去甲肾上腺素和缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌的作用

缺血预处理 (Ｉｓｃｈｅｍｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ ,ＩＰ)的机理及其临床应用前景至今仍不清楚。目前肾上腺素能神经递质及其受体在ＩＰ的保护心脏作用中所起的作用日益受到重视。本试验通过大鼠缺血再灌注模型 ,并与ＩＰ保护作用相比较 ,探讨外源性去甲肾上腺素预     

缺血预处理对大鼠肥大心脏缺血再灌注损伤的影响

本实验用一氧化氮合成抑制剂－左旋硝基精氨酸复制大鼠高血压心脏肥大模型并作缺血再灌注处理，以观察缺血预处理对高血压肥大心脏Ｉ／Ｒ损伤的影响及ＮＯ在其中的作用。结果显示：ＩＰＣ能减轻大鼠高血压有肥大心脏Ｉ／Ｒ损伤，其程度与ＩＰＣ对正常心脏Ｉ／Ｒ损伤的保护相近，表明高血压肥大心脏同样具有ＩＰＣ保护现象，但ＮＯ在本模型中未起作用。     

缺血预处置对大鼠肢体血再灌注损伤的影响

目的和方法 在大鼠肢体血再灌注（ＩＲ）损伤模型上观察了缺血预处置（ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ，ＰＣ）的影响，结果：发现ＰＣ可以明显减轻ＩＲ引起的血压降低，血浆乳酸脱氢酶，组织蛋白酶Ｄ活性及脂质过氧化物丙二醛含量的升高，并抑制骨骼肌组织水肿及骨骼肌细胞线粒体钙超载的发生。同时还观察到，ＰＣ对ＩＲ时肢体微血管通透性升高，中性粒细胞浸润及血浆内皮素水平增高均有抑制作用，结论：ＰＣ对大鼠ＩＲ肢体有保护     

大鼠肢体缺血—再灌注所致肾损伤及其机制探讨

目的探讨肢体缺血-再灌注后脑内诱导型血红素氧合酶(HO-1)表达的变化及意义.方法SD大鼠随机分为正常(N),假手术(S),后肢单纯缺血(I),后肢缺血-再灌注(I-R)2h、6h、12h、18h、24h,后肢I-R18h+ZnPP(HO-1活性抑制剂锌原卟啉)各组.夹闭双侧股动脉根部4h,开放2h-24h,制备I及I-R各组模型,I-R18h+ZnPP组,再灌注6h、12h时经股静脉注射ZnPP(每次5μmol/kg).反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测脑组织HO-1mRNA表达的变化,以HO-1与β-actin(内参对照物)mRNA逆转录扩增产物电泳谱带的积分灰度值的比值,作为HO-1mRNA的半定量结果;免疫组化染色法观察HO-1蛋白在脑内的生成与分布;应用ZnPP抑制HO-1活性后,观察脑组织的病理学变化,比色法测定脑组织MDA含量及SOD活性的变化.结果(1)N组脑组织HO-1mRNA的相对表达量为0.053±0.004,S组为0.064±0.007,I组为0.142±0.049,均较N组显著升高,P＜0.05;肢体I-R后脑组织HO-1mRNA表达上调,I-R12h至峰值,此后回降,I-R2h、6h、12h、18h和24h各组的相对表达量依次为0.155±0.028、0.609±0.034、0.680±0.036、0.481±0.060和0.526±0.052,I-R6h、12h、18h和24h各组较N、S及I组显著升高,P＜0.01.(2)N、S及I组大脑皮质、海马等区域可见少量散在分布的HO-1阳性神经元.I-R6h组大脑皮质可见大量弥散分布的HO-1阳性锥体细胞及少量阳性胶质细胞,海马锥体层细胞呈阳性反应.I-R12h组大脑皮层及海马区出现大量HO-1阳性胶质细胞.(3)I-R18h±ZnPP组脑组织病变较I-R18h组加重,大脑皮质及海马部分神经元明显水肿,部分神经元核固缩,细胞周围出现水肿裂隙.(4)I-R18h+ZnPP组与I-R18h组相比,SOD活性下降,MDA含量增高(P＜0.05).结论肢体I-R后脑内HO-1表达上调,神经元表达HO-1时相早,但维持时间短,胶质细胞表达HO-1较迟,但维持时间长,胶质细胞是脑组织表达HO-1的主要细胞基础.抑制HO-1活性后脑损伤加重,脑内过氧化反应增强,表明HO-1具有抗氧化保护效应.     

