小剂量伽玛刀照射对致癎大鼠脑神经元nNOS表达的影响

目的 通过观察低剂量伽玛刀照射对致痫大鼠大脑皮质及海马神经元nNOS表达的影响，初步探讨伽玛刀治疗癫痫的作用机制。方法 将44只青霉素致痫大鼠模型等分为实验组和实验对照组，对实验组进行伽玛刀照射（周边剂量12Gy），应用免疫组化方法检测两组大脑皮质及海马神经元nNOS表达的变化。结果 nNOS在两组动物的皮质和海马表达均有显著性差别．实验组显著性低于实验对照组；实验对照组表达呈双高峰现象。结论 nNOS在伽玛刀治疗癫痫的机制中具有重要作用。     

低剂量伽玛刀对致痫大鼠皮层及海马神经元Fos表达的影响

目的通过观察低剂量伽玛刀照射对致痫大鼠大脑皮质及海马神经元cfos表达的影响,初步探讨伽玛刀治疗癫痫的作用机制,为临床治疗提供理论依据。方法以青霉素致痫模型为对象,应用免疫组化方法,检测低剂量伽玛刀照射(周边剂量12Gy)后,大脑皮质及海马神经元cfos表达的变化。实验组和对照组大鼠各22只,正常对照组大鼠4只。结果无论是皮层还是海马,伽玛刀照射后cfos在实验组动物和对照组动物中,表达均有明显的差别,并随时间呈现一定的规律性。结论cfos在伽玛刀治疗癫痫的机理中发挥重要作用。     

低剂量伽玛刀照射对致(癎)大鼠皮质及海马神经元c-fos和nNOS表达的影响

目的 通过观察低剂量伽玛刀照射对致(癎)大鼠大脑皮质及海马神经元c-fos和脑型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响,探讨伽玛刀治疗癫(癎)的作用机制.方法 将44只青霉素致(癎)大鼠模型等分为实验组和实验对照组大鼠各22只,另取4只正常大鼠作为正常对照组.实验组行伽玛刀照射(周边剂量12 Gy)后,应用免疫组化方法,观察大脑皮质及海马神经元c-fos和nNOS表达的变化.结果 无论是皮质还是海马,c-fos和nNOS在实验组与实验对照组动物之间,表达均有明显的差别,实验组表达明显少于实验对照组,而后者呈现双高峰现象.结论 c-fos和nNOS在伽玛刀治疗癫(癎)的机制中发挥了重要作用.     

低剂量伽玛刀照射对癫痫大鼠皮层及海马NMDA受体亚基表达的影响

目的观察低剂量伽玛刀照射对癫痫大鼠皮层和海马N-甲基-D-天氡氨酸(N-methyl-Daspartate,NMDA)受体亚基表达的影响。方法根据动物是否致痫及接受伽玛刀照射,将大鼠分为4组:对照组、伽玛刀组、药物致痫组、伽玛刀+药物组。腹腔连续注射戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)制备癫痫大鼠模型,以双侧额叶为照射靶区对大鼠进行低剂量伽玛刀照射,边缘剂量为15Gy。观察并记录各组大鼠伽玛刀照射前、后癫痫发作情况,并于伽玛刀照射后12周后留取脑组织,分别利用免疫组化及免疫蛋白印迹法对大鼠皮层及海马NMDA受体亚基NR1、NR2A和NR2B进行检测。结果对照组及伽玛刀组大鼠无痫性发作表现,与药物致痫组大鼠相比,伽玛刀+药物组大鼠经低剂量伽玛刀照射后12周,痫性发作明显减轻(P0.05)。与对照组相比,药物致痫组大鼠额叶皮层及海马CA1、CA3区NR1、NR2A和NR2B表达均明显增强(P0.05),阳性神经元数目及平均吸光度值均明显增加(P0.05);与药物致痫组比较,伽玛刀+药物组额叶皮层及海马CA1、CA3区NR1、NR2A和NR2B表达均明显降低(P0.05),阳性神经元数目及平均吸光度值明显减少(P0.05);伽玛刀组与对照组无明显差别(P0.05)。结论癫痫大鼠额叶皮层及海马NR1、NR2A及NR2B亚单位蛋白表达增强,低剂量伽玛刀照射可能引起癫痫大鼠皮层及海马NMDA受体亚基表达减少,这可能是低剂量伽玛刀抑制癫痫发作的分子机制之一。     

