颞叶海马硬化所致的难治性癫痫外科手术治疗与GAMMA刀治疗临床分析

[目的]探讨颞叶海马硬化所致难治性癫痫采用外科手术治疗与GAMMA刀治疗的疗效及治疗费用。[方法]本文通过1998～2003年在我研究所就诊的颞叶海马硬化所致的难治性癫痫患者进行评估后根据患者意愿分别给予外科手术治疗与GAMMA刀治疗。[结果]外科手术组治疗近期疗效92.8%,GAMMA刀治疗近期疗效53.84%,外科手术组平均治疗费用8500元（人民币）,GAMMA刀治疗组平均治疗费用18000元（人民币）。[结论]外科手术治疗与GAMMA刀治疗颞叶海马硬化所致的难治性癫痫安全有效,外科手术治疗近期疗效优于GAMMA刀治疗,但平均治疗费用低于GAMMA刀治疗。     

铝作用下大鼠海马神经细胞凋亡与bcl-2和bax基因转录的关系

目的探讨铝引起大鼠海马神经细胞凋亡与bcl2、baxmRNA表达变化的关系。方法健康雄性SD大鼠40只,按体重随机分为4组:生理盐水组、Al3+2.5、5.0、10.0mgkg组。染毒60天后处死,用TUNEL法检测细胞凋亡,RTPCR法检测bcl2、baxmRNA的表达,用凝胶成像系统进行结果分析。结果与对照组相比,Al3+5.0mgkg、10.0mgkg组大鼠海马神经细胞凋亡率显著升高(P<005),而Al3+2.5mgkg组与对照组相比凋亡率升高,但差异无显著性;3个染毒组bcl2mRNA表达均显著下降(P<0.05);3个染毒组baxmRNA表达显著升高(P<0.05);海马神经细胞凋亡指数与bcl2mRNA表达呈负相关(r=-0.909,P<0.01),与baxmRNA表达呈正相关(r=0.871,P<0.01)。结论铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡,其机制与bcl2mRNA表达下调,baxmRNA表达上调有关。     

难治性颞叶癫痫的手术治疗

目的 探讨难治性颞叶癫痫的手术治疗策略.方法 对30例难治性颞叶癫痫患者应用视频脑电监护系统、MRI进行术前综合评估,术中采用皮层电极、深部电极监测确定致痫灶,若为颞叶内侧结构局限性放电,不伴有其他结构异常,采取选择性海马一杏仁核切除术,其余患者采用经典的前颞叶切除术.结果 术后随访1～3年,Engle Ⅰ级25例(83.3%),Ⅱ级3例(10.0%),Ⅲ级2例(6.7%).结论 根据皮层电极与深部电极结果选择相应的手术入路,前颞叶切除术和选择性海马一杏仁核切除术是安全、有效的治疗难治性颞叶癫痫的方法.     

石棉诱导细胞凋亡改变的研究

目的探讨石棉诱导的细胞凋亡及其相关基因ｂｃｌ２及ｂａｘ表达的改变。方法大鼠石棉染尘。收集石蜡包埋的石棉作业工人肺癌组织块。ＴＵＮＥＬ法（ｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｍｅｄｉａｔｅｄｄＵＴＰｎｉｃｋｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇｍｅｔｈｏｄ，末端脱氧核糖核酸转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记法）观察凋亡细胞分布及数量。生物素抗生物素蛋白ＤＣＳ（ａｖｉｄｉｎＤｃｅｌｓｏｒｔｅｒ）间接免疫荧光法观察ｂｃｌ２及ｂａｘ表达改变，琼脂糖凝胶电泳进行ＤＮＡ梯状电泳分析。结果大鼠染尘后４０天，细胞凋亡增强、ｂｃｌ２表达减少、ｂａｘ蛋白含量升高，可见ＤＮＡ特征性梯度电泳条带；大鼠染尘后７０天，细胞凋亡明显减弱。在石棉作业工人肺癌组织中未见明显细胞凋亡。结论石棉可诱导肺组织细胞凋亡发生改变，这种改变有时段性。凋亡相关基因表达也有相应变化。     