二氧化硫对大鼠缺血再灌注心脏的损伤作用

目的观察二氧化硫(SO2)在心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法大鼠心脏分为:I/R组,SO2组及天冬氨酸异羟肟酸(HDX)组。采用Langendorff离体心脏灌注模型。MacLab数据采集系统监测离体心脏功能。结果SO2组心功能恢复率明显低于I/R组(P<0.05,P<0.01);HDX组显著高于I/R组(P<0.05,P<0.01)。SO2组冠脉流液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、谷氨酸-草酰乙酸转移酶(GOT)活性、肌红蛋白(Mb)含量及心肌丙二醛(MDA)、共轭双烯键(CD)含量及GOT活性显著高于I/R组(P<0.05,P<0.01);HDX组冠脉流液中上述指标明显低于I/R组(P<0.05,P<0.01)。SO2组心肌还原型谷胱甘肽(GSH)含量明显低于I/R组(P<0.05);HDX组心肌GSH含量显著高于I/R组(P<0.01)。结论SO2参与了大鼠心肌缺血再灌注损伤。增加心肌脂质过氧化及降低心肌还原型谷胱甘肽含量可能与SO2心肌损伤有关。     

缺血后处理对小肠缺血-再灌注损伤大鼠肠系膜微循环的影响

目的:观察缺血后处理对小肠缺血/再灌注损伤大鼠肠系膜微循环变化的影响。方法:64只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、缺血/再灌注(I/R)组、缺血后处理(I-postC)组及缺血预处理(IPC)组,分别于再灌注2h、12h观测肠系膜微循环、肠壁血流量和血流动力学的变化,并按Hackel氏分度法判定肠道出血损伤情况。结果:与Sham组比较,I/R组平均动脉压、±dp/dtmax明显降低(P<0.05),小肠明显水肿、出血,Hackel氏分度显著升高(P<0.01);I-postC组与IPC组动脉压和±dp/dtmax明显高于I/R组(P<0.05),上述小肠病理变化明显减轻(P<0.05);I-postC明显减轻I/R所致的细动静脉收缩(P<0.05)、血流速度减慢(P<0.05)和微血管内白细胞贴壁滚动、粘附;肠缺血再灌注2h时,I-postC组肠壁血流量降低程度较I/R组减轻(P<0.05),与IPC的保护效果接近。结论:I-postC通过改善微循环减轻小肠I/R损伤。     

地塞米松对大鼠后肢缺血再灌注损伤的保护作用

目的：评价地塞米松对血流、中性粒细胞和内皮细胞功能及缺血再灌注的骨骼肌活力的影响。方法：利用SD大鼠后肢止血带缺血模型,观察活体微循环,计数血循中激活的中性粒细胞、测定胫前肌含水量,观察胫前肌组织形态及血管内皮细胞超微结构的变化,结果：地塞米松参疏通缺血再灌注组织的微循环,降低血循环中激活中性粒细胞数、减轻胫前肌含水量,胫前肌的组织学和超微结构变化比对照组小,结论：地塞米松使血流明显改善,抑制血循环中中性粒细胞的激活,提高缺血再灌注骨骼肌的活力,保护内皮细胞免受缺血再灌注损伤。     

