大肠埃希菌和克雷伯菌产广谱β—内酰胺酶测定的标准方法

产广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬＳ）的大肠埃希菌和克雷伯菌,对青霉素、头孢类抗生素或氨曲南,当临床治疗时可耐药,而此类细菌中某一些的体外药敏试验却可以呈敏感结果,虽然它们的抑菌圈直径低于通常大小但高于敏感范围的下限。这些潜在的产ＥＳＢＬＳ的菌株,可以通过美国国立临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）１９９９年Ｍ１００－Ｓ９文件中的标准方法测定（附表）［１］。凡是产ＥＳＢＬＳ的菌株,在报告中必须注明对所有青霉素类、头孢类抗生素及氨曲南耐药,以免延误治疗、危及病人生命。附表　肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌中的Ｅ…     

要正确评价和应用稀释法和扩散法细菌药敏试验

细菌药敏试验结果，敏感（Ｓ）、中介度（Ｉ）、耐药（Ｒ）是临床医师治疗细菌性感染、合理选用药物、提高疗效和避免滥用抗菌药物的重要依据。美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）推荐两种药敏试验方法：稀释法（琼脂或肉汤稀释法）和纸片扩散法。扩散法Ｓ、Ｉ、Ｒ...     

发现抗生素耐药性的实验室检测能力评估

1995年 ,ＷＨＯ即开始推动一项质控项目 ,旨在帮助参试国家评定其抗生素敏感试验的准确性。本研究为疾病预防和控制中心 (ＣＤＣ)在 1 996～ 1 999年间将 6个菌株分发给全世界近 1 30个实验室进行测试 ,结果汇总分析。ＣＤＣ按ＮＣＣＬＳ标准对细菌进行稀释法和纸片扩散法 (Ｋ Ｂ)试验 ,以确定标准值作参考。要求每个参试实验室不仅提供定量结果 (ＭＩＣ和抑菌环直径 ) ,还须提供定性结果 (敏感Ｓ ,中介Ｉ,耐药Ｒ)。结果 :ＷＨＯ 1是产生ＥＳＢＬ的肺炎克雷伯菌。 1 30个实验室中 63 9% ( 83/ 1 30 )用Ｋ Ｂ法 ,36 1 % ( 4 7/ 1 30 )用ＭＩ…     

简介美国NCCLS药敏试验法规(1999年1月版)的变动部分

１９９９年１月美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）出版的《药敏试验实施标准;第９次信息补充》（Ｍ１００Ｓ９）文件［１］对当前在临床上有重要意义的耐药菌株的检测做了许多的补充和修改。如新版本对于产超广谱β内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）株的检测、耐苯唑西林的凝固酶阴性的葡萄球菌（ＭＲＳＣｏＮ）的检测,进行了修改;增添幽门螺杆菌的药敏试验的操作规程和判定标准;补充肠球菌药敏试验的注意事项;补充几种新药的判定标准。１关于肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌中ＥＳＢＬ株的检测方法：新版本中修改要点包括…     

简介美国临床实验室标准化委员会最新推荐厌氧菌药敏试验方法及评价

由于厌氧菌的分离、鉴定和药敏试验技术较复杂 ,并受试验成本高等条件限制[1] ,国内很多实验室不能开展厌氧菌鉴定和药敏试验工作[2 7] 。即使是国外 ,多数临床医生治疗的依据 ,也是凭经验和文献资料。然而 ,近 10年来 ,厌氧菌的耐药率不断增高。本讲将探讨常见厌氧菌对常用于治疗厌氧菌抗生素的耐药机制 ;简要介绍美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ) 2 0 0 1年最新推荐的药敏试验方法 ,以及对 2种适合常规使用的药敏方法的评价 ,供临床和实验室参考。一、厌氧菌耐药机制厌氧菌耐药机制的形成主要是产酶 ;细胞壁通透性改变 ,使抗生素…     

