表法将培养海马神经元5d的培养皿随机分为三组:对照组(C组)、异氟醚组(I组)和AP5+异氟醚组(A组),每组12只。I组和A组培养的海马神经元放置在密闭箱中,吸入1.5%异氟醚和纯氧,吸入时间6h,C组不做任何处理。于异氟醚麻醉结束后2、4、6、24h(C组于相应时点),提取海马神经元总mRNA和总蛋白,采用RT-PCR法测定NR2A mRNA、NR2BmRNA和caspase-3mRNA的表达量,采用Westen blot法测定caspase-3蛋白含量。结果与C组比较,异氟醚麻醉结束后2、4和6hI组海马神经元NR2AmRNA和NR2BmRNA的表达量明显上调(P0.05)。与C组和A组比较,I组异氟醚麻醉结束后2、4和6h海马神经元caspase-3mRNA的表达量、异氟醚麻醉后4和6h海马caspase-3蛋白含量明显升高(P0.05)。结论吸入1.5%异氟醚可能通过上调新生大鼠海马神经元NMDA受体导致发育神经元凋亡,阻断NMDA受体可以预防异氟醚导致的发育期海马神经元凋亡。     

毒扁豆碱对异氟醚麻醉大鼠炎性反应和认知功能的影响

目的探讨毒扁豆碱对异氟醚麻醉大鼠认知功能的影响及其机制。方法 2月龄SD大鼠80只,随机分为四组,每组20只。对照组(C组)吸入含有30%氧气的空氧混合气体6h;异氟醚组(I组)吸入1.4%的异氟醚6h;毒扁豆碱+异氟醚组(PI组)与毒扁豆碱组(P组)腹腔注射毒扁豆碱100μg/kg,每8小时一次,共3次。首次给药后,PI组吸入1.4%异氟醚6h;P组吸入同浓度载气6h。麻醉结束行动脉血气分析,12h后取海马组织,ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6含量,RTPCR法检测capase-3mRNA的表达。光镜下观察海马CA1区锥体细胞形态学变化。麻醉后第2~7天评估认知功能。结果四组大鼠动脉血气指标、血糖和海马TNF-α含量差异均无统计学意义。与C组和P组比较,I组和PI组大鼠海马IL-1β、IL-6含量、capase-3mRNA明显升高,第4~6天逃避潜伏期明显延长,探索时间明显缩短(P0.05)。与I组比较,PI组大鼠海马IL-1β、IL-6含量、caspase-3mRNA表达明显降低,第4~6天逃避潜伏期明显缩短,探索时间明显延长(P0.05)。结论毒扁豆碱改善了异氟醚麻醉引起的大鼠认知功能损害,其机制可能与抑制海马炎性反应及神经元凋亡有关。     

异氟醚吸入对老年大鼠长时程增强和脑源性神经营养因子的影响

目的通过观察异氟醚麻醉后老年大鼠海马长时程增强(LTP)和脑源性神经营养因子(BDNF)的变化,探讨术后认知功能障碍(POCD)的可能机制。方法健康雄性20月龄SD大鼠72只,随机分为异氟醚处理组(I组)和对照组(C组),每组36只。I组大鼠异氟醚吸入及维持浓度为1.2%,维持麻醉3h,以大鼠翻正反射的消失和恢复视为麻醉的开始和结束;C组大鼠不吸入麻醉药。I组大鼠分别于麻醉后7和14d断头,C组大鼠直接断头,常规切取海马组织,制备厚500μm的海马脑片,进行LTP斜率和幅值的测定,Western blot法检测BDNF表达水平。结果与C组比较,异氟醚处理后7和14dI组LTP的斜率和幅值均明显下降(P0.05)。与处理后7d比较,处理后14dI组LTP斜率和幅值均有明显升高(P0.05)。与C组比较,处理后7和14dI组BDNF表达水平明显下降(P0.05)。与处理后7d比较,处理后14dI组BDNF表达水平明显升高(P0.05)。结论异氟醚麻醉后,老年大鼠学习记忆能力损害可能持续14d以上,LTP的改变可能参与POCD的发生机制,并且与BDNF表达水平的降低有关。     