大鼠小肠缺血预适应对缺血-再灌注损伤保护作用及机制

目的:探讨小肠缺血预适应(ischemic preconditioning,IP)对缺血再灌注(ischemia／reperfusion,I／R)肠黏膜损伤的保护作用及可能机制。方法:以大鼠肠系膜前动脉制造I／R和IP模型;用分光光度法测血和肠组织二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性;用H-E和PAS特染显示肠黏膜的病理改变并进行Chiu CJ评分;用免疫组化方法显示肠绒毛CGRP、NPY肽能神经并用测微尺测定阳性神经纤维密度。结果:与对照组相比,I／R组及IP I／R组血DAO水平升高而肠黏膜DAO水平降低,肠黏膜损伤Chiu CJ评分数升高;肠绒毛CGRP阳性神经纤维密度降低而NPY阳性神经纤维密度升高;但IP轻于I／R的变化。结论:小肠IP能减轻I／R引起的肠黏膜机械屏障的组织病理损伤,其机制是通过肠黏膜局部CGRP、NPY肽能神经参与调节其微血管舒缩平衡而实现的。     

苦参素降低大鼠肾脏缺血-再灌注损伤

目的观察苦参素的抗大鼠肾缺血再灌注损伤的作用并从抗氧化方面探讨其机制。方法用双肾肾蒂夹闭45 min建立IRI模型,将SD大鼠随机分为假手术组(sham);缺血再灌注组(I/R);苦参素治疗组(oxymatrine+I/R)。苦参素治疗组又分为高、中和低3个剂量组,在缺血再灌注前,连续7 d经腹腔注射。用自动生化仪测定血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平,观察苦参素对肾缺血再灌注的保护作用及确定最优剂量;以最优剂量干预用分光分析法测定肾组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果不同剂量组均能明显减轻肾脏IRI的病理形态学改变,改善肾功能。与I/R组相比,再灌注72 h后,MDA水平,血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平明显降低(P<0.05);苦参素治疗组的CAT、T-SOD、GSH-Px活性改善明显(P<0.05)。苦参素无体外抗氧化作用。结论苦参素对大鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用,作用机制可能与调控机体的抗氧化系统有关。     

不同缺血后处理方案对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 试建立恰当的大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）的缺血后处理模型。方法 选8 ～ 12周健康60只SD雄性大鼠,体质量220 ～ 260 g。随机分为6组：对照组（S组）、缺血再灌注组（IR组）及IR缺血后处理A、B、C、D组,每组10只。S组：分离出双侧肾蒂,仅行右肾蒂结扎和左肾蒂游离;IR组：结扎右侧肾蒂,夹闭左侧肾蒂60 min后恢复灌注;缺血后处理A、B、C、D组在肾脏缺血60 min后分别进行6次（开放10 s ＋ 阻断10 s）、5次（开放20 s ＋ 阻断20 s）、3次（开放10 s ＋ 阻断10 s）、3次（开放2 min ＋ 阻断2 min）的循环,然后充分开放灌注。再灌注24 h后监测肾功能,对肾组织结构损伤程度评分。结果 与IR组相比,A、B、C、D组后处理的血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）及肾小管损伤程度评分均降低（P 〈 0.05）,肾组织损伤明显减轻。处理组中,A、B两组的BUN、SCr及肾小管损伤程度评分相当（P 〉 0.05）,且缺血后处理效果优于C、D两组（P 〈 0.05）。结论： 采用缺血后处理A组方法和B组方法均可以成功制作出缺血后处理模型。     

低压低氧对大鼠下丘脑Orexin A表达及舌下神经放电的影响

目的:观察慢性间歇性低压低氧(chronic intermittent hypobaric hypoxia,CIHH)模型大鼠下丘脑OrexinA表达及舌下神经放电活动,探讨CIHH对呼吸活动调节的机制。方法:对正常成年雄性SD大鼠进行每天6 h的低压低氧处理,28 d后进行血气分析,采用免疫组织化学染色方法观察大鼠下丘脑Orexin A的表达,记录舌下神经放电作为观察呼吸活动的指标。结果:血气分析显示模型组大鼠的PO2下降,PCO2明显升高(P<0.05,n=6);模型组大鼠下丘脑Orexin A免疫阳性神经元的相对光密度值显著升高(P<0.01,n=5);舌下神经放电幅度积分面积减小(P<0.01,n=6),呼吸频率降低(P<0.05,n=6)。结论:CIHH使大鼠动脉血PO2下降、PCO2明显升高,舌下神经放电活动减弱。下丘脑Orexin A神经元表达的增加提示Orexin的确参与了对呼吸活动的调节,尤其在CIHH时发挥了重要作用。     

