HO-1的诱导表达对急性肺损伤小鼠CD54的影响

目的了解急性肺损伤小鼠CD54蛋白的表达,探讨血晶素诱导血红素加氧酶-1（hemeoxyge-nase—1,HO-1）的表达对于小鼠急性肺损伤（ALI）的影响。方法复制ALI伤小鼠模型,利用蛋白质印迹和流式细胞术方法检测ALI小鼠肺组织HO-1蛋白和CD54蛋白的表达。结果血晶素＋脂多糖（LPS）组与LPS组比较,HO-1蛋白差异有统计学意义（P〈0．05）;LPS组CD54的表达明显高于对照组（P〈0．05）;血晶素＋LPS组与LPS组比较CD54蛋白表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HO-1的诱导表达对于ALI小鼠有保护作用,它降低了肺组织CD54蛋白的表达。     

盐酸多西环素对急性肺损伤大鼠肺组织中MMP-2和MMP-9表达的影响

目的 研究盐酸多西环素（DOX）对内毒素诱导大鼠急性肺损伤（Acute lung injury,ALI）时肺组织基质金属蛋白酶2（Matrix metanoproteinase 2,MMP-2）及基质金属蛋白9（Matrixmetalloproteinase 9,MMF-9）的表达变化,分析DOX是否对急性肺损伤有保护作用,为临床预防急性肺损伤提供参考.方法 用气管内滴注脂多糖（LPs）的方法建立大鼠急性肺损伤模型.处死动物后.用免疫印迹法检测MMP2和MMP9在肺组织的表达.结果 MMP2和MMP9在正常大鼠肺组织中均为弱阳性表达,在ALI大鼠肺组织中为强阳性表达,而在DOX处理的急性肺损伤大鼠中期表达较ALI组显著下降（P＜0.01）.结论 MMP-2和MMP-9在急性肺损伤大鼠肺组织中有高表达,这表明这两个蛋白在ALI的发生过程中起着重要的作用;而DOX可以显著下调MMP-2和MMP-9的表达.从而减轻肺组织的损伤.     

骨桥蛋白和MMP-2、MMP-9在鼻咽癌中的表达

目的探讨骨桥蛋白（OPN）和基质金属蛋白酶2、9（MMP-2、MMP-9）在鼻咽癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化二步法,分别检测OPN和MMP-2、MMP-9在正常对照组（7例）和鼻咽癌（45例）组织中的表达,其中鼻咽癌患者发生颈部淋巴结转移有25例。结果①鼻咽癌组织中OPN和MMP-2、MMP-9的阳性率明显高于正常对照组（P〈0.05）,其中淋巴结转移组表达明显增高（P〈0.05）。②鼻咽癌中OPN和MMP-2、MMP-9的表达与肿瘤的淋巴结转移相关（P〈0.05）。结论 OPN和MMP-2、MMP-9可能在鼻咽癌的发生发展和突破基底膜向外扩散及淋巴结转移中起到重要作用。     

血红素氧合酶-1对哮喘小鼠模型IL-25和MUC5AC表达的影响

摘要：目的　探讨血红素氧合酶-1（HO-1）对哮喘小鼠气道炎症的调节作用及其机制。方法　将28只健康雌性Balb/c小鼠根据随机数字表法分为4组：对照组、哮喘组、血晶素组、福多司坦组,每组7只。哮喘组、血晶素组和福多司坦组小鼠于第1天和第14天腹腔注射20 μg卵清蛋白（OVA）+500 μg Al（OH）3+0.2 mL PBS致敏,于第25~28天每天雾化吸入1次OVA激发气道高反应制备小鼠哮喘模型,对照组以等量生理盐水替代,血晶素组致敏前1、2 d,致敏后12、13、23、24、27 d腹腔注射血晶素75 μmol/kg,福多司坦组分别于致敏前25、26、27 d灌胃给药福多司坦（200 mg/kg）,末次激发后24 h内处死小鼠并收集血液、肺组织。HE染色观察肺组织形态学改变,免疫组化检测肺组织黏蛋白5AC（MUC5AC）的表达,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测肺组织中MUC5AC和血清中白细胞介素（IL）-25的水平,并对MUC5AC和IL-25进行相关性分析。结果　哮喘组肺组织可见大量炎症细胞浸润、气管黏膜增厚、黏膜下水肿,血晶素组和福多司坦组可见少量炎症细胞浸润及渗出,病理改变较哮喘组轻。与对照组相比,哮喘组、血晶素组、福多司坦组MUC5AC和IL-25的表达水平明显升高（P＜0.05）;与哮喘组相比,血晶素组和福多司坦组MUC5AC和IL-25降低（P＜0.05）,且血晶素组较福多司坦组降低更明显（P＜0.05）。MUC5AC与IL-25的表达水平呈正相关（r=0.932,P＜0.01）。结论　HO-1可下调哮喘小鼠MUC5AC和IL-25的表达,减轻气道炎症和黏液高分泌。     

