野百合碱诱导大鼠肺动脉高压动物模型的制备

目的采用注射野百合碱(MCT)制备大鼠肺动脉高压模型,并对肺动脉压测定方法进行优化。方法通过ip MCT诱导建立大鼠肺动脉高压模型,通过测定大鼠肺血管阻力的方法来对大鼠右心室压进行测定,采用阳性药对照、血流动力学测定和组织学观察确定模型是否建立成功。结果 ip 50 mg/kg MCT 4周后大鼠右心室平均压、右心肥大指数对比对照组明显增高,观察病理组织切片,可见明显的内皮细胞损伤,分布不均,动脉管壁明显增厚,肺组织有大量的炎性细胞浸润,出现肺血管的重构,证实肺动脉高压动物模型造模成功。结论采用ip MCT可以建立稳定的大鼠肺动脉高压模型,且具有较高的存活率,同时建议采用改良的心导管测定方法测定大鼠右心室压力。     

环孢素A逆转野百合碱诱导的肺动脉高压

目的:探讨环孢素A(cyclosporine A,CsA)对野百合碱(monocrotaline,MCT)诱发肺动脉高压的影响及其作用机制.方法:36只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组(n=8)、肺动脉高压模型组(n=12)、CsA低、高剂量组(0.33和1 mg·kg-1,n=8).后3组大鼠颈背部皮下一次性注射MCT 50mg·kg-1诱导肺动脉高压模型,MCT注射后d 14～d 21,CsA组灌胃给药,模型组灌胃等体积的生理氯化钠溶液(5 mL·kg-1).MCT注射后d 22,右心导管术测肺动脉压,称肺湿重(wW)、右心室自由壁(RV)重和左心室加室间隔(LV S)重,计算右心肥大指数[RVHI=RV/(LV S)],肺湿重指数(LI=wW/BW).HE染色观察肺病理改变;免疫组化方法观察肺动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)阳性表达.用Image-ProPlus 5.1软件分析肺动脉中膜相对厚度及肺动脉平滑肌PCNA阳性细胞的比值.结果:CsA低、高剂量组均能逆转MCT诱导的肺动脉高压(P<0.05或P<0.01),降低RVHI及LI(P<0.05或P<0.01),改善肺动脉重构(P<0.05或P<0.01),减轻肺部炎症,抑制肺动脉平滑肌的增殖(P<0.05或P<0.01),且高剂量组更明显.结论:CsA能明显降低MCT诱导的肺动脉高压,逆转肺动脉重构,其机制与抑制肺动脉平滑肌增殖和抑制肺部炎症有关.     

黄芪多糖对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压的减缓作用及其机制研究

目的研究黄芪多糖对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压的减缓作用及可能机制。方法将100只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、野百合碱组、黄芪多糖低剂量组和黄芪多糖高剂量组。除正常对照组外,其余组大鼠按60 mg/kg单次腹腔注射野百合碱。黄芪多糖低剂量组及高剂量组大鼠在给药后的第2~28天分别按200 mg/kg及400 mg/kg腹腔注射黄芪多糖,每日1次。每组25只大鼠各取15只进行研究,检测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心肥厚指数(RVHI),观察其肺动脉及心肌细胞形态变化,检测其肺组织中白细胞介素17(IL-17)mRNA及蛋白的表达水平。结果与正常对照组比较,野百合碱组及黄芪多糖各剂量组大鼠mPAP、RVHI均显著升高(P<0.01),肺组织中IL-17的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),肺动脉及心肌细胞有明显病理改变;与野百合碱组比较,黄芪多糖各剂量组大鼠mPAP、RVHI均显著降低(P<0.01),肺组织中IL-17的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),肺动脉及心肌细胞病理变化有改善;与黄芪多糖低剂量组比较,黄芪多糖高剂量组大鼠上述指标水平及病理改变的改善更明显。结论黄芪多糖能降低野百合碱诱导大鼠的肺动脉高压,并改善肺动脉结构及心肌病理改变,推测其机制可能与下调大鼠肺组织中IL-17的表达有关。     

