重组人白细胞介素-1受体拮抗药对豚鼠离体呼吸道平滑肌的影响

目的　观察人重组白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1ra)对正常和卵白蛋白致敏豚鼠离体肺条、气管平滑肌的影响。方法　应用离体器官装置、张力换能器、MedLab记录系统测定肺条和气管平滑肌的张力。结果　①IL 1ra对正常豚鼠离体肺条和气管平滑肌有直接松弛作用 ,EC50 分别为1 2 9ⅹ 10 -7mol·L-1和 8 0 6× 10 -8mol·L-1;并对卵白蛋白致敏的豚鼠肺条和气管平滑肌也有直接的松弛作用 ,EC50 分别为 2 6 1× 10 -7mol·L-1和 5 88× 10 -7mol·L-1,但致敏豚鼠呼吸道平滑肌对IL 1ra的敏感性要比正常豚鼠低。②IL 1ra(10 -9～ 10 -5mol·L-1)可剂量依赖性地抑制致痉剂组胺对正常豚鼠肺条和气管平滑肌的收缩作用 (P <0 0 1)。③IL 1ra能抑制卵白蛋白攻击引起的肺条和气管平滑肌的收缩 ,IC50 分别为 7 83ⅹ 10 -7mol·L-1和 4 4 8ⅹ 10 -7mol·L-1。结论　IL 1ra对正常、痉挛及致敏状态的呼吸道平滑肌均有松弛作用     

甘草次酸对血管平滑肌细胞c-fos mRNA表达及细胞增殖的影响

目的　研究甘草次酸 (GA)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)原癌基因c fosmRNA表达及细胞增殖的影响 ,探讨GA与血管紧张素Ⅱ (AⅡ )受体结合的可能机制。方法　原代培养大鼠血管平滑肌细胞 ,[3H]TdR参入DNA、MTT分析法、Northernblot。结果　①低浓度GA( 1× 10 -9mol·L-1)及高浓度GA( 1× 10 -5mol·L-1)均能导致c fosmRNA迅速表达 ;1× 10 -5mol·L-1Sar AⅡ能够阻断AⅡ、GA诱导的VSMCc fos表达 ;低浓度和高浓度GA都能促进AⅡ ( 1× 10 -5mol·L-1)诱导的VSMCc fos表达 ;②低浓度GA对细胞的增殖有促进作用 ;随着浓度的升高 ,促增殖作用减弱 ;高浓度GA抑制细胞的增殖。Sar AⅡ单独作用于VSMC ,不影响细胞增殖 ;Sar AⅡ能够阻断AⅡ对细胞增殖的促进作用 ;Sar AⅡ既抑制低浓度GA促细胞增殖作用 ,也消除高浓度GA抑制细胞增殖作用 ;低浓度GA与AⅡ联合作用 ,对细胞增殖的促进作用更加显著 ;高浓度GA与AⅡ联合作用于VSMC ,则可减轻高浓度GA对细胞增殖的抑制作用。结论　GA能激活c fos转录因子 ,从而产生对VSMC的增殖作用 ,因此 ,GA具有AT1受体的激动剂2 0 0 2 0 4 0 3收稿 ,2 0 0 2 0 7 2 3修回作者简介 :张凤云 ,女 ,33岁 ,硕士 ;贺师鹏 ,男 ,67岁 ,教授。研究方向 :酶和受体的拮抗剂样作用     