急性心肌梗死合并室颤与MMP-9相关性探讨

目的：探讨急性心肌梗死合并室颤与MMP-9表达的相关性。方法选择我院10例急性心肌梗死合并室颤患者纳入实验组;同期选择本院10例急性心肌梗死未合并室颤患者作为对照组。实验组及对照组于发病后第1、3、5d各抽取外周静脉血5ml,-20℃冰箱保存。采用RT-PCR 及ELISA 法同时测定MMP-9。结果 RT-PCR 结果显示实验组第1d血细胞MMP-9基因表达比对照组高1.73倍（1.03-2.96）;实验组第3d MMP-9基因表达比对照组高1.54倍（1.09-2.92）;实验组第5d MMP-9基因表达比对照组高1.61倍（1.07-3.09）。实验组第1d与实验组第3、5d MMP-9表达ΔCT差异具有统计学意义（均P〈0.05）。对照组第1、3、5d MMP-9组间基因表达ΔCT值差异具有统计学意义（均P〈0.05）,对照组第1d与对照组第3、5d的 MMP-9表达差异具有统计学意义（ΔCT比较,均P〈0.05）。 ELISA结果显示实验组第1d、3d、5d MMP-9水平显著高于对照组同时间点MMP-9水平（均P〈0.05）。对照组第3、5d血清 MMP-9水平显著高于对照组第1d 血清MMP-9水平（均P〈0.05）。实验组第3、5d血清MMP-9水平显著高于实验组第1d 血清MMP-9水平（均P〈0.05）。结论 MMP-9在急性心肌梗死合并室颤发生、发展中起到促进作用,增加了急性心肌梗死患者发生室颤可能性。     

MMP-2、MMP-14、TIMP-2在退变腰椎间盘髓核组织的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-14（MMP-14）和金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在退变腰椎间盘髓核组织表达的意义。方法应用免疫组织化学法检测36例退变腰椎间盘髓核组织（退变组）、20例腰椎骨折腰椎间盘髓核组织（对照组）MMP-2、MMP-14和TIMP-2表达。结果退变组MMP-2、MMP-14表达明显高于对照组（P〈0.001）,TIMP-2表达无明显改变（P〉0.05）;椎间盘退变等级与MMP-2、MMP-14及TIMP-2表达呈正相关（分别rs=0.710,P〈0.001;rs=0.617,P〈0.001;rs=0.406,P=0.014）;MMP-2与MMP-14、TIMP-2表达呈正相关（分别rs=0.665,P〈0.001;rs=0.516,P=0.001）。结论 MMP-2、MMP-14和TIMP-2表达加强可能是导致椎间盘退变的重要原因之一。     

右美托咪定对高氧诱导急性肺损伤小鼠的保护作用及Nrf2/HO-1通路的影响

摘 要 目的：探讨右美托咪定对高氧诱导急性肺损伤小鼠的保护作用及核转录因子红细胞系2p45相关因子2（Nrf2）/血红素加氧酶 1（HO-1）通路的影响。 方法: 将100只C57BL/6小鼠随机分为5组：正常对照组、模型组、地塞米松组（100 mg·kg-1）、右美托咪定低（40 mg·kg-1）、高（80 mg·kg-1）剂量组。除正常对照组外,其余各组建立高氧诱导急性肺损伤模型,并于造模成功后腹腔注射相应药物,正常对照组和模型组给予等体积生理盐水,qd,持续7 d。实验结束后,检测小鼠肺/体比值、肺损伤评分、血氧分压（PaO2）,小鼠肺组织中Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达水平,胱天蛋白酶 1（caspase 1）、白细胞介素 1β（IL 1β）、白细胞介素 18（IL 18 ）蛋白水平。制作肺部HE染色切片,观察肺损伤情况。 结果: 与正常对照组比较,模型组肺/体比值、肺损伤评分、Nrf2 mRNA及蛋白表达水平、IL 1β、IL 18、caspase 1蛋白表达水平明显升高,PaO2、HO-1 mRNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,右美托咪定组肺/体比值、肺损伤评分、Nrf2 mRNA及蛋白表达水平、IL 1β、IL 18、caspase 1蛋白表达水平明显降低,PaO2、HO-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,且呈剂量相关性;右美托咪定低剂量组与地塞米松组比较差异有统计学意义（P<0.05）。正常对照组肺泡组织结构正常,无炎症细胞浸润、无胶原蛋白沉淀;模型组、右美托咪定低剂量组肺泡壁明显增厚、破裂,可见中性细胞及少量嗜酸性细胞浸润,肺间质可见较多胶原蛋白沉淀;右美托咪定高剂量组及地塞米松组肺泡结构基本正常,有少量中性细胞侵润,几乎无胶原蛋白沉淀。 结论: 右美托咪定对高氧诱导急性肺损伤小鼠的保护作用与抑制Nrf2 mRNA及蛋白表达水平表达,进而抑制IL 1β、IL 18、caspase 1蛋白表达有关。     