A Standardized Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) for the Detection of Antibodies to Toxoplasma Gondii

An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the serodiagnosis of Toxoplasma gondii infections on single serum dilutions was developed.

This test system is a standardized kit designed to detect circulating specific antibodies to Toxoplasma gondii in human sera. It consists of Toxoplasma gondii soluble antigen-coated microtitration multiwell plates, specific immunoglobulin-enzyme conjugate and other required reagents.

In a clinical trial performed on sera from 1,035 clinically suspected toxoplasmosis cases, the Sabin Feldman Dye Test (SFDT) and this ELISA system agreed closely. Relative to the SFDT, the sensitivity and specificity of the latter was 98.0% and 97.6% respectively with a correlation coefficient of 0.97. In a further study of 121 sera, the Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT), the Indirect Haemagglutination Test (IHAT) and this ELISA procedure showed over 90% agreement, with correlation coefficients of 0.98 and 0.95 respectively. Within the working concentration of specific antibody to T. gondii in human serum, there was a linear relationship between the ELISA values and the WHO international standard for human anti-Toxoplasma serum.     

肿瘤坏死因子放射免疫分析的建立及初步临床应用

用人重组肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）和特异性兔抗ＴＮＦ血清建立了液相竞争放射免疫分析，最小检出值＞３０ｐｓ／管，标准曲线范围０．３～２４．３ｎｇ／ｍｌ，批内和批间变异系数平均为７．８％和８．４％。本法检测３７名健康献血员血清ＴＮＦ为０．８３±０．２６ｎｇ／ｍｌ，２３例急性黄疸性肝炎、１３例慢性迁延性肝炎、１９例慢性活动性肝炎、２２例肝硬化、２５例肝癌血清ＴＮＦ分别为１．９５±０．５９ｎｇ／ｍｌ，２，０６±０．５１ｎｇ／ｍｌ，１．５８±０．５４ｎｇ／ｍｌ，１．７５±０．６５ｎｇ／ｍｌ和１．５７±０．５３ｎｇ／ｍｌ。２８例肺癌术前血清ＴＮＦ０．９２±０．４２ｎｇ／ｍｌ，２２例肺癌术后血清ＴＮＦ为１．０８±０．２９ｎｇ／ｍｌ。     

特异性小鼠血清中瘦素放射免疫分析的建立和应用

目的　建立高特异性和高灵敏度的小鼠血清瘦素 (Leptin)放射免疫分析方法 ,用于测定小鼠血清中瘦素水平。方法　用人工重组的小鼠leptin多次免疫兔子获取高效价、高特异的小鼠leptin抗体。用氯氨T法制备1 2 5I标记的leptin ,经Sep hadexG 2 5纯化。抗原抗体反应采用平衡一步法 ,4℃培养 2 4h后经PR试剂分离结合和游离的标记抗原。该法测定范围为 1.1～ 30 0ng mL ,最低检出值为 0 .5ng mL ,批内和批间误差小于 4 .4 %和 6 .7%。结果　用该法测定正常小鼠 2 3例 ,血清leptin为 (39.6 5± 15 .72 )ng mL ,而人leptin放射免疫法为 (1.5 6± 0 .4 5 )ng mL ,具有显著的差异 ,2组数据有中等程度的相关性 (r=0 .6 2 18)。用该法测定正常人样本 30例 ,血清leptin为 (19.4 6± 7.0 9)ng mL ,而人leptin放射免疫法为 (10 .0 8± 5 .2 0 )ng mL ,具有显著差异 ,但不存在明显的相关性 (r =- 0 .0 95 9)。用该法发现烫伤大鼠血清leptin明显下降 (14 .33± 3.5 2 )ng mL与(6 .71± 3.14 )ng mL ,烫伤大鼠切痂后leptin于 96h内恢复正常水平 (12 .0 8± 4 .0 5 )ng mL。结论　该法稳定、简便、特异、灵敏 ,适于检出小鼠和大鼠血清中的leptin水平 ,而不适合于检测人血清内leptin水平     