脱氢野百合碱诱导犬肺动脉高压模型的剂量

目的研究脱氢野百合碱（DHMc）诱导犬肺动脉高压模型的合适剂量,以提高犬肺动脉高压建模成功率。方法将28只犬随机分成3组,即3rag·ks-1DHMC组（n=12）、2nag·ksllDHMC组（,l=8）和1．5mg·kg^-1DHMC组（n=8）o所有犬于右心导管测定各组血流动力学参数后,右心注射不同剂量的DHMC,观察8周。记录观察期间每组犬的死亡只数,并行肺组织病理切片检查。结果3mg·kgllDHMC组导致动物死亡率高达58．33％;而2rag·kg^-1组注射DHMC诱导犬肺动脉高压模型的成功率为100％,动物死亡率为0;1．5mg·kg^-1DHMC组肺动脉压力未见明显升高。结论野百合碱对于肺血管毒性损伤作用呈剂量相关性,减少DHMC注射剂量,以2mg·kg。注射,不仅犬存活率较高,而且能成功诱导形成肺动脉高压模型。     

亚高原地区野百合碱诱导大鼠肺动脉高压模型的剂量研究

目的 探讨亚高原地区野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导大鼠肺动脉高压模型的最佳剂量.方法 将从平原地区购买85只(♂)SD大鼠随机分为对照组、MCT-20 mg·kg-1组、MCT-30 mg·kg-1组、MCT-40 mg·kg-1组、MCT-50 mg·kg-1组、MCT-60 mg·kg-1组.除...     

地塞米松对野百合碱诱导肺动脉高压模型大鼠血管活性物质的影响

目的 探讨地塞米松早期干预对野百合碱(MCT)诱导肺动脉高压(PAH)大鼠肺血管活性物质的影响.方法 成年雄性SD大鼠30只随机均分为对照(C)组、MCT模型(M)组、MCT+地塞米松(MD)组.建立MCT诱导PAH模型,应用放射免疫法观察血浆一氧化氮(NO)和内皮素1(ET-1)水平的变化.结果 注射MCT3周后,M组大鼠肺动脉平均压(mPAP)显著高于C组和MD组(P＜0.05);与C组和MD组比较,M组血浆ET-1含量升高,NO含量降低(P＜0.05);而MD组ET-1和NO含量与C组比较无统计学差异.结论 地塞米松能抑制MCT诱导的PAH大鼠血浆中的ET-1含量升高和NO含量降低,从而改善内皮细胞功能,降低PAH.     

酚妥拉明对野百合碱引起的大鼠肺动脉高压的影响

本文研究结果表明:野百合碱是一个有效的引起Wistar大鼠肺动脉高压模型的药物;酚妥拉明(0.2mg·kg~(-1)0.4mg·kg~(-1))im.每天2次.连续用药21d后.可降低野百合碱引起的肺动脉高压.但对股动脉血压无明显影响。酚妥拉明(0·52mg·kg~(_1))iv一次即可明显降低野百合碱引起的大鼠肺动脉高压和股动脉压。     

人参皂苷Rg1抗野百合碱诱导大鼠肺动脉高压的作用机制

目的探讨人参皂苷Rg1对野百合碱(MCT)诱导的大鼠肺动脉高压(PAH)的影响和作用机制。方法将55只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、Rg1组、Rg1+L-NAME组、L-arg组、LNAME+L-arg组,除对照组5只外各组均为10只。对照组皮下注射等体积生理盐水,其余各组均皮下注射MCT(50 mg·kg-1)复制PAH模型,3 d后按分组给药,Rg1剂量为15 mg·kg-1·d-1(ip),L-NAME为20 mg·kg-1·d-1(ig),L-arg为200 mg·kg-1·d-1(ip),连续21 d。每周测量体重,末次给药后2 h麻醉,导管法测定平均肺动脉压(mPAP),计算右心肥厚指数(RVHI),HE染色观察肺小动脉病理改变,分别经比色法和ELISA测定血清中NO和cGMP含量。结果与对照组相比,模型组大鼠体重下降,mPAP和RVHI显著增高(P<0.05),肺小动脉重构明显,经Rg1治疗后各指标均有好转(均P<0.05)。模型组大鼠血清中NO和cGMP含量较对照组低,但未见显著差异(P>0.05),Rg1和L-arg处理后NO和cGMP含量均显著增加(P<0.05),且两者对NO和cGMP的影响可被L-NAME拮抗(P<0.05)。结论人参皂苷Rg1可有效干预MCT诱导的大鼠肺动脉高压,其机制部分与增加NO有关。     