海马神经元激活物致疒间大鼠大脑皮质和海马γ-氨基丁酸受体的表达

目的 观察大鼠海马神经元在激活物作用下γ-氨基丁酸（GABA。）受体的表达,进一步探讨癫痫发病机制。方法 将大鼠海马神经尢被戊四氮（PTZ）作用后的激活物（实验组）及无血清培养基（对照组）注入大鼠侧脑室后观察其行为、脑电图（EEG）及脑组织GABA,受体表达的变化。结果 实验组大鼠注射后15～30min出现Ⅱ～Ⅲ级惊厥反应,EEG呈短程中高幅尖波、尖慢复合波;对照组的行为及EEG未见异常;各时点实验组大鼠脑组织GABA、免疫反应阳性细胞表达明显低于对照组（均P〈0．05）,对照组GABA,免疫反应阳性细胞广泛分布于大脑皮质、海马回、齿状回。结论 海马神经元激活物具有明显致痫作用,其致痫效应与GABAA受体含量下降有关。     

伽玛刀对癫痫大鼠模型的治疗作用及机制研究

目的 研究伽玛刀照射对癫痫大鼠的放射生物学作用,探讨伽玛刀治疗癫痫的作用机制.方法 制备海人酸大鼠癫痫模型,利用自行设计的伽玛刀动物定向头架,分别应用100Gy和20Gy的伽玛射线对癫痫大鼠海马组织进行照射,观察大鼠行为学、脑电图、MRI及超微结构、脑组织氨基酸含量及GABA能神经元表达变化.结果 伽玛刀照射后大鼠癫痫发作次数明显减少.100Gy组照射后2个月MRI表现为靶区高信号,20Gy组5个月MRI未见改变.伽玛刀照射后兴奋性氨基酸含量显著低于癫痫组,GABA能神经元表达低于正常,但高于癫痫组.结论 伽玛刀照射对癫痫大鼠具有治疗作用,高剂量伽玛射线(100Gy)对致痫灶有毁损作用.低剂量伽玛射线(20Gy)通过抑制兴奋性神经元释放兴奋性氨基酸使癫痫发作减少.     

硫丙咪胺对戊四氮致痈幼鼠海马GFAP、c—fos表达和学习认知的影响

目的：观察硫丙咪胺（Thi）对戊四氮（PTZ）致痫幼大鼠海马胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）、c-fos表达及学习认知的影响。方法：发育期SD幼鼠40只随机分为对照组、PTZ致瘸组、TM 30mg·kg^-1干预组和Thi15mg·kg^-1干预组（均n=10）。观察各组大鼠瘸样行为，水迷宫实验观察学习认知能力、免疫组化检测海马GFAP和c-fos的变化。结果：对照组无痫样发作，阿z致痫组有重度发作，Thi30mg·kg^-1干预组有轻度发作（P〈0．05）；水迷宫实验中，PTZ致痫组寻找平台潜伏时间延长和通过平台次数减少，Thi30和15mg·kg^-1干预组寻找平台潜伏时间明显缩短，通过平台次数增加明显，差异有统计学意义（P〈0．05）；PTZ致痫组GFAP和c-fos表达明显强于Thi干预组，差异有统计学意义（P〈0．05），其中Tiff30与15mg·kg^-1干预组相比差异也有统计学意义（P〈o．05）；GFAP和c—fos免疫组化表达与大鼠空间学习记忆能力呈正相关。结论：Thi可能通过抑制PTZ致瘸幼大鼠海马GFAP、c—fos表达，减轻癫痫发作程度，提高其学习认知能力。     

中枢组胺对戊四氮点燃大鼠海马GABA能神经元的影响

目的:探讨中枢组胺抗癫痫的作用机制。方法:应用免疫组织化学方法研究中枢组胺对戊四氮(PTZ)致癫痫大鼠海马神经元GABA、GAD67表达的影响。结果:戊四氮致痫组大鼠海马神经元GABA、GAD67的表达量明显低于正常对照组,L-组胺酸干预组明显高于戊四氮致痫组,L-组胺酸干预组与正常对照组之间差异无显著性意义。结论:中枢组胺通过激活海马GABA能神经元来抑制癫痫的发生和发展。     

海马硬化型癫痫颞叶的病理学及c-fos、c-jun表达研究

目的研究海马硬化型颞叶癫痫（TLE）患者颞叶皮层神经元的变性凋亡以及c—fos、c-jun表达，并与海马的相应变化进行比较。方法14例颞叶和海马标本制成脑片后，用尼氏染色和TUNEL染色观察神经细胞变性和凋亡，并计数神经细胞数量；同时，研究c—fos和c-jun表达以反映癫痫发作对神经元损伤的程度和范围。结果颞叶皮层的神经细胞数量明显减少且形态异常，并有较多的凋亡细胞，伴有胶质细胞增生，而且有c—fos和c-jun的大量表达；其表现与海马的相应变化相似，但颞叶的胶质细胞增生更为明显。与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。结论除海马外，颞叶神经细胞和胶质细胞的病理改变可能参与海马硬化型TLE的发生和传播过程。     

