荷S-180移植瘤小鼠血清干扰素γ含量的变化及免疫调节药物的干预作用

目的 研究荷S-180肉瘤小鼠血清干扰素γ(IFN-γ)含量的变化,并采用具有调节免疫功能的药物进行干预,探讨内源性IFN-γ在抗小鼠移植瘤方面的意义.方法 建立荷S-180实体瘤小鼠动物模型,分别用灵芝多糖(GLP)、环孢素A(CsA)灌胃给药,每天1次,连续9 d,用ELISA试剂盒检测小鼠血清中IFN-γ的含量,并分离肿瘤称重.结果 首次发现荷S-180实体瘤小鼠血清中IFN-γ含量在所观察的接种后20 d内随荷瘤时间的延长而升高.GLP(400、200、100 mg/kg)使荷瘤小鼠血清中的IFN-γ含量增加、肿瘤重量减轻,但增加IFN-γ含量以高剂量最为明显,抑瘤效应以中剂量最佳,两者之间相关关系无统计学意义.CsA(20、10、5 mg/kg)可降低荷瘤小鼠血清中IFN-γ的含量,但对肿瘤重量无明显影响,两者之间无相关关系.结论 灵芝多糖增加荷瘤小鼠血清中IFN-γ含量与抑瘤效应无明显相关,环孢素A降低荷瘤小鼠血清中IFN-γ的含量对肿瘤重量无明显影响,提示内源性IFN-γ在抗小鼠S-180移植瘤方面并不是主要的免疫调节因素.     

IFN-γ转基因治疗与肿瘤内注射重组IFN-γ对荷瘤小鼠疗效的比较

目的;评价IFN-γ转基因方法与肿瘤内注射重组IFN-γ对荷瘤小鼠的治疗作用。方法:用小鼠结肠癌细胞CT26接种于Balb/c小鼠皮下,建立小鼠皮下种植模型;小鼠成瘤后分成5组(每组9只),分别进行不同的干预。①组1 以阳离子脂质体为载体将真核表达质粒pcDNA3-IFN-γ导入结肠癌肿块细胞;②组2 肿瘤内注射重组IFN-γ,每日1次,连续4周;③组3 肿瘤内注射重组IFN-γ,每周3次,连续4周;④组4 为生理盐水对照组;⑤组5 为空载质粒对照组。结果:与生理盐水对照组比较,转基因治疗组和外源IEN-γ给药组抑瘤效应明显;组1、2、3荷瘤小鼠平均生存期分别为(67.3±4.7)天、(65.8±4.3)天及(57.5±4.4)天,明显长于组4(42.3±2.4)天与组5(41.0±2.1)天。结论:IFN-γ转基因治疗对荷瘤小鼠的肿瘤生长有抑制效应,转基因治疗组与重组IFN-γ每日给药组抑瘤效果相当,而优于重组IFN-γ间断给药组。     

γ-干扰素在体外对血管内皮细胞凋亡的诱导作用

目的: 观察γ-干扰素(IFN-γ)对血管内皮细胞(EC)的作用及其对肿瘤坏死因子-α(TNFα)表达的影响。方法: 体外培养EC,MTT法检测IFN-γ(0、20、40、80μg/L)对EC生长的直接影响,半定量逆转录-多聚酶链反应检测不同浓度的IFN-γ对EC凋亡相关基因TNFαmRNA的表达的影响。结果: IFN-γ可抑制体外培养的EC生长(P<0.01),且具有剂量依赖;IFN-γ能明显上调EC的TNFα表达。结论: IFN-γ可能通过上调EC中TNFα的表达而诱导EC凋亡。     

γ-干扰素对骨吸收及实体瘤骨转移的体外抑制作用

目的探讨体外实验中γ-干扰素(IFN-γ)对其他细胞因子引起的骨吸收及实体瘤骨转移病人外周血单个核细胞培养上清(PBMCs)促进的骨吸收的抑制作用。方法利用新生鼠头顶骨进行体外骨吸收实验,分别验证细胞因子白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、IFN-γ、粒-巨噬细胞生长因子(GM-CSF)在体外对骨吸收的影响。检测8例实体瘤骨转移阴性及11例骨转移阳性病人PBMCs的骨吸收活性(BRA)。结果IL-1I、L-6、TNF、GM-CSF均可促进体外骨吸收,以IL-1作用最强。而上述因子联合培养,BRA明显增强。IFN-γ本身对骨吸收作用不明显,但能使IL-1及细胞因子联合培养引起的骨吸收减弱。IFN-γ可使实体瘤骨转移阳性病人PBMCs诱发的BRA增强明显降低(t=2.34,P<0.05)。结论IL-1I、L-6、TNF、GM-CSF在体外对骨吸收有促进作用;IFN-γ在体外可使部分细胞因子及实体瘤骨转移阳性病人PBMCs促进的骨吸收作用减弱,提示γ-干扰素可能存在抑制肿瘤转移作用。     