甘草酸对血清和组织胺诱发的大鼠气道平滑肌细胞增生的影响

目的　观察甘草酸对血清和组织胺诱发的大鼠气道平滑肌细胞 (ASMC)增生的影响。方法　MTT法、细胞计数法和流式细胞术检测体外培养的ASMC的光密度、细胞数和细胞周期。结果　①在含 10 0g·L-1FCS的培养液中加入 6×10 -5mol·L-1的甘草酸可使A570 的增速增加 ,而加入 384×10 -5mol·L-1和 15 36× 10 -5mol·L-1却使A570 的增速减慢 ;在含 10 -2 mol·L-1组织胺的培养液中加入甘草酸使A5 70的增速减慢 ,浓度越大作用越明显。②在含 10 0g·L-1FCS的培养液中加入 6× 10 -5mol·L-1的甘草酸可促进细胞增生 ,而加入 384× 10 -5mol·L-1和 15 36× 10 -5mol·L-1则抑制细胞增生 ;在含 10 -2 mol·L-1组织胺的培养液中加入甘草酸 ,细胞增生受到抑制 ,浓度越大作用越明显。③在 10 0g·L-1FCS或 10 -2 mol·L-1的组织胺中培养 96h ,随着甘草酸浓度的增加 ,G1期细胞数增多 ,S期和G2 +M期细胞数减少。结论　①对FCS刺激引起的ASMC增生 ,低浓度甘草酸有促进作用 ,高浓度有抑制作用。②对组织胺刺激引起的ASMC增生 ,低浓度和高浓度甘草酸都有抑制作用     

血管紧张素Ⅱ和氯沙坦对大鼠小动脉平滑肌细胞的基质金属蛋白酶2和9表达的影响

目的　为研究血管紧张素Ⅱ导致血管重构的机制是否与其影响平滑肌细胞的基质金属蛋白酶 2和 9的表达及活性有关。方法　应用RT PCR、Westernblot、明胶酶谱分析等方法观察不同浓度的血管紧张素Ⅱ对体外培养的大鼠肠系膜小动脉平滑肌细胞的金属蛋白酶 2和 9的表达及活性的影响。结果　高浓度的血管紧张素Ⅱ作用VSMC 48h时 ,可以诱导金属蛋白酶 2和 9的表达及活性增加。不同浓度影响程度不同 ,1× 10 - 8mol·L- 1和 1× 10 - 7mol·L- 1的血管紧张素Ⅱ影响最强。 1× 10 - 6 mol·L- 1氯沙坦可以部分阻断血管紧张素Ⅱ对金属蛋白酶 2和 9的诱导作用。结论　血管紧张素Ⅱ可以诱导小动脉VSMC的金属蛋白酶 2和 9的表达及活性增加 ;AT1受体参与介导此过程     

缝隙连接在苯肾上腺素缩血管中的作用

目的　探讨缝隙连接 (GJ)在苯肾上腺素 (PE)缩血管中的作用。方法　通过大鼠离体肠系膜动脉环 (superiormesentericarterialrings,MARs)试验 ,观察GJ阻断剂Hep tanol预处理对PE引起的去内皮和完整内皮MARs收缩及其量效曲线的影响。结果　Heptanol预处理可明显抑制 1 0× 10 - 7mol·L- 1PE的缩血管作用 ,并呈剂量依赖关系。 3 0× 10 - 5 mol·L- 1Heptanol抑制百分率分别为 11 70 %±3 2 5% (去内皮组 )和 15 2 4%± 7 87% (完整内皮组 ) ;3 0× 10 - 4mol·L- 1Heptanol预处理 ,抑制百分率分别为3 6 3 6%± 11 54% (去内皮组 )和 3 8 85%± 13 0 3 % (完整内皮组 ) ;同浓度Heptanol对PE致去内皮和完整内皮MAR收缩的抑制作用差异无显著性。 3 0× 10 - 5 ,1 0× 10 - 4,3 0× 10 - 4mol·L- 1Heptanol使PE的量效曲线右移 ,最大效应 (Emax)不变。结论　GJ参与介导苯肾上腺素的缩血管作用 ,GJ阻断剂Heptanol对PE缩血管的抑制作用无明显内皮依赖性 ,具易逆性特点     

