喉癌组织RKIP基因甲基化表达调控研究

摘要：目的检测喉癌组织中Raf 1激酶抑制蛋白（ Raf 1 kinase inhibitor protein, RKIP ）基因启动子区域的甲基化状态及其蛋白表达情况,并探讨其临床意义。方法采用甲基化特异性PCR（methylation specific PCR,MSP ）技术及免疫组化方法检测53例喉癌组织及34例癌旁组织中RKIP基因启动子区域的甲基化状态及蛋白表达情况。结果喉癌及癌旁组织中RKIP基因启动子甲基化发生率分别为17%、3%,两者比较差异具有统计学意义（P=0.045）。结论RKIP基因启动子区高甲基化状态可能是造成喉癌组织中RKIP表达缺失的分子机制之一,RKIP蛋白表达缺失与喉癌的发生发展及转移有关。     

喉癌组织中IGFBP-rP1基因的甲基化及表达

目的：探讨喉癌中胰岛素样生长因子结合蛋白一相关蛋白1（IGFBP—rP1）基因启动子区甲基化与蛋白表达之间的关系。方法：采用甲基化特异性PCR方法和免疫组织化学的方法分别检测45例喉癌组织及18例癌旁组织中IGFBP-rP1基因的甲基化状态和蛋白表达情况。结果：喉癌组织IGFBP—rP1启动子区甲基化率为33．3％（15／45）,相应癌旁组织甲基化率为5．6％（1／18）,喉癌组织中IGFBP—rP1基因甲基化率明显高于癌旁组织（P〈0．05）。喉癌组织中IGFBP—rP1蛋白表达显著低于癌旁正常组织（P％0．05）,且与其启动子区甲基化状态呈负相关。结论：IGFBP—rP1基因启动子区甲基化导致基因沉默可能是喉癌发生的机制之一。     

喉鳞状细胞癌中脆性组氨酸三联体基因启动子甲基化及其蛋白的表达

目的：探讨喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因启动子甲基化状态及与FHIT蛋白表达的关系。方法：采用PCR-based酶切甲基化及免疫组织化学SP技术,检测41例LSCC及其相对应的喉正常粘膜(NSE)中FHIT基因启动子甲基化状态及其蛋白表达。结果：在NSE组中,无一例出现FHIT基因启动子甲基化,而在LSCC组中,有24．4％(10／41)出现甲基化,且甲基化状态与病理分级及淋巴结转移有关(P＜O．01);NSE组及LSCC组FHIT蛋白阳性率分别为100．0％(41／41)和46．3％(19／41),且与肿瘤TNM分期及淋巴结转移有关(P＜O．05);FHIT基因启动子甲基化与蛋白阳性表达有明显的相关性(P＜O．01)。结论：FHIT基因启动子甲基化是其基因失活的重要机制之一,在LSCC的发生、发展中起重要作用。     

声门上型喉癌组织中的BRMS1蛋白表达及甲基化的研究

目的:探讨声门上型喉鳞状细胞癌组织中乳腺癌转移抑制基因(BRMS1)的蛋白表达以及BRMS1基因启动子区域甲基化情况及其临床意义。方法:采用Western blotting法检测70例声门上型喉癌组织原发灶、60例癌旁正常喉黏膜组织和44例颈部淋巴结转移灶中BRMS1蛋白的表达情况;甲基化特异聚合酶链反应(MSP)法检测上述组织中的BRMS1基因启动子区域甲基化情况,探讨BRMS1基因启动子甲基化与其基因表达的相关性;分析BRMS1蛋白表达及BRMS1基因启动子甲基化情况与患者的临床分期、病理分级、颈部淋巴结转移等方面的相关分析。结果:Western blotting检测发现声门上型喉癌原发灶、癌旁正常喉黏膜组织和颈部淋巴结转移灶均有BRMS1蛋白表达,在癌组织及转移淋巴结中BRMS1蛋白表达下调(P<0.05)。MSP法检测发现BRMS1基因启动子区甲基化,在BRMS1蛋白低表达患者的原发灶中检测到34例BRMS1基因启动子区甲基化,44例BRMS1蛋白低表达的颈部淋巴结转移灶中检测到32例BRMS1基因启动子区甲基化,60例癌旁正常喉黏膜组织中均未检测到BRMS1基因启动子区甲基化,统计学分析结果表明在声门上型喉癌中BRMS1基因启动子甲基化与其基因表达下调密切相关(rs=0.66,P<0.05)。结论:声门上型喉癌组织中BRMS1蛋白表达下调。BRMS1蛋白表达下调与声门上型喉癌的P-TNM分期、病理分化程度和颈部淋巴结转移密切相关。BRMS1基因启动子甲基化与声门上型喉癌组织中BRMS1基因表达下调相关,也可能是声门上型喉癌组织中BRMS1基因表达下调的原因之一。     