大鼠背阔肌肌皮瓣缺血再灌注损伤局部缺血预处理及 肢体远程缺血预处理的影响对比

目的 对比局部缺血预处理和肢体远程缺血预处理对大鼠背阔肌肌皮瓣缺血再灌注损伤的影响。方法 选取广西医科大学动物实验中心提供的40只体质量在250~300 g的健康雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组、缺血组、对照组,每组10只。用无损伤血管夹对肢体缺血预处理组大鼠右股动脉进行夹闭,对局部缺血预处理组大鼠胸背动脉进行夹闭,对缺血组大鼠的胸背动脉进行夹闭,对照组大鼠只在胸背动脉穿线,不结扎。运用ELISA法检测四组大鼠缺血前（T0）、缺血3 h（T1）、灌流恢复后1 h（T2）血清NO、ET水平。结果 肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组、缺血组大鼠T1、T2时血清NO水平均低于T0时,血清ET水平均高于T0时,差异均有统计学意义（P＜0.05）;肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组、缺血组大鼠T1、T2时血清NO水平均低于对照组,血清ET水平均高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组大鼠血清NO水平高于缺血组,血清ET水平低于缺血组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 大鼠背阔肌肌皮瓣缺血再灌注损伤在局部缺血预处理和肢体远程缺血预处理下均能够减轻,并保护肌皮瓣。     

不同强度游泳训练对大鼠空间学习记忆和小脑食欲素的影响

背景:运动可以改善人的认知能力,然而在小脑内的具体调控机制并不明了.有研究报道,食欲素A和学习记忆有关.目的:构建两种不同强度游泳训练的大鼠模型,观察运动对大鼠空间学习和记忆能力的影响,并分析大鼠小脑食欲素A的表达情况,探索运动干预学习记忆能力的潜在作用机制.方法:36只雄性SD大鼠被随机分配为正常组(n=10)、中等...     

失血性休克大鼠早期肠黏膜缺血/再灌注损伤的形态学研究

目的:观察动物缺血/再灌注损伤(I/R)早期肠黏膜屏障的形态学变化.方法:在建立大鼠失血性休克模型的基础上,通过放血和输入生理盐水的方法,输注所放出血液2倍以上的生理盐水供动物休克后复苏,复苏后0h、1h、3h、6h、12h、24h观察其肠黏膜标本在显微镜下病理改变及肠黏膜上皮损伤指数等指标.结果:①I/R过程可造成肠黏膜屏障损伤,表现在复苏0h可见回肠绒毛水肿,片状坏死、脱落及黏膜萎缩,黏膜损伤以1h和3h明显,其损伤指数分别为2.8和2.6,损伤的黏膜6h后开始重建,24h重建基本完成;②结肠黏膜上皮水肿、脱落,伴有中性粒细胞浸润及杯状细胞脱颗粒,但其损伤指数明显小于回肠.结论:失血性休克早期的肠I/R后可造成肠黏膜屏障损害,但肠黏膜具有强大的重建潜能;早期的重建只是肠黏膜上皮细胞间连续性建立,其黏膜仍进行性萎缩;结肠较回肠更耐受I/R打击.     