丙泊酚对急性肺损伤大鼠血红素氧合酶-1表达的影响

目的探讨丙泊酚对肺的保护作用及其可能作用机制。方法通过尾静脉注射内毒素建立急性肺损伤模型,丙泊酚和锌原卟啉同样经过尾静脉给药。将Wistar大鼠随机分入实验对照组（C组）、脂多糖组（L组）、脂多糖＋丙泊酚组（LP组）和锌原卟啉组（LZ组）。给药前及开始后第3、6和12h测定动脉血氧分压（PaO2）,实验结束后观察肺湿/干重（W/D）比值、肺组织病理学检查并进行肺损伤轻重程度评分,同时观察各组大鼠肺组织血红素氧合酶-1（HO-1）含量。结果实验前各组PaO2无明显差异,注射LPS后L组PaO2持续下降,和C组相比其PaO2显著降低（P〈0.05）。实验结束后L组和C组相比其W/D比值、肺组织病理学检查评分及HO-1含量显著增加（P〈0.05）。而LP组和L组相比W/D比值、肺组织病理学检查评分含量显著降低（P〈0.05）,而PaO2和HO-1含量显著升高（P〈0.05）。而LZ组加入锌原卟啉后明显抑制丙泊酚以上保护作用。结论丙泊酚具有肺保护作用,且该作用可能与其通过增加HO-1表达作用相关。     

苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠MMP-9、ICAM-1、HO-1表达的影响

目的: 通过检测实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型脊髓中MMP-9、ICAM-1、HO-1的mRNA表达来研究苦参素对EAE的治疗作用。方法: 选取40只大鼠随机分为EAE组、空白对照组、苦参素低剂量组和苦参素高剂量组。EAE组和苦参素两个剂量组注射豚鼠全脊髓匀浆(GPSCH)抗原乳剂免疫建立EAE模型。苦参素两个剂量组于免疫当天起鼠尾静脉注射苦参素注射液200 mg·kg^-1和100 mg·kg^-1。观察3组大鼠的发病情况, 采用5分评分法对症状进行评分。设计和合成三条针对MMP-9、ICAM-1、HO-1mRNA的特异性引物, 采用PCR技术检测苦参素治疗16 d后大鼠脊髓中MMP-9、ICAM-1、HO-1mRNA的表达。结果: EAE组平均症状评分(2.45±0.36)高于苦参素治疗组(1.35±0.21), 且两者之间存在显著性差异(P<0.05)。与空白对照组比较, EAE组大鼠脊髓中MMP-9、ICAM-1的表达显著升高(P<0.01), 而苦参素治疗组中MMP-9、ICAM-1的表达与EAE组比较有所降低(P<0.05)。与空白对照组比较, EAE组大鼠脊髓中HO-1的表达显著降低(P<0.05), 而苦参素治疗组中HO-1的表达显著升高(P<0.01)。结论: 苦参素能够通过降低MMP-9和ICAM-1mRNA的表达, 并促进HO-1mRNA的表达而发挥对实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用。     