卫生部临床检验中心关于NCCLS药敏标准更新研讨暨第一期厌氧菌检测培训班在京举办

为了推动抗生素药敏试验的标准化、尽快与国际接轨 ,卫生部临床检验中心于 2 0 0 1年 10月 9～ 13日 ,在北京举办了关于ＮＣＣＬＳ药敏标准更新研讨暨全国第一期厌氧菌诊断技术培训班。大会由卫生部临检中心主持 ,中心副主任申子瑜致开幕辞 ;美国国家临床标准化委员会微生物分会主席Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ先生为大会作“抗生素敏感试验的标准化对全球的影响和技术更新”的报告 ;陈民钧主任作“医院细菌室的三大任务”的报告。出席会议的还有卫生部医政司张宗久处长、护理处巩玉秀处长 ;北京市医政处吕鹏处长等。近 30 0位与会代表来自全国 2 2…     

为什么NCCLS推荐的超广谱β-内酰胺酶法只提出大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌?

革兰阴性杆菌的主要由质粒介导的超广谱β 内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ)耐药机制已引起广泛的注意 ,已有许多专著和综述发表。美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)发布的推荐的筛查或确证法 (1999～ 2 0 0 1年版 )已为国内细菌检验室采用。对临床正确选用抗生素治疗革兰阴性杆菌感染患者起了推动作用。事实表明 ,除大肠埃希菌、肺炎或产酸克雷伯菌外 ,变形杆菌、粘质沙雷菌、肠杆菌、枸橼酸杆菌、摩根摩根菌、志贺菌、沙门菌等也可产生ＥＳＢＬｓ。许多报告统计出上述临床菌株产生ＥＳＢＬｓ的频率 ,认为对这些革兰阴性菌要应用ＮＣＣＬＳ法…     

儿科感染致病菌814株耐药性检测

中华儿科杂志, １９９９, ３７（ １１）： ６８４－６８７．收集武汉地区１３所医院儿科分离的致病菌,采用Ｋ－Ｂ法进行药敏试验,用ＷＨＯ细菌耐药监测软件“ＷＨＯＮＥＴ－４”进行统计和分析,根据１９９３年发布的美国临床试验室标准委员会（ＮＣＣＬＳ）标准判断细菌耐药性。结果１９９６年总共收集儿科致病菌８１４株。志贺菌属、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、假单胞菌属和克雷伯菌属是主要菌种。１０．７％金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药,对其他抗生素的耐药也增加。肠杆菌科菌株对氨苄西林的耐药率超过７９．４％,对克雷伯菌属的…     

微量显色酵母菌药敏试验方法初步应用

临床酵母菌目前已成为医院感染的主要菌群之一 ,体外药敏试验对于合理筛选抗真菌药物 ,发现耐药菌株等有重要意义[1] 。为此 ,我们参照文献 [2 ]介绍一种“ＹｅａｓｔＯｎｅ微量稀释显色法酵母菌药敏试验”方法 ,并以美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)推荐的“Ｍ2 7 Ａ”方法为参考 ,对其方法学特点作初步评价。一、材料和方法1 菌株来源 :2 0 0 0年 5月～ 2 0 0 1年 5月间从各类临床标本中分离到的酵母菌共 130株 ,按常规方法和ＡＰＩ 2 0ＣＡＵＸ ,或用ＹＢＣ卡经ＶＩＴＥＫ仪器 (生物梅里埃公司 )鉴定 ,其中包括白念珠菌、热带念…     

1135株革兰阴性杆菌对头孢菌素耐药情况分析

通过对１９９２～１９９４年院内感染的１１３５株革兰阴性杆菌对头孢菌素的耐药分析，指导临床合理用药。方法：应用ＶＩＴＥＫＡＭＳ－６０自动微生物分析仪，Ｋ－Ｂ法对菌株进行鉴定，药敏试验，并按美国临床实验室标准委员会（ＮＣＣＬＳ）标准分析，质控，结果，药敏质控符合ＮＣＣＬＳ标准，１１３５株革兰阴性杆菌对头孢呋肟，头孢哌酮等耐药性检测，均经Ｕ检验，Ｐ〈０．０１，表明耐药性明显增加，结论，随头孢菌素广泛使用     