结核与肿瘤患者胸腔积液中TNF-α,IFN-γ,IL-2,IL-4的水平及临床意义

目的探讨肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ),白细胞介素(interleukin,IL)-2,IL-4在结核性和肿瘤性胸腔积液中的水平及临床意义。方法收集2016年4月至2018年6月在昆明医科大学第一附属医院呼吸内科住院的确诊为结核性或肿瘤性胸腔积液患者的胸腔积液和血清标本,其中结核性30例,肿瘤性32例。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定胸腔积液和血清中TNF-α,IFN-γ,IL-2,IL-4浓度,并分析结果及其临床意义。结果 (1)结核组胸腔积液中TNF-α,IFN-γ,IL-2的浓度高于其血清浓度(P <0.05);肿瘤组胸腔积液中IL-2的浓度高于其血清浓度(P <0.05);(2)结核组胸腔积液中TNF-α,IFN-γ,IL-2及血清中IFN-γ浓度高于肿瘤组(P <0.01);(3) IL-4的胸腔积液和血清浓度,及血清中TNF-α,IL-2浓度在结核和肿瘤组间差异无统计学意义(P> 0.05)。(4) ROC曲线结果显示,胸腔积液中TNF-α,IFN-γ,IL... 更多     

树突状细胞疫苗联合CpG-ODN对膀胱肿瘤细胞的免疫学效应研究

目的 探讨负载肿瘤抗原的树突状细胞(DC)疫苗联合含未甲基化胞嘧啶鸟嘌呤(CpG)序列的寡脱氧核糖核苷酸(CpG-ODN)对膀胱肿瘤细胞的免疫学效应.方法 用小鼠BTT739细胞反复冻融抗原致敏培养第7天的DC,48h后分别加入CpG-ODN及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导DC成熟,制备负载肿瘤抗原的DC疫苗,灭活后用于刺激T淋巴细胞制备效应细胞(CTL),乳酸脱氢酶释放实验测定各组CTL对BTT739细胞的杀伤活性,ELISA法测定效应细胞培养上清液的干扰素-γ(IFN-γ)水平,同时检测了CTL对自体淋巴细胞的杀伤活性.结果负载肿瘤抗原的DC诱导的效应细胞分泌较高水平的IFN-γ,并对BTT739细胞具有较高的杀伤效应,CpG-ODN活化的DC疫苗诱导的效应细胞分泌IFN-γ水平及对肿瘤细胞的杀伤活性均高于TNF-α活化的DC疫苗诱导的效应细胞(P<0.01).DC疫苗对自体淋巴细胞无明显免疫杀伤活性.结论 CpG-ODN可增强负载肿瘤抗原的DC疫苗对膀胱肿瘤细胞的免疫杀伤效应,并且对自体淋巴细胞无免疫杀伤活性,为膀胱癌的免疫治疗提供了实验基础.     

放射治疗荷肾癌小鼠肿瘤生长抑制与脾细胞及肿瘤组织IL-2，IFN-γ和IL-10的关系

目的：观察放射治疗对BALB／c小鼠肾癌移植瘤的抑瘤作用与细胞因子IL-2,IFN-γ和IL-10表达分泌的关系．方法：建立BALB／c小鼠的Renca肾癌细胞移植瘤放射治疗的模型;采用ELISA试剂盒检测小鼠脾淋巴细胞的细胞因子IL-2,IL-10和IFN-γ分泌水平．RT—PCR法检测肿瘤组织IL-2,IL-10和IFN-γ基因的表达水平．结果：治疗组小鼠肾癌移植瘤生长速度较肿瘤对照组明显减慢．放疗组小鼠脾细胞分泌IL-2,IFN-γ及肿瘤组织IL-2,IFN-γ的表达较肿瘤对照组明显升高,IL-10较肿瘤对照组降低．结论：经放射治疗后,小鼠肿瘤生长受到明显抑制,与放疗引发小鼠脾细胞分泌IL-2,IFN-γ和肿瘤组织IL-2,IFN-γ表达分泌增强,IL-10细胞因子降低有关．     