七氟醚对新生大鼠脑皮质蛋白质组学的影响

目的 评价七氟醚对新生大鼠脑皮质蛋白质组学的影响.方法 取5窝7d龄大鼠,每窝6只,共30只,采用随机数字表法,将每窝新生大鼠分为对照组(C组)和七氟醚组(S组).C组吸入空气4h,S组吸入1.8％七氟醚4h.麻醉结束后即刻每窝每组取1只新生大鼠,经胸壁穿刺左心室抽取动脉血样,行血气分析,检测血糖.于麻醉结束后3h和72 h时,每窝每组取1只新生大鼠处死,分离脑皮质,用不同的CyDye荧光染料标记后进行胶内差异双向凝胶电泳,并对差异蛋白质进行基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱鉴定和生物学信息分析.结果 两组均未发生酸碱失衡、缺氧和低血糖.与C组比较,S组麻醉结束后3h双向凝胶电泳和质谱分析共鉴定出6个差异表达的蛋白,其中4个与细胞骨架和神经生长相关的蛋白(β微管蛋白2c、Ⅲ型β微管蛋白、脑衰反应调节蛋白1、脑衰反应调节蛋白4)表达下调,1个与能量代谢相关的蛋白(ATP合成酶β亚基)表达下调,1个与信号转导相关的蛋白(G蛋白β1亚基)表达上调(P＜0.05).麻醉后72 h未见差异蛋白表达.结论 1.8％七氟醚麻醉新生大鼠4h可短期诱发与脑皮质神经元的迁移分化、能量代谢及信号转导有关的蛋白表达变化,这可能是其诱导发育期鼠脑神经退行性变化的机制.     

吸入不同浓度异氟醚对老龄大鼠海马细胞色素c表达的影响

目的 评价吸入不同浓度异氟醚对老龄大鼠海马细胞色素c(Cyt c)表达的影响.方法 健康雄性老龄SD大鼠63只,月龄20月,体重500～600 g,随机分为3组(n=21),对照组(C组):吸入30%氧气2 h;0.75%异氟醚组(L组):吸入0.75%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h;1.5%异氟醚组(I2组):吸入1.5%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h.分别于麻醉30 min、1和2 h时,各组取5只大鼠,取动脉血样行血气分析.于麻醉结束后24 h时,各组取8只大鼠,测定认知功能;取8只大鼠,分别采用免疫组化法和Western blot法测定海马Cyt c 的表达水平.结果 与C组比较,Ⅰ1组和Ⅰ2组逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,穿越原平台次数减少,海马Cyt c表达上调(P＜0.05);与Ⅰ1组比较,Ⅰ2组逃避潜伏期、原平台象限停留时间缩短和穿越原平台次数差异无统计学意义(P＞0.05),海马Cyt c表达上调(P＜0.05).结论 吸入异氟醚可通过上调海马Cyt c的表达导致老龄大鼠认知功能障碍.     

异氟醚麻醉对新生大鼠海马BDNF和磷酸化ERK表达的影响

目的 探讨异氟醚麻醉对新生大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)表达的影响.方法 出生7d的SD大鼠48只,体重12～17 g,雌雄不拘,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=24):对照组(C组)和异氟醚麻醉组(1组).Ⅰ组吸入2.5％异氟醚3 min,然后吸入1.5％异氟醚4h;C组吸入空气4h.麻醉结束即刻每组取4只大鼠,抽取动脉血样,行血气分析,并检测血糖浓度.分别于麻醉结束即刻和麻醉结束后6、24和48 h(T-4)时各处死大鼠5只,取海马组织,采用Western blot法检测钾离子-氯离子联合转运体2(KCC2)、钠离子-钾离子-氯离子联合转运体1( NKCC1)、BDNF和p-ERK的表达,计算NKCCI/KCC2比值.结果 麻醉结束即刻两组大鼠均未发生酸碱失衡、低氧和低血糖等.与C组比较,Ⅰ组T3和T4时海马KCC2表达下调,NKCC1/KCC2比值升高,T1和T2时海马BDNF和p-ERK的表达下调(P＜0.05),各时点海马NKCC1表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚麻醉通过下调BDNF和p-ERK的表达,导致新生大鼠海马神经元发育延迟.     