钾通道Kv1.2与致痫大鼠发病相关性的研究

目的通过检测戊四唑(PTZ)致痫大鼠钾通道Kv1.2蛋白表达,探讨钾通道Kv1.2与癫痫发病的相关性。方法 40只SD大鼠分成实验组30只和正常对照组10只。实验组30只大鼠通过腹腔注射PTZ建立全身强直阵挛发作大鼠癫痫模型,取成功致痫鼠24只均分成3组,分别于致痫后3个时间段(1h、24h、48h)取脑组织。用免疫组化法和Western blot法检测大鼠钾通道Kv1.2蛋白。结果实验组大鼠海马区钾通道Kv1.2蛋白表达水平在致痫后3个时间段(1h、24h、48h)均明显低于对照组(P0.05)。实验组大鼠海马区钾通道Kv1.2蛋白表达水平在致痫后3个时间段(1h、24h、48h)之间无显著性差异(P0.05)。结论大鼠海马区钾通道Kv1.2表达的减少与全身强直阵挛发作大鼠癫痫发病密切相关。     

低剂量伽玛刀照射癫癎大鼠脑神经元的超微结构研究

目的探索伽玛刀治疗原发性癫的细胞学机理。方法建立大鼠皮质青霉素局灶性癫癎模型,将SD大鼠随机分为实验组、实验对照组和对照组。照射周边剂量12 Gy, 等剂量曲线为50%。分别于0.5 h~2个月后取靶区皮质及海马标本制备光镜、常规透射电镜样品。结果癫癎模型鼠可见较多凋亡神经元,而癫癎模型鼠经低剂量伽玛刀照射后同时程的神经元改变较轻微,凋亡细胞少见。结论凋亡参与了青霉素致癫癎发作后海马神经元的死亡过程,低剂量伽玛刀照射对抑制神经元的死亡过程有重要作用。     

伽玛刀低剂量照射对致疒间大鼠海马中氨基酸递质的影响

目的观察伽玛刀低剂量照射对致疒间大鼠海马中谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的影响,探讨伽玛刀治疗癫疒间的作用机制。方法将50只锂-匹罗卡品致疒间大鼠随机分为照射组和非照射组,各25只,另取正常大鼠25只(腹腔注射生理盐水)作为对照组。照射组大鼠进行伽玛刀低剂量照射(周边剂量20Gy),对照组和非照射组大鼠不进行伽玛刀照射。用高效液相色谱-质谱-质谱(HPLC-MS-MS)分析法检测各组大鼠海马Glu、GABA的含量。结果伽玛刀照射2周后,照射组和非照射组大鼠海马中Glu含量均高于对照组,照射组GLu含量低于非照射组,差异具有统计学意义(P0.05);照射组和非照射组GABA含量均低于对照组,照射组GABA含量高于非照射组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论伽玛刀低剂量照射通过调节海马中Glu与GABA的平衡,以达到抗癫疒间的作用。     

柴胡疏肝汤对戊四氮致痫大鼠海马及额叶皮质c-fos表达的影响

目的 观察柴胡疏肝汤对戊四氮致痫大鼠海马及额叶皮质c-fos表达的影响.方法 选取经戊四氮诱导制作的癫痫模型大鼠48只,按随机数字表法分成6组:癫痫模型组、德巴金组、定痫丸组、柴胡疏肝汤低剂量组、柴胡疏肝汤中剂量组和柴胡疏肝汤高剂量组,每组各8只;另设正常对照组8只.正常对照组和癫痫模型组常规饲养,其他各组给予药物德巴金,定痫丸,低、中、高剂量柴胡疏肝汤处理,均连续灌胃治疗5周.免疫组化染色检测各组大鼠海马及额叶皮质c-fos的表达情况.结果 戊四氮致痫后大鼠海马及额叶皮质c-fos表达明显增强,而应用中、高剂量的柴胡疏肝汤,德巴金和定痫丸治疗后,大鼠海马及额叶皮质c-fos表达均明显减弱,与癫痫模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05),而柴胡疏肝汤低剂量组大鼠海马及额叶皮质c-fos表达无明显减弱.结论 柴胡疏肝汤的抗癫痫作用机制可能与其含有柴胡皂甙及其他多种有效的抗癫痫成份多靶点干预海马及额叶皮质c-fos表达水平有关.