辛伐他汀对ACS患者血清MMP-9及TIMP-1影响的临床分析

目的观察辛伐他汀对急性冠状动脉综合征（ACS）患者血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制因子-1（TIMP-1）的影响。方法采用酶联免疫法测定ACS患者（38例）稳定性心绞痛（SAP）患者（32例）血清TIMP-1及MMP-9浓度,在辛伐他汀治疗后复查TIMP-1及MMP-9的变化,并与健康对照组（20例）比较。结果 ACS组血清MMP-9显著高于SAP组及对照组（均P〈0.05）,而TIMP-1显著低于SAP组及对照组（均P〈0.05）,SAP组MMP-9显著高于对照组（P〈0.05）,SAP组TIMP-1与对照组之间差异（P〉0.05）;辛伐他汀治疗4周后ACS患者血清MMP-9水平下降,TIMP-1水平上升,与治疗前比较差异具有显著性（均P〈0.05）,SAP组MMP-9与治疗前比较差异具有显著性（P〈0.05）,而SAP组TIMP-1无明显改变（P〉0.05）。结论 ACS患者MMP-9升高及TIMP-1下降,可能与ACS发病机制密切相关,辛伐他汀能降低ACS患者MMP-9及升高TIMP-1,对于ACS的临床治疗有着重要的意义。     

血红素氧合酶-1对脂多糖诱导的急性心肌细胞损伤细胞内钙离子浓度的影响

目的研究HO-1对脂多糖刺激的心肌细胞内钙离子含量的影响。方法差速贴壁法培养乳鼠心肌细胞,分为对照组（C）,脂多糖LPS组（L）,LPS＋Hemin组（L＋H）,LPS＋ZnPP组（L＋Zn）,分别诱导或阻断HO-1的合成,并检测心肌细胞内钙离子含量。结果 LPS诱导心肌细胞钙离子含量升高,Hemin增加HO-1水平,降低细胞内钙离子水平,ZnPP降低HO-1水平,细胞内钙离子浓度进一步增加。结论 LPS刺激使心肌细胞内钙离子含量明显升高,HO-1可降低细胞内钙超载。     

肺癌组织中高迁移率族蛋白-1、血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9与微血管生成的相关性研究

目的 探讨肺癌组织中高迁移率族蛋白-1（HMGB-1）、VEGF和MMP-9与微血管生成的相关性.方法 选择肺癌患者标本80例为研究对象,癌组织作为观察组,癌旁正常肺组织作为对照组,采用免疫组化染色测定组织中HMGB-1、VEGF、MMP-9和MVD的表达情况.结果 观察组肺组织HMGB-1、VEGF和MMP-9的表达均明显高于对照组（χ^2=6.27、5.93、5.16,均P＜0.05）.观察组MVD值为（76.27±19.24）个,对照组为（24.67±6.14）个,两组差异有统计学意义（t=6.764,P＜0.01）.HMGB-1、VEGF和MMP-9均与MVD呈正相关关系（r=0.430、0.506、0.597,均P＜0.05）.结论 肺癌组织中HMGB-1、VEGF和MMP-9与微血管生成有密切关系.     

魟鱼软骨多糖对小鼠恶性黑色素移植瘤MMP-9表达的影响

目的:研究魟鱼软骨多糖(RCG)对小鼠恶性黑色素移植瘤基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:体外培养黑色素瘤细胞(B16),接种B16细胞于C57BL/6小鼠右侧腋下部位,复制小鼠黑色素瘤模型。实验分为生理盐水(等容生理盐水)、环磷酰胺(CTX,60mg·kg-1)和魟鱼软骨多糖高、中、低剂量(700、300、100mg·kg-1)组,灌胃给药,每天1次,连续21d。观察肿瘤生长情况,计算原发瘤抑制率;采用Westernblot方法检测肿瘤组织中MMP-9的蛋白表达情况;采用RT-PCR方法检测MMP-9的基因表达情况。结果:与生理盐水组比较,魟鱼软骨多糖高、中、低剂量组小鼠原发瘤抑制率显著升高(P<0.01);魟鱼软骨多糖高、中、低剂量组MMP-9蛋白表达、基因表达显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖能明显抑制小鼠黑色素瘤原发瘤的生长,可能与其抑制肿瘤MMP-9的蛋白表达和MMP-9mRNA的表达有关。     