异氟醚延迟预处理对心肌缺血再灌注损伤兔心肌蛋白质组的影响

目的 探讨异氟醚延迟预处理对心肌缺血再灌注损伤兔心肌蛋白质组的影响.方法 成年新西兰大白兔8只,雌雄不拘,体重2.0-2.5 kg,随机分为2组(n=4):缺血再灌注组(IR组)和异氟醚延迟预处理组(IDP组).采用结扎左冠状动脉前降支40 min.再灌注120 min的方法 建立缺血再灌注模型.IDP组持续吸入2%异氟醚2 h,24 h后进行缺血再灌注.于再灌注结束即刻,取左心室前壁心肌组织,进行双向凝胶电泳和质谱分析.结果 与IR组比较,IDP组差异表达的蛋白质有13个,其中10个蛋白质表达上调,3个蛋白质表达下调(P<0.05).质谱分析得到13张肽质量指纹图谱,并成功鉴定出了其中11个蛋白质.结论 异氟醚延迟预处理可减轻兔心肌缺血再灌注损伤,可能与心肌蛋白质组的变化有关.     

异氟醚对老年大鼠脑组织神经元凋亡的影响

目的 探讨异氟醚对老年大鼠脑组织神经元凋亡的影响.方法 健康雌性老年SD大鼠90只,月龄22～24月,体重497～593 g,随机分为对照组(C组)、1.2%异氟醚组(Ⅰ1组)和1.8%异氟醚组(Ⅰ2组),每组30只.C组吸入含40%O2的空氧混合气体3 h;Ⅰ1组和Ⅰ2组分别吸入1.2%、1.8%异氟醚3 h维持麻醉.待翻正反射消失时各组随机取3只大鼠股动脉置管监测血液动力学,于股动脉置管后5 min、吸入异氟醚1、2、3 h时抽股动脉血行血气分析;大鼠苏醒后24 h时各组随机取12只行Morris水迷宫实验测试认知功能,历时7 d,记录逃避潜伏期;分别于苏醒后24、72 h及7 d时各组随机取5只大鼠断头处死取脑,采用TUNEL法检测海马及皮层区凋亡神经元,计算神经元凋亡率.结果 三组各时点血液动力学指标及血气分析结果 差异无统计学意义(P>0.05);与C组比较,Ⅰ1组和Ⅰ2组第2、3天逃避潜伏期延长(P<0.05或0.01),第4～6天差异无统计学意义(P>0.05),苏醒后24、72 h及7 d时皮层区神经元凋亡率升高(P<0.05或0.01).结论 吸入异氟醚可导致老年大鼠认知功能一过性降低,可能与其诱发大脑皮层区神经元凋亡有关.     

异氟醚对大鼠海马高级糖基化终末产物受体表达的影响

目的 探讨异氟醚对大鼠海马高级糖基化终末产物受体(RAGE)表达的影响.方法 雄性老龄SD大鼠45只,月龄24月;雄性成年SD大鼠45只,月龄4月,分为老龄组和成年组(n=45),每组再分为3个亚组(n=15):老龄对照组(OC组)和成年对照组(AC组)吸入含30%氧气的空氧混合气体;老龄单次吸入异氟醚组(OS组)和成年单次吸入异氟醚组(AS组)吸入1.5%异氟醚2 h;老龄多次吸入异氟醚组(OR组)和成年多次吸入异氟醚组(AR组)吸入1.5%异氟醚3次,2 h/次,每天1次.吸入异氟醚后1 d各组随机取8只大鼠行Morris水迷宫实验测定认知功能,余大鼠处死取海马,采用RT-PCR法检测RAGE mRNA的表达水平,免疫组织化学法检测RAGE蛋白的表达水平.结果 与OC组比较,OS组和OR组认知功能减退,海马RAGE mRNA及其蛋白的表达上调(P＜0.05);与AC组比较,AS组和AR组认知功能减退,AR组海马RAGE mRNA及其蛋白的表达上调(P＜0.05);与OS组比较,OR组认知功能减退,海马RAGE mRNA表达上调(P＜0.05);与AS组比较,AR组认知功能减退,海马RAGE mRNA及其蛋白的表达上调(P＜0.05).结论 异氟醚可导致老龄和成年大鼠认知功能降低,尤其对老龄大鼠影响明显,可能与其上调海马RAGE表达有关.     