IFN-γ转基因治疗结肠癌小鼠肝转移的抑制效应

目的:评价IFN-γ转基因方法与肿瘤内注射重组IFN-γ对荷瘤小鼠肝转移的抑制作用。方法:手术显露脾脏后,经脾注入1×107/ml浓度的小鼠结肠癌细胞株CT26单细胞悬液0.1ml,建立小鼠结肠癌肝转移模型;小鼠分成4组(每组12只),术后第2日起分别进行不同的干预。结果:与生理盐水和空载质粒对照组比较,转基因治疗组和外源IFN-γ给药组对抑制肝转移结节的效应明显(P<0.05);转基因治疗组和外源IFN-γ给药组荷瘤小鼠平均生存期分别为(39.5±5.6)天和(40.8±4.7)天,明显长于生理盐水组(29.0±3.5)天和空载质粒组(31.1±4.7)天。结论:IFN-γ转基因治疗对荷瘤小鼠的肝转移有抑制效应,转基因治疗组能够与重组IFN-γ每日给药组取得相似的抑瘤效果。     

IFN-γ对体外培养系统中IL-18诱导的肿瘤快速杀伤效应的影响

目的 :建立体外培养系统 ( CCs) ,应用 rh IL- 1 8在 CCs中诱导肿瘤快速杀伤效应 ,探讨IFN- γ在快速杀伤效应中的作用。方法 :采用 Stem Sep TM免疫磁性细胞分离法分离人外周血 NK细胞、T细胞及树突状细胞 ( DCs) ;流式细胞仪分析细胞表型 ;细胞毒实验检测杀伤活性 ;ELISA方法检测 IFN-γ的产生量。结果 :在 CCs中 ,rh IL- 1 8能单独诱导一种快速肿瘤杀伤作用 ,其杀伤作用随rh IL- 1 8浓度的增加而增高 ;rh IL- 1 8能够诱导 CCs产生 IFN-γ,并促进 m RNA的表达 ,但其作用不如 rh IL- 1 2 + rh IL- 1 8明显 ;抗 IFN- γ单抗对 rh IL- 1 8诱导的快速肿瘤杀伤效应无明显影响。结论 :IL- 1 8能够在 CCs中有效地诱导快速肿瘤杀伤效应 ,且这种杀伤效应不依赖 IFN- γ无关途径     

γ-干扰素在小剂量美法仑治疗肿瘤过程中对荷瘤小鼠外周血红细胞的影响

[目的]探讨γ-干扰素(IFN-γ)在小剂量美法仑治疗肿瘤过程中对荷瘤小鼠外周血红细胞的影响。[方法]利用单一剂量美法仑治疗荷瘤野生型C57BL/6小鼠模型,取遗传背景相同、基因型不同的IFN-γ+/-和IFN-γ-/-C57BL/6小鼠各6只,观察7.5 mg/kg美法仑治疗后两组荷瘤小鼠肿瘤结节直径的变化,并且分别在美法仑用药前第3天、用药后6 h、第4、7、11、15、28天内眦静脉取血,肝素抗凝后检测外周血RBC数、Hb含量和Hct。[结果]美法仑7.5 mg/kg用药后第1天,两组荷瘤小鼠肿瘤结节缩小均不明显;用药后第4天,荷瘤IFN--γ/-小鼠肿瘤生长轻度受抑后进行性增大,并在用药后2周内所有小鼠肿瘤复发、死亡;而IFN-γ+/-小鼠肿瘤的肿瘤结节进行性缩小、肿瘤消退并治愈。7.5 mg/kg美法仑治疗后11 d内,IFN-γ免疫功能不同的荷瘤IFN--γ/-和IFN-γ+/-小鼠外周血RBC计数、Hb含量和Hct之间差异无显著性意义(P>0.05);美法仑治疗11 d后,IFN-γ免疫功能缺陷的荷瘤IFN-γ-/-小鼠外周血RBC计数、Hb含量和Hct明显低于IFN-γ免疫功能正常的荷瘤IFN...     