RASSF2A基因甲基化在喉癌组织中的表达及意义

目的 探讨抑癌基因RASSF2A表达水平及其基因异常甲基化与喉癌的关系及意义。 方法 采用RT-PCR及甲基化特异性PCR(MSP)检测50例喉癌组织(实验组)和10例癌旁正常黏膜组织(对照组)中RASSF2A基因mRNA的表达水平及其启动子甲基化状态。 结果 喉癌组织中有54%(27/50)存在RASSF2A基因启动子,而对照组正常黏膜组织中未发现RASSF2A基因甲基化现象,差异有统计学意义(χ2=9.818, P=0.002)。RASSF2A甲基化水平程度与喉癌患者临床病理特征无明显相关性。喉癌组织中RASSF2A基因mRNA的表达水平明显低于正常黏膜组织(χ2=9.818, P=0.002)。RASSF2A基因甲基化的喉癌组织中其mRNA的表达减少,反之亦然。 结论 喉癌组织中RASSF2A基因CpG岛甲基化与其基因表达缺失有关,可能参与了喉癌的发生发展过程。     

PiWil2在甲状腺乳头状癌中的表达及其与侵袭转移的关系

目的 探讨piwil2在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达及其与PTC的关系.方法 采用免疫组化、原位杂交检测60例PTC患者肿瘤组织及其癌旁组织中Piwil2蛋白和piwil2 mRNA的表达情况.结果 Piwil2蛋白在肿瘤组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为8 8.3%(53/60)和10.0%(6/60),两者比较差异有统计学意义(x2=73.654,P＜0.01).piwil2 mRNA在肿瘤组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为85.0%(51/60)和6.7%(4/60),两者比较差异有统计学意义(x2=74.148,P＜0.01).Piwil2蛋白及mRNA在PTC中的表达与患者的TNM分期及淋巴转移有关(P值均＜0.05).Piwil2蛋白及mRNA在PTC中的表达有相关性(x2=15.098,P＜0.01).结论 Piwil2参与了PTC的发生发展,与PTC的浸润和颈淋巴转移有关.

Abstract：

Objective To study the expressions of Piwil2 protein and mRNA in papillary thyroid carcinoma(PTC) and the relationship between Piwil2 and the invasion and metastasis of PTC. Methods Immunohistochemistry and in situ hybridization were used to detect the expression of Piwil2 protein and mRNA in 60 cases of PTC with the matched adjacent non-cancerous epithelium (NCE). Results The positive rates of Piwil2 protein expression in PTC and NCE were 88.3% (53/60) and 10.0% (6/60)respectively, with significant difference ( x2 = 73. 654,P ＜ 0.01 ). The positive rates of Piwil2 mRNA expression in PTC and NCE were 85.0% (51/60) and 6. 7% (4/60) respectively, also with significant difference (x2 =74. 148 ,P ＜0.01 ). Up-regulated expressions of Piwil2 protein and mRNA were related to the invasion and metastasis of PTC (P ＜ 0.05 ). Conclusion Piwil2 may play a role in the invasion and metastasis of PTC.     