异氟醚预处理兔缺血再灌注心肌蛋白质组双向凝胶电泳分析

目的研究异氟醚预处理对缺血再灌注心肌保护的相关蛋白的变化。方法将8只新西兰大白兔随机分为心肌缺血再灌注对照组(C组)和异氟醚预处理组(I组),每组4只。两组均接受左冠状动脉前降支阻断40 m in,开放再灌注120 m in。I组在缺血前24 h前吸入1MAC异氟醚2 h。分别取各组缺血区心肌进行二维凝胶电泳,利用Im ageM aster 2D软件分析实验结果。结果与C组对比,I组有13个蛋白表达发生了显著变化,其中表达明显增强的有10个蛋白,表达明显降低的有3个蛋白。结论差异表达的蛋白可能在异氟醚对心肌缺血再灌注损伤的保护中发挥作用。     

孕期吸入异氟醚对子代大鼠海马神经元突触可塑性的影响

目的 探讨孕期吸入异氟醚对子代大鼠海马神经元突触可塑性的影响.方法 孕14 d的SD大鼠10只,体重220～250 g,采用随机数字表法,将孕鼠随机分为对照组和异氟醚组,每组5只.对照组大鼠每天单纯机械通气2 h,异氟醚组大鼠每天吸入1.3%异氟醚2 h,至大鼠分娩.子代大鼠出生后4周,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,测定结束后处死子代大鼠取脑,分离海马,采用透射电镜观察海马CA1区神经元突触的超微结构,计数海马神经元突触数量,测定突触后致密物质厚度.结果 与对照组相比,异氟醚组子代大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马神经元突触数量减少,突触后致密物质厚度降低(P<0.05).结论 孕期吸入异氟醚可通过抑制子代大鼠海马神经元突触的可塑性而降低其认知功能.     

丙泊酚/异氟醚麻醉对大鼠获取空间记忆能力的损害及c-Fos和EGR-1蛋白的变化

目的 通过研究丙泊酚和异氟醚麻醉对青、老年大鼠Morris水迷宫训练成绩及海马CA1区脑神经元FOS核蛋白(c-Fos)和EGR-1核蛋白表达的变化,探讨麻醉后脑神经元分子水平变化与行为学表现的相关性.方法 雄件SD大鼠3月龄(青年组)和20月龄(老年组)各60只,随机分为对照组(不麻醉)、训练组(不麻醉,行Morris水迷宫训练)、丙泊酚组(丙泊酚100 mg·kg-1·h-1,ip;分别于麻醉2 h/4 h后的2 d/2周行Morris水迷宫训练:P2d,P4d,P2W,P4W)、异氟醚组(异氟醚1.2%;分别于麻醉2 h/4 h后的2 d/2周行Morris水迷宫训练:I2d,I4d,I2W,I4W).Morris水迷宫实验连续进行5 d,每天2次,记录逃避潜伏期变化,用以测试各组大鼠的空间学习记忆能力.行为学实验后立即分离海马组织CA1区,应用免疫组化法和酶标法半定量检测c-Fos和EGR-1核蛋白的阳性表达.结果 4 h异氟醚麻醉后,大鼠的认知功能损害均可持续至麻醉后2周,尤以老年大鼠常见且程度严重,表现为学习速度和记忆质量均有所下降(P<0.05),青年组大鼠学习速度略有下降(P<0.05);4 h丙泊酚麻醉后,老年组大鼠认知功能改变可持续至麻醉后2周,但与异氟醚麻醉相比程度较轻,主要表现为学习速度减慢(P<0.05).免疫组化法和酶标法检测结果:与对照组相比,Morris水迷宫训练后,大鼠海马CA1区c-Fos和EGR-1的表达均明显增加(P<0.05);I4d,I4W组老年大鼠和P4d组青年大鼠c-Fos阳性细胞率与单纯训练组大鼠相比有所下降(P<0.05);I4d组老年大鼠EGR-1阳性细胞率与单纯训练组大鼠相比有所下降(P<0.05).结论 麻醉可能会引起大鼠行为学改变,可持续至麻醉后2 d至2周;随着麻醉时程的延长和年龄的增加,改变更为明显,且异氟醚作用较丙泊酚显著.麻醉对大鼠海马CA1区c-Fos和EGR-1表达的影响可能是导致大鼠行为学改变的机制.     