难治性颞叶癫痫患者的病理学研究

目的探讨难治性颞叶癫痫患者线粒体改变与神经元变性之间的关系。方法30例难治性颞叶癫痫患者的临床资料、海马病理学改变进行比较分析。结果光镜：神经元缺失,电镜下可见线粒体肿胀明显,内、外膜崩解,嵴变形断裂消失,部分线粒体呈空泡变。结论神经元变性坏死程度与发病年龄有关,可认为脑损伤发生年龄越小,残存神经元数量越少,线粒体的改变与神经元的变性坏死程度有一定联系,其具体联系还需进一步研究。     

雌激素对谷氨酸诱导大鼠脑皮质细胞凋亡的影响

目的：观察雌激素对谷氨酸诱导离体皮层神经元凋亡的作用,探讨雌激素的神经保护作用机制。方法：原代培养大鼠大脑皮质细胞,分为正常对照组、谷氨酸组和谷氨酸＋雌激素组,采用TUNEL和免疫细胞化学检测等方法,分析雌激素对谷氨酸诱导神经元凋亡的作用。结果：谷氨酸可明显诱导神经元凋亡,凋亡指数为34.6%;雌激素能明显拮抗谷氨酸的凋亡毒性作用,凋亡指数下降为18.4%（与谷氨酸组相比P〈0.05）;免疫组化结果显示,雌激素组bcl-2表达阳性细胞明显增加,bax蛋白表达受到抑制。结论：雌激素具有神经保护作用,作用机制可能通过影响凋亡相关基因的表达来实现。     

S-腺苷蛋氨酸和叶酸抑制同型半胱氨酸诱导的海马神经细胞凋亡

目的研究S-腺苷蛋氨酸和叶酸抑制同型半胱氨酸诱导的海马神经细胞凋亡作用及其相关机制。方法用同型半胱氨酸、S-腺苷蛋氨酸和叶酸处理体外培养的海马神经细胞,观察神经细胞的凋亡情况,以及凋亡相关蛋白的表达变化。结果用250μmol/L同型半胱氨酸作用4h可使神经细胞凋亡率显著升高,并呈时间依赖性。甲基供体S-腺苷蛋氨酸和叶酸可显著抑制同型半胱氨酸引起的神经细胞凋亡。同型半胱氨酸可显著促进凋亡相关蛋白P53、Bax的表达,抑制Bcl-2的表达。S-腺苷蛋氨酸和叶酸可抑制同型半胱氨酸引起的凋亡相关蛋白表达的改变。结论S-腺苷蛋氨酸和叶酸可显著抑制同型半胱氨酸引起的神经细胞凋亡,凋亡相关蛋白表达的变化可能是S-腺苷蛋氨酸和叶酸作用的分子机制之一。     

丁酸诱导结肠癌细胞凋亡机制的实验研究

目的:探讨膳食纤维在结肠中的酵解产物丁酸(butyrate)诱导人结肠癌细胞凋亡的作用机制.方法:人传代结肠癌细胞株SW1116经不同浓度(0、2、3、4、7和10 mmol/L)丁酸处理后,在不同时段(6、24、48和72 h)分别收集细胞,用RT-PCR和Western Blotting检测肿瘤细胞bcl-2和bax基因及其蛋白表达的变化,并用流式细胞仪和荧光定量法分别测定其p53蛋白浓度和caspase-3活性的变化.结果:实验过程中,肿瘤细胞的bcl-2 mRNA及其蛋白均无表达,但随着培养液中丁酸浓度的不断增加和培养时间的延长,其bax mRNA及其蛋白的表达则逐渐增强,同时伴有p53蛋白浓度和caspase-3活性的增加.结论:丁酸以p53依赖方式通过上调肿瘤细胞bax mRNA及其蛋白的表达而诱导SW1116细胞凋亡.     