人喉鳞状细胞癌中PTEN、PCNA的表达及临床意义

目的　研究抑癌基因PTEN(phosphotaseandtensionhomologdeletedfromchromsome 10 )、增殖细胞核抗原PCNA(proliferatingcellnuclearantigen)在人喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。 方法　应用免疫组化S -P法检测 10例正常喉组织 ,2 0例癌旁组织和 6 0例喉鳞状细胞癌中抑癌基因PTEN ,增殖细胞核抗原PCNA的表达。结果　 10例正常喉组织和 2 0例癌旁组织均有较强的PTEN蛋白的表达 ,15 % (9/ 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白阴性 ,31.7% (19/ 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白弱阳性 ,5 3.3% (32 / 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白阳性或强阳性 ;PTEN阴性喉癌颈部淋巴结转移率为 77.8% (7/ 9) ;PTEN阳性喉癌颈部淋巴结转移率为 33.3% (17/ 5 1) ,两者之间差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。 83.3% (5 0 / 6 0 )的喉癌呈PCNA阳性表达 ,显著高于正常及癌旁组织 (P <0 .0 1)。晚期、低分化、伴颈部淋巴结转移的喉癌组织中PCNA阳性表达率显著高于早期、高分化、无颈部淋巴结转移的喉癌组织(P <0 .0 1)。结论　抑癌基因PTEN的表达异常可能与喉鳞状细胞癌的发生、发展有关 ;PCNA在喉癌中的表达与其分级、临床分期、淋巴结转移密切相关 ,PCNA可作为喉癌进展的重要参考指标。     

RASSF1A基因启动子甲基化状态与喉癌关系的实验研究

目的检测喉癌组织的抑制基因RAS相关区域家族1A(Ras associationdomain family 1,isoform A,RASSF1A)甲基化状态,并探讨RASSF1A启动子甲基化与喉癌的关系。方法应用甲基化特异性PCR技术技术检测52例喉癌组织,52例相应癌旁组织及24例对照组织中RASSFIA基因启动子甲基化状态。按年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤分期进行分组,分析RASSF1A基因启动子区甲基化情况与各组临床病理特征的关系。结果 1喉癌组织、癌旁组织及对照组织中RASSFIA基因启动子区甲基化的例数分别65.4%、7.7%、0%。喉癌组甲基化发生率显著高于癌旁组和对照组,差异有显著统计学意义(P0.05),而癌旁组甲基化发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。2RASSF1A基因启动子甲基化情况与喉癌患者的年龄、性别及肿瘤的分化程度、及分期情况关系不明显,按上述临床病理特征分组,各组内比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 1喉癌组织中RASSF1A基因启动子区的甲基化,提示其与喉癌发生关系密切,可能喉癌发生过程中一个重要的分子机制。2不同肿瘤的分化及分期间甲基化程度无明显差异,提示RASSF1A基因发生甲基化可能是喉癌发生中的早期事件。3RASSF1A启动子甲基化有望成为早期诊断喉癌的一个分子标志。甲基化特异性PCR方法是一种快而灵敏的基因甲基化检测方法,有望应用于临床。     

Management of cancer of the base of tongue

The management of base of tongue cancer has evolved steadily over time. Organ preservation with primary radiation therapy has produced excellent oncologic and functional outcomes. Concomitant chemotherapy has become important in patients with locoregionally advanced disease. Planned neck dissection after organ preservation therapy continues to be an integral step for regional control. This article reports the results of a literature review of base of tongue cancer emphasizing a multidisciplinary approach to obtain optimal results in terms of cure and quality of life.     

耳廓开放性外伤的治疗方法探析

目的 探讨耳廓开放性外伤的治疗方法。方法 23耳耳廓开放性外伤经彻底清创，肝素生理盐水冲洗伤口后，对位缝合。术后用抗生素抗感染、丹参扩张血管、罂粟碱改善微循环。结果 23耳中2耳失访，18耳完全成活，1耳部分成活，2耳完全坏死。结论 耳廓撕裂伤、断伤、带有皮蒂的耳廓离断伤，由于断端双侧血管丰富，经对位缝合后容易成活。但耳廓完全离断伤由于缺乏血供，经对位缝合后不易成活，可采用去皮血管植入包埋法，带肌蒂皮瓣移植法或尝试显微外科技术施行血管吻合，以提高耳廓完全离断伤的成活率。