野百合碱致肺动脉高压相关机制研究进展

吡咯里西啶类生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs)分布十分广泛,3%的有花植物中含有PAs,其中含量较多的为紫草科、菊科、豆科及兰科植物[1]。含PAs的中药应用广泛,如中国药典2005年版一部即收录了佩兰(菊科)、紫草(紫草科)、款冬花(菊科)等多种含有该类生物碱的植物。野百合碱(monocrotaline,MCT)是来自于豆科猪屎豆     

野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺血管5-HT转载体表达增强

目的　研究野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压与5 HT转载体基因表达的关系。方法　应用MCT诱导的慢性肺动脉高压大鼠模型,建立离体动脉环5 HT浓度反应曲线;HE染色观察肺动脉构型重建,应用RT PCR检测大鼠肺动脉5 HT转载体mRNA表达。结果　MCT大鼠肺血管对5 HT收缩反应增强,肺肌型小动脉中膜增厚,MCT诱导的肺动脉高压大鼠肺血管5 HT转载体mRNA表达明显增多。5 HT转载体基因表达与肺肌型小动脉中膜增厚有明显相关性。结论　MCT诱导的肺动脉高压大鼠肺血管构型重建及5 HT引起收缩反应增强,伴有5 HT转载体mRNA表达增多;同时5 HT转载体mRNA表达与肺肌型小动脉中膜增厚有明显相关性,提示5 HT转载体可能在肺动脉高压中起重要作用。     

芍药苷对大鼠低氧性肺动脉高压的防治作用及其抗氧化机制研究

目的 研究芍药苷对低氧诱导的肺动脉高压大鼠模型的作用并初步探讨其作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为6组,每组10只,分别为：对照组（等体积生理盐水,ig）、模型组（等体积生理盐水,ig）、阳性对照组（西地那非25 mg/kg,ig）、芍药苷低、中、高剂量组（20、40、80 mg/kg,ig）。对照组大鼠置于正常环境中饲养,其余各组均于给药0.5 h后置于全自动低压低氧舱内（大气压50 kPa,氧浓度10%）,每天8 h,持续21 d。在实验终点时检测各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、平均颈动脉压（mCAP）、右心室肥厚指数（RVHI）及观察肺动脉病理变化;检测血浆内皮素（ET-1）、血清一氧化氮（NO）水平;检测肺组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、丙二醛（MDA）含量。结果 与对照组比较,模型组大鼠mPAP、RVHI、血浆ET-1水平、肺组织中MDA含量显著升高（P＜0.01）,血清中NO水平、肺组织中SOD、CAT、GSH-Px活性显著降低（P＜0.01）,HE染色显示大鼠肺小动脉管壁明显增厚,管腔狭窄。与模型组比较,芍药苷中、高剂量组大鼠mPAP、RVHI、血浆ET-1水平、肺组织中MDA含量显著降低（P＜0.05或P＜0.01）,血清中NO水平、肺组织中SOD、CAT、GSH-Px活性显著升高（P＜0.05或P＜0.01）;HE染色显示不同剂量芍药苷干预后,大鼠肺小动脉管壁增厚和管腔狭窄均不同程度减轻。结论 芍药苷可降低低氧诱导的大鼠肺动脉高压与右心室肥厚程度,减轻肺小动脉血管重塑,其机制可能与降低大鼠血浆ET-1水平、升高血清NO水平,改善血管内皮舒缩因子失衡,提高大鼠肺组织匀浆中SOD、CAT、GSH-Px活性、降低MDA含量,减轻大鼠肺组织氧化应激损伤有关。     