TNF-α,IFN-γ对角质形成细胞杀灭金黄色葡萄球菌作用的影响

目的观察不同浓度肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ及二者联合作用下对金黄色葡萄球菌在角质形成细胞中生存状态的影响,了解角质形成细胞的抗菌功能及相关因素。方法以金黄色葡萄球菌侵入角质形成细胞为实验模型,对照组加入等量灭菌PBS,以平板菌落计数法观察不同浓度(20ng/mL,40mg/mL)下TNF-α、IFN-γ及二者同一浓度联合作用下胞内活菌数量。结果与对照组相比,在20ng/mL浓度下,各组胞内活菌数量变化不明显(P>0.05)。在40ng/mL浓度下,与对照组比较,IFN-γ组活菌数量减少,差异有统计学意义(P<0.05);TNF-α+IFN-γ组活菌数量有所减少,但不及单用IFN-γ效果明显(P>0.05),TNF-α组活菌数量无明显变化(P>0.05)。结论 IFN-γ可以增强角质形成细胞杀菌功能,TNF-α与IFN-γ联合作用下,细胞杀灭胞内细菌功能弱于单用IFN-γ,而单用TNF-α对角质形成细胞杀灭金黄色葡萄球菌作用无明显影响。     

青藤碱治疗大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究

目的：探讨盐酸青藤碱对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用。方法：对EAE大鼠动物模型给予3种不同剂量的青藤碱，并以甲氨蝶呤作为对照，观察青藤碱对EAE动物模型发病程度、脑和脊髓的病灶数目及血清肿瘤坏死因子-α(TNF—α)、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-10的影响。结果：青藤碱减轻EAE动物发病程度、减少脑和脊髓的病灶数目，降低血清TNF—α、IFN-γ水平，但对血清IL—10水平无明显影响。结论：青藤碱具有治疗EAE动物模型的作用，其机制可能与抑制TNF-α、IFN-γ为主的免疫应答有关。     

细胞因子对人单核/巨噬细胞表达CD40和CD40L的影响

目的：探讨细胞因子在γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子（TNF）和白介素-1（IL-1）对人单核/巨噬细胞表达CD40和CD40L的影响。方法：应用RT-PCR方法半定量测定CD40和CD40LmRNA含量,流式细胞技术检测细胞表面CD40和CD40L表达水平。结果：IFN-γ,TNF和IL-1既增加CD40和CD40LmRNA表达,又能诱导单核/巨噬细胞表面CD40和CD40L高表达,而抗氧化剂VitE能下调细胞因子引起的CD40和CD40L表达,但作用不完全,结论：细胞因子（IFN-γ,TNF和IL-1）能刺激单核/巨噬细胞高表达CD40和CD40L,这种作用可被VitE部分抑制。     

肿瘤抗原MAGE-2多抗原肽疫苗的设计合成及免疫原性研究

目的采用多抗原肽(multiple antigen peptide,MAP)设计方案,提高线性短肽的免疫原性.方法对肿瘤抗原MAGE-2220-228细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位进行分子修饰,设计、合成四分支多抗原肽(MAP4).标准Fmoc合成方案进行合成,液相色谱/质谱联用(LC/MS)进行目的肽鉴定.以体外刺激人外周血单核细胞(PBMC)诱导CTL效应及IFN-γ分泌,标准51Cr释放实验与Elispot实验进行免疫原性的研究.结果标经准51Cr释放实验验证,低浓度的MAP4可以诱导出有效的CTL效应,Elispot实验显示MAP4能够有效诱导的IFN-γ分泌.结论 MAP的构建能够增强CTL效应和IFN-γ的分泌,是一种有效刺激CTL应答的多肽疫苗形式.     

IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1在肿瘤患者中的表达及其相关性

目的 探讨IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1在肿瘤患者中的表达及相关性.方法 采集32例肿瘤患者(肿瘤组)和34例健康体检者(对照组)外周血,提取RNA并反转录成cDNA,运用实时定量PCR方法检测IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1 mRNA的表达.结果 肿瘤组IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1 mRNA表达水平较对照组明显降低,差异有统计学意义.IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1相互之间都具有正相关性.其中IFN-γ与Bcl-2的相关系数为0.984,IFN-γ与MMP-9的相关系数为0.982,IFN-γ与STIM-1的相关系数为0.985;Bcl-2与MMP-9的相关系数为0.980,Bcl-2与STIM-1的相关系数为0.956,MMP-9与STIM-1的相关系数为0.951.结论 肿瘤患者IFN-γ、Bcl-2、MMP-9及STIM-1 mRNA表达较健康人明显降低,并且在肿瘤患者中4项指标之间均呈正相关.     