西红花苷对牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

目的研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法以Fluo-3/AM作为Ca²⁺荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10^-8,1×10^-7,1×10^-6 mol·L^-1)均能明显抑制1×10^-2 mol·L^-1 H₂O₂引起的细胞内钙离子浓度的升高,其抑制率含钙条件下分别为34.1%, 57.1%和74.3%(P<0.01),无钙条件下分别为26.2%,32.1%和50.0%(P<0.01);在胞外无钙的条件下,西红花苷 (1×10^-8,1×10^-7,1×10^-6 mol·L^-1)能抑制70 mmol·L^-1 CHCl₃导致雷洛丁敏感钙池的释放,其抑制率分别为27.8%, 27.8%和50.0% (P<0.01)。结论西红花苷能抑制胞外钙离子的内流及内质网上钙离子的释放。     

普伐他汀对非对称性二甲基精氨酸促血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　探讨非对称性二甲基精氨酸 (ADMA)对血管平滑肌细胞增殖的作用和普伐他汀对ADMA促平滑肌细胞增殖的影响及其机制。方法　用[3H]TdR掺入法和MTT比色法检测ADMA对培养的牛胸主动脉平滑肌细胞增殖作用的量效关系和时效关系 ,以及普伐他汀等药物对ADMA刺激平滑肌细胞增殖的影响。结果　用 30～ 30 0 μmol·L- 1ADMA分别孵育平滑肌细胞后 ,都明显增加血管平滑肌细胞DNA的合成 ,表现在 [3H]TdR掺入量由对照组的(6 38± 134)cpm增加到大剂量ADMA组的 (12 79±111)cpm。用 30 0 μmol·L- 1ADMA孵育细胞 2 4～ 96h呈时间依赖性地促进血管平滑肌细胞增殖 ,表现为 [3H]TdR掺入量随着时间的延长分别增加为对照组的 1.5 ,2 .7,4 .3和 5 .6倍。普伐他汀 (10 0 μmol·L- 1)可逆转ADMA所致的细胞DNA合成的增加 ,[3H]TdR掺入量由ADMA单独孵育组的 (6 10± 2 0 2 )cpm降低至普伐他汀处理组的 (35 6± 12 6 )cpm。此外 ,一氧化氮供体硝普钠和抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐处理后也可逆转这种增加。MTT法测定细胞数也证明 ,30～ 30 0 μmol·L- 1普伐他汀呈剂量依赖性地对抗ADMA所致的平滑肌细胞增殖。结论ADMA可促进血管平滑肌细胞的增殖 ;普伐他汀对ADMA所诱导的平滑肌细胞增殖具有抑制作用 ;这两者均可能与细?     

异补骨脂素的植物雌激素作用及其机制的探讨

目的利用雌激素受体(estrogenic receptor,ER)阳性乳腺癌T47D细胞和ER阴性乳腺癌MDA-MB231细胞观察异补骨脂素(isopsoralen)的雌激素样作用,并探讨其可能的作用靶点和机制。方法以ER拮抗剂ICI182,780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察异补骨脂素对T47D和MDA-MB231细胞增殖的影响;通过流式细胞术检测细胞周期分布的变化。同时,利用实时荧光定量PCR法及流式细胞术检测异补骨脂素对T47D细胞pS2 mRNA及蛋白表达情况的影响。结果1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素能够促进T47D细胞增殖,提高细胞分裂增殖指数,且该作用可被ICI182,780所拮抗;1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素对MDA-MB231细胞增殖无影响。PCR及流式蛋白检测结果显示:1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素可使pS2 mRNA和蛋白表达增加,同时加入ICI182,780可部分拮抗异补骨脂素对pS2表达的诱导和促进作用。结论异补骨脂素具有植物雌激素作用,该效应可通过作用于靶细胞雌激素受体途径实现。     