5-羟基癸酸盐对大鼠低氧性肺动脉高压的抑制作用

目的探讨5-羟基癸酸盐(5-HD)对肺动脉高压形成的影响机制及炎症因子的作用。方法 SD大鼠在常压9.5%～10.5%O2的低氧舱中进行低氧处理,每天8 h,每周6 d。1周后,按照分组每天先sc给予5-HD 5 mg.kg-1,再进低氧舱,连续3周。右心导管法测平均肺动脉压(mPAP),测定心脏右心肥厚指数(RVHI),光镜下观察肺血管形态学改变,并用图像分析法测定肺动脉相对中膜厚度(PAMT)。ELISA法检测血清及肺匀浆中白细胞介素6(IL-6),IL-8,巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1a和单核细胞趋化蛋白(MCP)-1含量,免疫组化法测定肺组织中IL-6及MCP-1的表达。结果与正常对照组相比,低氧模型组大鼠mPAP,RVHI及PAMT明显增加(P<0.05);与低氧模型组相比,给予5-HD组明显降低(P<0.05)。与正常对照组相比,低氧模型组大鼠血清IL-6,IL-8,MIP-1a及MCP-1水平增高(P<0.05);与低氧模型组相比,给予5-HD组大鼠血清IL-8,MIP-1a及MCP-1水平明显降低(P<0.05)。结论 5-HD可能是通过抑制肺动脉高压大鼠血清中的某些炎症细胞因子的表达、下调大鼠炎症细胞因子分泌,达到降低肺动脉高压的作用。     

尼群地平对大鼠野百合碱性肺动脉高压的防治作用

目的：利用野百合碱（ＭＣＴ）引起的大鼠肺动脉高压（ＰＨ）模型，探讨尼群地平（ＮＩＴ）对ＭＣＴ性ＰＨ的防治作用。方法：给ＭＣＴ或ＭＣＴ＋ＮＩＴ（１０ｍｇ·ｋｇ－１ｉｐ，每日一次）４ｗｋ，测定肺血流动力学参数和静脉血浆及肺组织匀浆中内皮素样免疫反应物（ｉｒ－ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和丙二醛（ＭＤＡ）的含量。结果：ＮＩＴ能有效地降低ＭＣＴ模型大鼠的肺动脉压（从４．５±０．９降至３．６±０．５ｋＰａ）和肺血管阻力（从１１８±１７降至７９±１８ｋＰａ·ｍｉｎ·Ｌ－１），能抑制ＭＣＴ引起的肺小动脉中膜增厚；ＮＩＴ能显著抑制ＭＣＴ模型大鼠的肺组织匀浆中ＮＯ含量的减少和血浆中ＳＯＤ活性的降低（Ｐ＜０．０５），明显阻止肺匀浆中ＭＤＡ的升高（Ｐ＜０．０１）。结论：长期使用ＮＩＴ可有效防治ＭＣＴ性ＰＨ，其作用可能与其Ｃａ２＋拮抗作用及保护ＳＯＤ活性和增加ＮＯ含量有关。     