BDNF基因多态性与颞叶癫痫患者的关联研究

目的研究BDNF基因多态性与颞叶癫痫患者的相关性。方法选取本院和广东三九脑科医院神经内科门诊及住院患者,颞叶癫痫组(20名),特发性癫痫组(20名),同时设置对照组为随机选择的我院体检中心健康个体(40名)。测定这三组人群的BDNF基因的功能位点rs6265单核苷酸多态性(SNP)分布。结果颞叶癫痫组以及特发性癫痫组的BDNF基因的功能位点rs6265基因型的频率与对照组无显著统计学差异(P>0.05)。结论 BDNF基因多态性与颞叶癫痫患者易感性可能无关。     

颞叶内侧癫痫的手术治疗

目的 分析总结颞叶内侧癫痫的临床特点,探讨前颞叶内侧切除术的手术方法,并对手术效果进行评价.方法 回顾性分析2003年4月至2007年6月诊断为颞叶内侧癫痫行前颞叶内侧切除术21例患者的临床资料.手术方式:标准前颡叶内侧切除术,部分加做皮层热灼术.结果 21例患者中,术后早期3例出现一过性失语,2例出现短暂的肢体力弱,1例复视,均在术后1～2周恢复正常.1例术后出现永久性轻偏瘫.术后病理检查发现,18例颞叶内侧硬化,其中1例伴灰质异位;1例伴右颞叶隐匿性脑动静脉畸形(AVM);3例无异常发现.随访4个月至4年,所有患者术后服用抗癫痫药物较术前减少或停药.Engel I级11例(52.4%),EngelⅡ级6例(28.6%),EngelⅢ级2例(9.5%),EngelⅣ级2例(9.5%),手术总有效率为90.5%,优良率为81.0%.结论 颞叶内侧癫痫行前颞叶内侧切除术效果良好.     

颞叶内侧占位病灶所致癫痫的显微外科治疗

目的 观察病灶切除联合海马杏仁核切除术治疗颞叶内侧占位病灶所致癫痫的手术效果.方法 回顾性分析颞叶内侧占位病灶所致癫痫且术中深部电极探查出海马异常放电的18例患者,采用改良翼点切口开颅经颞中回皮层入路行病灶切除联合海马杏仁核切除治疗,18例患者均取得了占位病灶的肉眼全切,采用Engel分级量表评价癫痫控制效果.结果 所有病例均获得随访,平均2.8年.术后Engel分级Ⅰ级13例,Ⅱ级4例,Ⅲ级1例,Ⅳ级0例,2例出现对侧1/4象限盲;3例出现近期记忆功能较术前下降,无手术死亡及其他持久并发症.结论 病灶切除联合海马杏仁核切除术治疗病侧海马异常放电的颞叶内侧占位病灶所致癫痫,并发症少,安全有效.     

石蒜碱诱导结肠癌HT-29 细胞凋亡机制研究

目的 探讨石蒜碱诱导结肠癌HT-29 细胞凋亡及机制。方法 不同浓度的石蒜碱处理体外结肠癌HT-29 细胞,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪和Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡;Real time PCR实验检测Caspase-3、Bcl-2和Bax的mRNA水平;Western blot方法检测Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的水平。结果 48h时石蒜碱对HT-29 细胞IC50为8.878μmol/L;与对照组比较,1.25μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L石蒜碱能诱导细胞凋亡(P<0.05),上调Caspase-3、Bax的mRNA和Caspase-3、Bax蛋白水平,下调Bcl-2的mRNA和Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 石蒜碱能通过调节Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达水平,抑制结肠癌HT-29 细胞生长,诱导细胞凋亡,具有明显的体内抗肿瘤作用。     

二甲基甲酰胺致人肝细胞凋亡及其对Bcl-2及Bax和Caspase-3表达的影响

目的 初步探讨二甲基甲酰胺(DMF)对正常成人肝细胞的致凋亡作用和对Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响.方法 以终浓度为0、50、100、150、200mmol/L的DMF作用于正常成人肝细胞12 h后,应用流式细胞术和western blotting法检测细胞凋亡率及Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的变化.结果 与阴性对照组比较,各DMF剂量组凋亡率明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01).随着染毒剂量的增加,肝细胞凋亡率上升,呈现剂量-反应关系.且染毒后随着DMF剂量的增加,Bcl-2表达水平下降,差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,Bax 表达水平无明显变化,Bcl-2/Bax比值随着DMF剂量增加而下降,200mmol/L剂量组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).在DMF150、200mmol/L剂量组可见到Caspase-3切割活化.结论 DMF可诱导肝细胞发生凋亡,其机制可能与Bcl-2/Bax比值表达下调、Caspase-3发生切割活化有关.     