丙泊酚/异氟醚麻醉对大鼠获取空间记忆能力的损害及c-Fos和EGR-1蛋白的变化

目的 通过研究丙泊酚和异氟醚麻醉对青、老年大鼠Morris水迷宫训练成绩及海马CA1区脑神经元FOS核蛋白(c-Fos)和EGR-1核蛋白表达的变化,探讨麻醉后脑神经元分子水平变化与行为学表现的相关性.方法 雄件SD大鼠3月龄(青年组)和20月龄(老年组)各60只,随机分为对照组(不麻醉)、训练组(不麻醉,行Morris水迷宫训练)、丙泊酚组(丙泊酚100 mg·kg-1·h-1,ip;分别于麻醉2 h/4 h后的2 d/2周行Morris水迷宫训练:P2d,P4d,P2W,P4W)、异氟醚组(异氟醚1.2%;分别于麻醉2 h/4 h后的2 d/2周行Morris水迷宫训练:I2d,I4d,I2W,I4W).Morris水迷宫实验连续进行5 d,每天2次,记录逃避潜伏期变化,用以测试各组大鼠的空间学习记忆能力.行为学实验后立即分离海马组织CA1区,应用免疫组化法和酶标法半定量检测c-Fos和EGR-1核蛋白的阳性表达.结果 4 h异氟醚麻醉后,大鼠的认知功能损害均可持续至麻醉后2周,尤以老年大鼠常见且程度严重,表现为学习速度和记忆质量均有所下降(P<0.05),青年组大鼠学习速度略有下降(P<0.05);4 h丙泊酚麻醉后,老年组大鼠认知功能改变可持续至麻醉后2周,但与异氟醚麻醉相比程度较轻,主要表现为学习速度减慢(P<0.05).免疫组化法和酶标法检测结果:与对照组相比,Morris水迷宫训练后,大鼠海马CA1区c-Fos和EGR-1的表达均明显增加(P<0.05);I4d,I4W组老年大鼠和P4d组青年大鼠c-Fos阳性细胞率与单纯训练组大鼠相比有所下降(P<0.05);I4d组老年大鼠EGR-1阳性细胞率与单纯训练组大鼠相比有所下降(P<0.05).结论 麻醉可能会引起大鼠行为学改变,可持续至麻醉后2 d至2周;随着麻醉时程的延长和年龄的增加,改变更为明显,且异氟醚作用较丙泊酚显著.麻醉对大鼠海马CA1区c-Fos和EGR-1表达的影响可能是导致大鼠行为学改变的机制.     