尼索地平对大鼠离体肺动脉和肺动脉高压的影响

目的 观察尼索地平(nifedipine,NIS)对KCl和去氧肾上腺素(phenylephrine,PHE)所致离体大鼠肺动脉收缩的作用,同时研究其对野百合碱诱导的肺动脉高压(pulmonary hypertention,PH)大鼠的影响。方法 ①采用离体血管实验法,以KCl和PHE在含钙离子和不含钙离子的K-H液中预收缩离体大鼠肺动脉环,观察NIS对血管收缩的影响。②取40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、NIS组和硝苯地平(NIF)组,每组10只,采用野百合碱(50 mg·kg^-1)皮下注射建立大鼠PH模型,连续灌胃给药21 d。采用右心导管法测定mPAP、mRVP、maxPAP和maxRVP,并计算各组大鼠的RVHI和LI。结果 ①在含钙离子的K-H液中,NIS抑制KCl(20,40,60 mmol·L^-1)和PHE(1×10^-7,5×10^-7,1×10^-6 mol·L^-1)所致血管收缩的IC₅₀分别为0.87×10^-8,1.41×10^-8,8.32×10^-8 mol·L^-1和0.56×10^-7,4.27×10^-7,1.28×10^-6 mol·L^-1。在无钙离子K-H液中,NIS无抑制离体血管收缩的作用。②模型组大鼠mPAP、mRVP、maxPAP、maxRVP、RVHI和LI均显著高于正常组(P<0.01),NIS组和NIF组大鼠的上述指标均显著低于模型组(P<0.05)。结论 NIS有抑制大鼠肺动脉收缩的作用,对野百合碱诱导的大鼠PH有治疗作用。     

普伐他汀对溶血磷脂酰胆碱促血管平滑肌细胞增殖及细胞粘附的影响

目的　探讨羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂普伐他汀对溶血磷脂酰胆碱 (LPC)促血管平滑肌细胞增殖及白细胞与内皮细胞粘附的影响。方法　用MTT法检测LPC对平滑肌细胞增殖的量效和时效关系及普伐他汀对LPC促平滑肌细胞增殖的影响 ;用直接记数法检测LPC诱导中性粒细胞系K5 6 2细胞与人脐静脉内皮细胞系ECV30 4细胞的粘附和普伐他汀对LPC所致白细胞与内皮细胞粘附的影响。结果　用 1～ 10 μmol·L-1LPC孵育血管平滑肌细胞 2 4～ 4 8h后 ,呈时间和剂量依赖性地诱导细胞增殖 ,而用 0 3～ 1mmol·L-1普伐他汀预孵育平滑肌细胞 1h ,再与 3μmol·L-1LPC共孵育 2 4～ 4 8h ,明显地抑制LPC所诱导的细胞增殖 ;用 3μmol·L-1LPC孵育ECV30 4细胞 12h显著增加K5 6 2细胞与ECV30 4细胞的粘附 ,而将ECV30 4细胞用 1mmol·L-1普伐他汀预处理后 ,明显减少白细胞与内皮细胞的粘附。结论　普伐他汀可抑制LPC促血管平滑肌细胞增殖及白细胞与内皮细胞粘附的作用。     

舒马曲坦对大鼠肺动脉平滑肌细胞的促有丝分裂作用

目的　观察 5 HT1B/1D受体激动剂舒马曲坦对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)的促有丝分裂作用 ,探讨其作用机制和诱发肺血管构型重建的可能性。方法　分离培养大鼠PASMC ,用噻唑蓝 (MTT)法检测细胞增殖 ,用流式细胞术法分析细胞周期和DNA合成。结果　MTT法检测 5 羟色胺 (5 HT) 0 .0 1,0 .1,1.0 μmol·L- 1可促进PASMC增殖 ,增殖率分别增加2 0 1% ,2 2 8%和 2 5 6 %。舒马曲坦 0 .0 1,0 .1,1.0μmol·L- 1可促进PASMC增殖 ,增殖率分别增加199% ,2 2 0 %和 2 4 5 %。流式细胞术分析 5 HT 0 .1和1.0 μmol·L- 1组的细胞增殖指数分别为 2 2 .2 %和2 5 .9% ,S期细胞分数分别为 7.2 %和 9.8%。舒马曲坦 0 .1和 1.0 μmol·L- 1组的增殖指数分别为2 1.2 %和 2 3.9% ,S期细胞分数分别为 6 .6 %和8.8% ,均较对照组明显增高 (P <0 .0 5 )。 5 HT和舒马曲坦能够促进PASMC从G0 /G1期进入S期 ,5 HT的促有丝分裂作用可能有 5 HT1B/1D受体的参与。结论　舒马曲坦能促进PASMC的增殖。 5 HT1B/1D 受体在PASMC增殖和肺血管构型重建中有重要作用。舒马曲坦有致肺动脉高压的风险     