维甲酸致神经管畸形中牡蛎拮抗神经细胞凋亡的实验研究

目的 探讨维甲酸(retinoic acid,RA)致神经管畸形(neural tube defects,NTDs)中牡蛎拮抗神经细胞凋亡的分子机制。方法 建立NTDs模型并给予牡蛎拮抗,观察神经细胞的凋亡情况及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax与Caspase-3表达的变化。结果 1)RA组神经管上皮细胞凋亡指数明显高于对照组,牡蛎组凋亡指数明显低于RA组(P＜0.05)。2)RA组神经上皮细胞Bcl-2的表达明显低于对照组,牡蛎组Bcl-2的表达明显高于RA组(P＜0.05)。3)RA组Bax与Caspase-3的表达均明显高于对照组,牡蛎组Bax与Caspase-3的表达明显低于RA组(P＜0.05)。 结论 牡蛎可以拮抗RA引起的神经上皮细胞过度凋亡,其机理可能是通过上调Bcl-2的表达和下调Bax与Caspase-3的表达实现的。     

胎膜早破凋亡机理的探讨

目的:探讨细胞凋亡调控蛋白Bax、Bc l-2、Fas、Caspase-3在胎膜早破发病机制中的作用,凋亡与感染的关系,及临床的防治意义。方法:收集临产前剖宫产分娩的初产妇(包括足月胎膜早破、足月前胎膜早破及正常对照)胎膜51例,应用免疫组化法检测胎膜中Bax、Bc l-2、Fas、Caspase-3的表达情况,并常规HE染色进行胎膜的组织学检查,和经TUNEL原位标记后精确测定胎膜中细胞凋亡指数。结果:胎膜早破组Bax、Fas、Caspase-3阳性表达率分别为91.18%、88.24%、85.29%,明显高于其对照组58.82%、52.94%、23.53%,差异有显著统计学意义(P=0.018,0.014,0.000),但两组间Bc l-2阳性表达率无差异(P=0.105);胎膜早破组羊膜绒毛膜炎的发生率和细胞凋亡指数亦较其对照组高(P=0.035,0.000)。胎膜组织学证实为羊膜绒毛膜炎的和无羊膜绒毛膜炎的其Bax、Bc l-2、Caspase-3阳性表达率无统计学差异(P=0.846,0.332,0.334),但羊膜绒毛膜炎组Fas阳性表达率显著增高(P=0.039),而且细胞凋亡指数亦高有统计学差异(P=0.000)。结论:胎膜早破发生亦与凋亡有关。无论有无感染,促凋亡蛋白Bax、Fas、Caspase-3在胎膜早破患者胎膜组织中呈显著表达,且Fas还参与炎症反应。基因和环境因素共同作用下的细胞凋亡增加可能是胎膜早破的又一发病机理,凋亡与感染可能是胎膜早破的独立致病因素,亦或协同作用。     

参附注射液对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元Bax、Bcl-2表达的影响

目的:探讨参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马神经元Bax、Bcl-2蛋白表达的影响及其治疗作用。方法:建立新生大鼠HIBD模型,把实验分成两部分:①观察缺氧缺血后3、7、14、28天各组的体重变化以及各组28天内生存率;②观察缺氧缺血前2h,缺氧缺血后2、12、24h,3、7、14、28天各时间点新生大鼠海马CA1区神经元Bax、Bcl-2蛋白的表达。每组实验随机分为4组:假手术组(S组)、生理盐水对照组(C组)、参附预处理组(P组)、参附治疗组(SF组)。结果:SF组和P组较C组Bax表达明显下调(P<0.05,P<0.01),而Bcl-2表达显著上调(P<0.05,P<0.01),生长发育和生存情况明显好于C组。结论:参附改善了新生大鼠HIBD后的生长发育,提高了其生存率;可明显下调新生大鼠HIBD后海马神经元Bax蛋白表达及上调Bcl-2蛋白的表达。     