丙泊酚/异氟醚麻醉对大鼠获取空间记忆能力的损害及c-Fos和EGR-1蛋白的变化

目的 通过研究丙泊酚和异氟醚麻醉对青、老年大鼠Morris水迷宫训练成绩及海马CA1区脑神经元FOS核蛋白(c-Fos)和EGR-1核蛋白表达的变化,探讨麻醉后脑神经元分子水平变化与行为学表现的相关性.方法 雄件SD大鼠3月龄(青年组)和20月龄(老年组)各60只,随机分为对照组(不麻醉)、训练组(不麻醉,行Morris水迷宫训练)、丙泊酚组(丙泊酚100 mg·kg-1·h-1,ip;分别于麻醉2 h/4 h后的2 d/2周行Morris水迷宫训练:P2d,P4d,P2W,P4W)、异氟醚组(异氟醚1.2%;分别于麻醉2 h/4 h后的2 d/2周行Morris水迷宫训练:I2d,I4d,I2W,I4W).Morris水迷宫实验连续进行5 d,每天2次,记录逃避潜伏期变化,用以测试各组大鼠的空间学习记忆能力.行为学实验后立即分离海马组织CA1区,应用免疫组化法和酶标法半定量检测c-Fos和EGR-1核蛋白的阳性表达.结果 4 h异氟醚麻醉后,大鼠的认知功能损害均可持续至麻醉后2周,尤以老年大鼠常见且程度严重,表现为学习速度和记忆质量均有所下降(P<0.05),青年组大鼠学习速度略有下降(P<0.05);4 h丙泊酚麻醉后,老年组大鼠认知功能改变可持续至麻醉后2周,但与异氟醚麻醉相比程度较轻,主要表现为学习速度减慢(P<0.05).免疫组化法和酶标法检测结果:与对照组相比,Morris水迷宫训练后,大鼠海马CA1区c-Fos和EGR-1的表达均明显增加(P<0.05);I4d,I4W组老年大鼠和P4d组青年大鼠c-Fos阳性细胞率与单纯训练组大鼠相比有所下降(P<0.05);I4d组老年大鼠EGR-1阳性细胞率与单纯训练组大鼠相比有所下降(P<0.05).结论 麻醉可能会引起大鼠行为学改变,可持续至麻醉后2 d至2周;随着麻醉时程的延长和年龄的增加,改变更为明显,且异氟醚作用较丙泊酚显著.麻醉对大鼠海马CA1区c-Fos和EGR-1表达的影响可能是导致大鼠行为学改变的机制.     

丙泊酚/异氟醚麻醉对大鼠获取空间记忆能力的损害及c-Fos和EGR-1蛋白的变化

目的 通过研究丙泊酚和异氟醚麻醉对青、老年大鼠Morris水迷宫训练成绩及海马CA1区脑神经元FOS核蛋白(c-Fos)和EGR-1核蛋白表达的变化,探讨麻醉后脑神经元分子水平变化与行为学表现的相关性.方法 雄件SD大鼠3月龄(青年组)和20月龄(老年组)各60只,随机分为对照组(不麻醉)、训练组(不麻醉,行Morris水迷宫训练)、丙泊酚组(丙泊酚100 mg·kg-1·h-1,ip;分别于麻醉2 h/4 h后的2 d/2周行Morris水迷宫训练:P2d,P4d,P2W,P4W)、异氟醚组(异氟醚1.2%;分别于麻醉2 h/4 h后的2 d/2周行Morris水迷宫训练:I2d,I4d,I2W,I4W).Morris水迷宫实验连续进行5 d,每天2次,记录逃避潜伏期变化,用以测试各组大鼠的空间学习记忆能力.行为学实验后立即分离海马组织CA1区,应用免疫组化法和酶标法半定量检测c-Fos和EGR-1核蛋白的阳性表达.结果 4 h异氟醚麻醉后,大鼠的认知功能损害均可持续至麻醉后2周,尤以老年大鼠常见且程度严重,表现为学习速度和记忆质量均有所下降(P<0.05),青年组大鼠学习速度略有下降(P<0.05);4 h丙泊酚麻醉后,老年组大鼠认知功能改变可持续至麻醉后2周,但与异氟醚麻醉相比程度较轻,主要表现为学习速度减慢(P<0.05).免疫组化法和酶标法检测结果:与对照组相比,Morris水迷宫训练后,大鼠海马CA1区c-Fos和EGR-1的表达均明显增加(P<0.05);I4d,I4W组老年大鼠和P4d组青年大鼠c-Fos阳性细胞率与单纯训练组大鼠相比有所下降(P<0.05);I4d组老年大鼠EGR-1阳性细胞率与单纯训练组大鼠相比有所下降(P<0.05).结论 麻醉可能会引起大鼠行为学改变,可持续至麻醉后2 d至2周;随着麻醉时程的延长和年龄的增加,改变更为明显,且异氟醚作用较丙泊酚显著.麻醉对大鼠海马CA1区c-Fos和EGR-1表达的影响可能是导致大鼠行为学改变的机制.