Carvedilol inhibits proliferation of cultured pulmonary artery smooth muscle cells of patients with idiopathic pulmonary arterial hypertension

Idiopathic pulmonary arterial hypertension (IPAH) is associated with proliferation of smooth muscle cells (SMCs) in small pulmonary arteries. Inhibition of proliferation of pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs) may be an effective treatment of patients with idiopathic pulmonary arterial hypertension. Recent studies have shown that carvedilol, an alpha- and beta-blocker with antioxidant and calcium channel blocking properties, inhibits the proliferation of cultured normal human pulmonary artery smooth muscle cells. In this study, we tested the hypothesis that carvedilol has antiproliferative effects on pulmonary artery smooth muscle cells of patients with idiopathic pulmonary arterial hypertension. Pulmonary artery smooth muscle cells from six idiopathic pulmonary arterial hypertension patients who had undergone lung transplantation were cultured. To determine cell proliferation, H-thymidine incorporation was measured. Platelet-derived growth factor-induced proliferation of IPAH-PASMCs was significantly greater than that of normal control pulmonary artery smooth muscle cells. Carvedilol (0.1 microM to 10 microM) inhibited the proliferation of idiopathic pulmonary arterial hypertension-pulmonary artery smooth muscle cells in a concentration-dependent manner. Prazosin (an alpha-blocker) and N-acetyl L cysteine (an antioxidant agent) (0.1 microM to 10 microM) did not inhibit their proliferation, but the high concentration of propranolol (a beta-blocker) and nifedipine (a calcium channel blocker) (10 microM) inhibited the proliferation. The combination of propranolol and nifedipine inhibited the proliferation but only at a high concentration (10 microM) combination. Cell cycle analysis revealed that carvedilol (10 microM) significantly decreased the number of cells in S and G2/M phases. These results indicate that carvedilol inhibits the exaggerated proliferation of pulmonary artery smooth muscle cells of patients with idiopathic pulmonary arterial hypertension partially via its beta-blocking [corrected] and calcium channel blocking effects in vitro.     

SB_(224289)对5-HT诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的研究 5 HT1B受体拮抗剂SB2 2 42 89对 5 HT诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 ,探讨肺血管构型重建的 5 HT1B受体机制。方法分离培养大鼠肺动脉平滑肌细胞 ,用MTT法和3 H TdR掺入法检测细胞增殖和DNA合成。结果SB2 2 42 89能剂量依赖地抑制 5 HT诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖。SB2 2 42 89能剂量依赖地抑制 5 HT诱导的肺动脉平滑肌细胞的DNA合成 ,SB2 2 42 89能阻断 5 HT对肺动脉平滑肌细胞的促有丝分裂作用。结论SB2 2 42 89能抑制 5 HT引起的肺动脉平滑肌细胞的增殖。5 HT1B受体在 5 HT诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖中有重要作用。     