罗格列酮对糖尿病大鼠血清MMP-9及外周血单核细胞MMP-9mRNA表达的影响

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）配体罗格列酮对糖尿病大鼠血清基质金属蛋白酶9（MMP-9）浓度和外周血单核细胞mRNA表达的影响。方法：30只SD大鼠随机分为三组，对照组、糖尿病组和罗格列酮组，每组10只。糖尿病组和罗格列酮组腹腔注射链脲霉素制作糖尿病大鼠模型后，罗格列酮组以罗格列酮灌胃，5mg·kg^-1·d^-1，共28d，对照组和糖尿病组以等量0.9％氯化钠溶液灌胃，比较治疗前、后的血清MMP-9浓度的变化，分离外周血单核细胞，RT-PCR检测MMP-9mRNA的变化。结果：处理28d后血清MMP-9浓度明显降低（P〈0.01），外周血单核细胞MMP-9mRNA表达量明显降低。结论：罗格列酮可以降低糖尿病大鼠血清MMP-9及外周血单核细胞MMP-9mRNA袁达．提示冀可能通过抑制MMP-9表达稳定动脉粥样锺化斑块．     

季德胜蛇药片对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨季德胜蛇药片对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法：将30只清洁级SD雄性大鼠分为季德胜蛇药组（D组）、对照组（C组）和缺血再灌注组（I／R组）,每组10只。建立大鼠肺缺血再灌注模型,检测大鼠肺组织湿干重比;光学显微镜及透射电镜下观察肺组织损伤程度;通过明胶酶谱法测定肺组织匀浆液中明胶酶即金属蛋白酶-2、-9（MMP-2、MMP-9）的活力;逆转录酶PCR方法检测MMP-2、MMP-9mRNA在大鼠肺组织中的表达变化。结果：与缺血再灌注组比较,蛇药组肺湿干重比降低（P〈0．01）,肺组织损伤程度减轻,肺组织匀浆液MMP-9酶活力显著下降,MMP-2酶活力略有降低,肺组织中MMP-9、MMP-2的mRNA表达均降低。结论：季德胜蛇药片通过抑制MMP-9、MMP-2的活性及表达,使基底膜的降解降低,从而对大鼠肺缺血再灌注损伤有-定的保护作用。     

MMP-9、TIMP-1在曲张大隐静脉中的表达及意义

目的：研究基质金属蛋白酶9（MMP-9）与基质金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）在曲张大隐静脉中的表达及其与发病机制的关系。方法：收集佳木斯大学附属第一医院2012-11～2013-09,血管外科手术治疗的大隐静脉曲张患者31例（40条肢体）,其中男19例,女12例,年龄35～71岁,平均51.25岁。标本均取自大隐静脉主干曲张最显著部位。根据CEAP临床分级法,将40条患肢分为C1～C3组（24条肢体）和C4～C6组（16条肢体）。对照组选择同期佳木斯大学附属第一医院血管外科和骨外科,因外伤或动脉硬化闭塞症（排除下肢静脉曲张和静脉曲张家族史）而截肢的正常大隐静脉10例。其中男7例,女3例,年龄25～67岁,平均48.10岁。实验组与对照组均采用免疫组织化学染色法检测MMP-9、TIMP-1蛋白在大隐静脉中的表达。结果：MMP-9可在正常大隐静脉壁中少量表达,而在曲张大隐静脉壁中表达明显增高（P〈0.05）,C4～C6组和C1～C3组表达率无统计学意义（P〉0.05）。TIMP-1也可在正常大隐静脉壁中表达,而在曲张大隐静脉壁中表达明显增高（P〈0.05）,C4～C6组和C1～C3组表达率无统计学意义（P〉0.05）。结论：MMP-9、TIMP-1的异常表达可能参与了大隐静脉曲张的血管重塑过程。     

塞来昔布对急性肺损伤大鼠外周血IL-8和MCP-1的作用研究

目的：探讨脂多糖（ lipopolysaccharide ,LPS）所致大鼠急性肺损伤时环氧合酶（ COX）-2抑制剂塞来昔布对外周血趋化因子白细胞介素（interlukine,IL）-8和单核细胞趋化蛋白（monocyte chemoattrac-tant protein,MCP）-1表达的影响。方法45只大鼠随机分为3组：对照组（ n ＝15）,给予等量的0邋．9％氯化钠溶液;LPS组（ n ＝15）：尾静脉注射LPS（5 mg/kg）复制急性肺损伤模型;塞来昔布治疗组（ n＝15）：注射LPS复制急性肺损伤模型后30 min塞来昔布灌胃（20 mg/kg）,于3 h后放血处死动物。采用酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测3组大鼠外周血IL-8和 MCP1-的表达水平。结果 LPS组和对照组相比外周血IL-8和MCP-1的表达差异均有统计学意义（ P ＜0．05）;塞来昔布组和LPS组相比,差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论塞来昔布可能通过抑制趋化因子IL-8和MCP-1的表达,改善大鼠急性肺损伤反应程度。