复方苦参注射液抗博来霉素致大鼠肺纤维化药效学研究

目的 探讨复方苦参注射液对博来霉素诱导肺纤维化模型大鼠的影响及相关机制。方法 将120只SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组及复方苦参注射液低、中、高剂量（注射液原液1、2、4 mL·kg^-1）组,每组20只,采用气管内注射博来霉素方法制备肺纤维化大鼠模型,造模24 h后给药组ip复方苦参注射液,第14、28天取材。观察大鼠一般状态、肺系数、肺功能、肺组织病理变化,并采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的水平,进一步检测肺组织中羟脯氨酸（HYP）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）表达量的变化。结果 大鼠的一般情况观察发现,与假手术组比较,模型组大鼠食量及饮水量均有所下降,精神萎靡,毛色暗淡发黄,同时模型组大鼠出现拱背及口唇、爪甲及尾尖均呈现紫黯现象,部分大鼠出现口鼻出血,呼吸困难现象。给予复方苦参注射液后,肺纤维化模型大鼠的活动和精神状态均有改善作用。与假手术组比较,模型组大鼠体质量明显降低（P<0.01、0.001）,肺系数显著增加（P<0.001）,肺功能指标潮气量下降（P<0.001）,气道阻力升高（P<0.001）,动态肺顺应性降低（P<0.001）,肺组织发生纤维化、炎细胞浸润等明显损伤,血清中TNF-α和IL-1β水平显著升高（P<0.001）,肺组织中HYP水平显著升高（P<0.001）,而SOD活性则显著下降（P<0.001）,MDA水平有增加趋势。与模型组比较,复方苦参注射液低、中剂量组大鼠体质量显著增加（P<0.05、0.001）,大鼠肺系数显著降低（P<0.05、0.001）,潮气量显著上调（P<0.001）,气道阻力显著降低（P<0.01、0.001）,动态肺顺应性显著上调（P<0.01、0.001）,大鼠肺组织纤维化程度明显减轻,血清中TNF-α水平降低（P<0.01、0.001）,肺组织中HYP含量显著降低（P<0.01）,SOD活性则显著升高（P<0.05、0.01、0.001）,MDA有下调趋势,但差异不显著。结论 复方苦参注射液可改善肺纤维化模型大鼠肺功能与肺部形态学病变,降低血清中TNF-α水平,以及下调肺组织中HYP含量与提高SOD活性,减轻炎性反应并增加抗氧化能力,对肺纤维化大鼠产生保护作用。     

DL0805-2防治野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的药效评价

新型Rho激酶抑制剂DL0805-2在高血压危象的治疗中不仅能快速降低系统血压,也可降低肺动脉压力,并对肺部损伤具有明显保护作用.本实验拟探究DL0805-2防治肺动脉高压的药效并初步探究其分子机制.动物福利和实验过程均遵循中国医学科学院药物研究所动物伦理委员会规定.将SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为D...     

大蒜素对慢性铁中毒大鼠氧化应激与肝细胞自噬的抑制作用

目的探讨大蒜素(allicin)对慢性铁中毒大鼠氧化应激与肝细胞自噬的抑制作用及可能机制。方法 36只SD大鼠按体质量随机分为6组,即正常对照(饲喂基础饲料)、慢性铁中毒模型(饲喂高铁饲料)、正常+大蒜素40 mg·kg-1、慢性铁中毒+大蒜素30,40和60 mg·kg-1组,每组6只。持续饲喂6周后,取血及肝、结肠和肾组织用试剂盒测定铁含量、总铁结合力、丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性。透射电镜和免疫组织化学方法观察肝细胞形态结构、自噬以及胱天蛋白酶3凋亡蛋白、Ki-67细胞增殖抗原和LC3-B微管相关蛋白表达的变化。结果与正常对照组比较,模型组血清铁含量增加(P<0.01),总铁结合力下降(P<0.01),肝和结肠组织铁含量增加(P<0.05)。与模型组比较,饲喂不同剂量大蒜素大鼠血清铁含量显著下降(P<0.05),总铁结合力显著增加(P<0.05),结肠组织铁含量显著下降(P<0.05);饲喂大蒜素40和60 mg·kg-1肝组织铁含量显著下降(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组肝和结肠组织MDA含量显著增加(P<0.05),肝组织T-SOD活性增加(P<0.01),结肠组织T-SOD活性下降(P<0.01)。与模型组比较,饲喂大蒜素组肝组织MDA含量显著下降(P<0.05),结肠和肾组织T-SOD活性显著增加(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组肝实质细胞和肝非实质细胞Ki-67增殖抗原表达显著增加(P<0.05),胱天蛋白酶3凋亡蛋白表达无明显变化(P>0.05)。观察肝细胞超微结构,模型组大鼠肝细胞有大量铁蛋白颗粒累积,线粒体和内质网膜膨胀,胞质中形成自噬前体。模型组大鼠肝细胞LC3-B微管相关蛋白有较强表达,正常对照和正常+大蒜素组肝细胞未发现LC3-B免疫阳性染色。结论大蒜素能有效清除体内自由基,增强机体抗氧化能力,降低肝中铁诱导的氧化压力、线粒体膜的改变和细胞自噬,对慢性铁中毒肝细胞具有一定的保护作用。