哮喘豚鼠气道平滑肌细胞内钙释放通道的变化

目的检测哮喘豚鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)内钙释放通道功能的改变,探讨与支气管哮喘的关系,同时,寻找传代培养ASMCs的方法。方法以Flou-3/AM为细胞内钙离子示踪剂,观察ASMCs在工具药作用下细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的改变。结果①在ASMCs外无钙情况下,不同浓度ryanodine(5×10-5,10-4,2×10-4mol·L-1)作用于原代培养正常与哮喘ASMCs,[Ca2+]i迅速升高,哮喘组明显高于正常组(P<0·01)。10-4mol·L-1的组织胺(hista-mine)作用于原代培养的正常组与哮喘组ASMCs,[Ca2+]i升高无差异(P>0·05)。②传代培养哮喘ASMCs在10-4、2×10-4mol·L-1ryanodine作用下,[Ca2+]i迅速升高,与原代细胞比较无差异(P>0·05)。在浓度为5×10-5mol·L-1时,原代明显高于传代(P<0.01)。哮喘组传代ASMCs对10-4mol·L-1的histamine反应不明显。结论哮喘豚鼠ASMCs内钙释放通道(RyRs)功能升高,特定条件下,哮喘传代细胞仍然保持原代细胞内钙释放通道的特性。     

库容性Ca~(2+)内流介导大鼠远端结肠平滑肌收缩

目的探讨库容性Ca2+内流(capac itative Ca2+entry,CCE)是否参与大鼠远端结肠平滑肌兴奋-收缩偶联过程。方法利用器官离体装置、张力换能器、Powerlab 4/25T数据采集分析系统测定远端结肠平滑肌的张力。结果毒胡萝卜素(thapsigargin,TG,10 nmol.L-1~1μmol.L-1)诱导结肠平滑肌条产生持续的张力性收缩,不同浓度TG所致的同步收缩反应张力不同。在无钙Krebs液(包含1 mmol.L-1EDTA)中使用TG将肌条培养35 m in后,再加入Ca2+2.5mmol.L-1,比未使用TG处理的肌条产生的收缩张力明显提高(99%±28%vs70%±8%)。且TG耗竭胞内钙库后再复钙所致的收缩效应,不受L型钙通道阻断剂verapam il影响,但可被SOC通道阻断剂La3+减弱。结论TG耗竭胞内钙库后再复钙诱导的大鼠远端结肠平滑肌收缩反应由CCE介导,提示CCE是提供大鼠远端结肠平滑肌收缩的激活信号Ca2+的来源之一,参与完成结肠平滑肌兴奋-收缩偶联过程。     

三七皂甙对慢性缺氧性肺动脉高压的影响

目的：研究三七皂甙对大鼠慢性缺氧性肺动脉高压的作用。方法：采用间断常压缺氧法制备大鼠慢性缺氧性肺动脉高压模型，腹腔注射三七皂甙（２５，５０和１００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），连续给药２１天。结果：三七皂甙能产生剂量依赖性地抑制慢性缺氧性肺动脉高压的作用，其抑制率分别为１５．９％、４３．９％和７３．４％，并能明显抑制右心室肥厚，其抑制率分别为２２．１％、５５．６％和８３．３％，而对颈动脉血压无明显的影响。三七皂甙（２００ｇ·Ｌ－１）能明显抑制血小板生长因子所诱导的离体肺动脉平滑肌细胞ＤＮＡ的合成。结论：三七皂甙有抑制慢性缺氧性肺动脉高压的作用，可能是通过抑制血小板生长因子促肺动脉平滑肌细胞增殖而抑制肺血管结构重建来实现的。     

肝癌组织中DNA倍体、SPF、PI值测定的临床意义

目的 了解原发性肝癌组织中DNA倍体,SPF、PI值,与临床分期的关系。方法应用流式细胞仪（FCM）测定石蜡包埋的原发性肝细胞癌组织标本120例,检测DNA倍体,SPF、PI值。结果随着原发性肝细胞癌临床分期的发展,临床Ⅰ～Ⅱ与Ⅲ～Ⅳ期肿瘤的异倍体率（Ⅰ～Ⅱ33．3％,Ⅲ-Ⅳ期42．8％）,SPF、PI值均增高,其与正常肝组织均有统计学意义。但肿瘤各临床分期Ⅰ-Ⅱ与Ⅲ-Ⅳ期之间并无统计学意义。结论测定原发性肝细胞癌组织的DNA倍体,SPF、PI值能了解其某些分子生物学特性,从而从分子水平上了解其增殖活性。对肿瘤的诊断及预后的评估有积极的临床意义。     