Abstract：

Objective To observe the effect of chaihushugantang on the expression of c-fos in the hippocampus and frontal lobe cortex of pentylenetetrazole (PTZ)-induced epileptic rats. Methods Forty-eight PTZ-induced epileptic rats were randomly divided into 6 groups: epileptic model group,Valproate treatment group, Dingxianwan treatment group, and lower-dose, medium-dose and high-dose chaihushugantang treatment groups (n=8). Normal control group was also employed (n=8). The epileptic rats in the normal control group and epileptic model group were fed normally. Rats of the treatment groups were performed intragastric administration of medicines (Valproate, Dingxianwan and chaihushugantang) for 5 weeks in succession respectively. The expression of c-fos in the hippocampus and frontal lobe cortex of all the rats was observed. Results The expression of c-fos in the hippocampus and frontal lobe cortex of rats in the epileptic model group was significantly increased, while the c-fos expression in the hippocampus and the frontal lobe cortex of rats in the medium-dose and high-dose chaihushugantang treatment groups and Valproate treatment group and Dingxianwan treatment group was significantly decreased as compared with that in epileptic model group (P<0.05). But the c-fos expression in the hippocampus and the frontal lobe cortex of rats in the low-dose chaihushugantang treatment group showed no obvious decrease. Conclusion Chaihushugantang has good antiepileptic effect, might through affecting the c-fos expression in the epileptic rats. The antiepileptic mechanism of chaihushugantang can be related to saikosaponins and other antiepileptic constituents in it.     

伽玛刀照射癫痫大鼠海马神经元超微结构及线粒体计量分析

目的观察低剂量伽玛刀照射对癫大鼠海马神经元超微结构的影响。方法建立大鼠青霉素局灶性癫动物模型,将58只SD大鼠分为对照组、癫模型组和伽玛刀照射组。对大鼠行伽玛刀照射,照射中心剂量24 Gy、周边剂量12 Gy、等剂量曲线50%,术后3 h～60 d取靶区海马,透射电镜观察并采用图像分析系统对线粒体形态进行计量分析。结果对照组细胞结构基本正常;癫模型组可见神经元细胞器明显空化,线粒体体密度、数密度、比表面和嵴膜密度较对照组明显减少(均P<0.05),线粒体平均体积和平均截面积较对照组明显增大(均P<0.05)。伽玛刀照射组早期线粒体的平均体积、平均截面积、数密度、比表面与对照组相比差异显著(均P<0.05),中期和晚期线粒体各项参数与对照组相比差异不显著。结论大鼠癫发作早期线粒体形态结构变化明显,低剂量伽玛刀照射对神经元修复起重要作用。     

伽玛刀治疗顽固性颞叶内侧癫后放射性脑水肿的临床分析

目的 总结伽玛刀治疗顽固性颞叶内侧癫痫后放射性脑水肿的发生情况，探讨其对治疗及对病人生活质量的影响。方法采用Leksell C型伽玛刀治疗51例顽固性颞叶内侧癫痫，根据癫痫发作特点、脑电图、PET—CT、MRI进行致痫灶定位。颞叶外侧皮质靶区边缘剂量10-12Gy，等剂量曲线40％-60％；加行同侧海马、杏仁照射，边缘剂量16—24Gy，等剂量曲线50％。结果随访时间18-96个月．平均66．7个月。出现放射性脑水肿表现45例，占88．2％；均发生在颞叶内侧。21例需要口服糖皮质激素，4例症状严重者需住院行静脉注射治疗。术后1年为放射效应高峰期，随时间延长，放射急性反应的MRI表现均得到改善，部分出现脑局部萎缩。4例严重放射性脑坏死病人均为WieserⅠ级者：5例Ⅴ级和Ⅵ级病人中仅1例出现放射性脑水肿反应。结论伽玛刀治疗顽固性颞叶内侧癫痫后出现放射性脑水肿甚至放射性脑坏死，均为正常的治疗反应，其与癫痫控制效果密切相关；给予对症支持治疗后，预后良好。     

伽玛刀照射后猫脑运动区皮质GFAP、S-100蛋白变化的研究

目的研究伽玛刀照射猫脑额叶运动区皮质后该区星形胶质细胞(Astrocyte,AST)中胶质原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)和S-100蛋白表达的变化,为临床上伽玛刀治疗癫痫等疾病选择合适剂量,减少不良反应,提供敏感监测指标。方法健康家猫45只,随机分为对照组、伽玛刀10Gy和25Gy组,于照射后24小时、7天、14天,对靶区取材,进行GFAP、S-100检测。结果伽玛刀照射猫额叶运动区皮质后14天内GFAP和S-100蛋白均有表达增强,与照射剂量和时间正相关。结论伽玛刀照射猫额叶运动区皮质后14天内GFAP和S-100蛋白均有表达增强,与剂量和时间成正相关。S-100蛋白可能是放射性脑损伤急性期更敏感的指标。