重度子痫前期胎盘组织中Bcl-2和Caspase-3的表达及意义

目的:探讨重度子痫前期患者胎盘组织中Bcl-2和Caspase-3的表达及其与重度子痫前期发生、发展的关系。方法:采用免疫组织化学染色方法检测20例正常晚期妊娠孕妇(对照组)、40例重度子痫前期患者(重度子痫前期组,其中早发型20例,晚发型20例)的胎盘组织进行Bcl-2和Caspase-3的定位,并用计算机图像分析系统进行定量分析。结果:与对照组比较,重度子痫前期组Bcl-2的表达显著降低和Caspase-3的表达显著升高,且两者呈负相关(r=-0.334,P=0.009),早发型重度子痫前期与晚发型重度子痫前期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在胎盘组织中Bcl-2低表达和Caspase-3的高表达,可能与重度子痫前期的发生有关。     

白藜芦醇对绒癌细胞JEG-3的杀伤效应

目的:研究白藜芦醇(RES)对绒癌细胞JEG-3的凋亡作用及其机制.方法:不同浓度RES药物作用于JEG-3细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术、Western blot法,检测RES对细胞增殖、周期分布、凋亡、及相关蛋白表达的影响.结果:RES以时间和浓度依赖方式抑制JEG-3细胞的增殖(P<0.01),同时诱导JEG-3细胞发生凋亡和G0/G1期阻滞(P<0.01).Western blot法检测显示在RES作用之后,Caspase-3蛋白、Bax表达明显上调,Bcl-2表达明显下调.结论:RES可抑制人绒癌JEG-3细胞增殖、诱导其凋亡、阻滞细胞G0/G1期、伴随Caspase-3活性上调,其机制可能与上调凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2有关.     

电磁辐射对大鼠心肌细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的 对比性研究3种波段电磁辐射对大鼠心肌细胞Bcl-2和Bax的表达变化,探讨其损伤心肌细胞凋亡的可能机制。方法 180只Wistar大鼠电脑随机分为对照组(C)、S波段微波辐照组(S)、X波段微波辐照组(X)、电磁脉冲辐照组(E),分别于辐照后6h、1d、3d、7d、14 d、28 d活杀,切取大鼠心脏标本行组织学、免疫组织化学检测Bcl-2和Bax的表达,应用图像分析技术,定量研究3种波段辐照后大鼠心脏组织Bcl-2和Bax的表达变化规律。结果 3种波段辐照后6h~7d大鼠心脏组织损伤呈加重趋势,心肌纤维排列紊乱,糖原颗粒减少,核染色质浓缩,蒲肯野纤维溶解,间质水肿,心肌间有浆液渗出;与对照组相比,心肌细胞凋亡增加,Bax和Bcl-2表达均增加(P<0.05),但Bax促凋亡表达强于Bcl-2的表达强度。14~28d后心脏呈修复恢复期,14~28d后各组Bcl-2和Bax蛋白表达比6h~7d有所减弱,Bcl-2表达强于Bax表达强度,但仍较对照组表达强。6~12个月心脏组织与对照组基本相似。结论 电磁辐射对心脏损伤过程中,心肌细胞凋亡起着重要的作用,并与凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达改变有关,且高功率微波作用较电磁脉冲明显,而X的作用又较S明显。     

超微六味地黄汤对孕期被动吸烟胎鼠脑Bax、Bcl-2和Casepase-3的影响

目的研究六味地黄汤超微和传统饮片对胎鼠脑发育不全的干预作用，并从细胞凋亡角度探讨其机理。方法采用孕鼠被动吸烟造成胎鼠脑发育不全，分别给予六味地黄汤超微和传统饮片进行治疗。采用免疫组化法检测Bax、Bcl-2和Casepas’e-3。结果模型组三项指标均明显高于正常组（P〈0．01）；治疗组与模型组相比Bax和Caspase-3明显减少（P〈0．01）；但仍高于正常组（P〈0．01）；治疗组与模型组相比Bcl-2变化不大（P〉0．05）。超微全量组和1／3量组Caspase-3表达较传统组少（分别为P〈0．05和P〈0．01）；超微全量组Caspase-3的表达较超微1／3量组少（P〈0．01）。结论孕期被动吸烟可以导致胎鼠脑Bax、Bcl-2和Casepase-3表达水平升高，六味地黄汤能降低Bax和Casepase-3的表达水平。