小柴胡汤诱导单核细胞产生肿瘤坏死因子的实验研究

目的　探讨小柴胡汤 (XCHT)对荷瘤小鼠S180 的抑瘤的可能机制。方法　应用放射免疫分析法测定荷瘤小鼠S180 血清肿瘤坏死因子 (TNF -α)含量的变化。结果　经小柴胡汤煎剂治疗后 ,S180 荷瘤小鼠血清TNF -α水平高于模型组 (P <0 .0 5 )。结论　小柴胡汤对S180 荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤机制可能与其诱导产生TNF -α有关     

IFN-γ联合rhTNF-α抑制白血病细胞c-myc原癌基因的表达

据《中华内科杂志》1994年33卷第5期报道西安第四军医大学西京医院血液科,用干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子(TNF-α)与人白血病细胞株及急性髓细胞性白血病(AML)患者原代白血病细胞体外液相共育,用细胞总RNA样品与~(32)P标记的c-myc DNA探针打点杂交,观察了IFN-r联合TNF-α作用HL-60细胞,TNF作用病人原代白血病细胞对其c-myc癌基因表达的影响。     

1,25-二羟基维生素D3干预前后糖尿病肾病患者外周血单核细胞促炎细胞因子的表达情况

目的 探讨1,25-二羟基维生素D3(VD3)干预前后糖尿病肾病患者外周血单核细胞促炎细胞因子的表达情况.方法 纳入2型糖尿病合并糖尿病肾病(DN)患者(DN组)及健康对照者(对照组)各15例,分别检测两组外周血单核细胞培养上清液在VD3干预和非干预条件下白介素(IL)-17A、干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)及IL-2水平.结果 VD3干预前,两组IL-17A水平比较差异无统计学意义(P>0.05),DN组IFN-γ、TNF和IL-2水平均高于对照组(P<0.05);VD3干预后,两组IL-17A、IFN-γ、TNF和IL-2水平均低于干预前,且DN组IL-17A、IFN-γ和IL-2水平仍高于对照组,但TNF水平低于对照组(均P<0.05).结论 相关促炎细胞因子可能在DN发生中起促进作用,VD3对DN患者外周血单核细胞相关促炎因子具有抑制作用.     

牛磺酸抗细胞因子诱导的原代培养胰岛细胞凋亡与抗凋亡蛋白A20的变化

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF)和γ-干扰素(IFN-γ)引起的原代培养胰岛细胞凋亡与A20蛋白表达变化以及牛磺酸对其影响.方法用体外单层培养的方法,培养Wistar大鼠胰岛细胞,采用流式细胞仪、DNA电泳、放射免疫法及其RT-PCR等分别观察IL-1β、TNF和 IFN-γ对胰岛细胞凋亡细胞百分率、DNA片段、培养液中胰岛素分泌以及A20蛋白表达的影响,并进一步观察牛磺酸的作用.结果流式细胞仪分析显示IL-1β、TNF和 IFN-γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率增加(从3.5%增加到30.2%),DNA明显片段化,同时胰岛素分泌明显降低(P<0.01), 而A20蛋白无表达;牛磺酸能阻断上述细胞因子的作用(P<0.01).结论牛磺酸能够改善细胞因子诱导的原代培养胰岛细胞凋亡,其机制可能与促进A20蛋白表达有关.     

干扰素-γ对染矽尘小鼠肺脏肿瘤坏死因子-α和转化生长因子-β1蛋白表达的影响

目的探讨实验性矽肺纤维化小鼠模型支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子(TNF)-α及肺组织转化生长因子(TGF)-β1的变化及干扰素-γ(IFN-γ)对其的调节作用。方法雌性ICR小鼠随机分为矽肺模型组、IFN-γ治疗组和对照组,每组32只。矽肺纤维化小鼠模型通过气管内暴露法(气管内注入SiO2粉尘混悬液)建立,对照组气管内注入0.1ml生理盐水。建模成功后,矽肺模型组及对照组每日腹腔内注射生理盐水0.3ml,IFN-γ治疗组每日腹腔内注射1.0×104/0.3mlIFN-γ,至处死为止。每组气管暴露后不同时间(7、14、21、28d)分别处死8只小鼠。用ELISA方法测定3组小鼠BALF中TNF-α水平,用免疫组织化学法测定矽肺组织中TGF-β1蛋白的表达,及IFN-γ治疗对二者的影响。结果矽肺模型小鼠肺组织TGF-β1表达在染尘后的7、14、21、28d时明显高于对照组(P均<0.01),表达高峰是染尘后的7d;IFN-γ治疗组IFN-γ治疗后的7、14、21、28d肺组织TGF-β1表达显著低于矽肺模型组(P<0.01或P<0.05),但仍高于对照组(P均<0.01)。矽肺模型组BALF中TNF-...