Pharmacological profile of store-operated Ca(2+) entry in intrapulmonary artery smooth muscle cells

Store-operated Ca(2+) entry (SOCE) plays an important role in the contraction and proliferation of pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs). The aim of this study was to characterise the pharmacological properties of the SOCE pathway in freshly isolated PASMCs from rat lung and to determine whether this Ca(2+) entry pathway is sensitive to nitric oxide donor drugs. Following depletion of Ca(2+) from the sarcoplasmic reticulum, by treating cells with thapsigargin, re-addition of Ca(2+) produced an increase in cytosolic fluo-4 fluorescence that was sustained for the period that extracellular Ca(2+) was present. Thapsigargin also increased the rate of quench of fura-2 fluorescence, confirming that SOCE was activated. The SOCE pathway was not affected by nifedipine or verapamil; however, it was inhibited by the divalent cations Ni(2+) (10 microM) and Cd(2+) (10 microM) by 47+/-5% and 49+/-5% respectively. SOCE was also inhibited 42+/-5% by 2-aminoethoxydiphenyl borate (2-APB; 75 microM) and 58+/-4% by Gd(3+) (10 microM), although La(3+) (100 microM) had little effect. None of the NO donors examined, including sodium nitroprusside, glyceryl trinitrate, and 2-(N,N-diethylamino)-diazenolate-2-oxide had any effect on SOCE. Thus, the pulmonary vasorelaxation produced by NO does not involve direct inhibition of SOCE in PASMCs. Western blot and immunocytochemistry using antibodies directed against specific TRPC subunits detected the presence of TRPC1, 3, and 6 in pulmonary artery and the pharmacological profile of SOCE in PASMCs favours a role for TRPC1 in mediating the underlying channels that are activated by store depletion.     

人参炔醇对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用及机制

目的观察人参炔醇(panaxynol,PNN)对大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)增殖的抑制作用及机制。方法由细胞计数、[3H]TdR参入试验确定细胞增殖率,采用分子探针Fura-3/AM及共聚焦显微镜检测胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i),RT-PCR方法观察线粒体转录因子1(m tTF1)mRNA的表达。结果PNN以浓度依赖方式抑制血清及PDGF-BB诱导的RASMC增殖和DNA合成;9μmol.L-1PNN预处理RASMC能抑制PDGF-BB引起的[Ca2+]i升高;PDGF-BB上调RASMC m tTF1 mRNA表达,该作用可被3、9μmol.L-1的PNN抑制。结论PNN具有抗RASMC增殖作用,该作用与降低[Ca2+]i和抑制m tTF1 mRNA表达有关。     

前列腺素E_2及硝苯吡啶对某些免疫功能的影响

PGE_23×10~(-7)～3×10~(-6)mol/L及硝苯吡啶5×10~(-6)～1×10~(-5)mol/L对ConA诱导的淋巴细胞增殖有明显抑制作用。药物作用48h后洗去药物,加入致裂原后继续培养细胞,结果发现硝苯吡啶的抑制作用已完全逆转,而PGE_23×10~(-6)mol/L的抑制作用则部分逆转。当低浓度PGE_2(3×10~(-3)mol/L)与硝苯吡啶(1×10~(-6)mol/L)同时作用于脾细胞时,可见两者作用正巧相加,无明显拮抗与协同作用。PGE_26×10~(-6)mol/L及硝苯吡啶1×10~(-5)mol/L对巨噬细胞移动有直接抑制作用。用~(51)Cr标记调理的绵羊红细胞方法证明低浓度PGE_2对巨噬细胞吞噬功能有增强,而硝苯吡啶预培养对吞噬功能影响不大。