大鼠在体心脏缺血后处理模型的建立与优化

目的建立并优化大鼠在体心脏缺血后处理(I-postC)模型。方法采用冠状动脉左前降支垫扎球囊法建立在体心脏I-postC模型,健康雄性SD大鼠随机分为7组(n=8):缺血/再灌注(I/R)组(冠状动脉左前降支缺血45min/再灌注2h)、缺血预处理(IPC)组(I/R前先行3轮缺血5min/再灌注5min处理)、I-postC组(包括4个亚组,于冠脉缺血45min后先进行3或4轮再灌注30s/缺血30s或再灌注60s/缺血60s后处理后再进行冠脉再灌注)以及假手术(sham)组。氯化三苯四氮唑(TTC)法测定心肌梗死面积,试剂盒检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)和心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果I/R引起明显的心肌梗死和组织损伤,采用冠状动脉左前降支垫扎球囊法进行I-postC可以显著减少I/R后心肌梗死面积,尤以3或4轮再灌注30s/缺血30s组保护作用明显,其梗死区占缺血区百分比分别比I/R组下降30.26%和58.81%(P分别<0.05),与IPC保护效果相近。结论I-postC可以减轻心肌I/R损伤,其中4轮再灌注30s/缺血30s诱导的I-postC在限制心肌梗死面积方面作用最明显,是理想的大鼠在体心脏I-postC模型。     

Xiaoyaosan regulates depression-related behaviors with physical symptoms by modulating Orexin A/OxR1 in the hypothalamus

The functional regulation of the orexin system in the central nervous system is closely related to the occurrence and development of psychotic disorders. Abnormal changes in the lateral region of the hypothalamus are associated with the comorbidity of depression and physical symptoms, and how the traditional Chinese formula Xiaoyaosan regulates these changes may reveal aspects of the pathogenesis of depression. This study aimed to establish a rat model of depression in order to examine changes in Orexin A/OxR1 expression in the lateral region of the hypothalamus and the effects of Xiaoyaosan. Sixty specific pathogen-free (SPF) male healthy Sprague–Dawley (SD) rats were used in the experiment and randomly divided into the control group, the model group, the Xiaoyaosan group and the fluoxetine group. The depression model was established by 21-day chronic immobilization stress (CIS). Food intake and body weight were recorded, and the sucrose preference test (SPT) and open field test (OFT) were used to evaluate the model. Then, the expression of Orexin A/OxR1 in the hypothalamus was measured by ELISA, Western blot and quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) analysis. The expression of Orexin A and OxR1 in the lateral hypothalamic area was significantly down regulated in the model group, compared with the control group. Xiaoyaosan significantly reversed these changes with obvious curative effects. Abnormal changes in Orexin A/OxR1 in the lateral hypothalamic area of rats with depression caused by chronic stress are closely related to the pathogenesis of depression accompanied by physical symptoms. Xiaoyaosan can improve depression accompanied by physical symptoms by regulating Orexin A/OxR1.     

大鼠提睾肌动脉溶栓模型的建立与应用

目的为了较全面地评价溶栓治疗效果,本实验设计了一个既能观察血栓溶解过程,同时又能观察组织微循环状况的溶栓治疗动物模型.方法以大鼠提睾肌动脉作为靶血管,静脉注射血卟啉(1mg/kg)后,以紫外光(波长455nm)照射靶血管一定部位,通过光化学法制造血栓,血栓形成后10min输葡激酶(1mg/kg)静脉溶栓,以生理盐水作为对照.显微镜下直接观察血栓形成与溶解过程以及微循环血流状态,用显微摄像系统记录分析图像,并通过激光多普勒血流量图像仪测组织的血流量,从而评价血栓的溶解效果及溶栓前后组织的微循环状态与血流灌注情况.结果两组的再通率及再通程度无统计学差别(P》0.05),而溶栓组的血栓溶解时间较对照组减低,统计学差别显著(P《0.05);血栓溶解后,组织血流量和微血流流速的恢复值均较正常时减少,统计学差别显著(P《0.05).结论葡激酶具有一定的促血栓溶解效果,主干血管血栓溶解后,该血管供应的下游组织在微循环灌注等方面并不能完全恢复至正常状态.通过此模型,既可以评价溶栓剂溶解血栓的效能,又可衡量溶栓后组织的再灌注情况.