超广谱β—内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的 了解超广谱β内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）细菌的检测及耐一的情况,以利于对ＥＳＢＬｓ的监控和治疗。方法 用ＮＣＣＬＳ推荐的初筛和确证实验及双纸片协同实验、Ｅ －ｔｅｓｔ、 Ｖｉｔｅｋ３２型全自动分析系统药敏检测卡ＧＮＳ－ＮＴ对１６０株大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌进行ＥＳＢＬｓ的鉴定,并检测确证ＥＳＢＬｓ阳性菌株的药敏情况。结果 共检出ＥＬＳＬｓ菌株３３株,双纸片协同实验、Ｅ－ｔｅｓｔ、ＧＮＳ－ＮＧ三者     

大肠埃希杆菌和克雷伯菌属超广谱β—内酰胺酶测定及耐药性

目的 进行大肠直菌和克雷伯属超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬ）和耐药指导临床用药。方法 采用Ｖｉｔｅｋ－ＧＮＳ－ＮＴ卡测定,并以ＥｔｅｓｔＥＳＢＬ试条对照,ＥＳＢＬ阳性菌株进行１１种抗生素药敏测定。结果 发现１５．５％大肠埃希杆菌、１４．７％克雷伯菌属ＥＳＢＬ阳性,ＧＮＳ－ＮＴ 与Ｅｔｅｓｔ ＥＳＢＬ试条结果一致产ＥＳＢＬ细菌对庆大霉素、诺氟沙星、氨苄西林全部耐药、对其他抗生经率也很高,对呋喃妥因耐药     

1998年美国NCCLS纸片法药敏试验法规中的主要变动

我们在本刊介绍过美国国立临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）颁布的１９９７年纸片法药敏试验法规［１］。同年，该部门的抗生素药敏试验委员会对此法规作了一些重要修正［２］。判断结果的表格用了新的形式，每一类细菌均有一个判断结果的表格和相应的ＭＩＣ值，并附有试验条件，推荐的质控菌株及重要说明。值得注意的是抗生素有了新的品种。美国食品和医药管理局（ＦＤＡ）尚未正式批准认可列入常规分组选用表格中的抗生素，但累计资料已证明对某些细菌可以应用的归为“Ｏ”组，尚在研究试用的归为“Ｉｎｖ”组，Ｉｎｖ和Ｏ组的抗生素…     

沙门菌属细菌药敏试验的误区

美国实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)抗微生物敏感试验纸片法执行标准中指出 :对沙门菌属的药敏试验仅测试氨苄西林、ＴＭＰ/ＳＭＺ、喹诺酮类 ,对肠道外菌感染加试氯霉素和一种三代头孢菌素。并且明确强调对于氨基糖甙类 ,一、二代头孢类 ,即使体外有活性 ,临床却无效 ,故不宜报告为敏感。由于以前ＮＣＣＬＳ的规则在我国不够普及 ,所以常有错误报告 ,如赵宏等报道 (上海医学检验杂志 ,1999,(2 )∶77) ,330株伤寒沙门菌对庆大霉素、卡那霉素、头孢唑啉的敏感率均为10 0 % ,丁胺卡那霉素为 91 6 7%。陈有土报道 (临床检验杂志 ,2 0 0 0 ,18…     

简介美国NCCLS抗生素药敏试验操作标准(2001年版)变更内容

美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)在 2 0 0 0年召开的抗生素药物敏感试验委员会分会上 ,对 1999年以及以前出版的需氧菌的纸片扩散法 (Ｍ2 )和稀释法 (Ｍ7)药敏试验文件、表格等部分内容作了重要变更 ,更改内容编入 2 0 0 1年 1月出版的第 11版信息增刊 (Ｍ10 0 Ｓ11) [1] 。在Ｍ2文件中有新增的信息 2 2处 ,更改 9处和删除 1处 ;Ｍ7文件中有新增信息 2 2处 ,更改 6处和删除 1处。现将Ｍ10 0 Ｓ11文件中变更之处摘录整理 ,供读者参考。Ａ组主要试验及报告的抗生素 (Ａ组 ) ;Ｂ组主要试验及选择性报告的抗生素 (Ｂ组 ) ;Ｃ组补充试…     

阴沟肠杆菌高活性β内酰胺酶检测与相关耐药表型分析

阴沟肠杆菌是医院感染的重要病原菌。我们对我院临床分离的部分阴沟肠杆菌进行ＡｍｐＣ酶和超广谱 β内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ)的检测 ,并结合临床药敏试验 ,进行耐药表型及耐药机制分析 ,为合理使用药物提供参考依据。一、材料与方法1 菌株来源 :1 999年 1月至 2 0 0 1年 5月从住院患者各类标本中分离的阴沟肠杆菌 ,选择其中头孢西丁小于等于中介或 /和三代头孢 (头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟 )两种以上中介或耐药的 1 38株菌作为试验菌。大肠埃希菌ＡＴＣＣ2 592 2作为三维试验指示菌。试验质控株有肺炎克雷伯菌ＡＴＣＣ70 0 60 3(ＳＨＶ 1…     

合肥地区超广谱β—内酰胺酶菌株的分布及药敏分析

超广谱 β 内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ)主要由肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌等肠杆菌科细菌产生 ,能水解三代头孢和氨曲南等抗生素 ,其耐药性可在细菌间传播 ,造成严重的耐药问题。另外 ,各地区产ＥＳＢＬｓ菌株的流行情况也存在着一定程度的差异[1 ] 。为了解合肥地区产ＥＳＢＬｓ菌株的发生率和耐药特征 ,以控制其传播和流行 ,我们对合肥地区近年来从临床标本分离的 2 5 4株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行了ＥＳＢＬｓ的检测 ,并对其进行药敏分析。材料与方法一、材料1 .菌株来源　 2 5 4株细菌来自 1 999年 5月至2 0 0 0年 7月间的各种临床标本 ,其…     

药敏试验报告的理解

抗生素的种类越来越多 ,应用也越来越广泛 ,滥用抗生素 ,造成的耐药菌株也越来越多。感染菌株的准确药敏结果对临床治疗有重要指导意义。为更好地理解药敏试验结果的内容 ,笔者将其归纳如下。1　药敏试验的目的药敏试验的目的是检出细菌的耐药性 ,确定病原菌对哪种抗菌药物有抗药性 ,避免医生将其作为治疗药物使用。当获得药敏试验报告后 ,临床医生应立即依此结果 ,调整经验治疗 ,合理选用疗效最适宜的药物进行治疗。2　药敏结果的含义1 991年 1 2月 2 0日中华人民共和国卫生部令第 34条规定 :淘汰细菌药敏试验中“轻度敏感”和“极度敏感”…     

临床分离菌株的耐药性监测与分析

目前细菌耐药性问题日益突出,主要监测和研究的焦点集中在耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（ＭＲ－ＳＡ）、耐青霉素的肺炎链球菌（ＰＲＰ）、耐万古霉素的肠球菌（ＶＲＥ）和产Ｂ－．内酞胺酶的革兰阴性菌等。１材料与方法本文对１９９８年上海瑞金医院临床分离菌进行耐药性分析,了解细菌的分布情况及耐药趋势。用ＡＰＩ及ＶＩＴＥＫ－ＡＴＢ系统对临床分离菌株进行鉴定,按美国临床实验室标准委员会（ＮＣＣＬＳ）推荐的标准方法（Ｋ－Ｂ法）进行药敏试验,用ＷＨＯＮＥＴ４软件进行分析［１］。２结果与讨论１９９８年临床分离菌株以革兰阴…     

问题解答

问 :苯唑西林对凝固酶阴性葡萄球菌药敏试验ＮＣＣＬＳ判断标准修改后的含义是什么 ?答 :1999年版ＮＣＣＬＳ药敏标准单独列出了苯唑西林对凝固酶阴性葡萄球菌 (ＣＮＳ)的分界点 ,规定苯唑西林ＭＩＣ≤0 .2 5 μｇ/ｍｌ、抑菌环≥ 18ｍｍ为敏感 ;ＭＩＣ≥ 0 .5 μｇ/ｍｌ、抑菌环直径≤ 17ｍｍ为耐药。此修改纯粹是以检出含ｍｅｃＡ基因ＣＮＳ为目的 ,与苯唑西林药动学无关。问 :为什么说用硝噻吩纸片检测革兰阴性杆菌 β内酰胺酶不可靠 ?答 :革兰阴性杆菌产生的 β内酰胺酶存在于细胞壁和细胞膜、细胞壁和外膜之间的间隙中 ,并不分泌到菌细…